ERK信号转导途径在LPS诱导的人类内皮细胞iNOS表达中的作用

目的主要研究 p44/42MAPK(ERK1/2或ERK)信号途径在LPS诱导的人内皮细胞 -ECV304iNOS表达和NO产生中的作用。方法用Griess法检测细胞培养液中NO水平 ,分别用免疫荧光法和RT -PCR检测细胞iNOS蛋白和mRNA表达 ,采用免疫激酶沉淀以Westernblot检测细胞中ERK激酶的活性。结果LPS可显著激活人类内皮细胞 -ECV304中的ERK信号途径 ,其激活高峰在LPS刺激后15～20min ,45min后活性逐渐下降。用ERK的特异性抑制剂PD98059处理细胞后可以显著抑制LPS诱导人内皮细胞ERK的活性。与对照组相比 ,LPS刺激后的ECV304细胞iNOS蛋白和mRNA的表达明显增加 ,培养基中NO水平也显著升高 ,用PD98059预处理细胞后 ,可显著抑制细胞iNOS表达和NO和产生。研究结果表明ERK信号途径参与了LPS介导的人内皮细胞iNOS表达和NO产生。结论通过阻断信号转导通路来减少iNOS及其它细胞因子的产生 。