DNA修复酶hMTH1在乙型肝炎病毒x基因致人肝细胞系L02细胞恶性转化中的意义

目的通过转基因细胞模型L02／HBx观察乙型肝炎病毒x基因（HBx）对DNA修复酶hMTH1转录表达的调控及其对人肝细胞系L02细胞生物学特性的影响。方法传代培养稳定表达HBx的转基因细胞模型L02／HBx及空白对照组L02细胞和空载体对照组L02／pcDNA3．1细胞，倒置显微镜下观察各组细胞的形态学特征，以四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法、流式细胞术检测各组细胞增殖、细胞周期和凋亡状况，并进行软琼脂克隆形成实验观察细胞的恶性转化能力。同时应用实时定量PCR测定各组细胞DNA修复酶hMTH1的表达水平。结果镜下观察发现L02／HBx细胞与对照组L02细胞相比形态发生明显改变。MTT法显示L02／HBx细胞生长速度比两对照组显著加快。流式细胞术结果表明，HBx可加速细胞周期进程、抑制细胞凋亡。软琼脂克隆形成实验发现L02／HBx细胞的克隆形成率明显高于L02细胞和L02／pcDNA3．1细胞（P〈0．05）。实时定量PCR检测发现hMTHI在L02／HBx细胞中的表达显著高于L02细胞和L02／pcDNA3．1细胞（P〈0．05）。结论HBx可诱导L02细胞发生恶性转化，在此过程中DNA修复酶hMTH1可出现反应性的上调表达。