E盒锌指蛋白1反转录本1对人膀胱癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的研究E盒锌指蛋白1反转录本1(ZEB1-AS1)对人膀胱癌细胞5637增殖、迁移、凋亡的影响。方法取适量对数生长期5637细胞分为观察组和对照组,分别用特异性的阳性对照小干扰RNA ZEB1-AS1、特异的阴性对照小干扰RNA转染细胞,采用实时荧光定量qRT-PCR法观察转染48 h两组细胞ZEB1-AS1 mRNA;采用MTT法观察转染24、48、72 h细胞增殖情况,采用细胞划痕实验观察转染48 h细胞迁移情况,采用流式细胞仪检测转染48 h细胞凋亡情况。结果转染48 h观察组和对照组ZEB1-AS1 mRNA的相对表达量分别为0.525 3±0.043 2、1.000 0±0.020 2,P<0.05;观察组转染24、48、72 h细胞增殖的OD值分别为0.316 4±0.007 8、0.595 4±0.032 5、0.770 3±0.030 7,对照组分别为0.452 9±0.016 1、0.732 6±0.037 0、0.920 4±0.018 9,组间比较P均<0.05;转染48 h时观察组和对照组的细胞迁移距离分别为(0.435±0.005)、(0.680±0.020)cm,P<0.05。转染后48 h观察组和对照组的细胞凋亡指数分别为15.70±0.94、14.53±0.69,P<0.05。结论 ZEB1-AS1可促进人膀胱癌细胞增殖、迁移,抑制细胞凋亡,可能在膀胱癌的发生、发展中起重要作用。

2型糖尿病患者血清E盒锌指蛋白1和泛素化特异性蛋白酶22表达水平与糖脂代谢及胰岛素抵抗的关系

目的检测2型糖尿病患者血清E盒锌指蛋白1(ZEB1)和泛素化特异性蛋白酶22(USP22)基因的表达水平,分析两者与糖脂代谢及胰岛素抵抗的关系。方法选择2020年6月至2023年6月苏州大学附属第一医院诊治的120例2型糖尿病患者为研究对象(糖尿病组),同时选择同期在该院进行体检的120例健康者作为对照组。采用qRT-PCR法检测血清ZEB1 mRNA和USP22 mRNA表达水平;Pearson法分析2型糖尿病患者血清ZEB1 mRNA和USP22 mRNA表达水平的相关性,及两者与体重指数(BMI)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感性指数(ISI)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)相关性;多元线性回归分析2型糖尿病患者血清ZEB1 mRNA和USP22 mRNA表达水平的影响因素。结果糖尿病组患者的BMI、TG、TC、FPG、FIns、HOMA-IR、ZEB1 mRNA、USP22 mRNA水平明显高于对照组,ISI、HOMA-β明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析显示,2型糖尿病患者血清ZEB1 mRNA和USP22 mRNA表达水平正相关(r=0.425,P<0.001);血清ZEB1 mRNA和USP22 mRNA表达水平均与FPG、FIns、HOMA-IR呈正相关(P<0.05),均与ISI、HOMA-β呈负相关(P<0.05)。多元线性回归分析显示,FIns升高、ISI降低是血清ZEB1 mRNA表达水平的影响因素(P<0.05);FPG升高是USP22 mRNA表达水平的影响因素(P<0.05)。结论2型糖尿病患者血清中ZEB1 mRAN和USP22 mRAN表达具有正相关关系,且两者与部分糖脂代谢和胰岛素抵抗指标具有相关性。

微RNA-204-5p、蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白1在新生儿肺炎血清中的表达

目的 探讨微RNA-204-5p(miR-204-5p)、蛋白锌指E盒结合同源盒蛋白1(ZEB1)在新生儿肺炎(NP)病儿血清中的表达变化及其在病情评估及预后预测中的临床价值。方法 选取2021年10月至2022年5月张家口市妇幼保健院收治的NP病儿80例为NP组,另选取同期该院出生的健康新生儿80例为对照组。检测血清miR-204-5p、ZEB1、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及C反应蛋白(CRP)水平并比较;采用Pearson法分析NP病儿血清miR-204-5p、ZEB1水平及其与临床指标的相关性;应用受试者操作特征(ROC)曲线分析miR-204-5p、ZEB1及二者联合预测NP不良预后的价值。结果 NP组血清miR-204-5p水平(0.47±0.16比1.01±0.21)、血氧饱和度[(83.99±6.15)%比(95.32±6.74)%]显著低于对照组,血清ZEB1[(4.76±0.71)ng/L比(2.15±0.36)ng/L]、CK、CK-MB[(46.25±12.52)U/L比(23.22±9.64)U/L]及CRP水平[(18.09±4.29)mg/L比(3.31±0.71)mg/L]均显著高于对照组(P<0.05)。重症组血清miR-204-5p水平、血氧饱和度显著低于轻症组,血清ZEB1、CK、CK-MB及CRP水平均显著高于轻症组(P<0.05)。血清miR-204-5p与CPIS评分、CK-MB及CRP水平呈负相关(r=-0.33、-0.30、-0.40,P<0.05),与血氧饱和度呈正相关(r=0.41,P<0.05);血清ZEB1水平与CPIS评分、CK-MB及CRP水平呈正相关(r=0.28、0.37、0.44,P<0.05),与血氧饱和度呈负相关(r=-0.36,P<0.05);血清miR-204-5p与ZEB1水平呈负相关(r=-0.56,P<0.05)。预后不良组血清miR-204-5p水平、血氧饱和度低于预后良好组(P<0.05),血清ZEB1、CK、CK-MB及CRP水平均显著高于预后良好组(P<0.05)。ROC曲线显示,miR-204-5p对NP不良预后预测的AUC为0.89,截断值为0.47,其灵敏度、特异度分别为95.12%、72.41%;ZEB1对NP不良预后预测的AUC为0.92,截断值为5.16,其灵敏度、特异度分别为87.80%、86.21%;二者联合对预后预测的AUC为0.99,明显高于二者单独诊断,其灵敏度、特异度分别为97.56%、94.83%。结论 miR-204-5p在NP病儿血清中低表达,ZEB1在NP病儿血清中高表达,均与NP病情严重程度有关,二者联合对NP不良预后具有较高的预测价值。

急性脑出血患者血清E盒锌指结合蛋白1及DNA甲基化转移酶1与神经功能缺损和预后的相关性分析

目的探讨急性脑出血(ACH)患者血清E盒锌指结合蛋白1(ZEB1)、DNA甲基化转移酶1(DNMTl)与神经功能缺损、预后的关系。方法选取2019年7月—2022年7月本院收治的105例ACH患者为ACH组,依据ACH患者入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将其分为轻度组(n=34)、中度组(n=41)、重度组(n=30)。根据改良Rankin量表(mRS)评分将ACH患者分为预后良好组(n=65)和预后不良组(n=40)。另纳入同期105例体检健康者为对照组。选取2021年7月—2022年7月本院诊治的45例ACH患者对构建的ACH预后模型的受试者工作特征(ROC)曲线进行验证。采用酶联免疫吸附试验检测血清ZEB1、DNMT1水平;采用Spearman法分析ACH患者ZEB1、DNMT1水平与NIHSS评分的关系;采用多因素Logistic回归模型分析ACH患者预后的影响因素,采用ROC曲线评估血清ZEB1、DNMT1水平对ACH患者预后的预测价值。结果与对照组相比,ACH组血清ZEB1、DNMT1水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与轻度组相比,中度组和重度组ACH患者血清ZEB1、DNMT1、NIHSS评分均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与中度组相比,重度组ACH患者血清ZEB1、DNMT1、NIHSS评分均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman分析结果显示,ACH患者血清ZEB1、DNMT1水平与NIHSS评分均呈正相关(r=0.569、0.763,P均<0.001)。单因素分析结果显示,与预后良好组比较,预后不良组患者NIHSS评分、血肿体积、ZEB1及DNMT1水平均升高或增大,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,ZEB1、DNMT1、NIHSS评分、血肿体积增大是ACH患者预后不良的危险因素(P<0.05)。血清ZEB1、DNMT1预测ACH患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.834、0.854,ZEB1、DNMT1联合预测ACH患者预后的AUC为0.944,灵敏度为95.0%,特异度为86.2%。以验证组人群对预测预后的ROC曲线进行验证,结果显示AUC为0.903(95%CI:0.854~0.951),提示预后预测曲线具有较好的区分度。结论ACH患者血清ZEB1、DNMT1水平较高,二者均与ACH患者神经功能缺损、预后显著相关,且血清ZEB1、DNMT1联合可能更有利于临床评估ACH患者预后情况。

人参皂苷Rd对锌指E盒结合蛋白1抑制脑胶质瘤细胞增殖和血管生成的影响

目的:探讨人参皂苷Rd(ginsenoside Rd,GS-Rd)对锌指E盒结合蛋白1(Zinc-finger E-box binding protein 1,ZEB1)在脑胶质瘤血管生成中的分子调控机制的影响。方法:采用q RT-PCR检测ZEB1在脑胶质瘤细胞系中的表达。采用分子对接模拟实验预测与ZEB1结合的小分子。构建ZEB1过表达/沉默表达细胞系研究ZEB1在脑胶质瘤中的调控作用,采用Western blot检测血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的蛋白表达水平,通过CCK-8实验、血管形成实验检测GS-Rd处理对细胞增殖和血管生成能力的影响。结果:ZEB1在脑胶质瘤细胞中高表达,且促进脑胶质瘤细胞增殖和血管生成。GS-Rd被预测到能与ZEB1结合,并且能明显抑制脑胶质瘤细胞增殖和血管生成。回复实验结果显示,GS-Rd处理可显著抑制ZEB1过表达诱导的脑胶质瘤细胞增殖和血管生成。结论:该研究证实了GS-Rd通过结合ZEB1抑制脑胶质瘤血管生成的分子机制,应用GS-Rd或抑制ZEB1功能可能是抑制脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长的可行途径。

LncRNA ZEB1-AS1和LncRNA SOX2OT在糖尿病肾病患者中的表达及与肾功能的相关性研究

目的探究长链非编码RNA锌指E盒结合同源盒蛋白1反义链1(LncRNA ZEB1-AS1)和长链非编码RNA性别决定相关基因簇2重叠转录本(LncRNA SOX2OT)在糖尿病肾病(DN)患者中的表达及与肾功能的相关性。方法选取于2021年11月—2023年12月在武汉大学人民医院肾内科收治的DN患者106例为DN组,并根据24 h尿蛋白定量(24 h Upro)水平分为正常蛋白尿亚组43例(<30 mg)、微量蛋白尿亚组39例(30~<300 mg)、大量蛋白尿亚组24例(≥300 mg),另选取同期医院单纯糖尿病患者106例作对照组,检测患者血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平;Pearson法分析LncRNA ZEB1-AS1和LncRNA SOX2OT与肾功能指标的相关性;Logistic分析影响DN患者肾功能损伤的因素。结果DN组血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平低于对照组(t=11.471、10.257,P均<0.001)。血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT比较,正常尿蛋白亚组>微量尿蛋白亚组>大量尿蛋白亚组(F=58.720、117.722,P均<0.001),BUN、SCr、UA水平比较,正常尿蛋白亚组<微量尿蛋白亚组<大量尿蛋白亚组,差异均有统计学意义(F=122.493、595.589、53.178,P均<0.001);LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT分别与BUN、SCr、UA呈负相关(r=-0.487、-0.498、-0.521,-0.527、-0.515、-0.534,P均<0.001);Logistic回归分析显示,糖尿病病程长及高BUN、SCr、UA水平是影响DN患者肾功能损伤的危险因素[OR(95%CI)=1.672(1.128~2.479)、2.839(1.534~5.253)、2.754(1.512~5.017)、2.693(1.464~4.954)],高LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT是保护因素[OR(95%CI)=0.875(0.798~0.959)、0.898(0.832~0.969)]。结论血清LncRNA ZEB1-AS1、LncRNA SOX2OT水平与DN患者肾功能有关,可能是评估DN患者肾功能的潜在指标。

miR-150-5p靶向ZEB1调控EMT对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)是否可靶向锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)调控子宫内膜癌(EC)细胞上皮间质转化(EMT)进而影响癌细胞的恶性生物学行为。方法RT-qPCR技术检测正常子宫内膜和EC组织中、子宫内膜上皮细胞系hEEC及EC细胞系Ishikawa和HEC-1-A中miR-150-5p相对表达量。过表达miR-150-5p,MTT法、菌落形成实验、伤口愈合实验和Transwell实验分别评估Ishikawa细胞活力、克隆形成、迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与ZEB1的靶向关系;RT-qPCR检测miR-150-5p及ZEB1 mRNA相对表达量;Western blot技术检测ZEB1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达量。结果与正常子宫内膜组织比较,EC组织中miR-150-5p相对表达量降低(P<0.05);与hEEC细胞比较,HEC-1-A细胞和Ishikawa细胞中miR-150-5p相对表达量降低(P<0.05),Ishikawa细胞中最低(P<0.05)。与空白组比较,miR-150-5p mimics组细胞490 nm处吸光度值、细胞菌落数、迁移数和侵袭数、ZEB1 mRNA和蛋白相对表达量及N-cadherin、Vimentin和MMP-9蛋白相对表达量显著降低,miR-150-5p相对表达量、E-cadherin蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。经生物信息学分析,ZEB1被预测为miR-150-5p的潜在靶基因。结论miR-150-5p可靶向ZEB1抑制癌细胞的恶性生物学行为,其作用机制可能与调控EC细胞EMT进展有关。

β-连环素和锌指E盒结合的同源盒蛋白1在膀胱癌组织的异常表达及意义

目的检测β连环素(β-catenin)和锌指E盒结合的同源盒蛋白1(ZEB1)分子在膀胱癌组织中的表达,分析二者的关联及其在膀胱癌发生、发展中的作用。方法收集79例手术切除的膀胱癌组织标本,应用EnVision免疫组化检测β-catenin、ZEB1蛋白的表达及分布。分析二者的相关性,并探讨其与患者临床病理特征之间的关系。结果β-catenin在膀胱癌组织中的表达具有明显的异质性,可分布在胞膜、胞质或胞核内,在较低临床分期和较低病理分级膀胱癌中主要以胞膜和胞质表达为主,而在较高临床分期和较高病理分级膀胱癌中主要以胞质和胞核表达为主;ZEB1在膀胱癌组织中表达主要位于胞核中,并且表达强度随着肿瘤病理分级和临床分期的增加而升高,二者表达具有明显的相关性。结论膀胱癌组织中β-catenin和ZEB1的异常表达与肿瘤临床分期、病理分级及有无淋巴结转移相关,且β-catenin和ZEB1的表达具有明显的相关性,二者联合应用,对膀胱癌的准确诊断和预后分析有一定价值。

HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清SDC-1、ZEB1表达水平与近期预后的相关性分析

目的分析血清多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)水平与乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)近期预后的关系。方法选取濮阳市人民医院2020年1月至2022年10月收治的130例HBV-ACLF患者和130例慢性乙型肝炎(CHB)患者,纳入同期130例健康体检者为对照组。比较3组血清SDC-1、ZEB1水平。对HBV-ACLF患者进行3个月随访,分为生存组(76例)和死亡组(54例),比较不同预后患者一般资料及血清SDC-1、ZEB1水平;分析血清SDC-1、ZEB1、终末期肝病模型(MELD)评分对HBV-ACLF患者预后的评估价值;分析HBV-ACLF预后的影响因素。结果CHB组、HBV-ACLF组患者血清SDC-1、ZEB1水平高于对照组(P<0.05),HBV-ACLF组高于CHB组(P<0.05)。死亡组HBV-ACLF患者白蛋白低于生存组(P<0.05),血清SDC-1、ZEB1水平及MELD评分高于生存组(P<0.05)。血清SDC-1、ZEB1、MELD评分联合预测HBV-ACLF患者预后的曲线下面积(AUC)大于单独预测。MELD评分、SDC-1、ZEB1是HBV-ACLF患者死亡的危险因素(P<0.05)。结论HBV-ACLF患者血清SDC-1、ZEB1水平均与近期预后相关,且血清SDC-1、ZEB1与MELD评分联合预测HBV-ACLF患者近期预后的价值最高。

锌指E盒结合蛋白1在骨发育和骨肿瘤发生中的作用

锌指E盒结合蛋白1(Zeb 1)为Zeb基因家族一员,是胚胎发育、细胞分化、肿瘤发生等生理病理过程必不可少的转录因子;有实验证据表明Zeb 1与骨发育和骨肿瘤发生发展密切相关。本文结合Zeb 1结构和功能,从生理性骨发育和病理性恶性骨肿瘤发生发展的角度系统论述Zeb 1相关调控机制,并做进一步的研究展望。

老年子宫内膜样腺癌癌组织神经纤毛蛋白2、E盒结合锌指蛋白1对血管生成的作用

目的检测老年子宫内膜样腺癌患者术后组织中神经纤毛蛋白(NRP)2、转录因子E盒结合锌指蛋白(ZEB)1的表达及其对白细胞分化抗原(CD)34阳性的血管生成的作用。方法 133例老年子宫内膜样腺癌患者手术后存留的蜡块及临床资料为研究组,70例老年子宫脱垂或子宫肌瘤患者行子宫全切术后的宫颈组织作为对照组,应用免疫组化方法检测两组中NRP2、ZEB-1的表达和CD34标记的微血管密度(MVD),关注其相关性及临床意义。结果研究组NRP2、ZEB-1蛋白表达阳性率和MVD明显高于对照组,研究组NRP2、ZEB-1表达和MVD均与肿瘤的TNM分期、浸润、脉管累犯和Ki67指数密切相关(P均<0.05)。NRP2、ZEB-1和MVD均具有正相关性。结论子宫内膜样腺癌组织中NRP2、ZEB-1高表达和MVD可以有效促进肿瘤的发生和进展,NRP2和ZEB-1对CD34阳性的血管生成可能有一定促进作用。

尿道下裂患儿包皮组织中E盒结合锌指蛋白1的表达

目的:探讨E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)在尿道下裂患者包皮组织中的表达,分析ZEB1 mRNA和蛋白的表达水平与尿道下裂的关系。方法:实验组和对照组的包皮组织来自于37例尿道下裂修复术患儿和11例包皮环切术包皮过长患儿,37例尿道下裂根据尿道口的位置归类为24例轻中度尿道下裂和13例重度尿道下裂,通过免疫组化和RT-PCR法分别对ZEB1的蛋白和mRNA表达水平进行检测。结果:ZEB1蛋白阳性表达率在轻中度尿道下裂组为75.0%(18/24)、重度尿道下裂组为100%(13/13),明显高于对照组的9.1%(1/11),且两两比较均具有统计学意义(P均<0.05);RT-PCR显示ZEB1 mRNA表达在对照组,轻中度、重度尿道下裂组织中的相对累计光密度值比分别为(0.67±0.21)、(0.81±0.24)、(1.55±0.29),除对照组和轻中度尿道下裂组差异无统计学意义外(P=0.64),对照组和轻中度尿道下裂组分别和重度尿道下裂组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:ZEB1在尿道下裂患儿的包皮组织中的表达明显上调,且与尿道下裂的严重程度相关,提示ZEB1基因表达上调可能导致尿道下裂的形成。

锌指E盒结合蛋白1在子宫内膜癌患者中的表达及意义

目的探讨锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)在子宫内膜癌患者中的表达及意义。方法选取该院2015年1月至2018年6月收治的子宫内膜癌患者150例为观察组,另选取同期150例健康体检者为对照组。根据子宫内膜癌高、中、低分化标准对观察组进行病理分级,其中高分化(G1组)57例,中分化(G2组)78例,低分化(G3组)15例。采用免疫组织化学法检测所有研究对象的ZEB1表达情况。比较观察组与对照组的ZEB1表达情况;比较不同病理分级患者的ZEB1表达情况;分析观察组ZEB1表达情况与子宫内膜癌临床病理特征的关系。结果观察组ZEB1阳性率为66.67%,明显高于对照组的13.33%(P<0.05)。G1、G2、G3组ZEB1阳性率均高于对照组(P<0.05);G3组ZEB1阳性率高于G2、G1组(P<0.05);G2组ZEB1阳性率高于G1组(P<0.05)。观察组肿瘤分期越高、肌层浸润深度越深、存在淋巴结转移患者的ZEB1阳性率越高(P<0.05)。结论ZEB1在子宫内膜癌组织中呈高表达,且子宫内膜癌病理分级越高,ZEB1阳性率越高;不同肿瘤分期、浸润深度及有无淋巴结转移患者的ZEB1表达具有明显差异,ZEB1可能参与了子宫内膜癌的发生、发展过程。

锌指E盒结合蛋白1在恶性肿瘤中的研究进展

锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)是上皮-间充质转化的重要转录因子,不仅促进肿瘤的发生发展,还与肿瘤的预后密切相关。目前已证实ZEB1在多种肿瘤中有高表达。就ZEB1在肿瘤的生长、转移和预后等方面的作用做一综述。

结直肠癌组织中锌指E盒同源结合蛋白-1、赖氨酸酰氧化酶-2的表达变化及意义

目的探讨结直肠癌组织中锌指E盒同源结合蛋白-1(ZEB1)与赖氨酸酰氧化酶-2(LOXL2)的表达变化及其意义。方法利用免疫组织化学法检测83例结直肠癌患者手术切取的癌组织与癌旁组织中ZEB1与LOXL2的表达水平,并进行比较。分析癌组织ZEB1与LOXL2的表达与患者临床病理参数的关系。采用Kaplan-Meier生存曲线评估预后。结果 ZEB1、LOXL2在结直肠癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05)。结直肠癌组织中,ZEB1及LOXL2的阳性表达率与TNM分期、浸润程度、淋巴结转移相关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤组织分化程度无关(P均>0.05),且ZEB1与LOXL2的表达呈正相关(r=0.348,P=0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果表明,ZEB1及LOXL2表达阴性的患者术后生存率和平均生存时间均高于ZEB1及LOXL2表达阳性的患者(P均<0.05)。结论 ZEB1与LOXL2在结直肠癌组织中异常高表达,且参与病情进展及促进不良预后。

SNHG3调控miR-186-5p/ZEB1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化的机制研究

目的探究SNHG3调控miR-186-5p/E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的机制。方法在HepG2细胞中转染siRNA干扰片段敲除SNHG3、转染pcDNA3.1(+)/SNHG3使SNHG3过表达,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测是否转染成功。克隆形成实验检测HepG2细胞增殖,细胞划痕实验检测HepG2细胞迁移率,Transwell小室实验检测HepG2细胞侵袭数量,双荧光素酶活性检测验证SNHG3与miR-186-5p、miR-186-5p与ZEB1的靶向关系,FQ-PCR和Western blot法检测SNHG3、ZEB1、E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9、Snail的表达水平。结果肝癌组织中SNHG3表达量高于正常组织,SNHG3表达量低/中的肝癌患者的生存预后优于SNHG3表达量高的肝癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。克隆形成实验结果显示,与pcDNA3.1(+)组相比,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞增殖数量显著增加(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞迁移率显著高于pcDNA3.1(+)组(P<0.05)。Transwell小室实验结果显示,pcDNA3.1(+)/SNHG3组HepG2细胞侵袭数量显著高于pcDNA3.1(+)组(P<0.05)。双荧光素酶活性检测结果显示,miR-186-5p mimic和pGL6-SNHG3-WT共转染后,荧光素酶活性低于其他组,miR-186-5p mimic和pGL6-ZEB1-WT共转染后,荧光素酶活性低于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。FQ-PCR和Western blot检测结果显示,当SNHG3过表达时,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量显著下调,N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9和Snail mRNA和蛋白相对表达量以及ZEB1蛋白相对表达量显著上调;当SNHG3敲除后,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量显著上调,N-cadherin、MMP-2、vimentin、MMP-9和Snail mRNA和蛋白相对表达量以及ZEB1蛋白相对表达量显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SNHG3调控miR-186-5p/ZEB1可促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,表明SNHG3是肝癌潜在的治疗靶点。

敲低锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的通过RNA靶向干扰降低人胃癌BGC823细胞中锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)基因表达,观察ZEB1低表达对胃癌BGC823细胞的侵袭、迁移及增殖能力的影响,并检测相关基因lncRNA HOTAIR、上皮钙黏素(E-cadherin)表达情况。方法用载体构建针对人ZEB1基因表达的干扰质粒sh ZEB1,脂质体转染胃癌BGC823细胞后,经G418及有限稀释法筛选稳定转染细胞株。通过实时定量PCR和Western blot法检测BGC823细胞ZEB1 mRNA和蛋白水平,MTT法检测其增殖能力,TranswellTM小室侵袭试验检测转染细胞侵袭能力、划痕试验检测细胞迁移能力,实时定量PCR检测lncRNA HOTAIR、E-cadherinmRNA水平。结果成功构建干扰质粒sh ZEB1,敲低BGC823细胞ZEB1水平后,BGC823细胞的增殖、侵袭和迁移能力降低、lncRNA HOTAIR水平降低、而E-cadherin表达增高。结论靶向降低BGC823胃癌细胞ZEB1的水平,可降低lncRNA HOTAIR水平及细胞增殖、侵袭、迁移力。

卵巢癌组织锌指E盒同源结合蛋白1、微小RNA-574-3p的表达及其临床意义研究

目的探究卵巢癌组织锌指E盒同源结合蛋白1(ZEB1)、微小RNA-574-3p(miR-574-3p)表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2015年1月至2018年1月于浙江医院行手术治疗的90例卵巢癌患者的癌组织作为卵巢癌组,选取其相应癌旁正常组织作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测两组组织中miR-574-3p、ZEB1mRNA的表达水平;采用Kaplan-Meier法分析卵巢癌组织中miR-574-3p、ZEB1的表达与患者生存时间的关系;采用多因素Cox回归分析影响卵巢癌患者预后的相关因素。结果与对照组比较,卵巢癌组组织中miR-574-3p表达水平较低(P<0.05),ZEB1表达水平较高(P<0.05);卵巢癌组组织中miR-574-3p与ZEB1mRNA的表达呈负相关(P<0.05);miR-574-3p、ZEB1均与患者淋巴结或腹膜转移、国际妇产科联盟(FIGO)分期相关(P<0.05),ZEB1低表达的卵巢癌患者平均生存时间显著长于ZEB1高表达的卵巢癌患者(P<0.001),miR-574-3p低表达的卵巢癌患者平均生存时间显著短于miR-574-3p高表达的卵巢癌患者(P<0.001);miR-574-3p低表达、ZEB1高表达是影响卵巢癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论卵巢癌组织中ZEB1表达上调,miR-574-3p表达下调,且其与患者淋巴结或腹膜转移、FIGO分期相关,可能成为卵巢癌治疗的新靶点。

多模态MRI结合血清CA125、ZEB1对子宫癌肉瘤与低危型子宫内膜癌的鉴别研究

目的分析多模态磁共振成像(MRI)结合血清糖类抗原125(CA125)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)对子宫癌肉瘤(UCS)与低危型子宫内膜癌(EC)的鉴别价值。方法回顾性选取2018年1月至2022年12月郑州市金水区总医院收治24例UCS患者和55例低危型EC患者分别作为UCS组和低危型EC组,均行多模态MRI检查和血清CA125、ZEB1检测。以病理结果作为金标准,采用受试者工作特征曲线分析多模态MRI与血清CA125、ZEB1单项及联合对UCS和低危型EC的鉴别价值。结果UCS组肿瘤最大直径、出血占比、囊变/坏死占比、容积转运常数、血液回流常数均高于低危型EC组(P<0.05),相对表观扩散系数低于低危型EC组(P<0.05);UCS组血清CA125、ZEB1水平均高于低危型EC组(P<0.05);多模态MRI联合血清CA125、ZEB1鉴别诊断UCS和低危型EC的灵敏度为95.83%,均高于单项鉴别诊断(P<0.05),联合鉴别诊断的AUC为0.904,均高于单项鉴别诊断,联合鉴别诊断的特异度为74.55%,与单项鉴别诊断比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论多模态MRI和血清CA125、ZEB1均对UCS和低危型EC具有鉴别诊断价值,将三项联合能够进一步提高鉴别诊断价值。

结肠癌患者血清微小RNA-205和癌组织E盒结合锌指蛋白1的表达情况及其与放疗敏感性的关系

目的分析结肠癌患者血清微小RNA-205(miRNA-205)及癌组织E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)的表达情况,并探讨两者与放疗敏感性的关系。方法将90例结肠癌患者作为结肠癌组,84例体检者作为对照组。收集所有研究对象的血清样本,以及结肠癌患者的癌组织和其中84例患者的癌旁组织。采用实时荧光定量PCR法检测血清miRNA-205的相对表达水平,采用免疫组化法检测癌组织和癌旁组织中ZEB1的表达情况。比较结肠癌组和对照组血清miRNA-205的相对表达水平、癌组织和癌旁组织中ZEB1的表达情况,以及不同临床病理特征结肠癌患者血清miRNA-205的相对表达水平和癌组织中ZEB1的表达情况。比较放疗敏感和不敏感的结肠癌患者(放疗敏感组和放疗不敏感组)血清miRNA-205相对表达水平、癌组织中ZEB1的表达情况,并采用Logistic回归模型分析影响结肠癌患者放疗敏感性的因素。结果结肠癌组的血清miRNA-205相对表达水平高于对照组,癌组织中的ZEB1阳性表达率高于癌旁组织(均P<0.05);结肠癌患者血清miRNA-205相对表达水平可能与病理类型、局部浸润情况、淋巴结转移情况、原发肿瘤-区域淋巴结-远处转移(TNM)分期、肿瘤大体类型及病变部位有关(均P<0.05),癌组织中的ZEB1表达阳性率与局部浸润情况、淋巴结转移情况、TNM分期、肿瘤大体类型及病变部位有关(均P<0.05)。放疗敏感组血清miRNA-205的相对表达水平以及癌组织ZEB1阳性表达率均较放疗不敏感组更低(均P<0.05);癌组织ZEB1的表达情况和TNM分期是结肠癌患者放疗敏感性的影响因素(均P<0.05)。结论结肠癌患者血清miRNA-205表达和癌组织ZEB1表达均上调,两者可能共同参与结肠癌的发生、发展,并不同程度地影响患者的放疗敏感性。