老年乳腺癌患者癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白表达变化及与预后的关系

目的 探讨N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTHDF1)、E2F8转录因子8(E2F8)蛋白表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法 选取46例老年乳腺癌患者,术中取癌组织和癌旁组织,用免疫组化染色法检测组织中YTHDF1、E2F8蛋白表达。随访患者并记录随访期间肿瘤复发、转移及死亡时间。用Spearman秩相关分析乳腺癌组织YTHDF1与E2F8蛋白表达的相关性;Kaplan-Meier法分析YTHDF1、E2F8蛋白表达与患者无进展生存预后的关系;Cox回归分析老年乳腺癌患者无进展生存预后的影响因素。结果 乳腺癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05),二者蛋白表达呈正相关(r=0.706,P<0.05)。TNM分期Ⅱ期、肿瘤最大径>2 cm、合并淋巴结转移老年乳腺癌患者癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白阳性表达率高于TNM分期Ⅰ期、肿瘤最大径≤2 cm、无淋巴结转移的癌组织(P均<0.05)。32例患者发生肿瘤进展,YTHDF1、E2F8蛋白表达阳性患者5年无进展生存率低于其蛋白表达阴性患者(P均<0.05)。TNM分期Ⅱ期、合并淋巴结转移、YTHDF1蛋白阳性表达、E2F8蛋白阳性表达是老年乳腺癌患者无进展生存预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论 老年乳腺癌患者癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白高表达,且与老年乳腺癌患者肿瘤TNM分期、肿瘤最大径、淋巴结转移有关,是患者无进展生存预后的独立危险因素。

基于E81T8-Ni2填充盖面的L415M管线钢的焊接工艺评定

L415M管线钢环向焊接接头焊接工艺填充盖面焊丝采用E81T8-Ni2代替E71T8-Ni1,替代原则不符合GB/T 31032—2014《钢质管道焊接及验收》的覆盖原则,需要重新进行焊接工艺评定。基于施工单位焊接工艺需求,为了验证E81T8-Ni2能否用于L415M对接焊缝的填充盖面焊接,采用焊条电弧焊打底,自保护药芯焊丝半自动焊填充盖面组合焊接方法,根焊焊接材料为E6010,填充盖面为E81T8-Ni2,依据GB/T31032—2014进行焊接工艺评定。对评定试样进行外观检查、无损检测、拉伸试验、弯曲试验、刻槽锤断试验以及冲击试验。试验结果表明,L415M管线钢环向焊接接头各项指标合格,拉伸试样断在母材上,焊接接头满足高强匹配要求。焊接工艺评定试验研究成果可为长输管道用L415M管线钢焊接工艺以及焊材选择提供参考。

神经胶质瘤U251细胞中TRIM21和TRIM8之间相互作用研究

目的探讨TRIM21和TRIM8在神经胶质瘤U251细胞中的相互作用机制及其生物学效应。方法在U251细胞中分别过表达和敲低TRIM21或TRIM8,通过蛋白质印迹和RT-PCR法检测两者的蛋白和mRNA表达水平。利用免疫荧光实验分析TRIM21和TRIM8的亚细胞定位。通过免疫共沉淀实验验证TRIM21和TRIM8之间的相互作用。应用胞内泛素化实验检测TRIM21和TRIM8的泛素化修饰。蛋白酶体抑制剂MG-132用于抑制蛋白酶体活性。利用流式细胞术检测U251细胞凋亡。结果在U251细胞中,TRIM21负向调控TRIM8蛋白水平,反之,TRIM8也可以负向调控TRIM21蛋白水平,并且都能抑制细胞凋亡。机制研究显示,U251细胞中TRIM21和TRIM8之间存在相互结合,两者相互调控是通过催化泛素化介导的泛素-蛋白酶体依赖性降解途径实现的。结论U251细胞中TRIM21与TRIM8可以通过泛素化修饰促进泛素-蛋白酶体依赖性的蛋白质降解相互负向调控,提示体内细胞正常生长分化需要TRIM21-TRIM8之间蛋白质水平的相对稳态,也即可能存在E3泛素连接酶蛋白稳态,稳态失衡可能与肿瘤的发生发展密切相关。

腺苷诱导耗竭型CD8^(+)T细胞影响肾癌细胞迁移及凋亡

目的探索腺苷是否诱导耗竭型T细胞生成以及对肾透明细胞癌细胞迁移和凋亡的影响。方法流式细胞术检测肾透明细胞癌及癌旁组织中CD8^(+)T细胞及耗竭表型分子3(TIM-3)的表达。生物信息学分析肾透明细胞癌及癌旁组织中基因表达差异,寻找影响T细胞耗竭基因。利用shRNA技术构建稳定敲除该基因的肾透明细胞癌786-O细胞株,检测细胞的迁移、凋亡等生物学行为。制备不同肿瘤条件培养基,培养CD8^(+)T细胞,研究敲除基因后的肾透明细胞癌细胞对耗竭型T细胞的影响。结果肾透明细胞癌与癌旁组织相比高表达CD8^(+)T细胞及TIM-3。生物信息学分析发现腺苷合成限速酶NT5E(CD73)在肾透明细胞癌中的表达高于癌旁组织。检测临床标本发现肾透明细胞癌组织中腺苷及CD73的表达高于癌旁组织。与对照组比较,敲除NT5E组的786-O细胞迁移能力下降及凋亡增加。敲除NT5E的肿瘤条件培养基培养的CD8^(+)T细胞中程序性死亡蛋白1表达减少,抑制T细胞增殖能力下降。结论肾透明细胞癌组织存在耗竭型CD8^(+)T细胞、腺苷及CD73的高表达。敲除NT5E的肾透明细胞癌786-O细胞迁移能力下降、凋亡增加。敲除NT5E可减少腺苷合成,减少耗竭型T细胞的生成。

E2F8在人结直肠癌中的表达及其与患者预后的关系

目的探讨腺病毒E2启动子结合因子8(E2F8)在结直肠癌(CRC)中的表达及其对结直肠癌患者预后的影响。方法分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因组织表达(GTEx)数据库中E2F8在结直肠癌中的mRNA表达水平。通过实时荧光定量PCR方法(qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)方法分别检测E2F8在结直肠癌组织和细胞中的表达量。98例结直肠癌患者肿瘤及癌旁组织经免疫组化染色方法分析E2F8蛋白表达与患者临床特征和预后的关系,采用COX比例风险模型分析CRC预后的影响因素。结果TCGA数据库及临床样本中E2F8在肿瘤组织中的表达水平均高于正常组织。结直肠癌细胞系中E2F8表达水平除HCT116、HCT15以外均较正常结肠上皮细胞系高。高表达E2F8的患者总生存期、无疾病生存期、无转移生存期均短于低表达E2F8的患者(均P<0.01),高表达E2F8的结直肠癌组织Dukes分期较晚(P<0.05)。单因素COX回归模型分析发现,女性(HR=2.009,95%CI:1.139~3.544)、淋巴结侵犯(HR=1.780,95%CI:1.005~3.150)、Dukes C/D期(HR=2.538,95%CI:1.393~4.623)、TNM III/IV期(HR=2.894,95%CI:1.554~5.392)、E2F8高表达(HR=2.807,95%CI:1.540~5.118)与结直肠癌患者不良预后相关(均P<0.05)。多因素COX回归模型分析发现,E2F8高表达(HR=2.747,95%CI:1.447~5.216)和较晚的TNM分期(HR=5.543,95%CI:1.537~19.990)是结直肠肿瘤患者不良预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论E2F8在结直肠癌中较高表达,结直肠癌组织中高表达E2F8与结直肠癌患者Dukes分期晚和不良预后有关,E2F8高表达是结直肠肿瘤患者不良预后的独立危险因素,E2F8可作为结直肠癌患者疾病进展及预后的潜在标志物。

表达猴痘病毒表面蛋白A35R和E8L稳转细胞株的构建与应用

【目的】构建稳定表达猴痘病毒(Mpox virus,MPXV)表面蛋白A35R和E8L的稳转细胞株,用于定性或定量分析相应猴痘表面蛋白的抗体或互作分子与细胞表面A35R或E8L结合活性。【方法】运用基因重组技术,构建表达A35R或E8L的慢病毒表达载体,以HEK-293T作为宿主细胞,通过慢病毒转染技术形成稳定表达并定位在细胞表面A35R或E8L的稳转细胞株。采用Western Blot及细胞免疫荧光检测工程化细胞株中A35R或E8L的表达及蛋白定位情况,并运用流式细胞术验证稳转细胞与抗血清中多克隆抗体的结合能力。分别从表达A35R或E8L的稳转细胞中筛选出单克隆细胞株,并以单克隆稳转细胞作为工具定量分析商业化抗猴痘A35R或E8L单克隆抗体与细胞表面A35R或E8L的结合活性。【结果】成功构建稳定表达A35R或E8L并定位至细胞膜上的HEK-293T稳转细胞,经过单克隆化筛选,建立4株单克隆细胞株,其中2株稳定表达A35R(A35-2C10和A35-4E3)和2株稳定表达E8L(E8-6和E8-8)。筛选出的单克隆细胞在定量分析抗猴痘A35R或E8L的单克隆抗体结合活性方面显示出良好的拟合度。【结论】通过慢病毒转染技术构建的表达猴痘表面A35R或E8L的稳转细胞株可以作为通用研究工具,应用于抗A35与E8L中和抗体、核酸适配体或互作分子等相关分子与相应抗原结合活性的定性或定量分析。

铁路隧道下穿E8高速公路塌陷区施工方案分析

马来西亚东海岸铁路项目文冬2#隧道下穿E8高速公路,伴随软弱围岩、泥岩、浅埋等不良地质,且发生高速路面塌陷。依据地质钻孔、现场踏勘、已揭露围岩、外部干扰因素等,综合分析施工方案,确定经济合理、切实可行支护参数,保证工程有序推进。该项目线上为中国标准,线下采用马来西亚标准/英国标准。本文将依托文冬2#隧道下穿E8高速路面塌陷区、浅埋区,论证合理方案,保证隧道下穿施工的安全性、有效性,为类似工程实施提供宝贵经验与借鉴。

支气管哮喘患者血清免疫球蛋白E和支气管肺泡灌洗液中白介素8测定及意义

目的探讨免疫球蛋白E(IgE)和白介素8(IL-8)在支气管哮喘发病机制中的作用以及在诊疗中的意义。方法选择25例支气管哮喘急性发作患者为哮喘组,另选正常健康体检者16例为对照组。采集所有研究对象血清和支气管肺泡灌洗液(BALF),使用多抗体夹心酶联免疫吸附方法检测2组血清IgE和BALF中IL-8含量,比较2组血清IgE和BALF中IL-8含量,并进行相关性分析。结果哮喘组血清IgE水平和BALF中IL-8水平均较对照组明显增高(P<0.01);哮喘组血清IgE和BALF中IL-8水平之间呈显著正相关(r=0.73,P<0.01)。对照组血清IgE和BALF中IL-8水平之间无明显相关性(r=0.26,P>0.05)。结论IL-8和IgE可能参与了哮喘的发病过程,测定二者的水平,对临床诊断支气管哮喘有一定的应用价值。

血清IL-8、IgE、TNF-α和外周血EOS水平在儿童哮喘中的表达及意义

目的观察哮喘患儿血清白介素-8(IL-8)、免疫球蛋白E(IgE)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和外周血嗜酸性粒细胞(EOS)水平的变化,并探讨其临床意义。方法对2013年8月—2014年8月收治的52例儿童哮喘患者(哮喘组)的血清IL-8、IgE、TNF-α和外周血EOS水平进行检测,同时选择52例健康儿童(健康对照组)进行同期检测,比较哮喘组患儿治疗前、治疗3个月后及与健康对照组血清IL-8、IgE、TNF-α水平及外周血EOS计数,并分析不同病理阶段、不同病程血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS计数差异。结果哮喘组治疗前血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS计数均明显高于健康对照组,差异有统计学意义(t=3.027、2.896、2.273、2.196,P<0.05);哮喘组治疗后血清IL-8、IgE、TNF-α水平和外周血EOS计数均明显低于治疗前,差异有统计学意义(t=2.992、2.735、2.254、2.201,P<0.05);哮喘发作组的IL-8、IgE、TNF-α水平和EOS计数均高于哮喘缓解组(t=2.886、2.205、2.153、2.124,P均<0.05);哮喘持续发作组IL-8、IgE、TNF-α、EOS计数等指标均明显高于其他哮喘发作组和哮喘缓解组,且差异均有统计学意义(其他哮喘发作组:t=2.836、3.124、2.995、2.854;哮喘缓解组:t=3.735、4.002、3.834、3.656,P均<0.05);且其他哮喘发作组患儿的IL-8、IgE、TNF-α、EOS水平也均高于哮喘缓解组,差异具有统计学意义(t=2.267、2.894、2.241、2.207,P均<0.05);病程>1年组IL-8、IgE、TNF-α、EOS计数水平均明显高于病程≤1年组,且差异均有统计学意义(t=2.349、3.122、2.126、2.858,P<0.05)。结论血清IL-8、TNF-α、IgE和外周血EOS水平在支气管哮喘发病中起着重要作用。

AD患儿外周血白细胞介素-17、白细胞介素-8、血清IgE及EOS水平变化及其意义

目的探讨特应性皮炎(AD)患儿外周血白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-8(IL-8)、免疫球蛋白E(IgE)及嗜酸性粒细胞计数(EOS)的水平变化及其意义。方法选取120例AD患儿作为AD组,以同期30名健康儿童作为对照组,检测并比较两组外周血IL-17、IL-8、IgE及EOS的水平,依据皮损严重程度对AD患儿进行分层分析。结果 AD组患儿的外周血中IL-17、IL-8、IgE及EOS水平均显著高于对照组(P<0.05);AD组患儿的外周血中IL-17、IL-8、IgE、EOS水平及AD严重程度评分各亚组间比较,重度组>中度组>轻度组,且差异具有统计学意义(P<0.05);AD组患儿的外周血中IL-17、IL-8、IgE、EOS水平与AD严重程度评分均呈显著正相关(P<0.05)。结论 AD儿童外周血IL-17、IL-8、IgE及EOS水平均显著的增高,且与病情严重程度密切相关。

普洱茶E8组分的化学成分研究

采用HPLC制备色谱等分析了普洱茶乙酸乙酯提取物E8组分的化学成分,并通过LC/MS和NMR等对制备得到的化合物进行了结构鉴定。结果表明,从E8组分中分离鉴定出5个化合物,分别为3',4',5-三羟基-7-甲氧基黄酮、3',4',5,7-四羟基黄酮(木犀草素)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖甙、3',4',7-三羟基-5-甲氧基黄酮-7-O-β-D-葡萄糖甙和3',4',7-三羟基-5-甲氧基黄酮。

番茄果实特异性E8启动子的基因克隆与序列分析

目的获取番茄果实特异性E8启动子基因,为实现外源基因在转基因番茄中果实特异性表达做准备。方法培养中蔬5号(Zhongshu No.5)番茄幼苗, 采集叶片,用Omega公司的植物基因组提取试剂盒提取番茄基因组DNA;设计引物,从基因组中通过PCR扩增获得番茄果实特异性E81.1和E82.2启动子基因;克隆进pGEM-T载体,酶切鉴定;送上海基康公司测序;序列分析。结果从番茄基因组DNA中PCR扩增得到预期大小的启动子片段;构建重组pGEM-T-E81.1和pGEM-T-E82.2载体,经酶切证实具有与目标片段长度相符的插入片段;测序结果分析显示:番茄果实特异性E8启动子序列高度保守,所获得的Zhongshu No.5 E82.2启动子DNA序列与Deikman报道的Cherry种的E82.2启动子同源性为99%, 登陆GenBank, ID号为AF515784。结论成功获得Zhongshu No.5番茄果实特异性E81.1、E82.2启动子基因,为下一步转基因番茄口服疫苗的研制奠定了一定的工作基础。

8E160柴油机活塞组热负荷及机械负荷耦合分析

采用活塞、活塞环和气缸套耦合的方法对 8E16 0型柴油机的活塞、活塞环、气缸套进行了三维温度场分析。以此为基础 ,对活塞组进行机械负荷和热负荷的耦合分析 ,计算了活塞耦合应力场 ,以深入了解活塞的热负荷状态及综合应力分布情况 ,进而为完成降低热负荷、改善应力分布的改进设计和进一步强化奠定了理论基础。讨论了 8E16 0型柴油机活塞和活塞销的三维有限元分析过程 ,并将本次温度场分析所采用的活塞组—气缸套耦合模型与活塞单一模型作了比较 ,结论为前者加载负荷的试算量比后者大大减少 ,并且精度高。

维生素E对脑梗死患者尿液中8-异前列腺素F_(2α)含量的影响

目的探讨维生素E干预治疗对脑梗死患者尿液中8-异前列腺素F_(2α)(8-iso-PGF_(2α))含量的影响。方法选取14例脑梗死患者作为治疗组,给予维生素E(300mg/d)治疗;另选取14例年龄、性别、血压、血脂、病灶部位及脑梗死程度与治疗组无显著差异的脑梗死患者作为对照组,不给予维生素E治疗。收集所有患者发病24h内和发病14天时的尿样和血清,测定尿样中8-iso-PGF_(2α)及血清中维生素E浓度。结果治疗组患者14天时尿液中8-iso-PGF_(2α)的浓度均显著低于对照组(85.20±9.17 vs 91.36±4.24ng/ mmol creatinine,P<0.05);而血清中维生素E的浓度显著高于对照组(15.56±6.98 vs 10.91±4.36μmol/L,P<0.05)。静脉血中低密度脂蛋白(LDL)中的总胆固醇、LDL三酰甘油和LDL游离胆固醇在治疗组与对照组间无显著性差异(分别为5.08±0.61 vs 4.72±0.61mmol/L,0.88±0.06 vs 0.84±0.03 mmol/L,1.72±0.41 vs 1.75±0.92mmol/L,P>0.05)。结论维生素E干预治疗可以降低急性期脑梗死患者尿液中8-iso-PGF_(2α)含量,减轻其体内的氧化压力。

白头翁汤及其主要成分对LPS诱导内皮细胞分泌NO、E-selectin和IL-8的影响

拟探讨白头翁汤及其主要成分对细菌内毒素(LPS)导致的机体炎症等病理损伤的治疗作用。培养内皮细胞至单层融合状态,加入内毒素刺激,3h后加入高、中、低3种浓度的8种药物,继续培养21h后收集细胞上清液,用ELISA方法测定NO、E-selectin和IL-8的含量。结果显示,白头翁汤高剂量组、白头翁素高剂量组和小檗碱高剂量组的NO含量极显著低于LPS对照组(P<0.01),白头翁汤中剂量组、白头翁素中剂量组、小檗碱中剂量组和秦皮乙素高剂量组显著低于LPS对照组(P<0.05);白头翁汤高剂量组和药根碱高剂量组的E-selectin含量极显著低于LPS对照组(P<0.01),白头翁皂苷B4高剂量组、小檗碱高剂量组和药根碱中剂量组显著低于LPS对照组(P<0.05);秦皮乙素高剂量组的IL-8含量极显著低于LPS对照组(P<0.01),白头翁汤高剂量组、秦皮甲素高剂量组和中剂量组、秦皮乙素中剂量组显著低于LPS对照组(P<0.05)。结果提示白头翁汤及其主要成分具有明显的抗细菌内毒素作用,可在由NO、E-selectin和IL-8介导的机体炎症等病理损伤过程中发挥治疗作用。

前列腺素E_1对肝硬化患者IL-6,IL-8及ALT的影响

目的 研究前列腺素 E1 (PGE1 )对肝硬化患者血清IL- 6 ,IL- 8和血清总胆红素 (SB)及 AL T的影响 .方法 应用放射免疫法测定了 30例肝硬化患者应用 PGE1 前后血清IL - 6 ,IL - 8,SB和 AL T的变化 ,并与 30例应用常规保肝治疗的肝硬化患者对比 ,同时测定了 2 0名正常人的血清 IL- 6和 IL - 8含量 .结果 肝硬化组和正常对照组的 IL - 6含量分别为 (4 36± 10 6 ) ng· L- 1 和 (2 5 5± 83) ng· L- 1 (P <0 .0 1) ,IL- 8含量分别为 (4 2 9± 6 2 ) ng· L- 1和 (2 77± 71) ng· L- 1 (P<0 .0 1) .应用 PGE1 治疗后 ,IL - 6下降为 (345± 48) ng· L- 1(P<0 .0 1) ,IL- 8下降为 (32 5± 5 0 ) ng· L- 1 (P<0 .0 1) ,SB由(32± 9)μmol· L- 1 降为 (19± 7)μmol· L- 1 (P<0 .0 1) ,AL T由 (115± 5 1) U· L- 1降为 (75± 2 9) U· L- 1 (P<0 .0 1) ,对照治疗组的 IL- 6 ,IL- 8,SB及 AL T亦显著降低 (P<0 .0 5 ) .结论 PGE1 能显著降低肝硬化患者血中 IL - 6 ,IL - 8,SB及AL T含量 ,疗效优于常规治疗组 。

新城疫病毒F_(48)E_8株 HN基因在杆状病毒系统中表达

目的 采用新型杆状病毒表达系统(Bac to Bac系统)在昆虫细胞Sf-9中进行新城疫病毒F48 E8株HN基因表达。方法NDV F48 E8株 HN基因插入到转座载体 pFast Bac Ⅰ,构建重组转座载体 pFast HN,转化到感受态细胞 DH10后,将目的基因转座到穿梭载体Bacmid中,经筛选获得重组Bacmid HN转染到Sf-9昆虫细胞,并进行检测。结果 表达产物经SDS-PAGE、Westem blot检测获得蛋白特异带,相对分子质量约63000。结论NDVF48E8株HN基因能通过新型杆状病毒表达系统在昆虫细胞Sf-9中进行表达,表达量约为细胞总蛋白的10％。

哮喘患儿血清TNF-α、IL-8、IgE的动态变化及其临床意义

目的探讨哮喘儿童血清TNF-α、IL-8、IgE的动态变化及其临床意义。方法哮喘患者急性发作组88例及缓解期组78例、正常对照组70例,分别抽取其静脉血测定血清TNF-α、IL-8、IgE,IL-8、IgE应用双抗体夹心ELISA法检测,TNF-α应用ELISA法检测。结果哮喘急性发作组及缓解期组血清IgE、IL-8、TNF-α水平均明显高于对照组(P<0.01);哮喘急性发作期组血清IgE、IL-8、TNF-α水平也均明显高于缓解期组(P<0.01)。结论IL-8可能参与了哮喘急性发作患儿的发病过程,可能发挥正反馈调节作用,促进哮喘患儿IgE分泌;哮喘缓解期仍存在炎症反应。TNF-α在启动哮喘气道炎症并使其持续存在中起关键作用。

模拟高原条件下大鼠龈沟液中TNF-α、PGE_2、IL-8与牙周炎的相关性研究

目的:研究模拟高原条件下大鼠牙周炎动物模型龈沟液中细胞因子水平的变化及其与牙周指数的相关性。方法:将80只SD大鼠随机分为4组(缺氧对照组、缺氧实验组、常氧对照组及常氧实验组),每组20只,成功建立大鼠牙周炎模型(缺氧实验组、常氧实验组)后,在常氧与低氧环境(模拟海拔5000m高原、23h/d)下饲养8周,检测AL、PLI、BI等牙周临床指标,用ELISA法分别检测每组大鼠龈沟液中TNF-α、PGE2、IL-8的含量。结果:缺氧实验组龈沟液中TNF-α、PGE2水平明显高于其余各组(P<0.01),且与牙周指数呈正相关(P<0.01),而IL-8显著低于其他3组(P<0.01),与AL、PLI呈负相关(P<0.01),与BI无相关(P>0.05)。结论:模拟高原条件下,大鼠牙周炎模型龈沟液中TNF-α、PGE2水平较平原条件下升高,而IL-8减少,促使牙周组织炎症加重。

慢性乙型肝炎患者CD4^+和CD8^+T细胞亚群的研究

目的:比较不同感染状态慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+和CD8+T细胞亚群的差异。方法:收集CHB患者78例,根据感染状态分为乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性且肝功能正常、HBeAg阳性且肝功能异常和HBeAg阴性3组。13例健康志愿者(正常对照组)来自曙光医院体检中心。应用流式细胞术(FCM)检测不同感染状态CHB患者外周血中CD4+CD25+、CD8+CD28-、CD4+CD95+、CD8+CD95+细胞亚群的分布情况,并对各亚群分布情况与HBeAg和HBVD-NA水平的相关性进行分析。结果:与正常对照组相比,HBeAg(+)肝功能正常组的CD4+CD25+/CD4+和CD4+CD95+/CD4+明显升高(P<0.01,P<0.05),3个感染组CD8+CD28-/CD8+值均明显升高(P<0.01);与HBeAg(+)肝功能正常组相比,HBeAg(+)肝功能异常组和HBeAg(-)组的CD4+CD25+/CD4+明显降低(P<0.01),HBeAg(-)组CD8+CD95+/CD8+明显降低(P<0.05),HBeAg(+)肝功能异常组的CD8+CD95+/CD8+明显降低(P<0.01)。CD4+CD25+/CD4+,CD4+CD95+/CD4+与HBVDNA呈正相关(P<0.01,P<0.05),CD8+CD28-/CD8+与HBVDNA和HBeAg均呈正相关(P<0.01)。结论:CHB患者外周血中CD4+CD25+、CD8+CD28-T、CD4+CD95+细胞表达频率增加,可能对慢性乙肝病毒感染过程中的免疫耐受起一定作用。