E-test法用于100株革兰阴性菌的药敏结果评价

１００株临床分离的革兰阴性菌用Ｅ－ｔｅｓｔ、琼脂稀释法与Ｋ－Ｂ法等三种方法进行了五种抗菌药物的敏感试验。结果显示按等级资料处理三法无显著性差异，Ｅ－ｔｅｓｔ与琼脂稀释法的一致性为９０．０％，仅在头孢呋肟中出现了３例严重差异（Ｒ→Ｓ）；Ｋ－Ｂ法与琼脂稀释法一致性为８６．２％，在环丙沙星中出现９例严重差异，庆大霉素出现３例严重差异；Ｅ－ｔｅｓｔ与Ｋ－Ｂ法之间的一致为９０．２％。Ｅ－ｔｅｓｔ确为一种简便、易行、准确的抗菌药物敏感试验方法，但其价格较贵，只适于在某些情况下选择使用。

用E-test法对菌丝相马尔尼菲青霉进行体外药敏检测

用E test抗真菌药敏试条研究酮康唑、伊曲康唑、5 氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑对马尔尼菲青霉(PM)菌丝相的敏感性 ,判定MIC值。结果5种抗真菌药对PM菌丝相均具良好敏感性 ,尤以伊曲康唑为优。马尔尼菲青霉的药敏试验为临床上选择有效药物具有一定的意义。

E-test法和Rosco纸片法检测申克孢子丝菌对伊曲康唑和氟康唑的敏感性试验

目的探讨申克孢子丝菌的体外抗真菌药敏试验E-test法和Rosco纸片法的可比性,观察申克孢子丝菌对伊曲康唑和氟康唑的敏感性。方法采用临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的M27-P方案中的E-test法检测和Rosco纸片法检测申克孢子丝菌在菌丝相时对伊曲康唑、氟康唑的MIC值。结果采用E-test法和Rosco纸片法检测20株临床分离株25℃菌丝相时,伊曲康唑的MIC值范围分别为:0.012～2.0μg/mL,14～29mm,氟康唑的MIC值范围分别为:>256μg/mL,0mm。结论体外抗真菌药敏试验E-test法和Rosco纸片法有较好的一致性和重复性。申克孢子丝菌25℃菌丝相时对伊曲康唑、氟康唑的敏感性存在差异,对伊曲康唑的敏感性高于氟康唑。

念珠菌体外药敏试验K-B法与E-test法的对照研究

目的 探讨分别采用K-B法与E-test法检测我院念珠菌体外药物敏感性,为临床合理用药提供参考。方法 随机选择我院2010年∽2014年间的110例念珠菌眼炎患者,收集110例眼分泌物标本,接种培养念珠菌菌株110株,分别采用K-B法与E-test法检测念珠菌对于伊曲康唑、氟康唑的敏感率,比较检测结果的差异性。结果 采用K-B法对伊曲康唑敏感菌株的检出率为88.2%,对氟康唑敏感菌株的检出率为97.3%;采用E-test法对伊曲康唑敏感菌株的检出率为86.4%,对氟康唑敏感菌株的检出率为98.2%,二者的差异经统计学比较分析无明显差异（P〉0.05）。结论 采用K-B法与E-test法检测念珠菌体外药敏试验的结果具较高的符合率,均为较为理想的念珠菌体外药敏试验方法,可根据医院具体情况加以选择。

运用E-Test法对肠杆菌科细菌产超广谱酶的鉴别

为了解肠杆菌科细菌耐药及产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL)的情况 ,运用 K- B琼脂扩散法与 E- Test ESBL 筛选纸条相结合 ,对 177株肠杆菌科的细菌进行耐药性监测 ,并对 41株耐头孢他定和 (或 )头孢噻肟的细菌采用 E- Test法进行超广谱酶的测定 ,结果显示 8种抗菌药物对 177株肠杆菌科细菌抗菌活性最强依次为亚胺培南 (96 % ) ,阿米卡星 (85 % ) ,头孢他定 (73% ) ,环丙沙星 (6 9% )。 11株 (6 . 2 % )产超广谱酶的细菌中 5株为大肠杆菌 ,4株为肺炎克雷伯杆菌 ,余下 2株为阴沟肠杆菌。提示产超广谱酶的细菌对第三代头孢菌素耐药 ,对亚胺培南 10 0 %敏感 ,对阿米卡星、头孢西丁敏感率均在 6 0

163份呼吸道标本酵母菌培养和E-test法药敏分析

目的 研究临床上引起呼吸道感染的酵母菌菌群分布及其E test药敏试验 ,并以此探讨E test法在真菌药敏方面的应用。方法 对 163份呼吸道分泌物作酵母菌常规培养分离而后取菌用Walk/AwayTM-4 0鉴定系统鉴定 ,并用E test试条作药敏试验。结果 共分离出 48株酵母菌 ,以白色念珠菌和热带念珠菌为主 ,分别为 2 9株 (60 4% )和 9株 (18 8% ) ;而药敏试验中IT ,FC ,KE ,FL ,AP的耐药率分别为 44 1% ,8 8% ,41 2 % ,61 8%和 0。结论 呼吸道分泌物酵母菌以白色念珠菌和热带念珠菌为主 。

病原微生物药敏检测方法分析

抗生素敏感试验在当前病原微生物耐药性持续增长的形势下,已成为指导临床科学合理用药不可或缺的重要环节。因此,药敏检测方法的完善与发展是快速获取科学、准确微生物耐药谱的前提,也是实现有效临床治疗的重要保障。本文旨在探究纸片扩散法、稀释法等多种微生物药敏检测方法的检验原理和优缺点,预测抗菌治疗的效果,帮助临床医师选择合适的抗菌药物,为药敏检测方法的发展提供参考。

青霉素E-test法药敏条临床研究

目的通过国内外青霉素E-test法药敏条对临床分离菌株的药物敏感性研究,评价国产E-test法药敏条的临床性能。方法收集2014—2016年临床分离纯化菌株226株,与梅里埃药敏条平行对比,超过±1个稀释倍数的采用微量稀释法进一步确认,对所测MIC值及敏感性进行统计学方法分析。结果国产药敏条与法国梅里埃药敏条比对中,有9株菌的MIC值超出了±1个稀释倍数范围,经微量肉汤稀释法验证后,有6株菌的MIC值回到了±1个稀释倍数的范围内,即纠正后的EA(Essential agreement)%为98.67%(223/226)。另外,有4株菌的体外敏感性判读存在差异,经微量肉汤稀释法验证后,有3株菌的敏感判定结果与国产条完全一致,即最终的CA(Categorical agreement)%为99.56%(225/226),VMD(Very major discrepancy)为0%,MD(Major discrepancy)为0.44%(1/226)。结论国产E-test法药敏条临床性能与国外产品无显著差异,可用于临床微生物药敏的体外检测。

5种国产与进口E-test药敏条的一致性比较

目的比较5种药物国产E-test药敏条(简称国产条)(青霉素、万古霉素、氯霉素、两性霉素B和氟康唑)与进口E-test药敏条(简称进口条)的一致性。方法收集2014至2015年北京协和医院临床分离菌共294株,用E-test法测定其最低抑菌浓度(MIC)值,国产条与法国生物梅里埃公司进口条平行检测的MIC值超过|±1|个倍比稀释倍数(细菌)/|±2|个倍比稀释倍数(真菌)或体外敏感性判定结果不一致时,采用微量肉汤稀释法进行验证。结果 56株菌进行青霉素E-test药敏条检测,其中52株MIC值在|±1|个倍比稀释倍数范围内,4株菌MIC值超出此范围,经微量肉汤稀释法验证,有2株菌MIC值与进口条更接近;其中3株菌体外敏感性判读存在差异,且均为国产条较进口条敏感,经微量肉汤稀释法验证,有2株菌药敏结果与国产条一致。62株菌进行万古霉素E-test药敏条试验,其中完全一致16株(16/62,25.8%),|±0.5|个倍比稀释倍数43株(43/62,69.4%),|±1|个倍比稀释倍数2株(2/62,3.2%),仅1株菌MIC值超出|±1|个倍比稀释倍数(14W00916,粪肠球菌),经微量肉汤稀释法验证后,该菌MIC值介于进口条和国产条之间;62株菌体外敏感性判读与进口条100%一致。其余3种抗菌药物(氯霉素、两性霉素B、氟康唑)的基本一致(essential agreement,EA)率和分类一致(categorical agreement,CA)率均为100%。结论 5种国产条(青霉素、氯霉素、万古霉素、两性霉素B、氟康唑)所测定MIC值和体外敏感性判定结果准确可靠,与进口条一致性较好,可满足临床和实验室需求。

3种药敏检测方法对洋葱伯克霍尔德菌体外抗菌药物药敏结果分析

目的评估微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测洋葱伯克霍尔德菌体外抗菌药物药敏试验的结果。方法采用微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测31株洋葱伯克霍尔德菌对复方磺胺甲噁唑、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素、左氧氟沙星和美罗培南这6种抗菌药物的药敏性。以微量肉汤稀释法为参考方法,计算50%最低抑菌浓度(MIC 50)、敏感率和误差率,分析基本一致率和分类一致率。结果复方磺胺甲噁唑的MIC 50为1.00μg/mL,敏感率为100.0%,体外活性最好。头孢哌酮/舒巴坦的MIC 50为16.00μg/mL,敏感率只有61.3%,体外活性最差。以微量肉汤稀释法为参考方法,E-test法检测头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦和左氧氟沙星的基本一致率和分类一致率均<90.0%,且存在一定的误差率,其中左氧氟沙星的非常重大误差为6.5%,头孢哌酮/舒巴的重大误差为12.9%;纸片扩散法检测头孢他啶和头孢哌酮/舒巴坦的分类一致率<90.0%,且存在一定的误差率,其中米诺环素的非常重大误差为6.5%,头孢哌酮/舒巴坦的重大误差为12.9%;E-test法和纸片扩散法检测复方磺胺甲噁唑和美罗培南敏感率均>90.0%,分类一致率均>90.0%。结论微量肉汤稀释法、纸片扩散法和E-test法检测洋葱伯克霍尔德菌可能存在不同的误差,应合理选择药敏检测方法,以确保结果的准确性。

两种方法测抗菌药物敏感试验的比较

目的 比较 E- test法与常规纸片法两种抗菌药物敏感试验方法。方法 采用两种方法对我院 1998年 11月～ 1999年 4月临床分离到的 10 0株革兰阴性杆菌同时进行 8种抗菌药物的敏感试验 ,全部资料录入计算机进行统计分析。结果 按有序多分类资料处理 ,两法差异无显著性 ;E- test法与纸片法一致性达 89.8% ;以 E- test为标准 ,计算纸片法平均极大误差为 1.4 %、大误差为 0 .2 %、一般差异为 8.5 % ;同时对这 10 0株菌进行 β-内酰胺酶试验 ,并将药敏结果分成产酶组与非产酶组加以比较 ,发现两法对产酶组非敏感检出率的差异 (11.6 %∶7.95 % )明显高于非产酶组的差异 (7.3%∶ 6 .7% )。结论 E- test法是一种精确简便的方法 ,而常规方法应严格按操作规程操作并应加以完善。

念珠菌体外药敏试验方法的比较

目的 探讨酵母菌纸片扩散法的临床适用性。方法 分别采用E test法、法国梅里埃ATBFungs酵母菌药敏试验与K B纸片法 ,检测念珠菌的体外药物敏感率 ,比较其差异显著性。结果 K B纸片法和E test法同时监测伊曲康唑 (IT)、氟康唑 (FL)。 2种药物的符合率为 96 8%、10 0 % ,其敏感率比较 88% / 85 %、98 4 % / 98 4 % ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;K B纸片法和法国梅里埃ATBFungs酵母菌药敏试验法对制霉菌素 (NYS)、酮康唑 (KET)、益康唑 (ECO)和咪康唑 (MIC)这 4种药物药敏结果的符合率分别为 10 0 %、10 0 %、91 2 %和 93 6 % ,敏感率比较 10 0 % /10 0 %、83 2 % / 83 2 %、70 % / 6 2 %和 6 8% / 71% ,差异也无显著性 (P >0 0 5 )。结论 K

两种方法在筛选产金属β-内酰胺酶鲍曼不动杆菌中的应用价值

目的以E-test法、双纸片增效法筛选产金属β-内酰胺酶(MBL)鲍曼不动杆菌(Ab),为临床筛选产MBL菌株、探究Ab耐药机制提供依据。方法使用MicroScan Walkway-40全自动微生物分析仪及MicroScanNegative Combo Panel Type31复合板进行菌株鉴定和药敏试验,筛选出泛耐药Ab,再分别用双纸片增效法、E-test法检测产MBL菌株。结果从298株Ab中筛选出38株泛耐药菌,经双纸片增效法筛选出MBL阳性19株(50.0%);E-test法筛选出MBL阳性18株(47.4%),两种方法阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论双纸片增效法、E-test法操作简单,均可用于MBL表型的快速筛查;但由于E-test法成本昂贵,不适宜在临床实验室推广;双纸片增效法成本低廉,适合在广大临床实验室特别是基层医院实验室推广。

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对多黏菌素B体外敏感性检测方法的差异性研究

目的了解不同检测方法在耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)对多黏菌素B体外药敏检测中的差异,为临床治疗和实验室检测提供依据。方法选择2018—2020年宁波地区临床分离的CRKP 147株,分别采用肉汤稀释法、E-test纸片法、仪器法(N335药敏卡)和纸片法检测其体外对多黏菌素B的敏感性,分析4种药敏检测方法所存在的差异。结果微量肉汤稀释法、E-test法和仪器检测CRCP对多黏菌素B MIC_(50)分别为1、1和0.5μg/mL,MIC_(90)分别为1、1和0.5,累积敏感率分别为97.3%、99.3%和98%,具有较高一致性和敏感性;仪器法检测CRKP对多黏菌素B的平均MIC值为(0.82±0.16)μg/mL,明显低于标准方法的(1.39±0.27)μg/mL,差异有统计学意义(P<0.01);E-test法和仪器法的基本一致率(EA)为92.5%和94.6%,标准符合(CA)分别为97.3%和98.6%,严重错误(VME)分别为2.7%和1.4%;重大错误(ME)和小错误(mE)均为0;纸片法KB值与肉汤稀释法MIC值之间方差分析P>0.05,故提示KB值与MIC值不具有线性关系。结论4种方法检测CRKP对多黏菌素B体外具有较高敏感性;仪器法和E-test法对于多黏菌素B的敏感性检测与微量肉汤稀释法高度一致,但其中仪器法N335药敏卡检测MIC有所降低,建议标准方法复核。

临床相关毛孢子菌的鉴定及体外药物敏感性研究

目的探讨临床相关毛孢子菌的鉴定方法及对常见抗真菌药物的体外敏感性。方法对48株临床分离的毛孢子菌分别通过形态学、API20C AUX、Vitek 2 Compact及核糖体rDNA ITS序列分析等方法鉴定到种;采用浓度梯度法(E-test)测定氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、两性霉素B及卡泊芬净对48株毛孢子菌的最低抑菌浓度。结果形态学和API20C AUX、Vitek 2 Compact不能准确区分不同种的毛孢子菌,以核糖体rDNA ITS序列分析将48株毛孢子菌鉴定为8个种:阿萨希毛孢子菌,星型毛孢子菌,皮瘤毛孢子菌,真皮毛孢子菌,皮肤毛孢子菌,赖巴克毛孢子菌,T.domesticum,T.jirovecii。体外药敏结果显示:卡泊芬净对毛孢子菌无体外活性,MIC>32μg/mL;氟康唑和两性霉素B对毛孢子菌活性差,体外活性最好的药物是伏立康唑和伊曲康唑。结论常规方法不易将毛孢子菌准确鉴定到种的水平,ITS序列分析准确快速,可以辅助临床区分难鉴定毛孢子菌。毛孢子菌药敏谱不同于临床常见其他酵母菌,氟康唑和两性霉素B对其活性差,伏立康唑具有良好的体外抗菌活性。

院内感染酵母样真菌的耐药性监测

目的：体外测定院内感染酵母样真菌对常用抗真菌药物的ＭＩＣ值，并对其耐药性进行分析。方法：利用Ｅ－Ｔｅｓｔ法测定来自于院内感染病人的３９０株酵母样真菌的ＭＩＣ值。结果：３９０株酵母样真菌对抗生素的耐药率分别是：二性霉素Ｂ为４．９％，５－氟胞嘧啶为６．６％，酮康唑为３４．４％，氟康唑为４４．１％，依康唑为４１．０％。在分离菌株中，重症病房（ＩＣＵ）占据比率较大（３３．１％），说明重症病房患者为高危易感人群，并且感染白色念球菌最多，其次为热带念珠菌。结论：酵母样真菌只对二性霉素Ｂ、５－氟胞嘧啶敏感，但是对酮康唑、氟康唑、依康唑３种抗真菌药物的耐药率普遍较高，其主要原因可能与其毒性较低，广泛应用于临床有关。

苯唑西林和万古霉素对金葡菌的抑菌圈直径和最低抑菌浓度的关系

目的分析苯唑西林和万古霉素对金黄色葡萄球菌的纸片扩散法抑菌圈直径和E-test法最低抑菌浓度间的关系。方法用纸片扩散法检测苯唑西林和万古霉素对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径,用E-test法检测最低抑菌浓度(M IC)。结果纸片扩散法和E-test法检测金黄色葡萄球菌对苯唑西林的敏感性,敏感率分别为85.0%和86.5%,中介率分别为2.3%和3.0%,耐药率分别是12.7%和10.5%,个别经K irby-Bauer法判定的中介株或耐药株经E-test法M IC证实为敏感或中介株;所有的菌株都对万古霉素的敏感,其中抑菌圈直径≥15 mm的菌株占91.7%。结论用K irby-Bauer法和E-test法检测金黄色葡萄球菌对万古霉素和苯唑西林的敏感性,其药敏结果基本一致,但纸片扩散法结果处折点值附近或万古霉素对菌株的抑菌圈低于超出敏感值下限时,应测量相应抗生素的最低抑菌浓度。

肺炎链球菌感染的耐药性探讨

目的 :了解临床分离肺炎链球菌对青霉素等抗生素的耐药性。方法 :常规方法鉴定肺炎链球菌 ,纸片扩散法测试肺炎链球菌对 9种抗生素敏感性。当苯唑西林抑菌圈≤ 19mm时以E -test浓度梯度法测定其对青霉素敏感性。自血液分离的菌株均以E -test法测定青霉素及万古霉素的MIC值。结果 :从呼吸道、血液及眼分泌物共检出 4 2株肺炎链球菌。苯唑西林筛纸片筛选耐药率达 35 .7% ,进一步经青霉素E -test检测 ,耐青霉素肺炎链球菌 (PRP)检出率实际为 19.0 %。PRP株耐药率及多重耐药性明显高于非PRP株。结论 :苯唑西林纸片测试肺炎链球菌敏感性有一定重要误差 (假耐药率 ) ;PRP检出率虽比邻国报道低 。