基于E类逆变器的WPT系统线圈抗偏移研究

现有无线电能传输(WPT)系统中普遍存在元器件参数选型难,且常见线圈类型抗偏移能力普遍较弱。本文基于推挽式E类逆变器构建SS型拓扑结构磁耦合谐振式WPT(MCR-WPT)系统,计算系统中元器件参数,并推导其最大效率负载条件,同时提出同半径圆角矩形线圈设计,对同面积内不同条件线圈传输效率及抗偏移能力进行比较。仿真结果表明:耦合线圈结构与参数对传输性能有明显影响,在同等最佳负载条件下,所提线圈较其他常见类型线圈传输性能有所提升,最后通过实验验证仿真结果。

大肠杆菌O157胶体金免疫层析快速筛查方法的建立

目的建立一种大肠杆菌O157的胶体金免疫层析快速筛查方法。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测大肠杆菌O157,对该法进行敏感性、特异性和食品样品的适用性分析。结果该法能在15分钟内完成检测,检测不同的肠杆菌科细菌(非O157型大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、柠檬酸杆菌、肠杆菌、沙雷菌、耶尔森菌)、葡萄球菌、李斯特菌、气单胞菌、弧菌等共24种30株常见细菌,未发现有交叉反应,显示该法特异性良好。检测大肠杆菌O157的最低检出浓度为1×105cfu/ml。方法适用于奶粉、面粉、淀粉、咖啡粉、饼干、蛋糕、果冻、燕窝和果汁等食品样品的检测。结论新建立的大肠杆菌O157胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查。

大肠杆菌噬菌体的分离、纯化及其特性研究

探讨了从生活污水中分离、纯化大肠杆菌噬菌体的方法．经富集，从厦门大学、厦门港的生活污水中获得3种噬菌体．一是：蝌蚪状不可收缩尾的噬菌体，其头部为二十面体，直径约110—120nm，尾部长220—230nm，尾宽13—15nm，无尾鞘、基板、尾丁、尾丝等结构．二是蝌蚪状可收缩尾的噬菌体，其头部为三十面体，约70nm×110nm，尾部长约120—130nm，尾宽约18—22nm，有尾鞘、基板、尾丁、尾丝等结构，该类噬菌体在污水中占绝大多数．三是短尾噬菌体，其头部为二十面体，大小为20nm，尾部长约2—3nm，在污水中占有一定的比例．2种噬菌体在-18℃冰箱可存活56天．经噬菌体处理的污水，总菌数下降了30％左右，大肠杆菌总数下降90％以上．

化学发光磁酶免疫法检测O157∶H7大肠埃希菌

目的：建立灵敏稳定检测O157：H7大肠埃希菌的化学发光磁酶免疫法.方法：利用AMPPD-ALP化学发光体系,通过磁珠酶联免疫法对O157：H7大肠埃希菌进行检测.结果：其检测灵敏度达到850个,线性范围为1 000～50 000个,批间变异小于15%,批内变异小于20%,与人工计数培养检测相比相关系数达0.9807.结论：化学发光磁酶免疫分析法操作简便,检测精密度和灵敏度高,是一种很有发展前景的可靠方法.

宁夏地区牛源大肠埃希菌ESBLs检测及耐药性分析

为了解宁夏地区牛源超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌的耐药性、耐药特点及基因型分布,采用微量稀释法测定了16种抗菌药物对66株大肠埃希菌的MIC值,然后采用CLSI推荐的初筛及纸片确认方法对66株大肠埃希菌进行了ESBLs的检测,并采用PCR技术对ESBLs基因进行检测和初步分型。结果表明,大肠埃希菌对氯霉素、链霉素、四环素、多西环素、头孢和磺胺甲氧嘧啶的耐药率都比较高,而对阿米卡星、卡那霉素、多黏菌素、氟苯尼考及喹诺酮类药物则比较敏感。共检测出9株产超广谱β-内酰胺酶菌株,阳性率为13.64%,经PCR扩增、测序都为TEM型。结果显示,产ESBLs菌株多表现为多重耐药,对各种抗菌药物的耐药率均高于非ESBLs菌株。

复活光照强度对再生水紫外线消毒后大肠杆菌和粪大肠杆菌光复活的影响

研究了复活光照强度对污水三级处理出水紫外线消毒后大肠杆菌和粪大肠杆菌光复活的影响。复活光强对复活的影响依消毒时紫外线剂量及菌种的不同而不同.不同复活光强（0～43μW/cm^2）下，大肠杆菌在5 mJ/cm^2的紫外线剂量消毒后，复活情况基本不受复活光强影响.紫外线剂量增高至20 mJ/cm^2后复活光强存在阈值，在43μW/cm^2复活光条件下检测到明显的光复活，低于此光强没有检测到明显的光复活，粪大肠杆菌的光复活基本不受复活光照强度的影响.复活光强对细菌光复活的不同影响在光复活控制措施提出过程中需要考虑。

战术高能激光武器的发展现状和未来

文中介绍和分析了战术高能激光系统的拦截试验和存在的问题 ,以及机动战术高能激光系统及其第一代 /第二代激光器 ,特别评述了固体热容量激光器和高功率激光二极管阵列所取得的重大进展。

重庆地区大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的监测

研究重庆地区临床分离的大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏菌对第三代头孢菌素和氨曲南的耐药性及其产超广谱β－内酰胺酶的测定。应用纸片扩散法检测从临床标本中分离的１０７株大肠杆菌和７８株肺炎克雷伯氏菌的耐药性；并对可疑菌株用Ｅ－ｔｅｓｔ法进行超广谱β－内酰胺酶的测定。大肠埃希氏菌对５种抗生素的耐药率：氨曲南为２．８％；头孢曲松为７．５％；头孢噻肟为８．４％；头孢他啶为９．３％；头孢哌酮为１５．０％。产酶株有１７株，占１５．８９％。肺炎克雷伯氏菌对５种抗生素的耐药率：头孢噻肟为２３．１％；头孢哌酮为２３．１％；头孢他啶为２６．９％；头孢曲松为３０．８％；氨曲南为３４．６％。产酶株有１９株，占２４．３５％。大肠埃希氏菌较肺炎克雷伯氏菌耐药率低，其中对氨曲南敏感性最高，肺炎克雷伯氏菌对头孢噻肟及头孢哌酮敏感性最高，肺炎克雷伯氏菌较大肠埃希氏菌更容易产生超广谱β－内酰胺酶。

中国版纳猪MHCI类P1分子全长的原核表达与纯化

目的：获得原核表达的中国版纳猪ＳＬＡＩ类Ｐ１蛋白质分子。方法：ＰＣＲ扩增去信号肽的ＳＬＡＩ类Ｐ１ｃＤＮＡ序列，亚克隆至ｐＧＥＭＴ载体，测序。将亚克隆的Ｐ１ ｃＤＮＡ片段插入表达载体ｐＥＴ４２ｂ（＋），构建重组表达质粒ｐＥＴ－４２ｂ（＋）／ｓｌａ－ｐｌ，转化Ｅ·ｃｏｌｉ表达菌 ＢＬ２１－ＣｏｄｏｎＰｌｕｓ（ＤＥ３）－ＲＩＬ，ＩＰＴＧ诱导 Ｐ１－８ ｘ ｈｉｓ融合蛋白表达，经包涵体洗涤，８ ｍｏｌ／Ｌ尿素变性溶解，Ｎｉ２＋亲和层析，梯度透析后，定量保存。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ鉴定目的蛋白的表达与纯化。结果：目的蛋白（分子量３９．５ ｋＤ）表达量占细菌总蛋白 １５％，每升表达菌获得纯度９５％的目的蛋白 ４０ ｍｇ～６０ｍｇ。结论：成功建立猪 ＳＬＡ分子全长原核表达、纯化体系，为建立间接识别猪移植抗原ＳＬＡＩ类分子的人Ｔ细胞系及表位分析打下基础。

脑膜炎大肠杆菌新基因cglE的克隆、表达及功能分析

目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进行一级和二级结构预测。结果经Western-blot验证原核表达的CglE蛋白,SDS-PAGE电泳显示其分子量大小约50 000 Da。生物信息学分析表明,该基因与编码二氢硫辛酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide Ddhydrogenase,DLDH)的基因有同源性,与脑膜炎大肠杆菌侵袭素IbeA在二级结构上有相似性。结论建立稳定的原核表达系统并成功表达cglE基因产物,cglE基因可能与能量代谢及细菌穿透血脑屏障有关。目的蛋白CglE的表达及初步鉴定可为研究其功能及脑膜炎大肠杆菌的感染组学奠定了良好的基础。

重庆养鸭场雏鸭大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

对重庆市部分县养鸭场雏鸭所发疾病进行调查,根据其临床症状、病理变化及病原分离鉴定,确诊为大肠杆菌病。从部分养鸭场分离出的细菌通过形态染色特征、生化试验、致病性试验,得到15株大肠杆菌强毒株。对15株病原菌进行药敏试验,结果表明多数菌株对丁胺卡那霉素、妥布霉素素等抗生素高度敏感;对青霉素、氨苄青霉素、四环素等不敏感。

广西地区猪大肠杆菌血清型调查及耐药性检测

为了解广西地区猪大肠杆菌近年流行的血清型及耐药情况,对从广西10个市(县)50多个猪场采集的发病仔猪直肠拭子、肠内容物、肠系膜淋巴结等样品进行菌株分离、血清型鉴定及耐药性检测。结果表明,从样品中分离出103株致病性大肠杆菌,分属29个血清型,其中主要流行血清型为O138、O21、O101、O18、O9、O85;药敏试验结果表明,大肠杆菌致病菌株对头孢三嗪、氟苯尼考、头孢西丁、先锋霉素V、丁胺卡那等5种抗生素高度敏感,而对青霉素、利福平、阿莫西林、强力霉素、卡那霉素、链霉素、痢特灵等药物的耐药性菌株比例均大于60.0%,说明广西地区猪大肠杆菌致病菌株耐药性强、耐药谱广。

黑曲霉α-葡萄糖苷酶cDNA的克隆及表达

研究黑曲霉(Aspergillus niger)M-1菌株的α-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的克隆及表达。以M-1菌株的总RNA为模板,利用RT-PCR扩增α-葡萄糖转苷酶的cDNA,重组到Trc启动子控制下的表达载体pSE380中,构建重组质粒pSE-αtg,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。初步研究表明:重组蛋白具有葡萄糖苷酶活性,最适pH为6.0,最适温度为45℃,金属离子Cu2+和Mn2+对酶活力有明显的促进作用。添加1.6mmol/L IPTG对重组菌的诱导作用最大,在培养中添加麦芽糖,对重组菌产酶有显著的促进作用。

过量表达苹果酸酶对E.coli FMJ39厌氧混合酸发酵的影响

为了考察苹果酸酶对厌氧混合酸发酵的影响,从E.coliDH5α中PCR扩增苹果酸酶(NAD+-dependent,E.C1.1.1.38)基因sfcA,插入质粒pTrc99a构建了表达质粒pTrc99a-sfcA,有氧和厌氧的条件下,IPTG诱导在E.coliFMJ39(ldh,pfl)中均获得大量表达。厌氧发酵结果表明,过量表达苹果酸酶会影响混合酸发酵中甲酸、乙酸、丁二酸途径。重组菌甲酸和乙酸的量分别比受体菌提高了17.58%和15.27%,丁二酸的量降低了26.87%,柠檬酸的量变化不大。实验证实即使pfl基因缺陷,高浓度的L-Thr和L-Ser也会诱导Tdc操纵元把丙酮酸转化为甲酸和乙酸。

脉冲强光对大肠杆菌的杀菌实验研究

脉冲强光杀菌是一种新兴的冷杀菌技术,自制脉冲强光杀菌装置,光脉冲的脉冲宽度为20μs,最大输入能量为644J。使用该装置对大肠杆菌进行杀菌实验,对脉冲强光的杀菌影响因素进行研究。结果表明,脉冲强光对大肠杆菌的杀菌效果十分显著,输入电压2500V时,闪照4次能达到完全致死。各因素对脉冲强光杀菌效果影响的主次顺序是:闪照次数>输入电压>菌液透光率>菌液厚度。此外,杀菌菌液的物理性质对杀菌效果有较大影响。

中性蛋白酶基因在大肠杆菌中诱导表达条件的研究

采用PCR方法从枯草芽孢杆菌中扩增得到中性蛋白酶基因npr,与表达载体pET-22b(+)连接构建成重组质粒pET22b-npr,转化大肠杆菌BL21得到重组工程菌株。经IPTG诱导,其所含有的中性蛋白酶基因可高效表达。研究不同的表达条件对中性蛋白酶表达水平的影响,发现当培养液的OD_(600)值达到0.6～0.8时,添加诱导剂IPTG至终浓度为0.8 mmol/L,28℃诱导7h,重组工程菌中性蛋白酶的表达量最高,SDS-PAGE电泳结果显示出明显的分子质量约43 ku的特异性蛋白条带。

大肠杆菌对仔兔小肠形态学影响及其治疗方法的比较

为了研究大肠杆菌对仔兔小肠形态学影响,比较不同治疗方法的效果。将40只仔兔随机平均分为4组。经腹腔注射菌液后检测不同时期内毒素含量,并观察和比较小肠形态学结构的变化。结果表明,腹腔注射菌液后可形成毒血症,兔大肠杆菌的发病率与内毒素呈正相关;随着肠绒毛长度和粘膜厚度的恢复,病兔逐渐恢复正常。乳酸菌素在大肠杆菌引起兔腹泻的治疗中能有效恢复肠壁厚度和绒毛长度,在疾病恢复期治疗效果好于庆大霉素。

C_4光合作用关键酶PEPC的反应机制

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)在C4和CAM植物的光合作用中起着非常重要的作用。综述了该酶的催化反应机制及其调控方面的研究进展。

温度对重组大肠杆菌产番茄红素的影响及控制策略

在7L发酵罐中考察不同发酵温度23℃～37℃下对重组大肠杆菌E. coli ZYL-2产番茄红素的影响,33℃时发酵开始至9 h细胞比生长速率高于其他温度,且最早获得最大细胞生物量,发酵9 h后,28℃番茄红素比合成速率高于其他温度,合成期延长.基于上述结论,两步温度控制策略确定在发酵前9 h温度为33℃,9 h后降低至28℃,可获得最大番茄红素产量605.25 μgL-1和生产强度28.82μg L-1h-1,番茄红素发酵水平高于单一温度.

基因工程菌株BLG8900的遗传稳定性

目的研究基因工程菌株BLG8900的遗传稳定性。方法在有选择压力(加氨苄西林)的条件下,测定pYC2质粒在大肠杆菌BLG8900株[含有质粒pYC2的BL21(DE3)]中的遗传稳定性。结果工程菌连续传10、25、50和100代后质粒具有良好的稳定性,而且经BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切,酶切图谱相同。第100代菌株重组质粒的GnRH/TRS序列与原代菌株相同。原代与第10、25、50和100代菌株经IPTG诱导表达,GST-GnRH/TRS融合蛋白表达水平、菌体蛋白的SDS-PAGE图谱鉴定无明显差异。Western blot表明各代菌株表达产物均具有GnRH抗原特异性。结论质粒pYC2在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中有较好的遗传稳定性。