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非洲猪瘟病毒pE248R蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
被引量:
1
1
作者
杜楠楠
陈金霞
+6 位作者
曹云雷
张宽
童武
李丽薇
赵冉
童光志
高飞
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024年第2期188-194,共7页
本研究利用PCR方法从非洲猪瘟病毒的灭活样品中扩增出747 bp的E248R基因全长序列,利用同源重组法构建原核表达质粒pCold I-pE248R,经1 mmol/L的IPTG诱导1 h后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的分子量约为32...
本研究利用PCR方法从非洲猪瘟病毒的灭活样品中扩增出747 bp的E248R基因全长序列,利用同源重组法构建原核表达质粒pCold I-pE248R,经1 mmol/L的IPTG诱导1 h后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的分子量约为32 kDa,利用纯化后得到pE248R重组蛋白作为免疫原经过4次免疫后制备鼠源抗pE248R多克隆抗体。利用该多克隆抗体检测实验室构建并拯救的已证明能够稳定表达ASFV pE248R蛋白的重组病毒rPRRSV-E248R,结果显示制备的抗pE248R的多克隆抗体能够与rPRRSV-E248R发生特异性结合反应,证明利用本试验中原核表达的pE248R蛋白制备的多克隆抗体具有抗pE248R蛋白的特异性,为进一步针对ASFV E248R基因建立快速,特异性的血清学检测方法奠定了基础,也为针对pE248R蛋白的功能性研究提供了研究基础。
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关键词
非洲猪瘟病毒
e248r基因
p
e
248
r
蛋白
多克隆抗体
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职称材料
题名
非洲猪瘟病毒pE248R蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
被引量:
1
1
作者
杜楠楠
陈金霞
曹云雷
张宽
童武
李丽薇
赵冉
童光志
高飞
机构
中国农业科学院上海兽医研究所
扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
厦门市动物疫病预防控制中心
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024年第2期188-194,共7页
基金
国家自然科学基金ASFV专项(31941017)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(Y2020YJ15)
广东省重点领域研发计划项目(2019B020211003)。
文摘
本研究利用PCR方法从非洲猪瘟病毒的灭活样品中扩增出747 bp的E248R基因全长序列,利用同源重组法构建原核表达质粒pCold I-pE248R,经1 mmol/L的IPTG诱导1 h后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的分子量约为32 kDa,利用纯化后得到pE248R重组蛋白作为免疫原经过4次免疫后制备鼠源抗pE248R多克隆抗体。利用该多克隆抗体检测实验室构建并拯救的已证明能够稳定表达ASFV pE248R蛋白的重组病毒rPRRSV-E248R,结果显示制备的抗pE248R的多克隆抗体能够与rPRRSV-E248R发生特异性结合反应,证明利用本试验中原核表达的pE248R蛋白制备的多克隆抗体具有抗pE248R蛋白的特异性,为进一步针对ASFV E248R基因建立快速,特异性的血清学检测方法奠定了基础,也为针对pE248R蛋白的功能性研究提供了研究基础。
关键词
非洲猪瘟病毒
e248r基因
p
e
248
r
蛋白
多克隆抗体
Keywords
Af
r
ican swin
e
f
e
v
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r
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e
248
r
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n
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p
e
248
r
p
r
ot
e
in
polyclonal antibody
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
非洲猪瘟病毒pE248R蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
杜楠楠
陈金霞
曹云雷
张宽
童武
李丽薇
赵冉
童光志
高飞
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2024
1
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