ITGB2促进胶质瘤细胞增殖并受E2F2调控

目的探讨整合素亚单位β2(ITGB2)在胶质瘤中的表达、功能及其调控机制。方法收集2018年6月至2019年6月手术切除的25例胶质瘤组织样本以及其邻近的非肿瘤脑组织样本,采用实时定量PCR检测ITGB2 mRNA的表达。体外培养正常人小胶质细胞系(HMC3)和胶质瘤细胞系(A172、T98G、U138-MG),转染E2F2、ITGB2小干扰RNA调控细胞基因表达,CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖,利用流式细胞术检测细胞周期分布,双荧光素酶报告基因实验验证E2F2与ITGB2启动子区域的结合关系,利用免疫印迹法检测E2F2对ITGB2蛋白表达的影响。结果与瘤周非肿瘤脑组织相比,胶质瘤组织ITGB2 mRNA表达明显上调。敲低ITGB2表达抑制体外培养胶质瘤细胞的增殖,并诱导细胞发生周期阻滞。E2F2结合于ITGB2启动子区域,过表达E2F2促进ITGB2蛋白表达,敲低E2F2抑制ITGB2蛋白表达。过表达E2F2逆转敲低ITGB2对胶质瘤细胞生长的抑制作用。结论ITGB2在胶质瘤细胞中高表达,且促进胶质瘤细胞增殖,其高表达受E2F2调控。

FY-3E掩星反演电离层foF2、hmF2和TEC参数精度评估

在分析FY-3E提供的每日掩星数据数量及其全球分布特征基础上,利用电离层垂测仪数据获取的F2层临界频率值(foF2)和F2层峰值高度(hmF2)、高精度全球电离层格网(GIM)及国际参考电离层模型(IRI2016)提供的总电子含量(TEC)对FY-3E掩星反演的foF2、hmF2和TEC精度进行评估。结果表明,电离层垂测仪和FY-3E反演的foF2和hmF2数据的相关系数分别为0.86和0.75,RMSE分别为0.99 MHz和19.26 km。以GIM数据获取的TEC为参考,FY-3E GPS和北斗(BDS)数据反演的TEC精度大致相当。FY-3E TEC精度与太阳活动呈负相关;FY-3E TEC与GIM TEC的相关系数为0.90,RMSE为5.23 TECu。FY-3E TEC与同高度范围的IRI2016 TEC的相关系数为0.88,RMSE为3.70 TECu。

miR-365通过靶向E2F2抑制胃癌细胞增生和肿瘤形成

目的研究胃癌相关miR-365调控胃癌细胞增生和肿瘤发生的功能,并通过验证下游靶分子E2F2研究miR-365的作用机制。方法采用Northern blotting法检测miR-365在小鼠各组织器官中的表达谱;real-time PCR检测miR-365在人胃癌组织中的表达变化;细胞实验和裸鼠成瘤实验研究miR-365过表达对胃癌细胞增生的抑制作用;生物信息学分析miR-365下游靶分子E2F2;构建E2F2 3’UTR野生型和突变型荧光素酶报告载体,并利用双荧光素酶活性分析检测miR-365对E2F2基因表达的调控和结合位点;Western blotting法检测miR-365对E2F2蛋白表达的调控作用。结果 miR-365在包括胃在内的多种消化道组织中表达;miR-365在人胃癌组织中表达显著下调;miR-365过表达显著抑制多种胃癌细胞的增生和裸鼠皮下的成瘤能力;E2F2是miR-365的靶分子,miR-365通过E2F2 3’UTR上的结合位点抑制E2F2的蛋白表达。结论 miR-365在人胃癌组织和小鼠胃癌模型中表达下调,并通过下游靶分子E2F2抑制胃癌细胞增生和肿瘤形成。

MicroRNA-218下调肝细胞癌中的E2F2基因表达抑制细胞增殖的研究

目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印迹分析、细胞增殖和集落形成试验、细胞周期分析和相应的统计学处理。结果 miR-218表达水平在癌细胞中下调。MTT生长曲线表明,当miR-218过度表达时(Huh7中的miR-218 P=0.001;在MHCC-97中的miR-218 P=0.013)细胞增殖能力明显降低。双荧光素酶实验证实,转染了miRNA-218模拟物的细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.01),荧光酶报告基因含有E2F2野生型的第3′非翻译区。这些结果表明E2F2是miR-218的直接作用对象。与阴性对照组相比,转染了miR-218模拟物的Huh7和MHCC-97细胞株中的E2F2的相对mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论 miR-218通过直接作用于E2F2基因的第3′非翻译区调节E2F2的表达,从而抑制HCC细胞增殖。

铍针对皮神经卡压大鼠5-HT,PGE1及PGF2α的影响

目的探讨铍针对皮神经卡压大鼠5-HT、PGE1、PGF2α的影响。方法 Wistar大鼠60只,随机分成3组,A组:隐神经不做任何处理;B组:以内径0.3 mm的硅胶管卡压隐神经;C组:以内径0.5 mm的硅胶管卡压隐神经。造模成功1个月后,每组取10只测定机体自身所分泌的5-HT、PGE1、PGF2α的浓度,对每组余下10只:A组不做治疗,对B、C组进行铍针治疗,治疗后测定机体自身所分泌的致痛因子5-HT、PGE1、PGF2α的浓度。结果造模1个月后B、C组致痛因子5-HT、PGE1、PGF2α的浓度明显高于A组,差异有统计学意义,经铍针治疗后B、C组致痛因子5-HT、PGE1、PGF2α的浓度同A组比较差异无统计学意义。结论铍针治疗皮神经卡压性疼痛疗效在临床上已得到验证,通过实验证明其通过抑制机体释放降低痛阈的物质达到此疗效。

核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测33例卵巢浆液性囊腺癌、11例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、13例卵巢浆液性囊腺瘤以及12例正常卵巢组织中E2F2蛋白的表达。结果:E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌、交界性浆液性囊腺瘤、浆液性囊腺瘤以及正常卵巢组织中的阳性表达率分别为72.73%(24/33)、54.55%(6/11)、15.38(2/13)%和8.3%(1/11),E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中的阳性表达率明显高于在浆液性囊腺瘤、正常卵巢组织中的阳性表达率(P均<0.05),卵巢浆液性囊腺癌组的阳性表达率值虽然高于交界性浆液性囊腺瘤组,但是两组之间差异无统计学意义(P>0.05),浆液性囊腺瘤的阳性表达率接近正常卵巢组的2倍,但是两组之间的阳性表达率差异也无统计学意义(P>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的阳性表达率随手术病理分期的增加而增加(P<0.05),但与病理分级以及有无淋巴结转移无关(P均>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的表达水平随手术病理分期的增加、病理分级降低而增加(P均<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中核转录因子E2F2呈现明显的高表达,且其表达水平与手术分期、病理分级相关,提示E2F2在卵巢癌的发生发展中起到促进作用。

E2F2过表达使内耳感觉细胞重新进入细胞周期

目的将调控细胞周期和增殖的E2F2基因导入成年哺乳动物耳蜗中,使其过表达,从而使耳蜗内的终末静止细胞重新进入细胞周期,向可分裂细胞转变,达到实现增加毛细胞数量的目的。方法将人来源的E2F2基因构建到腺病毒载体上,通过圆窗导入耳蜗;全耳蜗铺片、耳蜗切片观察E2F2过表达后耳蜗细胞的形态特点,用BrdU标记及ki67免疫组化方法检测其增殖情况。结果腺病毒携带的E2F2基因通过圆窗导入耳蜗后,能够在耳蜗毛细胞和支持细胞上表达。特别是在螺旋神经节细胞表达更强。转染E2F2基因后,耳蜗内的细胞BrdU标记呈阳性结果,且有ki67表达。结论过表达E2F2有可能使处于终末期的耳蜗细胞重新进入细胞周期,此方法为毛细胞再生研究提供了新的思路。

人E2F2基因重组腺病毒的构建及在293细胞中的表达

目的构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因(pEGFP)的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础。方法根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EGFP载体片段连接,构建穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2,并将其与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组产生重组腺病毒。对重组腺病毒进行扩增、纯化及滴度测定,用聚合酶链反应和测序方法验证穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2穿梭质粒的构建;通过荧光显微镜和Westernblot(蛋白质印迹)方法,分别检测质粒pDC315-GFP-E2F2和重组腺病毒表达E2F2蛋白情况。结果经聚合酶链反应鉴定和测序分析,证实穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2与设计一致;经荧光显微镜检测,分别由穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2、重组腺病毒转染的HEK293细胞均可观察到GFP表达;经Western Blot检测出在72kDa～95kDa处有条特征带,其大小和E2F2-GFP融合蛋白(～76kDa)相吻合;滴度测定为1×1011PFU/ml(PFU,plaque forming unit,空斑形成单位)。结论成功构建了人E2F2基因重组腺病毒载体,并能在HEK293细胞中表达。

温针灸联合四逆汤加味治疗寒凝血瘀型原发性痛经的疗效及对患者中医证候、血清PGE2和PGF2a水平的影响

目的观察温针灸联合四逆汤加味治疗寒凝血瘀型原发性痛经的疗效,并探讨其对患者中医证候、血清前列腺素E2(PGE2)和前列腺素F2a(PGF2a)水平的影响。方法选择2017年5月至2020年7月北京中医药大学孙思邈医院收治的100例寒凝血瘀型原发性痛经患者为研究对象,采用随机数表法分为观察组和对照组,每组50例。对照组给予布洛芬治疗,观察组给予温针灸联合四逆汤加味治疗。治疗2个月经周期后比较两组患者的治疗效果,治疗前后中医证候积分和血清PGE2和PGF2a水平、视觉模拟疼痛量表(VAS)评分以及不良反应发生情况。结果观察组患者的治疗总有效率为94.0%,明显高于对照组的78.0%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者的小腹冷痛、肛门坠胀、肢体畏寒、腰骶酸痛等积分均降低,且观察组各项积分[(1.03±0.16)分、(1.59±0.32)分、(1.22±0.36)分、(1.21±0.19)分]明显低于对照组[(1.58±0.21)分、(1.98±0.33)分、(1.72±0.28)分、(1.52±0.27)分],差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后两组患者的PGE2升高,且观察组的PGE2为(29.67±3.87)g/mL,明显高于对照组的(25.87±3.19)g/mL,而PGF2a及VAS评分降低,且观察组患者的PGF2a及VAS评分分别为(28.34±3.11)g/mL、(2.11±0.51)分,明显低于对照组的(34.76±2.98)g/mL、(2.99±0.47)分,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的不良反应发生率为4.0%,明显低于对照组16.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温针灸联合四逆汤加味治疗寒凝血瘀型原发性痛经疗效显著,其可有效降低患者的中医证候积分,调节血清PGE2和PGF2a水平,缓解疼痛,安全性高。

柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2 SO7基因ORF的克隆与表达

用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2[F1(JL×HB)×SD]的总RNA中扩增了651 bp的SO7基因ORF。通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pMD18-T中,转化至受体菌DH5α中,经PCR及酶切鉴定确定阳性克隆pMD18-T-SO7,然后进行序列测定及分析确定成功克隆SO7基因ORF。经DNAStar软件分析核苷酸和氨基酸序列,结果显示扩增出了完整的SO7开放阅读框架,含651个核苷酸,富含AGC重复序列,编码216个氨基酸。与国外株SO7比较,核苷酸序列的同源性为97.7%,有15个核苷酸发生突变,其中9个为有义突变,氨基酸序列的同源性为94.9%。将获得的重组阳性克隆质粒pMD18-T-SO7与融合型表达载体pGEX-6p-1均以BamH I和EcoR I双酶切后。进行连接转化与克隆鉴定。将阳性克隆pGEX-6p-SO7转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约43.8 Ku融合蛋白带。Western blot分析发现,该蛋白具有E-tenella抗原性,从而为进一步研制E.tenella杂交株F2基因工程疫苗奠定了基础。

人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响

目的探究人参皂苷Rg3通过调控E2F1对人胃癌SGC-7901细胞生物行为学的影响。方法MTT测定不同浓度人参皂苷Rg3(0、80、160、320μmol·L^(-1))对细胞增殖影响;流式细胞术测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞凋亡的影响;划痕愈合实验和Transwell实验测定不同浓度人参皂苷Rg3对细胞迁移及侵袭的影响;Western blot测定不同浓度人参皂苷Rg3对E2F1、MMP-2、MMP-9、BCL-2、Bax表达的影响。结果80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞存活率与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞凋亡率与空白对照组比较明显增加,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞迁移数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞侵袭数目与空白对照组比较明显降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组E2F1 mRNA与E2F1蛋白表达量相较空白对照组明显减少且,呈浓度依赖性(P<0.05)。80、160、320μmol·L^(-1)人参皂苷Rg3组细胞中MMP-2、MMP-9、BCL-2蛋白表达量与空白对照组比较明显降低,BCL-2与空白对照组比较明显升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论人参皂苷Rg3能降低胃癌SGC-7901细胞增殖能力,抑制细胞迁移及侵袭能力,同时还促进SGC-7901细胞凋亡,且具有浓度依赖性,其作用机制可能通过E2F1因子下调MMP-2、MMP-9、BCL-2表达,上调Bax表达有关。

E2F2在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义

目的观察E2F2在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达水平,并分析其与HCC患者的性别、年龄、血清AFP浓度、病理学分级、TNM分期及预后的关系。方法下载并处理癌症基因组图谱(TCGA)中有关HCC的基因组学数据和所研究个体的临床资料,利用SPSS统计软件分析E2F2在HCC组织和癌旁组织中的表达水平,探讨E2F2表达水平与HCC患者性别、年龄、血清AFP水平、病理学分级、TNM分期等临床资料的关系以及对HCC患者预后情况的影响。结果E2F2在HCC组织中的表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);血清AFP浓度高的患者E2F2表达水平高于血清AFP水平低的患者,差异有统计学意义(P<0.05);病理学分级中Ⅲ~Ⅳ级HCC患者E2F2表达水平高于Ⅰ~Ⅱ级HCC患者,差异有统计学意义(P<0.05)。E2F2高表达组患者整体生存率低于E2F2低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论E2F2参与肝细胞肝癌的进展过程,是早期诊断肝细胞肝癌的肿瘤分子标志物及预后判断因子。

miR-155靶向调控SP1、E2F2mRNA转录水平的功能验证

目的观察微小RNA155(miR-155)对端粒酶逆转录酶(h TERT)调控相关蛋白特异性蛋白1(SP1)及转录因子E2F2重组质粒表达的影响,为进一步研究miR-155调控肿瘤细胞h TERT表达的机制提供实验基础。方法采用生物信息学预测软件Target Scan和Miranda预测SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR是否是人miR-155的作用靶点。针对SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR设计互补的两条寡核苷酸,包括目标序列(即SP1、E2F2野生型序列)及突变序列(SP1-mu、E2F2-mu),构建SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR报告基因载体p MIR-SP1、p MIR-E2F2、p MIR-SP1-mu和p MIRE2F2-mu。培养HEK-293细胞,采用脂质体法将SP1和E2F2的野生型和突变型p MIR-Luc质粒共转染HEK-293细胞24 h。将细胞分为SP1空白对照组、SP1目标序列组、SP1突变序列组、E2F2空白对照组、E2F2目标序列组、E2F2突变序列组,均加入0.2μg重组质粒、0.01μg对照质粒和0.375μL寡核苷酸,培养24 h。采用双荧光素酶报告基因系统检测双荧光素酶活性,以萤火虫荧光素酶活性值(F)/海肾荧光素酶活性值(R)比值评价miR-155与SP1及E2F2 mRNA 3'-UTR结合效果。结果在线预测结果示,SP1 mRNA 3'-UTR和E2F2 mRNA 3'-UTR均有与miR-155完全互补配对的序列,确定二者均为miR-155的靶基因。经鉴定,SP1和E2F2报告基因重组质粒构建成功。SP1目标序列组F/R低于SP1空白对照组及SP1突变序列组(P均<0.05),E2F2目标序列组F/R低于E2F2空白对照组及E2F2突变序列组(P均<0.05)。结论成功构建了SP1和E2F2报告基因重组质粒,证实miR-155能够靶向结合SP1和E2F2 mRNA 3'-UTR,在转录后水平抑制SP1和E2F2的表达。

E2F2和SDC4在急性胰腺炎患者中的表达及临床意义

目的探讨E2F转录因子2(E2F2)和多配体蛋白聚糖-4(SDC4)对急性胰腺炎患者病情评估及预后诊断的价值。方法将2018年4月至2020年4月西安市中心医院收治的45例轻症急性胰腺炎患者作为轻症组,56例重症急性胰腺炎患者为重症组;将同期20名来我院进行健康体检者作为对照组。比较各组研究对象的一般资料及临床特征;比较三组研究对象的E2F2、SDC4 m RNA和蛋白表达水平;分析E2F2、SDC4表达水平与急性胰腺炎患者JPN评分的相关性;分析血清SDC4、E2F2水平和JPN评分对急性胰腺炎的诊断价值。结果轻症组和重症组的腹痛、恶心呕吐发生率无明显差异(P>0.05);重症组的腹胀、全身性并发症发生率高于轻症组(P<0.05);轻症组和重症组的血清淀粉酶、脂肪酶、降钙素原、乳酸脱氢酶(LDH)以及C反应蛋白(CRP)水平高于对照组(P<0.01);重症组的血清淀粉酶、脂肪酶、降钙素原、LDH、CRP水平及JPN评分高于轻症组(P<0.01)。轻症组和重症组的E2F2、SDC4 m RNA和蛋白表达水平显著高于对照组,且重症组高于轻症组(P<0.05)。E2F2和SDC4表达水平与急性胰腺炎患者JPN评分呈正相关(P<0.001);E2F2表达水平与SDC4表达水平呈正相关(P<0.001)。血清E2F2和SDC4水平对急性胰腺炎的诊断价值较高,与JPN评分相似。结论E2F2和SDC4可作为评估急性胰腺炎患者发病及预后的潜在指标。

Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭

目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。

SBF2-AS1在食管鳞癌中的表达变化及其对肿瘤细胞KYSE410增殖、放疗敏感性的影响

目的观察长链非编码RNA SBF2-AS1在食管鳞癌中的表达变化及其对食管鳞癌细胞增殖、放疗敏感性的影响,并探索可能的机制。方法采用qRT-PCR法检测食管鳞癌组织和食管鳞癌细胞KYSE410中的SBF2-AS1,分析食管鳞癌组织中SBF2-AS1表达与肿瘤临床病理参数的关系。培养KYSE410细胞并分为siRNA-SBF2-AS1组、NC组,分别转染siRNA-SBF2-AS1、NC,分别于转染24、48、72、96 h后检测细胞增殖能力。对两组细胞给予X线照射,测算不同照射条件下的细胞增殖率和凋亡率;绘制单击多靶模型拟合细胞存活曲线得出D0(终斜率的倒数)、Dq(准阈剂量)、SF2(离体肿瘤培养细胞经2 Gy照射后的SF),计算放射增敏比;检测细胞中的E2F转录因子1(E2F1)蛋白。结果食管鳞癌组织和细胞中SBF2-AS1表达高于癌旁正常组织和食管正常上皮细胞(P均<0.05)。肿瘤直径>5 cm者、T3~T4期者SBF2-AS1相对表达量分别高于直径≤5 cm者、T1~T2期者(P均<0.05)。转染24、48、72、96 h后siRNASBF2-AS1组细胞增殖能力低于NC组(P均<0.05)。不同X线照射条件的siRNA-SBF2-AS1组细胞增殖率、E2F1蛋白表达均低于NC组,细胞凋亡率高于NC组;照射后细胞增殖率和E2F1蛋白表达低于未照射细胞,细胞凋亡率高于未照射细胞(P均<0.05)。siRNA-SBF2-AS1组细胞D0、Dq、SF2低于NC组(P均<0.05),放射增敏比为2.00±0.10。结论SBF2-AS1在食管癌组织和细胞中高表达;下调SBF2-AS1表达可抑制食管鳞癌细胞增殖,提高放疗敏感性,其机制可能与调控E2F1蛋白表达有关。

中药熏蒸疗法对气滞血瘀型原发性痛经患者PGE2、PGF2α、β-EP的影响

目的 研究中药熏蒸疗法对气滞血瘀型原发性痛经患者血清前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)、β-内啡肽(β-EP)的影响.方法 选取苏州大学医院妇科2018年1月至2019年6月收治的68例气滞血瘀型原发性痛经患者为研究对象,按照数字表法随机分为参照组和观察组,各34例.参照组予以布洛芬口服进行治疗,观察组在参照组的基础上加用中药熏蒸疗法进行治疗,治疗周期为2个月.比较2组治疗后临床疗效,比较2组治疗前后的中医症状积分及血清PGE2、PGF2α、β-EP水平变化,并观察2组治疗过程中不良反应发生情况.结果 观察组总有效率为91.17%,显著高于参照组的(67.65%,P<0.05);与治疗前比,治疗后2组食欲不振、头晕头痛、乳房胀痛、腰骶酸痛及四肢发冷积分均降低,且观察组显著低于参照组(P<0.05);与治疗前比,治疗后2组血清PGE2、β-EP水平均升高,且观察组显著高于参照组,血清PGF2α水平均降低,且观察组显著低于参照组(P<0.05);观察组不良反应发生率为2.94%,显著低于参照组的(17.64%,P<0.05).结论 中药熏蒸疗法可有效调节气滞血瘀型原发性痛经患者血清PGE2、PGF2α、β-EP水平,缓解临床症状,疗效显著,且不良反应少,安全可靠.

疏肝养血通络方联合米非司酮对子宫内膜异位症痛经患者疼痛程度及血清 PGE2、PGF2α、NGF水平的影响

目的观察疏肝养血通络方联合米非司酮对子宫内膜异位症痛经患者疼痛程度及血清前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F 2α(PGF 2α)、神经生长因子(NGF)水平的影响。方法将104例子宫内膜异位症痛经患者随机分为2组,对照组52例给予米非司酮口服治疗,观察组52例在对照组基础上给予疏肝养血通络方治疗,连续治疗3个月经周期,比较2组治疗后单项症状(经期或行经前后小腹胀痛、乳房胀痛、胸闷不适、经行不畅)、疼痛状况[COX痛经症状评分量表(CMSS)评分、视觉模拟评分(VAS)]及实验室检查指标(PGE2、PGF 2α、NGF)改善情况,统计2组临床总有效率及治疗期间不良反应发生率。结果2组治疗后经期或行经前后小腹胀痛、乳房胀痛、胸闷不适、经行不畅积分和COX评分、VAS评分均较治疗前明显降低(P均<0.05),且观察组以上症状积分均明显低于对照组(P均<0.05);2组治疗后血清PGE2、PGF 2α、NGF水平均较治疗前明显降低(P均<0.05),且观察组血清PGE2、PGF 2α、NGF水平均明显低于对照组(P均<0.05);观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05);观察组不良反应发生率为7.7%(4/52),对照组不良反应发生率为11.5%(6/52),2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝养血通络方联合米非司酮能够抑制子宫内膜异位症痛经患者血清PGE2、PGF 2α、NGF表达,改善患者痛经等症状,安全性高,疗效确切。

miR-125a靶向E2F2抑制口腔鳞状细胞癌干细胞干性的初步研究

目的:研究miR-125a在口腔鳞状细胞癌(FOSCC)组织中的表达及与OSCC患者临床病例特征的关系,并探讨miR-125a对E2F2的靶向调控作用和对OSCC干细胞(CSCs)干性的影响。方法:qRT-PCR检测miR-125a在40例OSCC组织和20例正常口腔黏膜组织中的表达水平,并分析OSCC组织中miR-125a的表达与临床病例特征的关系。磁珠分选OSCC细胞系Cal-27中的CSCs。Western blot检测OCT4、Nanog、SOX2干性标志蛋白及miR-125a在CSCs中的表达;脂质体分别转染miR-125a mimic和对照NC 48 h后,MTS检测各组CSCs增殖能力,软琼脂克隆检测各组CSCs肿瘤球形成能力,Transwell实验检测各组CSCs转移能力。Targetscan7.1软件及双荧光素酶报告基因试验,研究miR-125a对E2F2基因的靶向作用,qRT-PCR检测miR-125a对CSCs中E2F2 mRNA表达的影响。结果:qRT-PCR结果显示miR-125a在OSCC组织中的表达显著低于正常口腔黏膜组织,其低表达与OSCC肿瘤直径大、TNM分期晚期及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。OCT4、Nanog、SOX2干细胞标志物在CSCs中表达显著上调;miR-125a在CSCs中的表达均显著低于OSCC细胞Cal-27和人口腔黏膜角化细胞HOK(P<0.05);转染miR-125a mimic后,CSCs细胞增殖、肿瘤球形成及转移能力均下降(P<0.05)。TargetScan7.1软件和双荧光素酶报告基因试验证实E2F2为miR-125a的靶基因,miR-125a mimic组E2F2 mRNA表达降低(P<0.05)。结论:miR-125a在OSCC组织和细胞系中均低表达,且低表达与肿瘤直径大、TNM分期晚期及淋巴结转移相关,miR-125a可能通过负调控E2F2抑制CSCs的干性。

E2F2在类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞中的表达研究

目的研究E2F2在类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞(RA FLs)中的表达,分析其表达与类风湿关节炎病理特征的关系,以及调控E2F2表达的机制。方法采用瞬时转染的方法将E2F2 siRNA转染入RA FLs后,应用RT-PCR法筛选干扰效率最高的siRNA,并应用MTS法检测干扰E2F2表达后对RA FLs增殖的影响,采用ELISA法检测E2F2下游基因表达的变化。采用RT-PCR法检测分别使用TNF-α和PDTC刺激RA FLs以及共同使用TNF-α和PDTC刺激RA FLs后E2F2的表达。通过染色质免疫沉淀法(Ch IP)检测调控E2F2表达的方式。结果在si E2F2后,与对照组相比E2F2在mRNA水平表达显著降低(P<0.01),细胞增殖能力减弱(P<0.05)。在RA FLs中TNF-α通过NF-κB信号通路调控E2F2表达。结论在RA FLs中E2F2存在高表达现象,并且E2F2的高表达参与RA的病变过程,TNF-α通过NF-κB信号通路调控E2F2表达,可做为治疗类风湿关节炎的新靶点。