期刊文献+
共找到125篇文章
< 1 2 7 >
每页显示 20 50 100
Expression of Pseudorabies Virus gE Core Epitopes in Escherichia coli Strain BL21 and Utilization of Indirect PRV gE-ELISA 被引量:2
1
作者 Guangjun GUO Sufang LU +9 位作者 Guanggang QU Feng LI Lin DONG Yanli BI Jinliang WANG Feng WEI Na TANG Chunling ZHANG Zhuang DING Zhiqiang SHEN 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2014年第4期39-44,共6页
Pseudorabies virus glycoprotein E (PRV gE) has been recognized as a suitable diagnostic antigen for pseudorabies. In order to produce gE antigen in large quantities and at low cost, a gene fragment encoding PRV gE c... Pseudorabies virus glycoprotein E (PRV gE) has been recognized as a suitable diagnostic antigen for pseudorabies. In order to produce gE antigen in large quantities and at low cost, a gene fragment encoding PRV gE core epitopes was expressed in E. coli BL21 expression system. SDS-PAGE and Western Blotting revealed that the expression product in culture supematant of E. coli BL21 was a recombinant protein, approximately 51.8 Kd. At 5 h post-induction, protein concentration assay showed that the expression product amounted to 1.65 mg/ml, accounting for 24. 17% of total proteins in the culture supematant. An indirect PRV gE-ELISA was established by using the recombinant expression product as a coating antigen. Cross-reactivity assay showed that this antigen was PRV specific. In addition, the assay was consistently reproducible. Comparison of detection results of 240 serum samples between PRV gE-ELISA and a commercially available PRV diagnostic kit showed that there was no significant difference between these two methods (P 〉 0.05 ). 展开更多
关键词 Pseudorabies virus Glycoprotein E PRV strain SA Gene expression ELISA
下载PDF
牛病毒性腹泻病毒E^(rns)-ELISA抗体检测试剂盒的制备 被引量:1
2
作者 王静 陈柯源 +5 位作者 王胜华 丁成志 杨光辉 刘一 尹金花 王九峰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期65-70,共6页
为建立快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的血清学方法,本试验以BVDV NADL毒株结构蛋白E^(rns)作为包被抗原,优化反应条件并组装BVDV酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒,通过重复性试验、灵敏性试验、符合率试验和保存期试验验证该试... 为建立快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的血清学方法,本试验以BVDV NADL毒株结构蛋白E^(rns)作为包被抗原,优化反应条件并组装BVDV酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒,通过重复性试验、灵敏性试验、符合率试验和保存期试验验证该试剂盒的准确性、灵敏性和稳定性。结果显示,抗原包被浓度为4μg/mL,1%酪蛋白溶液37℃封闭45 min,被检血清以1∶400稀释孵育30 min,兔抗牛HRP标记二抗以1∶20000稀释孵育30 min,TMB底物反应5 min时,ELISA的反应背景下降,区分度最好。优化后方法的批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均在10%以内,表明该试剂盒具有较好的稳定性;灵敏性试验结果显示,当阳性血清稀释度达到1∶6400时仍可以检测为阳性,说明该试剂盒灵敏度较高;该试剂盒与美国爱德士生物科技公司(IDEXX)BVDV总抗体检测试剂盒共同检测466份临床血清样品,两者总符合率为89.1%;保存期试验结果显示,第4个月时该试剂盒仍能检测到阳性血清,说明稳定性较好。综上表明,本试验利用E^(rns)蛋白建立的BVDV间接ELISA抗体检测试剂盒灵敏度高且重复性好,可为BVDV抗体检测和流行性调查提供新的方法。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E^(rns)蛋白 抗体 间接ELISA
下载PDF
坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)的截短表达及其抗体间接ELISA方法的建立与应用
3
作者 唐晟 马瑶 +11 位作者 冯贺龙 李丽 汪宏才 张蓉蓉 曾哲 姚伦 温国元 邵华斌 罗青平 曾驰 谢佳燕 商雨 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第16期54-61,116,共9页
为了大量表达坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)并建立一种可检测坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法,试验首先将去除跨膜域的截短坦布苏病毒E基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)上并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达重组蛋白,利... 为了大量表达坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)并建立一种可检测坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法,试验首先将去除跨膜域的截短坦布苏病毒E基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)上并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达重组蛋白,利用His标签对表达的重组蛋白进行纯化;然后以重组蛋白为包被抗原、鸭待测血清为一抗、HRP标记兔抗鸭IgG为二抗,通过反应条件[抗原包被质量浓度、抗原包被条件、封闭液、封闭时间、一抗(待测血清样品)稀释液、一抗(待测血清样品)稀释度、一抗(待测血清样品)孵育条件、二抗稀释度、二抗孵育条件和显色条件]的优化和临界值的确定建立间接ELISA方法;最后进行特异性、敏感性和重复性试验,并通过临床样品检测比较该方法与Western-blot方法的符合性。结果表明:PCR扩增得到大小为1227 bp的坦布苏病毒截短E基因,经双酶切与测序验证后,成功构建重组表达质粒pET28a-E-tr。诱导后的重组蛋白分子量大小为49 ku并以包涵体的形式表达,纯化后的重组蛋白条带单一,可与鸭源坦布苏病毒阳性血清发生特异性结合。建立的ELISA方法优化后的抗原包被质量浓度为5μg/mL,抗原包被条件为4℃过夜,封闭液为2%BSA,封闭时间为60 min,一抗(待测血清样品)稀释液为1%BSA,一抗(待测血清样品)稀释度为1∶800,一抗(待测血清样品)孵育条件为37℃、30 min,二抗稀释度为1∶7500,二抗孵育条件为37℃、90 min,显色条件为37℃、10 min,阴阳临界值为0.368;仅可检测出鸭源坦布苏病毒阳性血清,无法检测出鸭源鸭疫里默氏杆菌、新城疫病毒、禽腺病毒、禽流感病毒、细小病毒阳性血清;待测血清最高稀释度为1∶3200(Western-blot方法待测血清最高稀释度仅为1∶1600);批次内重复变异系数(CV)为1.7%~4.7%,批次间重复CV为1.4%~5.7%;对137份临床鸭血清样品进行检测,阳性率为81.7%,与Western-blot方法比较样品阳性率较高,两种方法的符合率为87.6%。说明成功表达了坦布苏病毒截短E蛋白,并建立了一种特异性良好、敏感性较高、重复性较好的可检测坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法。 展开更多
关键词 坦布苏病毒 E蛋白 原核表达 间接ELISA 抗体
下载PDF
Serum Vitamin E Reference Intervals in a Black Congolese Population of Kinshasa
4
作者 Monzango Sibo Mboloko Esimo +16 位作者 Mputu Lobota Mbemba Fundu Nganga Mireille Itewa Monka Mayoka Mamoi Ntanga Kabuya Amba Naomie Lezaka Ensemeya Bola Jonita Maxime Fastrez Lebwaze Bienvenu Balthazar Phoba Destin Mbongi Tshilolo Léon Kahindo P. Muyalalo Mbanzulu Pita Emile Darai 《Open Journal of Obstetrics and Gynecology》 CAS 2023年第4期737-744,共8页
Context: Vitamin E is a powerful antioxidant and plays an important role in human reproduction. However, micronutrient deficiency is a major public health problem, particularly in developing countries. This study aime... Context: Vitamin E is a powerful antioxidant and plays an important role in human reproduction. However, micronutrient deficiency is a major public health problem, particularly in developing countries. This study aimed to establish reference intervals (RIs) for vitamin E in black Congolese people of childbearing age using an ELISA method to provide a reference for clinically assessing vitamin E status. Methods: A total of 127 healthy people between the ages of 20 and 42 who underwent check-ups were randomly selected for the study. ELISA method measured the level of vitamin E. The effect of gender on vitamin E level was assessed, and RI was established using a parametric approach. Results: Women showed significantly higher levels of vitamin E than men (p = 0.01). The RI of vitamin E in people of childbearing age was 3.71 to 13.72, 4.52 to 14.64, and 4.17 to 13.52 mg/L, respectively, for the whole population, women and men. Conclusion: Using an ELISA method, this study established RI for vitamin E in the black Congolese population of childbearing age. We also found that women had significantly higher vitamin E levels than men. The results could provide a scientific basis for interpreting vitamin status in people of childbearing age in our setting. 展开更多
关键词 ELISA Reference Interval People of Childbearing Age Vitamin E
下载PDF
牛传染性鼻气管炎病毒重组gE蛋白间接ELISA诊断方法的建立 被引量:9
5
作者 王海燕 朱远茂 +4 位作者 薛飞 童光志 赵立平 相文华 韩文瑜 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期29-33,共5页
以重组牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白,经纯化后作为诊断抗原建立了检测牛血清特异性gE抗体的间接酶联免疫吸附试验,确定其最佳包被量为每孔1.075μg。样品稀释度为1:40,兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1∶5000。判定标准为样品O... 以重组牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白,经纯化后作为诊断抗原建立了检测牛血清特异性gE抗体的间接酶联免疫吸附试验,确定其最佳包被量为每孔1.075μg。样品稀释度为1:40,兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1∶5000。判定标准为样品OD值大于0.582为阳性,小于0.472为阴性,在0.472与0.582之间为可疑。经抗特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。在403份血清样品中,进口试剂盒检出234份阳性样品,该诊断方法检出248阳性样品,与进口试剂盒的符合率为94.3%,但该诊断方法检出率更高。在43份血清样品中,中和试验检出24份阳性样品,该诊断方法检出28份阳性样品,与中和试验的符合率为85.7%。应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染率,发现这些地区的IBRV感染率为68.7%。 展开更多
关键词 牛传染性鼻气管炎 牛疱疹病毒Ⅰ型 糖蛋白gE 酶联免疫吸附试验
下载PDF
新疆地区绵羊戊型肝炎血清流行病学调查 被引量:9
6
作者 曲立春 郭志儒 +2 位作者 阿合买提.买买提 王远志 马勋 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期661-663,共3页
采集新疆6个地区4个品种绵羊的826份血清(南疆348份、北疆478份),应用双抗原夹心酶联免疫法(DS-ELISA)检测抗戊型肝炎病毒(HEV)IgG抗体,比较不同地域、不同年龄以及不同品种绵羊HEV抗体阳性率的差异。结果显示,所检测羊血清中HEV抗体阳... 采集新疆6个地区4个品种绵羊的826份血清(南疆348份、北疆478份),应用双抗原夹心酶联免疫法(DS-ELISA)检测抗戊型肝炎病毒(HEV)IgG抗体,比较不同地域、不同年龄以及不同品种绵羊HEV抗体阳性率的差异。结果显示,所检测羊血清中HEV抗体阳性率为19.13%(158/826),南、北疆羊HEV抗体阳性率分别为21.26%(74/348)和17.58%(84/478),差异显著(P<0.05)。卡拉库尔羊、小尾寒羊HEV抗体阳性率分别为23.94%(79/330)和17.33%(65/375),差异显著(P<0.05)。3岁以上、2~3岁和1岁以内羊的HEV抗体阳性率差异不显著(P>0.05)。这表明新疆地区绵羊HEV感染普遍存在。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 ELISA 新疆 羊血清
下载PDF
鸭坦布苏病毒E蛋白包被抗原间接ELISA方法的建立 被引量:9
7
作者 傅秋玲 陈珍 +6 位作者 施少华 傅光华 程龙飞 陈红梅 万春和 林建生 黄瑜 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2015年第1期1-5,共5页
以鸭坦布苏病毒E蛋白的主要优势抗原表位区E1蛋白作为包被抗原,建立检测鸭坦布苏病毒中和抗体效价的间接ELISA方法。优化后确定最佳的抗原包被浓度为1.548mg·L-1,血清的最佳稀释度为1∶100,酶标二抗的稀释度为1∶6 000。特异性表明... 以鸭坦布苏病毒E蛋白的主要优势抗原表位区E1蛋白作为包被抗原,建立检测鸭坦布苏病毒中和抗体效价的间接ELISA方法。优化后确定最佳的抗原包被浓度为1.548mg·L-1,血清的最佳稀释度为1∶100,酶标二抗的稀释度为1∶6 000。特异性表明,用建立的ELISA方法对禽流感、新城疫病毒、1型鸭肝炎病毒、胰腺型鸭甲肝病毒、禽霍乱和鸭疫里默氏杆菌的阳性血清进行检测,均未发生交叉反应;批内和批间重复试验的平均变异系数都小于10%;敏感性达1∶3 200。该方法与以全病毒为包被抗原的间接ELISA检测结果相关性达到95.1%。利用该方法对237份来自福建省开产麻鸭的血清样品进行检测表明,其血清阳性率达77.9%,表明福建省开产麻鸭感染鸭坦布苏病毒阳性率很高。本试验建立的间接ELISA检测方法具有特异性强,重复性好,敏感性高,为鸭坦布苏病毒抗体检测提供了简单快捷的检测方法。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 E蛋白 间接ELISA
下载PDF
海口和三亚地区商品猪中戊型肝炎病毒感染情况调查 被引量:7
8
作者 王凤阳 李布勇 +6 位作者 王轶 廖起志 杜丽 李笑春 申明霞 成鹰 刘涛 《中国热带医学》 CAS 2007年第6期897-897,900,共2页
目的调查海口和三亚地区商品猪中戊型肝炎病毒感染情况,为制定相应的戊肝防制策略提供资料。方法应用ELISA方法,对海口和三亚的18个养猪场的190只成年猪进行了HEV血清学调查。结果在海口和三亚地区18个猪场的190只猪中,抗-HEV抗体阳性猪... 目的调查海口和三亚地区商品猪中戊型肝炎病毒感染情况,为制定相应的戊肝防制策略提供资料。方法应用ELISA方法,对海口和三亚的18个养猪场的190只成年猪进行了HEV血清学调查。结果在海口和三亚地区18个猪场的190只猪中,抗-HEV抗体阳性猪176只,总阳性率92.6%。在18个猪场中,有13个猪场的HEV阳性率在90%以上,其中,11个猪场的阳性率为100%。最低的阳性率为60%。结论在海口和三亚两地区商品猪中,HEV的感染是非常普遍的,且感染率较高,应予关注。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 血清 酶联免疫吸附试验
下载PDF
基于重组E^(rns)蛋白的猪瘟E^(rns)-ELISA的建立和优化 被引量:2
9
作者 贾洪林 仇华吉 +6 位作者 朱庆虎 李国新 李娜 罗玉子 刘永刚 李艳 童光志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1028-1032,共5页
将大肠杆菌表达的猪瘟病毒重组Erns蛋白经纯化后作为包被抗原,建立了检测猪瘟抗体的Erns-ELISA方法。经优化试验,确定了最适抗原包被量为0.15μg;血清最适稀释度为1∶100。经阻断试验、交叉反应试验和重复性试验证明,建立的Erns-ELISA... 将大肠杆菌表达的猪瘟病毒重组Erns蛋白经纯化后作为包被抗原,建立了检测猪瘟抗体的Erns-ELISA方法。经优化试验,确定了最适抗原包被量为0.15μg;血清最适稀释度为1∶100。经阻断试验、交叉反应试验和重复性试验证明,建立的Erns-ELISA简便、特异、稳定,与基于重组E2蛋白的E2-ELISA的符合率高达96.7%,与基于全病毒抗原的Dot-ELISA符合率为77.5%。可以用于猪瘟抗体的血清学监测以及用作基于E2蛋白的标记疫苗配套的鉴别诊断。 展开更多
关键词 猪瘟 E^rns-ELISA 鉴别诊断
下载PDF
上海地区多种动物戊型肝炎血清学调查 被引量:19
10
作者 周锦萍 孙泉云 +5 位作者 刘佩红 薛霞 李凯航 卢军 张维谊 齐新永 《动物医学进展》 CSCD 2006年第12期85-88,共4页
在上海地区收集血液样品(猪、牛、山羊、马、鸡、鸭、鸽、犬和部分珍禽等)964份,应用双抗原夹心酶联免疫法(DS-ELISA)检测抗HEV抗体。结果表明,猪抗HEV抗体的阳性率为72.18%(301/417),其中母猪阳性率最高,为82.53%(222/269),育成猪阳性... 在上海地区收集血液样品(猪、牛、山羊、马、鸡、鸭、鸽、犬和部分珍禽等)964份,应用双抗原夹心酶联免疫法(DS-ELISA)检测抗HEV抗体。结果表明,猪抗HEV抗体的阳性率为72.18%(301/417),其中母猪阳性率最高,为82.53%(222/269),育成猪阳性率为52.54%(62/118),保育猪阳性率为50.00%(15/30);22个猪场均检测到抗HEV抗体阳性猪,阳性率高于60%的猪场有16个,占阳性猪场的72.72%。在牛、山羊、马、鸡、鸭、鸽等血清中也检测到了抗HEV抗体,阳性率分别为6.00%,24.00%,16.00%,1.90%,12.77%和4.44%,明显低于猪群的阳性率。在宠物犬中检测到了抗体阳性犬,阳性率为17.82%(18/101),说明犬对HEV易感。珍禽中野鸭、火烈鸟对HEV也有一定的敏感性,阳性率分别为6.60%(1/15)和10%(1/10),在孔雀和鸵鸟的血清标本中未检测到HEV抗体。猪群中戊型肝炎病毒存在较普遍,其他与人类密切相关的多种动物也对HEV敏感。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 动物 抗体 双抗原夹 心酶联免疫吸附试验
下载PDF
氟比洛芬酯在子宫肌瘤患者体内的药物代谢分布及对前列腺素E_2的影响 被引量:2
11
作者 郑飞 于慧敏 高丽 《中国生化药物杂志》 CAS 2016年第12期63-65,共3页
目的探讨氟比洛芬酯(flurbiprofen axetil,FA)在子宫肌瘤的药物代谢分布及对前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的影响。方法选取2014年1月~2016年2月在宁波市第二医院因子宫肌瘤行子宫全切术的患者86例,随机分为对照组44例和观察... 目的探讨氟比洛芬酯(flurbiprofen axetil,FA)在子宫肌瘤的药物代谢分布及对前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的影响。方法选取2014年1月~2016年2月在宁波市第二医院因子宫肌瘤行子宫全切术的患者86例,随机分为对照组44例和观察组42例。对照组和观察组分别于术前15 min给予0.9%氯化钠溶液和1 mg/kg FA,检测FA的活性代谢物氟比洛芬(flurbiprofen,FP),酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测组织匀浆中PGE2的浓度。结果观察组正常组织和肿瘤组织FP浓度分别为(0.70±0.13)μg/m L和(1.72±0.13)μg/m L,明显高于对照组(0.00±0.00)g/m L和(0.00±0.00)μg/m L,差异有统计学意义(P〈0.05);观察组肿瘤组织FP浓度明显高于正常组织,差异有统计学意义(P〈0.05);观察组正常组织和肿瘤组织PGE2浓度分别为(189.29±26.38)pg/m L和(260.01±46.63)pg/m L,均明显低于对照组(210.03±35.22)pg/m L和(390.20±92.10)pg/m L,差异有统计学意义(P〈0.05);观察组血浆FP浓度为(5.50±0.72)μg/m L,明显高于对照组(0.00±0.00)μg/m L,差异有统计学意义(P〈0.05),而PGE2浓度为(602.38±84.09)pg/m L,明显低于对照组(920.13±89.05)pg/m L,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 FA在子宫肌瘤组织中有一定的靶向分布,可降低PGE2浓度,从而起到减轻患者痛觉的作用。 展开更多
关键词 氟比洛芬酯 子宫肌瘤 前列腺素E ELISA法
下载PDF
猪乙型脑炎病毒囊膜E蛋白间接ELISA诊断方法的建立与初步应用 被引量:5
12
作者 张宁 金洪涛 +6 位作者 丁壮 张瑞岩 刘雯 李勇 薛会亮 李丹 夏志平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第7期170-175,共6页
本研究利用纯化的原核表达乙型脑炎囊膜E蛋白作为包被抗原,建立了乙型脑炎间接ELISA诊断方法。对检测的各种条件进行了优化,优化反应条件后确定的抗原最适包被浓度为2μg/mL,抗原最佳包被条件为37℃包被2 h,血清的最适稀释度为1∶160,... 本研究利用纯化的原核表达乙型脑炎囊膜E蛋白作为包被抗原,建立了乙型脑炎间接ELISA诊断方法。对检测的各种条件进行了优化,优化反应条件后确定的抗原最适包被浓度为2μg/mL,抗原最佳包被条件为37℃包被2 h,血清的最适稀释度为1∶160,酶标抗体最适稀释度为1∶5000,最佳封闭条件为1%BSA,阴阳性临界值判定标准为D492 nm=0.254。该方法不与猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒阳性血清反应,其D492 nm<0.254,说明该方法具有良好的特异性。采用该方法对150份疑似乙型脑炎血清样品进行检测,结果显示,与某猪乙型脑炎试剂盒相比符合率为90.77%,表明建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,因此,本研究成功建立了能特异性检测抗乙型脑炎血清抗体的ELISA检测方法。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 E蛋白 间接ELISA
下载PDF
汉坦病毒A_(537)核蛋白基因的分段表达及其产物抗原活性的研究 被引量:3
13
作者 吴守丽 严延生 +1 位作者 李世清 何似 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期66-70,共5页
目的构建汉坦病毒S基因不同截短片段的重组表达质粒,并选择表达高活性的重组抗原应用于血清学诊断。方法从HTN型A537株基因组中扩增出S全长基因,构建TA-A537S克隆;以此为模板扩增出不同长度的截短的S片段,定向插入表达载体pET-30a,获得... 目的构建汉坦病毒S基因不同截短片段的重组表达质粒,并选择表达高活性的重组抗原应用于血清学诊断。方法从HTN型A537株基因组中扩增出S全长基因,构建TA-A537S克隆;以此为模板扩增出不同长度的截短的S片段,定向插入表达载体pET-30a,获得含不同片段的重组表达载体(pET-1-112,pET-1-119,pET-1-137,pET-1-200,pET-1-292,pET-1-316,pET-1-429,pET-6-119,pET-6-137,pET-6-200,pET-6-292,pET-6-405,pET-16-112,pET-16-137,pET-26-137),并在大肠杆菌BL21(DE3)中分别进行了表达;应用SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况,应用Western blot分析重组抗原的活性,采用电洗脱、亲和层析等方法纯化重组蛋白,用间接ELISA法对重组蛋白的抗原性及抗原特异性进行检测。结果成功构建了含HV S全基因的TA-A537S克隆质粒;以截短的S基因片段构建的重组表达质粒中,既有表达又有活性的有pET-1-112,pET-1-119,pET-1-200,pET-1-292,pET-1-429,pET-6-119,pET-6-200,pET-6-292,pET-6-405;其中pET-6-119表达量最高且活性强;经电洗脱或Ni-NTA亲和层析可获得高纯度的重组蛋白e6-119;纯化的e6-119重组蛋白应用于ELISA检测疑似HFRS和不明原因的发热病人血清IgG,与IFAT比较,其敏感性和特异性分别为94.7%,95.6%。结论pET-6-119表达量高,易于纯化,并且具有良好的抗原性,是一种廉价、安全、可靠的诊断抗原。 展开更多
关键词 汉坦病毒 重组核蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附试验
下载PDF
戊肝与丙肝病毒在献血员人群中感染状况的对比研究 被引量:4
14
作者 李方和 杨东亮 +3 位作者 赵西平 喻植群 汪由坤 郝连杰 《中国病毒学》 CSCD 1996年第1期17-20,共4页
采用市售试剂对武汉地区乡村献血员进行血清抗HEV与抗HCV检测,两者的阳性率分别为5.74%及9.35%。在288份有ALT记录的单采浆献血员中,有近期ALT升高史的献浆者抗HEV及抗HCV检出率分别为14.04%及... 采用市售试剂对武汉地区乡村献血员进行血清抗HEV与抗HCV检测,两者的阳性率分别为5.74%及9.35%。在288份有ALT记录的单采浆献血员中,有近期ALT升高史的献浆者抗HEV及抗HCV检出率分别为14.04%及14.18%,均显著高于无近期ALT升高史的献浆者。对上述标本同时进行多项血清HBV标志检测,抗HEV阳性及抗HCV阳性组献血员多项HBV标志检测结果与相应阴性组比较均未见显著的差别。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 丙型肝炎病毒 感染 输血
下载PDF
流行性乙型脑炎病毒E基因的克隆、表达及初步应用 被引量:6
15
作者 张雪寒 何孔旺 +3 位作者 郭容利 倪艳秀 王芳 俞正玉 《中国病毒学》 CSCD 2005年第5期494-497,共4页
参照GenBank中的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14株序列设计了一对特异性引物,用PCR方法从SA14-14扩增E基因全长,然后克隆到pMD18-T载体中,转化宿主菌DH5a,提取阳性克隆质粒进行双酶切鉴定,将目的片段定向克... 参照GenBank中的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)SA14-14株序列设计了一对特异性引物,用PCR方法从SA14-14扩增E基因全长,然后克隆到pMD18-T载体中,转化宿主菌DH5a,提取阳性克隆质粒进行双酶切鉴定,将目的片段定向克隆到pET32a(+)中,转化入BL21(DE3),经IPTG诱导可表达分子量约73ka的蛋白,Western blotting试验呈阳性,表明E基因得到表达。以纯化的表达产物为核心抗原,猪抗JEV血清为一抗,HRP标记羊抗猪IgG抗体为二抗建立间接ELISA方法,并初步检测了一些血清样品,结果提示表达的蛋白具有很好的应用开发价值。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 E基因 表达 间接ELISA
下载PDF
大肠杆菌O157微孔板法与经典方法的比较研究 被引量:2
16
作者 张树宏 阮寅 +1 位作者 顾鸣 朱贻华 《现代食品科技》 EI CAS 2009年第4期455-457,共3页
大肠杆菌O157:H7是目前国内外极为关注的食源性致病菌,快速检测大肠杆菌O157:H7显得尤为重要。特针对9大类食品分别进行了传统培养法和3MTecra?微孔板法的对比实验,并选择了其它血清型大肠杆菌和其他种属细菌进行了特异性的检验。在199... 大肠杆菌O157:H7是目前国内外极为关注的食源性致病菌,快速检测大肠杆菌O157:H7显得尤为重要。特针对9大类食品分别进行了传统培养法和3MTecra?微孔板法的对比实验,并选择了其它血清型大肠杆菌和其他种属细菌进行了特异性的检验。在199份阳性样品中,3MTecra?大肠杆菌O157微孔板法的检出率为100%,传统培养法则为97.5%,3MTecra?大肠杆菌O157微孔板法的灵敏度达到1CFU/25g(mL),且该方法具有快速、简便、高效、准确的特点,适宜大规模化食品样品大肠杆菌O157检测。 展开更多
关键词 快速检测 大肠杆菌O157 酶联免疫法
下载PDF
新疆地区猪戊型肝炎血清流行病学调查 被引量:36
17
作者 马勋 陆承平 孟继鸿 《中国病毒学》 CSCD 2004年第3期285-287,共3页
The purpose of the present study was to determine the prevalence of swine Hepatitis E virus (HEV) infection in Xinjiang. 813 swine serum samples collected from 1 to 12 months of age at 9 swine farms in Xinjiang region... The purpose of the present study was to determine the prevalence of swine Hepatitis E virus (HEV) infection in Xinjiang. 813 swine serum samples collected from 1 to 12 months of age at 9 swine farms in Xinjiang region were tested by ELISA for the presence of IgG antibodies against HEV. The recombinant protein pUS166 containing region 452-617aa of the ORF2 of HEV US strain was used as coating antigen. The result showed that anti –HEV IgG were detected in 265 of 405 pigs (65.43%) in one group and 238 of 408 pigs (58.33%) in another group , and that the seropositivity rate was not related to geographic district and breeds, but differed remarkably by age, being 40% among the 1- to 3-month-old piglets, but 77.33% among ones over 3-month-old. It suggested that swine HEV was widespread in different geographic regions of XinJiang. 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 猪血清 酶联免疫吸附试验
下载PDF
吸毒人群HAV和HEV重叠感染状况及其影响因素分析 被引量:1
18
作者 李成华 黄民主 +6 位作者 谭梅娟 陈伟 关岚 刘浩 李登清 戴卫平 张琰 《实用预防医学》 CAS 2006年第5期1184-1186,共3页
目的了解吸毒人群中HAV、HEV重叠感染状况及其影响因素。方法现况研究,整群抽样法抽取某女性戒毒所和某男性戒毒所中吸毒人员596名,收集有关资料并采集血清标本。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中抗-HAVIgG及抗-HEVIgG,采用Chi-squ... 目的了解吸毒人群中HAV、HEV重叠感染状况及其影响因素。方法现况研究,整群抽样法抽取某女性戒毒所和某男性戒毒所中吸毒人员596名,收集有关资料并采集血清标本。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中抗-HAVIgG及抗-HEVIgG,采用Chi-square检验和Logistic回归分析对数据进行统计学处理。结果抗-HAVIgG及抗-HEVIgG均为阳性者22例,重叠感染率3.69%(22/596)。经χ2检验,不同年龄(χ2=2.605,P=0.272)、不同文化程度(χ2=1.974,P=0.160)、是否饮用生水(χ2=0.460,P=0.497)、家庭成员有无肝炎病史(χ2=2.008,P=0.156)的HAV、HEV重叠感染率差异无显著性。经Logistic回归分析,年龄(OR=1.72)、文化程度(OR=2.29)、家庭成员肝炎病史(OR=2.08)与吸毒者HAV、HEV重叠感染相关。结论吸毒人群是HAV、HEV重叠感染的高危人群,年龄增大、文化程度低、家庭成员肝炎病史可能是吸毒人群中HAV、HEV重叠感染的危险因素。 展开更多
关键词 流行病学 吸毒 甲型肝炎 戊型肝炎 重叠感染 酶联免疫吸附试验
下载PDF
昆明地区猪戊型肝炎病毒感染的血清学调查 被引量:3
19
作者 严玉霖 高洪 +3 位作者 李文贵 陈玲 高利波 赵汝 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第6期89-91,共3页
为了解昆明地区猪戊型肝炎病毒(HEV)感染的情况,从昆明地区12个规模化养猪场和部分散养户采集了270份猪血清,采用间接ELISA方法对血清样本进行抗HEV抗体检测。检测结果显示,235份规模化养猪场猪血清抗HEV抗体阳性率为59.15%,35份散养户... 为了解昆明地区猪戊型肝炎病毒(HEV)感染的情况,从昆明地区12个规模化养猪场和部分散养户采集了270份猪血清,采用间接ELISA方法对血清样本进行抗HEV抗体检测。检测结果显示,235份规模化养猪场猪血清抗HEV抗体阳性率为59.15%,35份散养户猪群血清中抗HEV抗体阳性率为74.29%,其中3月龄以上的育肥猪HEV抗体阳性率较高,为75%。结果表明,昆明地区猪群普遍存在HEV感染,尤其是仔猪和生长育肥猪HEV的感染较为严重。 展开更多
关键词 猪戊型肝炎病毒 感染 间接ELISA 血清学调查
下载PDF
新疆南疆地区绵羊戊型肝炎血清流行病学调查 被引量:7
20
作者 武军元 康强 +1 位作者 白万胜 白正辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期427-429,共3页
对新疆南疆4个行政区6个品种的434份绵羊血清,采用双抗原夹心酶联免疫法检测抗戊型肝炎病毒(HEV)IgG抗体,比较不同地区、不同品种及不同年龄段绵羊戊型肝炎抗体阳性率的差异。结果显示,所检测血清总的抗体阳性率为32.25%(140/434),4个... 对新疆南疆4个行政区6个品种的434份绵羊血清,采用双抗原夹心酶联免疫法检测抗戊型肝炎病毒(HEV)IgG抗体,比较不同地区、不同品种及不同年龄段绵羊戊型肝炎抗体阳性率的差异。结果显示,所检测血清总的抗体阳性率为32.25%(140/434),4个地区绵羊抗体阳性率依次为32.34%(65/201),37.25%(19/51),47.25%(43/91),14.29%(13/91),差异极显著(p<0.01);2岁以上绵羊与1岁以下绵羊抗体阳性率依次为47.25%(43/91)和21%(25/121),差异极显著(p<0.01);不同品种绵羊HEV感染率差异显著(p<0.05)。由此可见,新疆南疆地区绵羊普遍存在HEV感染。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 绵羊血清 酶联免疫吸附试验
下载PDF
上一页 1 2 7 下一页 到第
使用帮助 返回顶部