膀胱癌细胞高表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)通过上调CD24抑制NK细胞的杀伤

目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流式细胞术检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。转录组测序分析膀胱癌细胞E2F3a过表达组与对照组之间的基因表达差异,免疫组织化学染色法检测膀胱癌组织中E2F3a与差异基因在蛋白水平上表达的相关性。进一步利用染色质免疫沉淀(ChIP)、实时定量PCR、 Western blot法及小干扰RNA(siRNA)等方法探索膀胱癌细胞过表达E2F3a后对NK细胞活化及杀伤影响的具体机制。结果 在膀胱癌细胞中过表达E2F3a能显著抑制NK细胞的活化及杀伤。膀胱癌细胞过表达E2F3a可显著上调CD24基因的表达,膀胱癌组织中E2F3a和CD24蛋白的表达呈显著正相关。CHIP结果显示,E2F3a能够结合CD24的启动子区并促进CD24基因的转录。干涉E2F3a过表达膀胱癌细胞中的CD24表达后,发现膀胱癌细胞E2F3a过表达所介导的NK细胞活化及杀伤抑制被显著缓解。结论 在膀胱癌细胞中E2F3a可结合CD24的启动子区促进CD24基因的转录及CD24蛋白的表达。膀胱癌细胞E2F3a通过上调CD24表达来抑制NK细胞的活化及杀伤。

口腔鳞状细胞癌E2F转录因子1的表达与临床的意义

目的:探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达和临床意义,并阐明其在细胞凋亡和周期中的作用。方法:基于R语言和癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析OSCC中E2F1的表达和临床病理的相关性,通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)发现E2F1参与的主要生物学过程。蛋白质印迹法(Western blotting)和实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测E2F1在OSCC患者组织中的表达。通过细胞转染升高和敲低SCC15细胞系中E2F1的表达后,利用流式细胞术检测E2F1表达的改变对SCC15细胞凋亡和周期的影响。结果:E2F1在OSCC相关TCGA数据集中呈高表达,与T分期(T2或T4 vs T1)、组织学分级(G2或G3 vs G1)、临床分期(Ⅲ期vsⅠ期)、年龄(中年人vs青年人)和性别(男vs女)相关(P<0.05),多富集于细胞周期或核苷酸切除修复等基因组[P<0.05,错误发现率(false discovery rate,FDR)<0.25]。在37例OSCC患者组织中,E2F1的mRNA和蛋白均表达上调(P<0.001),表达上调的E2F1可降低SCC15细胞的凋亡率(P<0.05),以及在细胞周期中降低G1期的比率(P<0.01),并升高S期的比率(P<0.001)。结论:E2F1在OSCC中呈高表达,且可抑制细胞凋亡并促进细胞周期中G1/S期的转换。

E2F转录因子家族在脂肪生成中的调控作用

E2F转录因子(E2F transcription factor,E2Fs)是视网膜母细胞瘤蛋白(Retinoblastoma protein,p Rb,RB或RB1)家族的主要靶蛋白.作为关键的转录因子家族成员,E2Fs在调控下游基因的转录、DNA合成和细胞周期中起到至关重要的作用.近年来,关于脂肪生成的研究显示,E2F家族的多个成员参与脂肪生成调控.综述了E2Fs在脂肪生成中的调控作用,主要包括E2Fs家族成员的结构特征及在脂肪生成中的作用机制.研究发现,E2F-1与E2F-3在哺乳动物中具有促进脂肪分化的功能,E2F-2可能参与牛前脂肪细胞分化过程,具体功能尚不清楚,而E2F-4,E2F-5是脂肪生成的抑制因子,在哺乳动物中起抑制脂肪生成作用,E2F-6,E2F-7,E2F-8在脂肪生成调控中的作用尚不明确.针对E2Fs在脂肪增殖和分化中的调控作用进行综述,探讨E2Fs作为肥胖靶点的治疗策略,为后续预防和治疗肥胖及相关疾病提供理论依据.

miR-372靶向E2F转录因子5抑制宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞的恶性生物学行为

目的:探讨微小RNA-372(miR-372)对宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞恶性生物学行为的影响及其可能作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈鳞状细胞癌组织及其癌旁组织中miR-372和E2F转录因子5(E2F5)表达水平,构建miR-372过表达和低表达SiHa细胞系(miR-372、anti-miR-372),采用MTT法、流式细胞术、Transwell法及Western blot分别检测细胞增殖、凋亡、侵袭情况及其相关蛋白水平。在线预测miR-372与E2F5靶向关系并进行双色荧光素酶实验验证,在miR-372过表达SiHa细胞系上调E2F5,观察细胞增殖、凋亡和侵袭情况。结果:癌组织中miR-372表达低于其癌旁组织(P<0.05),而E2F5表达高于其癌旁组织(P<0.05)。miR-372过表达抑制细胞增殖、侵袭和核蛋白(Ki67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(cyclin A1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)表达(P<0.05);上调细胞凋亡和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)、Caspase-3、B淋巴细胞瘤2蛋白/Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2/Bax)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)表达(P<0.05)。miR-372可靶向抑制E2F5表达,E2F5过表达可缓解miR-372对SiHa细胞作用效果。结论:miR-372过表达可抑制SiHa细胞增殖和侵袭、促进细胞凋亡,可能与靶向作用抑制E2F5表达有关。

E2F转录因子家族在宫颈癌中的表达及其与临床预后的关系

目的 研究E2F家族在宫颈癌中的表达、预后价值以及与免疫浸润之间的关系。方法 采用Oncomine数据库分析E2F转录因子家族在不同类型癌症中的表达差异。采用GEPIA 2数据库分析E2F转录因子家族在宫颈癌组织与正常组织中的表达及不同临床分期间的差异。采用Kaplan-Meier plotter数据库分析E2F转录因子家族在宫颈癌中的预后价值。使用cBioPortal数据库进行E2F转录因子家族的共表达基因和遗传学突变分析。采用WebGestalt数据库对E2F家族相关基因进行功能及通路的富集分析。采用TIMER 2.0数据库分析E2F转录因子家族与宫颈癌中免疫细胞浸润的相关性。结果 宫颈癌中E2F1、E2F2、E2F3、E2F7、E2F8的表达均较正常宫颈组织高,但与临床分期无明显相关性。预后分析显示,E2F1高表达和E2F3低表达与患者更长的总生存期(overall survival,OS)和无复发生存期(recurrence free survival,RFS)明显相关。基因变异分析显示,E2F1基因变异率为5%,为E2F家族中最高。计算宫颈癌E2F家族成员之间的相关性结果表明,E2F2与E2F7、E2F8的表达,E2F3与E2F5的表达,E2F7与E2F8的表达均呈正相关;E2F2与E2F5的表达呈负相关。GO分析显示,E2F基因家族的相关功能主要指向生物调节和能量代谢;KEGG分析显示,E2F基因家族主要与细胞分裂、衰老及细胞周期密切相关。TIMER2.0数据库分析显示,部分E2F家族成员的表达水平与CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润呈正相关,与巨噬细胞浸润呈负相关。结论 E2F转录因子家族在宫颈癌中存在表达失调,家族成员E2F1,2,3,7,8是未来宫颈癌精准治疗的潜在靶点,而E2F1和E2F3可能成为评价宫颈癌预后新的生物标志物。

结直肠癌组织转录因子E2F2、黏蛋白样受体2水平与病人临床病理特征的关系及对淋巴结转移的诊断价值

目的分析转录因子E2F2和黏蛋白样受体2(EMR2)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其与病人临床病理特征的关系,评估二者对癌转移的诊断价值。方法2018年1月~2020年12月间住院手术的CRC病人术中切除CRC组织标本及癌旁组织标本各88例;采用实时荧光定量PCR法检测所有组织E2F2 mRNA、EMR2 mRNA表达水平;用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化氢酶连结法(SP法)检测组织中E2F2蛋白、EMR2蛋白表达,分析其与临床病理特征的关系;ROC曲线分析E2F2 mRNA、EMR2 mRNA表达水平对CRC病人淋巴结转移的诊断价值。结果CRC组织中E2F2蛋白、EMR2蛋白阳性率(76.50%、65.50%)高于癌旁组织(20.45%、26.14%),差异有统计学意义(P<0.05);CRC组织E2F2蛋白、EMR2蛋白表达与病人TNM分期、淋巴结转移及浸润深度相关(P<0.05);与无淋巴结转移病人比较,有淋巴结转移病人CRC组织中E2F2mRNA、EMR2mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);绘制ROC曲线发现,CRC组织中E2F2mRNA、EMR2mRNA表达水平单独及联合诊断淋巴结转移的AUC分别为0.782、0.844、0.877,E2F2mRNA联合EMR2mRNA诊断淋巴结转移的AUC高于二者分别单独诊断(P<0.05)。结论E2F2、EMR2与CRC病人TNM分期、淋巴结转移及浸润深度相关,二者联合对淋巴结转移具有一定诊断价值。

卵巢癌中E2F转录因子调控乳腺癌易感基因的研究进展

卵巢癌是恶性程度较高的肿瘤之一,大多数卵巢癌患者在被确诊时已是卵巢癌晚期。靶向乳腺癌易感基因(breast cancer susceptibility gene,BRCA)突变的卵巢癌治疗药物多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)抑制剂给卵巢癌患者的治疗带来福音,但仍存在非BRCA突变或PARP抑制剂治疗效果不佳的病例,寻找新的治疗方式是目前临床上亟须解决的问题。E2F转录因子的表达水平与卵巢癌患者的癌症分期及生存率密切相关,BRCA受E2F转录因子调控,这使其有望成为卵巢癌的治疗靶点。本文对卵巢癌中E2F转录因子对BRCA调控的研究进展作一综述。

转录因子E2F2在恶性肿瘤生物学功能中研究进展

细胞周期相关转录因子E2F2(transcription factor E2F2)是细胞周期相关转录因子E2F家族成员之一,参与细胞周期、增殖、凋亡、迁移及侵袭等过程,近几年大量的研究发现E2F2在肿瘤细胞中过表达。因此,本文对E2F2在头颈部、消化、呼吸、泌尿生殖、骨肌系统以及乳腺等恶性肿瘤中的作用以及分子机制研究进行综述,为进一步研究E2F2的生物学功能和治疗靶点的确立提供参考。

基于公共数据库分析头颈部鳞癌中转录因子E2F家族表达及预后意义

目的通过生物信息学方法分析转录因子E2F家族(E2Fs)在头颈部鳞癌(HNSCC)中转录水平(mRNA)的表达,探究其在HNSCC发病中的作用。方法利用TCGA、GEPIA2和UALCAN公共数据库分析E2Fs mRNA在HNSCC中的表达及其与患者总生存期的关系,利用cBioPortal公共数据库筛选E2Fs的共表达基因构建共表达网络,通过R软件分析E2Fs及其共表达基因生物学功能。结果HNSCC中8个E2Fs的表达量显著高于癌旁组织,其中E2F4表达量最高,其次是E2F1、E2F6和E2F7。Spearman分析显示E2Fs成员间呈正相关性。基因本体论分析显示,E2Fs及其93个共表达基因主要通过DNA复制、细胞周期和范可尼贫血等信号通路,参与DNA复制和染色体分离等生物学过程。Cox单因素和多因素分析显示,E2F4(HR=1.502,95%CI:1.141~1.977)和E2F8(HR=0.698,95%CI:0.531~0.917)的高表达与HNSCC患者总生存期有关(P<0.05)。预后列线图显示E2F4高表达患者1年生存概率最低,其次是E2F8低表达患者。结论E2F家族在HNSCC中显著高表达,且E2F4和E2F8的表达水平与患者预后有关,E2Fs及其靶基因主要通过DNA复制、细胞周期和范可尼贫血等信号通路调控细胞染色体分离和DNA复制等生物学过程参与HNSCC的发生发展。

老年乳腺癌患者癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白表达变化及与预后的关系

目的 探讨N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTHDF1)、E2F8转录因子8(E2F8)蛋白表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法 选取46例老年乳腺癌患者,术中取癌组织和癌旁组织,用免疫组化染色法检测组织中YTHDF1、E2F8蛋白表达。随访患者并记录随访期间肿瘤复发、转移及死亡时间。用Spearman秩相关分析乳腺癌组织YTHDF1与E2F8蛋白表达的相关性;Kaplan-Meier法分析YTHDF1、E2F8蛋白表达与患者无进展生存预后的关系;Cox回归分析老年乳腺癌患者无进展生存预后的影响因素。结果 乳腺癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05),二者蛋白表达呈正相关(r=0.706,P<0.05)。TNM分期Ⅱ期、肿瘤最大径>2 cm、合并淋巴结转移老年乳腺癌患者癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白阳性表达率高于TNM分期Ⅰ期、肿瘤最大径≤2 cm、无淋巴结转移的癌组织(P均<0.05)。32例患者发生肿瘤进展,YTHDF1、E2F8蛋白表达阳性患者5年无进展生存率低于其蛋白表达阴性患者(P均<0.05)。TNM分期Ⅱ期、合并淋巴结转移、YTHDF1蛋白阳性表达、E2F8蛋白阳性表达是老年乳腺癌患者无进展生存预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论 老年乳腺癌患者癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白高表达,且与老年乳腺癌患者肿瘤TNM分期、肿瘤最大径、淋巴结转移有关,是患者无进展生存预后的独立危险因素。

原癌基因Pokemon及核转录因子E2F3在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨POK红系髓性致癌因子(POK erythroid myeloid ontogenic factor,Pokemon)及核转录因子E2F3(E2Ftranscrip tion factor 3)在喉鳞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Max Vision二步法观察61例喉鳞癌组织及46例癌旁正常喉黏膜组织中Pokemon及E2F3的表达,并结合患者年龄、性别、原发部位、TNM分期、临床分期及预后之间的关系进行分析。结果 Pokemon及E2F3在喉鳞癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常喉黏膜组织中的阳性表达率(P<0.001);颈淋巴结转移(N+)、中低分化、临床晚期(Ⅲ+Ⅳ)喉鳞癌患者中Pokemon及E2F3表达强度增强(P<0.05);Pokemon及E2F3阳性表达患者的5年累积生存率较阴性表达患者低(P<0.05)。结论 Pokemon与E2F3在喉鳞癌组织中高表达,并与其预后不良相关。两者可能在喉鳞癌发生及恶性进展过程中发挥重要作用,有望成为喉鳞癌发病机制及分子靶向治疗的新指标。

基于生信数据库探究E2F3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨转录因子E2F3在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及临床意义。方法在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分析E2F家族成员在EOC组织与正常组织中的表达差异及临床意义,同时借助生物信息数据库预测E2F3的转录调控靶点。应用RT-qPCR和Western blot检测EOC及对照组中转录因子E2F3及其靶基因的mRNA及蛋白表达水平。结果TCGA数据信息结合GEO测序结果提示,与对照组相比在EOC中E2F1、E2F3呈现显著高表达(P<0.05),且均具有良好的诊断价值(AUC=0.964、AUC=0.967),E2F3高表达组中患者预后较差。联合JASPAR及Cistrome DB数据库预测E2F3转录调控靶基因ERCC1,且二者呈负相关(R=-0.243、P<0.001)。与对照组相比,EOC中E2F3与ERCC1的mRNA及蛋白表达水平均显著增高(P<0.05)。结论转录因子E2F3可靶向调控ERCC1,在EOC中呈现高表达,且与预后不良相关,可作为EOC早期诊断和治疗的潜在靶点。

E2F8在人结直肠癌中的表达及其与患者预后的关系

目的探讨腺病毒E2启动子结合因子8(E2F8)在结直肠癌(CRC)中的表达及其对结直肠癌患者预后的影响。方法分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因组织表达(GTEx)数据库中E2F8在结直肠癌中的mRNA表达水平。通过实时荧光定量PCR方法(qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)方法分别检测E2F8在结直肠癌组织和细胞中的表达量。98例结直肠癌患者肿瘤及癌旁组织经免疫组化染色方法分析E2F8蛋白表达与患者临床特征和预后的关系,采用COX比例风险模型分析CRC预后的影响因素。结果TCGA数据库及临床样本中E2F8在肿瘤组织中的表达水平均高于正常组织。结直肠癌细胞系中E2F8表达水平除HCT116、HCT15以外均较正常结肠上皮细胞系高。高表达E2F8的患者总生存期、无疾病生存期、无转移生存期均短于低表达E2F8的患者(均P<0.01),高表达E2F8的结直肠癌组织Dukes分期较晚(P<0.05)。单因素COX回归模型分析发现,女性(HR=2.009,95%CI:1.139~3.544)、淋巴结侵犯(HR=1.780,95%CI:1.005~3.150)、Dukes C/D期(HR=2.538,95%CI:1.393~4.623)、TNM III/IV期(HR=2.894,95%CI:1.554~5.392)、E2F8高表达(HR=2.807,95%CI:1.540~5.118)与结直肠癌患者不良预后相关(均P<0.05)。多因素COX回归模型分析发现,E2F8高表达(HR=2.747,95%CI:1.447~5.216)和较晚的TNM分期(HR=5.543,95%CI:1.537~19.990)是结直肠肿瘤患者不良预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论E2F8在结直肠癌中较高表达,结直肠癌组织中高表达E2F8与结直肠癌患者Dukes分期晚和不良预后有关,E2F8高表达是结直肠肿瘤患者不良预后的独立危险因素,E2F8可作为结直肠癌患者疾病进展及预后的潜在标志物。

转录因子E2F1抑制CREG表达调控体外培养的人血管平滑肌细胞分化

为探讨转录因子E2F1在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)表型转化中的作用及其对E1A激活基因阻遏子(cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG)表达调控的分子机制,应用生物信息学方法,定位人CREG(hCREG)基因启动子并确定转录因子E2F1在hCREG启动子区的结合位点,PCR方法克隆并构建hCREG基因启动子绿色荧光报告基因载体,以hCREG启动子区E2F1结合位点为模板,化学合成E2F1寡聚脱氧核苷酸(ODN)和错配E2F1ODN,利用转录因子"诱骗(Decoy)"策略,用E2F1ODN转染体外培养的VSMCs以阻断E2F1与hCREG基因启动子区的结合,蛋白质印迹(Western blot)分析检测阻断前后细胞内hCREG蛋白、报告基因绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和平滑肌细胞分化标志蛋白SMα-actin表达变化.结果显示:分化表型HITASY细胞中E2F1表达下调伴出核转位,而增殖表型的HITASY细胞中E2F1蛋白表达明显增加且定位于核内.进一步应用FuGene6瞬时转染E2F1ODN和错配E2F1ODN于体外培养HITASY细胞中,蛋白质印迹分析发现,转染E2F1ODN后,HITASY细胞中hCREG、SMα-actin和GFP表达均较未阻断组及错配组细胞明显增加.上述研究结果证实,E2F1是hCREG基因转录的重要调控因子,能够直接结合于hCREG启动子区阻遏hCREG表达,参与hCREG蛋白对VSMCs表型转化的调控作用.

核转录因子E2F-1和p27在大肠癌中的表达及意义

目的探讨E2F-1和p27在大肠腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测78例大肠癌、20例正常大肠黏膜和30例大肠腺瘤E2F-1和p27的表达情况。结果 E2F-1在大肠癌中的阳性率显著高于正常大肠黏膜和大肠腺瘤(P<0.05)。E2F-1表达与大肠癌的病理分化程度、淋巴结转移和临床分期具有相关性(P<0.05)。p27在正常大肠黏膜的阳性率明显高于大肠腺瘤和大肠癌。p27表达与大肠癌的病理分化程度、淋巴结转移和临床分期具有相关性(P<0.05)。结论 E2F-1和p27的表达与大肠癌发生关系密切,可以作为肠癌发生、发展的生物学标志物。

转录因子E2F1在脑膜瘤中的表达和临床意义

目的研究转录因子E2F1在脑膜瘤中的表达情况及其临床意义。方法选择57例经病理确诊为脑膜瘤患者及同期行脑外科手术治疗的38例非脑膜瘤患者,应用实时定量PCR方法和Western blot方法定量检测转录因子E2F1在脑膜瘤组织和正常脑膜中的表达情况,并采用免疫组织化学染色方法检测脑膜瘤组织中E2F1蛋白的表达定位。根据E2F1的表达情况分析其与脑膜瘤分型和预后的关系。结果实时定量PCR结果显示脑膜瘤组织中E2F1 mRNA表达水平显著高于正常脑膜组织,而且恶性脑膜瘤组织中E2F1 mRNA表达高于良性脑膜组织(P<0.01),Western blot结果也证实脑膜瘤组织中E2F1蛋白表达水平显著高于正常脑膜组织(P<0.01)。免疫组织化学染色结果显示脑膜瘤组织中E2F1蛋白主要定位在细胞核中。脑膜瘤组织中E2F1强阳性表达率为65%,正常脑膜组织中E2F1强阳性表达率为10%,二者比较差异具有统计学意义(P<0.01)。不典型和恶性脑膜瘤组织中E2F1强阳性表达率显著高于良性脑膜瘤。3年内脑膜瘤复发组E2F1表达阳性率显著高于无复发组(P<0.01)。结论 E2F1在脑膜瘤组织中表达增强,并且与脑膜瘤的恶性程度和复发率呈正相关。

胃肠道肿瘤细胞E2F-1转录因子活性对细胞周期的影响

目的:探讨癌细胞E2F-1因子的表达状态及其与细胞周期的关系。方法:采用免疫荧光组织化学染色法检测8株胃肠道肿瘤细胞系E2F-1转录因子的表达,并采用流式细胞术检测肿瘤细胞周期的变化。结果:依据E2F-1阳性表达的程度不同,将8株肿瘤细胞系分为E2F-1高表达组(包括HGC-27、BGC-823、SGC-7901、HT29)和E2F-1低表达组(包括MKN45、MKN28、SH288、SW-620)。E2F-1高表达组G1/G0期、S期、细胞凋亡比例分别为(33.48±4.61)%、(63.91±5.02)%、(1.50±0.56)%,低表达组分别为(58.58±3.41)%、(35.38±4.03)%、(5.61±1.44)%,2组间比较差异有统计学意义(t分别为6.04、5.99和2.44,P<0.05或P<0.01)。结论:肿瘤细胞E2F-1因子的表达状态对细胞周期有明显的影响。E2F-1阳性的肿瘤细胞则倾向于更高的增殖速率。

miR-144-3p靶向E2F8抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭并阻滞细胞周期

为了探究miR-144-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的作用机制,本研究基于多个数据库对miR-144-3p和其下游靶基因在肺腺癌组织中的表达水平进行了预测;通过生物信息学方法和文献调研,确定了E2F转录因子8(E2F transcription factor 8,E2F8)为miR-144-3p的下游靶基因,并通过双荧光素酶实验对miR-144-3p和E2F8的靶向结合关系进行了验证;然后,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)、免疫印迹分析(Western-blot)、细胞毒性检测(Cell Counting Kit-8 assay,CCK-8 assay)、克隆形成、侵袭能力测定和流式细胞术等实验,对miR-144-3p和E2F8在肺腺癌中的调控机制进行了探究。结果显示,miR-144-3p在肺腺癌组织和细胞中呈显著低表达,而E2F8则显著高表达,两者存在靶向关系;过表达miR-144-3p或敲低E2F8能抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭并阻滞细胞周期于G1期。上述结果表明,miR-144-3p通过负调控E2F8抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭能力,并阻滞细胞周期于G1期,从而抑制肺腺癌细胞的恶性进展。这为肺癌新检测、治疗手段的开发提供了参考依据。

转录因子E2F与血管再狭窄的研究进展

2F是调控细胞周期进程一个关键的转录因子 ,而且在血管再狭窄的病理过程中也起着非常重要的作用。对上述问题的了解 ,将有助于血管再狭窄防治的研究。