转录因子E2F-4在中低位直肠癌组织中的表达及意义

目的检测中低位直肠癌组织中转录因子E2F-4的表达,并分析其与临床病理学参数和预后的关系。方法选取临床资料与肿瘤病理标本完整的60例中低位直肠癌患者,所有患者均行直肠癌根治术,另以肠镜活检30例慢性结肠炎的直肠黏膜组织作为对照。免疫组织化学法检测直肠癌组织、癌旁组织及对照直肠黏膜的E2F-4表达,分析其与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期和术后转移复发等临床病理参数以及预后的关系。结果直肠癌组织E2F-4表达显著高于癌旁组织和对照直肠黏膜(P<0.05);直肠癌组织E2F-4表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移和术后转移复发有关;直肠癌组织E2F-4表达阴性者术后平均无瘤生存时间显著大于阳性者(P<0.05)。结论转录因子E2F-4与直肠癌生物学行为密切相关,在中低位直肠癌的发生发展中可能发挥癌基因的作用。

正常人群E2F-4基因(AGC)n重复多态性研究

目的:探讨正常人群E2F-4基因(AGC)n重复序列的多态性。方法:收集100例健康查体者外周血样品,提取基因组DNA,针对E2F-4基因AGC三核苷酸重复区段设计引物,PCR方法扩增后采用直接测序法对扩增产物测序分析。结果:E2F-4基因(AGC)n序列在正常人群中以(AGC)13最为多见,占91%,另外9例E2F-4基因出现5种情况的AGC重复数目变异,表现为13/14、13/15、13/16、13/17和13/18基因型。结论:E2F-4基因AGC重复序列在正常人群中呈现重复多态性,为进一步研究其病理学意义及与疾病发生关系奠定了分子遗传学基础。

转录因子E2F-4的表达与乳腺癌分级、分期及预后的关系

目的:探讨乳腺癌中转录因子E2F-4的表达与临床分期、病理组织学分级及其预后等参数的关系。方法:采用免疫组化学的方法检测乳腺癌组织中E2F-4的表达,半定量分析E2F-4的表达与肿瘤分期、分级、术后生存时间等临床病理学参数的关系;以正常乳腺组织作为对照。结果:正常乳腺小叶及导管上皮细胞之E2F-4表达呈阴性;65例乳腺癌中33例(50.8%)呈E2F-4高表达;E2F-4高表达与乳腺癌的病理学分级、类型、临床分期以及术后生存时间有关(P<0.05)。结论:E2F-4作为肿瘤的相关基因,参与了乳腺癌的发生、发展。E2F-4的高表达可能是评判乳腺癌恶性程度、转移、复发及预后的较好指标。

乳腺癌组织内转录因子E2F-4与雌激素受体/人表皮生长因子受体-2表达、临床分期及预后的关系

目的:观察乳腺癌组织内转录因子E2F-4的表达水平与雌激素受体(ER)/人表皮生长因子受体-2(HER-2)表达、临床分级、分期及预后的关系。方法:应用免疫组织化学技术,检测53例乳腺癌组织中E2F-4、ER、HER-2的表达,以正常乳腺组织作为对照,分析E2F-4的表达水平与ER、HER-2的表达及临床分级、分期、预后间的关系。结果:免疫组化结果显示14例正常乳腺组织内2例(14.3%)E2F-4低表达,其余组织内则呈阴性;53例乳腺癌组织内41例(77.4%)高表达E2F-4;E2F-4高表达与临床分期有关(P<0.05);与ER、HER-2表达无明显的相关性,与术后1年生存率无显著相关(P>0.05)。结论:E2F-4高水平表达可作为乳腺癌不良预后的重要的指标。

食管癌来源外泌体通过E2F4对CD4+T细胞向Th17细胞分化的影响

目的:研究食管癌来源外泌体对CD4+T细胞向Th17细胞分化的可能作用机制。方法:分离人正常食管上皮细胞HEEC和人食管癌细胞Eca-109来源外泌体(即HEEC-Exo、Eca-109-Exo),同时构建稳定表达的sh-NC和sh-E2F4的Eca-109细胞株并分离其外泌体(即sh-NC-Exo、sh-E2F4-Exo)。应用所得的外泌体处理CD4+T细胞;此外,应用稳定表达sh-NC和sh-E2F4的Eca-109细胞株建立食管癌异种移植小鼠模型。流式细胞术检测CD4+T细胞中Th17细胞比例;qRT-PCR检测E2F转录因子4(E2F4)mRNA表达;Western blot检测E2F4、维甲酸相关核孤儿受体γt(ROR-γt)和IL-17蛋白表达;ELISA试剂盒检测IL-17的含量。结果:与PBS组相比,HEEC-Exo组CD4+T细胞中Th17细胞比例、ROR-γt蛋白的表达、IL-17含量以及E2F4mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与HEEC-Exo组相比,Eca-109-Exo组CD4+T细胞中Th17细胞比例、ROR-γt蛋白表达、IL-17含量以及E2F4 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。与Eca-109-Exo组相比,sh-NC-Exo组CD4+T细胞中Th17细胞比例、ROR-γt蛋白表达、IL-17含量以及E2F4 mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与sh-NC-Exo组相比,shE2F4-Exo组CD4+T细胞中Th17细胞比例、ROR-γt蛋白表达、IL-17含量以及E2F4 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与Eca-109组相比,sh-NC组小鼠肿瘤大小和E2F4、ROR-γt、IL-17蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与sh-NC组相比,sh-E2F4组小鼠肿瘤大小和E2F4、ROR-γt、IL-17蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论:食管癌来源外泌体可能通过E2F4促进CD4+T细胞向Th17细胞分化,从而促进肿瘤生长。

E2F2和SDC4在急性胰腺炎患者中的表达及临床意义

目的探讨E2F转录因子2(E2F2)和多配体蛋白聚糖-4(SDC4)对急性胰腺炎患者病情评估及预后诊断的价值。方法将2018年4月至2020年4月西安市中心医院收治的45例轻症急性胰腺炎患者作为轻症组,56例重症急性胰腺炎患者为重症组;将同期20名来我院进行健康体检者作为对照组。比较各组研究对象的一般资料及临床特征;比较三组研究对象的E2F2、SDC4 m RNA和蛋白表达水平;分析E2F2、SDC4表达水平与急性胰腺炎患者JPN评分的相关性;分析血清SDC4、E2F2水平和JPN评分对急性胰腺炎的诊断价值。结果轻症组和重症组的腹痛、恶心呕吐发生率无明显差异(P>0.05);重症组的腹胀、全身性并发症发生率高于轻症组(P<0.05);轻症组和重症组的血清淀粉酶、脂肪酶、降钙素原、乳酸脱氢酶(LDH)以及C反应蛋白(CRP)水平高于对照组(P<0.01);重症组的血清淀粉酶、脂肪酶、降钙素原、LDH、CRP水平及JPN评分高于轻症组(P<0.01)。轻症组和重症组的E2F2、SDC4 m RNA和蛋白表达水平显著高于对照组,且重症组高于轻症组(P<0.05)。E2F2和SDC4表达水平与急性胰腺炎患者JPN评分呈正相关(P<0.001);E2F2表达水平与SDC4表达水平呈正相关(P<0.001)。血清E2F2和SDC4水平对急性胰腺炎的诊断价值较高,与JPN评分相似。结论E2F2和SDC4可作为评估急性胰腺炎患者发病及预后的潜在指标。

EBNA1对EBV相关胃癌细胞中E2F1表达的影响

目的探讨EB病毒(EBV)相关胃癌(EBVaGC)细胞中EBV编码的核抗原1(EBNA1)对E2F转录因子1(E2F1)表达的调控作用,并分析EBNA1和E2F1在胃癌细胞的表达情况。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)以及Western blotting方法,检测EBVaGC和EBV阴性胃癌(EBVnGC)细胞中EBNA1和E2F1的mRNA和蛋白表达水平;选取两种EBVnGC细胞BGC823和SGC7901,建立EBNA1稳定表达的细胞模型,命名为BGC823-EBNA1和SGC7901-EBNA1,采用qRT-PCR方法和Western blotting方法检测两种细胞中E2F1 mRNA和蛋白表达水平。结果qRT-PCR和Western blotting结果显示,EBNA1只在EBVaGC细胞中表达。EBVaGC细胞的E2F1 mRNA表达水平明显高于EBVnGC细胞,差异有统计学意义(t=13.60,P<0.01);而两种细胞的E2F1蛋白表达水平差异无显著性(P>0.05)。在EBVnGC细胞中稳定过表达EBNA1后E2F1的mRNA和蛋白表达明显上调。结论EBV编码EBNA1诱导E2F1表达上调,提示E2F1可能在EBVaGC的发生发展中起着重要作用。靶向EBNA1/E2F1途径可能为EBVaGC病人的治疗提供新的治疗靶点。