Let-7e-5p调控Fas/FasL影响小鼠变应性鼻炎发病的机制研究

目的探讨let-7e-5p对小鼠变应性鼻炎的影响及机制。方法将18只BALB/c小鼠按随机数字表法均分为对照(Control)组、变应性鼻炎(AR)组、let-7e-5p激动剂阴性对照(AR+agomir-NC)组、let-7e-5p激动剂(AR+agomir)组、let-7e-5p抑制剂阴性对照(AR+antagomir-NC)组和let-7e-5p抑制剂(AR+antagomir)组。除Control组外,其余组应用卵白蛋白(OVA)致敏建立AR模型,AR+agomir组和AR+antagomir组同时给予let-7e-5p agomir或let-7e-5p antagomir进行干预,末次激发致敏后对小鼠变应性鼻炎进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织,统计嗜酸性粒细胞数量,real-time PCR检测let-7e-5p、Fas、FasL m RNA表达,Western blot检测Fas、FasL蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测血清免疫球蛋白E(IgE)、特异性IgE(sIgE)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4、IL-13水平,双荧光素酶实验分析let-7e-5p和Fas、FasL的靶向关系。结果与Control组比较,AR组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增生明显,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平下降,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05)。与AR+agomir-NC组比较,AR+agomir组小鼠变应性鼻炎评分降低,鼻黏膜结构清晰,嗜酸性粒细胞数量减少,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平升高,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平下降(均P<0.05)。与AR+antagomir-NC组比较,AR+antagomir组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增厚,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达减少,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05),IL-12、IFN-γ水平差异无统计学意义。与NC+3’UTR-WT组比较,let-7e-5p agomir+3’UTR-WT组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论Let-7e-5p通过靶向调节Fas/FasL影响1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)平衡,从而参与AR小鼠变应性鼻炎发病的进展。

对比Spencer 7步技术和关节松动术(Maintland手法)治疗肩关节粘连性关节囊炎的疗效差异

目的 对比Spencer 7步技术和关节松动术(Maintland手法)治疗肩关节粘连性关节囊炎的临床疗效差异。方法 45例肩关节粘连性关节囊炎患者,随机分为治疗组(23例)和对照组(22例)。治疗组有3例,对照组有2例未完成8周的治疗,退出统计。故治疗组和对照组各有20例患者进行对比治疗。治疗组采用常规的物理因子治疗和Spencer 7步技术,对照组应用常规的物理因子治疗和关节松动术(Maintland手法)。比较两组治疗前后的Constant-Murley肩关节功能评分及视觉模拟评分法(VAS)评分。结果 治疗后,两组Constant-Murley肩关节功能评分的日常生活、肩前曲、肩外展评分均高于本组治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05);但组间治疗后比较差异没有统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组Constant-Murley肩关节功能评分的肩外旋、肩内旋、肩外展肌力评分均高于本组治疗前,且治疗组肩外旋评分(8.20±1.28)分、肩内旋评分(7.60±1.67)分、肩外展肌力评分(17.75±2.55)分高于对照组的(6.60±1.31)、(6.00±1.30)、(15.00±2.81)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组VAS评分均低于本组治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05);但组间治疗后比较差异没有统计学意义(P>0.05)。结论 在常规的物理因子治疗的基础上应用Spencer 7步技术和关节松动术(Maintland手法)治疗肩关节粘连性关节囊炎患者均可在疼痛和日常生活能力、关节活动度方面带来改善,但是对比肩外旋、肩内旋、肩外展肌力方面Spencer 7步技术结合常规的物理因子治疗比关节松动术(Maintland手法)具有更好的效果。

LRP16通过调控E-钙黏着蛋白的表达促进MCF-7细胞的侵袭生长

LRP16在原代乳腺癌组织中表达水平与雌激素受体α(ERα)表达状态以及腋窝淋巴结侵袭数目密切相关.为研究LRP16基因对乳腺癌MCF7细胞侵袭生长的影响,并探讨涉及的分子机制,采用基质胶黏附实验与Transwell方法,检测内源性LRP16表达抑制MCF7细胞的体外黏附、侵袭生长与迁移特征.结果表明,抑制LRP16在MCF7细胞中的表达,降低了细胞的体外黏附、侵袭与迁移能力;采用FVB小鼠进行的实验性转移试验结果显示,抑制LRP16显著降低了MCF7细胞的肺转移结节数目;为探索可能的分子机制,采用Western印迹方法,检测了LRP16对乳腺癌转移相关分子MMP2,MMP9,CD44和E钙黏着蛋白表达的影响,结果在LRP16抑制的MCF7细胞中只有E钙黏着蛋白蛋白表达上调.进一步的Northern印迹与免疫组化实验结果表明,抑制LRP16可上调MCF7细胞中E钙黏着蛋白基因的mRNA与蛋白表达水平;共转染与双荧光素酶方法检测LRP16对E钙黏着蛋白基因启动子的表达调控效应,结果显示,LRP16抑制E钙黏着蛋白基因基因5′近端启动子的转录激活,该抑制效应选择性存在于内源性ERα阳性细胞,并且依赖于雌激素的存在;染色质免疫共沉淀方法(ChIP)检测ERα与E钙黏着蛋白基因启动子的相互作用,结果显示,在LRP16基因表达缺陷的MCF7细胞中,ERα抗体沉淀到E钙黏着蛋白基因启动子的DNA序列;上述研究结果表明,抑制LRP16基因表达,削弱了激素依赖型乳腺癌细胞的侵袭生长能力,其分子机制涉及了LRP16通过ERα介导对E钙黏着蛋白基因基因转录激活的调控.

胃癌患者血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平及临床意义

目的分析胃癌患者血清中E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平及其与临床病理特征间的相关性。方法纳入该院肿瘤科收治的胃癌患者96例,收集同期在该院体检健康者60例作为对照组。检测两组研究对象血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平;分析胃癌组患者血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平与胃癌临床病理特征间的相关性;比较随访期间存活患者与死亡患者间血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7表达。结果与对照组比较,胃癌组患者血清E-钙黏蛋白显著降低而膜联蛋白A7显著增高(P<0.01)。胃癌患者的年龄、性别以及胃癌的大小、位置对血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平的影响差异无统计学意义(P>0.05),不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移的血清E-钙黏蛋白和膜联蛋白A7水平差异有统计学意义(P<0.01)。1年期随访发现30例死亡,66例存活;死亡患者入院时血清E-钙黏蛋白水平明显低于存活患者,膜联蛋白A7水平显著高于存活患者,比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌患者血清E-钙黏蛋白水平明显降低而膜联蛋白A7水平明显增高,与胃癌的分化、临床分期及淋巴转移联系密切,对胃癌患者的预后有重要评价作用。

E-Cad MMP-7与胃癌生物学行为的关系

目的探讨胃癌组织中E-钙黏素(E-Cad)和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化(S-P)法检测E-Cad和MMP-7在62例胃癌组织及20例正常胃组织中的表达水平,分析E-Cad和MMP-7在二者中表达的差异,并结合临床病理资料进行综合分析。结果胃癌与正常胃组织中E-Cad和MMP-7的表达差异有统计学意义(P<0.01),在胃癌组织中E-Cad的表达较正常组织显著降低,而MMP-7的表达较正常组织显著增强;E-Cad、MMP-7的表达水平与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、分化程度密切相关,E-Cad和MMP-7表达呈明显负相关性(r=-0.26,P=0.039)。结论 E-Cad、MMP-7的表达和胃癌的生物学行为有密切的相关性。

子宫内膜癌中MMP-7、E-CAD的表达及意义

目的 探讨MMP 7、E CAD在子宫内膜癌组织中的表达及意义。方法 利用免疫组化方法观察 72例内膜癌组织、6 4例癌前病变组织和 80例正常子宫内膜中MMP 7及E CAD的表达情况。结果 内膜癌组、癌前病变组MMP 7的阳性表达明显高于正常内膜组 (P <0 .0 1) ,而前两组之间无显著差异。内膜癌组E CAD的阳性表达明显低于正常内膜组和癌前病变组 (P <0 .0 5 ) ,后两组之间无显著差异。随临床分期增高、组织分化程度降低、淋巴结转移 ,MMP 7表达明显增强 ,E CAD表达明显下降 (P<0 .0 1)。E CAD与MMP 7表达之间存在负相关 (r =- 0 .36 0 ,P <0 .0 0 1)。结论 MMP 7在内膜癌发生过程中起了重要作用 ,MMP 7表达增强和E CAD表达减少 ,是内膜癌浸润和转移的重要促进因素。

血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导脐静脉内皮细胞表达E-选择素和单核细胞趋化蛋白1的影响

目的研究血管紧张素（1-7）对血管紧张素Ⅱ诱导的脐静脉内皮细胞E-选择素和单核细胞趋化蛋白1表达的影响,并初步探讨血管紧张素（1-7）的作用机制,阐明血管紧张素（1-7）对血管紧张素Ⅱ在炎症方面的拮抗作用。方法经形态学及抗VⅢ因子抗体免疫荧光染色鉴定的人脐静脉内皮细胞,按以下分组加入不同干扰因素进行实验。实验分组：①对照组：不加干预因素;②血管紧张素Ⅱ组：加入血管紧张素Ⅱ100 nmol/L;③血管紧张素（1-7）组：加入血管紧张素（1-7）1000 nmol/L;④血管紧张素Ⅱ＋血管紧张素（1-7）组：分别用血管紧张素（1-7）10、100、1000、10000 nmol/L预处理30 min后,再加入血管紧张素Ⅱ100 nmol/L;⑤血管紧张素Ⅱ＋血管紧张素（1-7）＋血管紧张素（1-7）受体拮抗剂A-779组：先用1000 nmol/L A-779预处理30 min后,再用终浓度为1000 nmol/L血管紧张素（1-7）预处理30 min,最后加入终浓度100 nmol/L血管紧张素Ⅱ。各组用酶联免疫吸附法和逆转录聚合酶链反应从蛋白和mRNA水平检测E-选择素和单核细胞趋化蛋白1的表达情况。结果正常细胞生长良好,呈鹅卵石样镶嵌排列,细胞透明度大,轮廓不清。荧光免疫组化染色法,可检测到培养的人脐静脉内皮细胞的VⅢ因子相关抗原为阳性。①与对照组比,血管紧张素Ⅱ（100 nmol/L）使E-选择素（25.39±1.97μg/L）和单核细胞趋化蛋白1（238.71±5.51 ng/L）的蛋白分泌量明显增加,E-选择素和单核细胞趋化蛋白1 mRNA的表达显著升高（均P〈0.01）;②血管紧张素（1-7）（1 000 nmol/L）使E-选择素（3.72±0.95μg/L）和单核细胞趋化蛋白1（90.24±9.82 ng/L）的蛋白分泌量降低,E-选择素和单核细胞趋化蛋白1 mRNA表达亦降低（均P〈0.01）;③混合刺激组中血管紧张素（1-7）（1010000 nmol/L）减少E-选择素蛋白合成,分别为21.15±1.31、17.41±1.94、12.71±1.84、9.46±1.40μg/L,均低于血管紧张素Ⅱ组（均P〈0.01）;同时也减少单核细胞趋化蛋白1蛋白合成,分别为214.57±7.16、196.83±8.20、176.63±8.93、155.52±8.19 ng/L,均低于血管紧张素Ⅱ组（均P〈0.01）;④混合刺激组中,与AngⅡ组比较,血管紧张素（1-7）（1010000 nmol/L）呈剂量依赖性的抑制AngⅡ刺激E-选择素、单核细胞趋化蛋白1 mRNA的表达（均P〈0.01）;⑤加入血管紧张素（1-7）受体拮抗剂A-779后,血管紧张素（1-7）的作用消失。结论血管紧张素（1-7）通过其特异性受体Mas拮抗血管紧张素Ⅱ诱导的人脐静脉内皮细胞E-选择素和单核细胞趋化蛋白1的表达,并呈浓度依赖性。

Let-7e-5p对变应性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞失衡的影响

目的:探讨let-7e-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型后随机均分为模型组(仅造模)、let-7e-5p激动剂对照组(鼻内滴注let-7e-5p agomir阴性对照)及let-7e-5p激动剂组(鼻内滴注let-7e-5p agomir);采用行为学评分考察各组小鼠的过敏症状,酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素17-A(IL-17A)和白细胞介素-10(IL-10)水平,HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织学变化,采用实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织let-7e-5p的表达、蛋白印迹法检测RORγt和Foxp3蛋白的表达,采用流式细胞术检测各组小鼠外周血CD4^+Foxp3^+Treg和CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群变化。结果:模型组小鼠较正常组的行为学评分、血清IgE及IL-17A水平明显增高、IL-10水平明显降低(P<0.01),let-7e-5p激动剂组较模型组的行为学评分、IgE及IL-17A水平明显下降、IL-10水平明显升高(P<0.01);同模型组比较,let-7e-5p激动剂组小鼠鼻黏膜基底层结构清晰,炎性细胞浸润明显减少;模型组小鼠鼻黏膜组织let-7e-5p基因的表达较正常组减少,let-7e-5p激动剂组则较模型组升高(P<0.05);模型组小鼠鼻黏膜组织RORγt蛋白表达较正常组增加、Foxp3蛋白表达减少,let-7e-5p激动剂组小鼠鼻黏黏膜组织RORγt蛋白表达较模型组减少、Foxp3蛋白表达增加(P<0.05);模型组小鼠较正常组外周血中CD4^+Foxp3^+Treg细胞亚群比例明显降低,CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群比例明显升高(P<0.01);let-7e-5p激动剂组小鼠较模型组的CD4^+Foxp3^+Treg细胞亚群比例显著升高,CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群比例明显降低(P<0.01)。结论:Let-7e-5p可能通过调节AR小鼠Foxp3和RORγt蛋白的表达,介导Treg/Th17细胞平衡,减轻炎症反应,从而改善AR小鼠鼻部过敏症状。

KLK7蛋白及E-钙黏蛋白在卵巢癌中的表达及意义

目的:探讨KLK7蛋白和E-钙黏蛋白(E-cad)在卵巢癌中的表达。方法:应用免疫组化法检测40例卵巢癌中KLK7蛋白和E-cad的表达,将二者的表达情况与临床指标的关系进行统计分析。结果:(1)KLK7蛋白和E-cad在上皮性卵巢癌中的表达与患者年龄、组织类型无关;随着临床分期增高、组织分化降低、患者手术时有淋巴结或大网膜转移和腹腔液中有癌细胞,KLK7蛋白的阳性表达率呈上升趋势(P<0.05),而E-cad的阳性表达率呈下降趋势(P<0.05或P<0.01);(2)在卵巢癌中KLK7蛋白和E-cad表达呈负相关(P<0.05)。结论:KLK7蛋白在卵巢癌中呈高表达,E-cad则正好相反,二者与卵巢癌的侵袭转移有关,可为评估预后的有效指标;KLK7蛋白和E-cad在卵巢癌组中表达呈负相关,在卵巢癌侵袭转移中可能存在拮抗效应。

KLK7蛋白及E-钙黏蛋白在子宫内膜癌中的表达及意义

目的:本实验通过研究E-钙黏蛋白及KLK7蛋白在子宫内膜癌中的表达,探讨其表达与子宫内膜癌的关系及临床意义。方法:将实验分为3组:16例增生期子宫内膜为正常组,30例不典型增生子宫内膜,35例子宫内膜癌,应用免疫组化SP染色方法检测E-Cad蛋白及KLK7蛋白在子宫内膜癌的表达及两者的关系。结果:与正常组比较,KLK7蛋白在不典型增生内膜及子宫内膜癌中的表达逐渐增高(P<0.05)。E-cad蛋白在不典型增生内膜及子宫内膜癌中的表达逐渐降低(P<0.05)。结论:通过本实验研究可知:KLK7蛋白和E-cad蛋白在子宫内膜癌的表达呈夫相关性,与子宫内膜癌的发生,发展密切相关,并为临床诊断及预后提出理论基础。

血浆miR-let-7e-5p、LncRNA NEAT1表达水平与2型糖尿病视网膜病变的关系

目的检测2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血浆中微小RNA-let-7e-5p(minute RNA-let-7e-5p,miR-let-7e-5p)和长链非编码核富含丰富的转录本1(lncRNA nuclear-enriched abundant transcript 1,LncRNA NEAT1)的表达水平,并讨论其与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系。方法从我院选取收治的T2DM患者126例纳入研究,根据有无DR情况分为84例DR组和42例非DR组,根据DR分级标准分为31例非增生型DR(non-proliferative DR,NPDR)和53例增生型DR(proliferative DR,PDR)。采用荧光定量聚分酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测T2DM患者血浆中miR-let-7e-5p和LncRNA NEAT1的表达水平,比较各组间miR-let-7e-5p和LncRNA NEAT1表达水平的差异;Pearson相关系数分析DR组患者血浆miR-let-7e-5p和LncRNA NEAT1表达水平的相关性;ROC曲线检测miR-let-7e-5p、LncRNA NEAT1对DR的诊断价值。结果非DR患者相比,PDR和NPDR患者的血浆miR-let-7e-5p表达水平降低,LncRNA NEAT1表达水平增加(P<0.05);并且与NPDR组相比,PDR组的血浆miR-let-7e-5p表达水平降低,LncRNA NEAT1表达水平升高(P<0.05);DR患者血浆miR-let-7e-5p与LncRNA NEAT1呈负相关(r=-0.534,P<0.05);miR-let-7e-5p诊断DR的AUC为0.856(95%CI:0.789~0.924),敏感度为77.38%,特异度为80.95%;LncRNA NEAT1诊断DR的AUC为0.844(95%CI:0.778~0.910),敏感度为69.05%,特异度为95.24%;两者联合诊断DR的AUC为0.935(95%CI:0.891~0.978),敏感度为88.10%,特异度为92.86%,两者联合对DR患者具有较高的诊断能力。结论miR-let-7e-5p和LncRNA NEAT1与T2DM患者DR的发生和进展有关,可能作为诊断DR发生的一种潜在生物标志物,且两者联合的诊断能力更佳。

E-钙粘蛋白和基质金属蛋白酶-7的蛋白表达与大肠癌的相关性

目的探讨E-钙粘蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)的蛋白表达与大肠癌的关系。方法应用免疫组织化学技术检测E-cadherin和MMP-7蛋白在14例大肠腺瘤组织、102例大肠癌组织及相应癌旁正常黏膜的表达情况。结果相对于大肠癌旁的正常组织,E-cadherin在癌组织中表达降低(P<0.001),而MMP-7蛋白在癌组织中比正常组织表达明显增高(P<0.001);二者在癌组织中呈现负相关(r=-0.478,P<0.001)。结论 E-cadherin的表达降低和MMP-7的表达增高与大肠癌的生物学行为密切相关。

E-cadherin和Claudin-7在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探讨E-钙黏蛋白(E-cadherin)和Claudin-7在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法以2016年8月~2017年8月新疆医科大学第一附属医院采集的正常宫颈上皮组织(对照组,n=30)、重度宫颈上皮内瘤变组织(HSIL组,n=28)和宫颈鳞状细胞癌组织(CA组,n=80)为研究样本,采用免疫组织化学方法检测三组E-cadherin、Claudin-7蛋白表达情况,分析两者与宫颈鳞状细胞癌病理特征的关系,同时对两者的表达水平进行相关性分析。结果 HSIL组、CA组E-cadherin蛋白阳性表达率明显低于对照组,且HSIL组明显高于CA组(P<0.05);HSIL组、CA组Claudin-7蛋白阳性表达率明显低于对照组,HSIL组明显低CA组(P<0.05);E-cadherin蛋白阳性表达率与宫颈鳞状细胞癌肿瘤大小、淋巴结转移呈负相关(P<0.05),与组织分化程度呈正相关(P<0.05),Claudin-7蛋白阳性表达率与淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与组织分化程度、临床分期呈负相关(P<0.05);Claudin-7蛋白与E-cadherin蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论宫颈鳞状细胞癌组织中E-cadherin和Claudin-7蛋白阳性表达率分别明显降低和升高,两者阳性表达率与宫颈鳞状细胞癌临床病理特征紧密相关。

E-7胶粘剂的改性探讨

文章针对环氧树脂E-7胶粘剂在加热固化过程中出现粘度小、流失严重的问题,通过添加不同含量的气相SiO2改善流动性,并对其粘度、力学性能进行研究。结果表明,随着气相SiO2添加量的增多,E-7胶粘剂的最小粘度由2673mPa·s逐渐增加到14000mPa·s,粘度增加明显。拉伸剪切强度仍可保持在19.71MPa,符合应用的实际要求。

肿瘤减灭术后静脉腹腔联合化疗治疗晚期上皮性卵巢癌效果及对患者血清B7-H4蛋白、E-选择素水平的影响

目的:研究了肿瘤减灭术后静脉腹腔联合化疗治疗晚期上皮性卵巢癌(EOC)的效果及对血清B7-H4蛋白、E-选择素水平的影响。方法:纳入晚期EOC患者150例,均行肿瘤减灭术和静脉腹腔联合化疗。记录治疗有效率、治疗前后B7-H4蛋白、E-选择素水平。使用二元Logistic回归分析影响晚期EOC患者治疗反应的危险因素。使用ROC曲线分析B7-H4蛋白、E-选择素对晚期EOC患者治疗反应的预测价值。结果:肿瘤减灭术后静脉腹腔联合化疗对晚期EOC患者的治疗有效率为77.33%。治疗后患者B7-H4蛋白和E-选择素水平均明显低于治疗前(均P<0.05)。治疗前B7-H4蛋白水平、治疗前E-选择素水平、肿瘤减灭术后残余病灶直径≥1 cm均为晚期EOC患者治疗反应的独立影响因素(均P<0.05)。ROC曲线显示,B7-H4蛋白和E-选择素对晚期EOC患者治疗反应的预测中,AUC分别为0.727(95%CI:0.617~0.837)和0.799(95%CI:0.707~0.892)。结论:肿瘤减灭术后静脉腹腔联合化疗对晚期EOC患者的治疗有效率为77.33%,治疗前B7-H4蛋白、E-选择素水平均为晚期EOC患者治疗反应的独立影响因素,并可作为晚期EOC患者治疗反应预测的有效指标。

黄芪解毒汤辅助化疗对乳腺癌细胞MCF-7凋亡及E-钙黏附因子的影响研究

目的:探讨黄芪解毒汤辅助化疗对乳腺癌患者细胞MCF-7凋亡、E-钙粘附因子(E-CD)的影响。方法:培养人乳腺癌MCF-7细胞,分为化疗组、黄芪解毒汤联合化疗组、空白组,分别以化疗药多西紫杉醇、化疗药联合黄芪解毒汤浓缩液、细胞培养液治分贝干预各组MCF-7细胞24小时。干预后采用流式细胞仪检测MCF-7人乳腺癌细胞凋亡情况,采用实时荧光定量PCR检测E-钙黏蛋白基因表达情况。结果:化疗组、黄芪解毒汤联合化疗组、空白组的MCF-7细胞24小时凋亡率依次为(52. 6±3. 4)%、(52. 4±3. 8)%(21. 3±0. 9)%,其中化疗组与黄芪解毒汤联合化疗组凋亡率比较均无显著差异(P>0. 05),但两组均显著高于空白组(P<0. 05);三组48小时凋亡率依次为(72. 6±2. 3)%、(81. 7±3. 4)%、(23. 5±1. 2)%,其中黄芪解毒汤联合化疗组凋亡率最高,其次为化疗组,空白组最低,组间差异均显著(P<0. 05);化疗组的m RNA (E-钙黏蛋白)相对表达量为(2. 483±0. 297),黄芪解毒汤联合化疗组(4. 285±0. 173),两组均显著高于空白组(1. 137±0. 138),且化疗组显著低于黄芪解毒汤联合化疗组(P<0. 05)。结论:黄芪解毒汤辅助化疗可显著促进人乳腺癌细胞MCF-7凋亡,并抑制E-钙黏附因子失活,提高治疗疗效。

hsa-let-7e-5p对肺腺癌细胞迁移的影响

目的筛选肺腺癌中差异表达的环状非编码RNA(miRNA),并分析其对肺腺癌(LUAD)迁移的影响及潜在机制。方法通过miRNA芯片筛选出LUAD组织和正常肺组织中差异表达的miRNA并预测其潜在的生物学功能和信号通路;通过荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和癌症基因组图谱(TCGA)分析验证hsa-let-7e-5p在LUAD组织和细胞系中的表达水平;通过划痕试验检测hsa-let-7e-5p对LUAD细胞迁移的影响;通过生物信息学分析和qRT-PCR验证hsa-let-7e-5p与基因DTX2、NME6、C8orf58、GATM和DHX57之间的靶向关系。结果miRNA芯片结果显示肺腺癌组织中347个miRNA下调而229个miRNA上调。hsa-let-7e-5p在LUAD组织和细胞系中下调,过表达hsa-let-7e-5p可以抑制肺腺癌细胞迁移。结论hsa-let-7e-5p在肺腺癌中低表达并抑制肺腺癌细胞的迁移,DTX2、NME6、C8orf58、GATM和DHX57是hsa-let-7e-5p的潜在靶基因。

CXCR7/CXCL12对人乳腺癌细胞侵袭和黏附能力的影响

目的探讨趋化因子受体CXCR7及其配体CXCL12对人乳腺癌细胞MDA-MB-435s移动性、侵袭能力以及黏附能力的影响。方法运用RNA干扰技术,沉默人乳腺癌细胞MDA-MB-435s CXCR7基因的表达,分别用RT-PCR、Western blot检测CXCR7 mRNA及蛋白表达水平;划痕实验检测细胞移动性的变化;Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化;黏附实验检测肿瘤细胞与细胞外基质的黏附能力。结果有效沉默CXCR7的表达后,与空白对照组比较,CXCR7 mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),CXCL12诱导的人乳腺癌细胞移动速度减慢,侵袭能力和黏附能力明显减弱(P<0.05)。结论CXCR7表达的改变能够调节人乳腺癌细胞移动性、侵袭和黏附能力。CXCL12/CXCR7生物轴在乳腺癌的侵袭转移过程中可能具有重要作用。

miR-7对胃癌细胞SGC7901增殖、迁移及侵袭能力的影响及其与黏着斑激酶相关性研究

目的探讨miR-7对胃癌细胞SGC7901增殖、迁移及侵袭能力的影响及其与黏着斑激酶(FAK)相关性。方法培养人胃癌SGC7901细胞,将细胞分为miR-7mimics组、miR-阴性对照组和空白对照组,分别转染miR-7模拟物(miR-7mimics)、miR-阴性序列和不做任何处理。Real-time PCR检测miR-7表达,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移能力和细胞侵袭能力,Western blot检测FAK和FAK Tyr397蛋白表达,利用Pearson相关分析对变量间相关关系进行分析。结果 miR-7mimics组细胞中miR-7相对表达量(2.86±0.47),显著高于miR-阴性对照组(1.03±0.15)和空白对照组(1.06±0.17),差异有统计学意义(F=635.985,P<0.01);miR-7mimics组24、48、72和96h细胞生长抑制率均高于miR-阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);迁移实验中,miR-7mimics组平均迁移细胞数[(159.52±5.94)/视野],显著低于miR-阴性对照组[(315.42±7.59/视野]和空白对照组[(307.53±8.16)/视野],差异有统计学意义(均P<0.05);侵袭实验中,miR-7 mimics组平均侵袭细胞数[(29.85±4.52)/视野],显著低于miR-阴性对照组[(85.42±5.59)/视野]和空白对照组[(88.53±6.16)/视野],差异有统计学意义(均P<0.05);miR-7mimics组细胞中FAK、FAK Tyr397蛋白表达量均低于miR-阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);Pearson相关分析显示,细胞中miR-7表达量与FAK和FAK Tyr397蛋白表达量均呈负相关(r=-0.724和-0.874,均P<0.01)。结论过表达miR-7可显著抑制胃癌SGC7901细胞增殖、迁移及侵袭过程,可能与负性调控FAK蛋白表达有关。