HPV DNA、HPV E6/E7蛋白和TCT在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌筛查中的价值

目的 探讨人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)DNA、HPV E6/E7蛋白和液基薄层细胞学检查(thin-prep cytology test,TCT)在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌筛查中的价值。方法 选取2021年7月至2022年6月于诸暨市人民医院妇科接受早期宫颈癌筛查的成年女性190例为研究对象,分别进行HPV DNA、HPVE6/E7蛋白及TCT检测,并进一步行阴道镜活检检查。比较不同病变患者的HPVDNA、HPVE6/E7蛋白和TCT对高级别病变的诊断效能。结果 CIN3及宫颈癌患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT检查及三者联合检测的阳性率均显著高于宫颈炎患者(P<0.05),宫颈癌患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT检查及三者联合检测的阳性率均显著高于CIN1患者(P<0.05)。CIN2+患者的HPV DNA、HPV E6/E7蛋白、TCT及三者联合检测的阳性率显著高于CIN1-患者。HPVDNA、HPVE6/E7蛋白、TCT三者联合诊断高级别病变的敏感度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为90.80%、30.10%、52.32%、79.48%。结论 HPV DNA、HPV E6/E7蛋白及TCT可作为筛查宫颈癌和癌前病变的手段,且三者联合检测的敏感度最高。

桂皮醛诱导人宫颈癌Siha细胞凋亡并下调HPV E6/E7蛋白表达

桂皮醛作为一种天然的小分子化合物具有抗炎、镇痛及抗肿瘤的活性,为了探究其对人宫颈癌Siha细胞凋亡及HPV E6/E7蛋白表达的影响,该文采用CCK-8法、流式细胞术、JC-1荧光探针以及Western blot等多种手段进行检测。结果显示,桂皮醛具有明显的抗肿瘤生长作用,可导致G2/M期阻滞、线粒体膜电位降低并通过蛋白酶体途径抑制E6/E7蛋白的表达;进一步验证桂皮醛与化疗药物紫杉醇、顺铂及5-氟尿嘧啶分别联合给药后的效果,证实其具有协同抗宫颈癌作用。

高危型HPVE6/E7蛋白在宫颈癌相关细胞调亡通路的研究

细胞调亡信号通路受阻是包括宫颈癌在内的恶性肿瘤最大特征,也是宫颈癌产生复发和转移的主要原因。近几年来研究发现的关键细胞调亡信号通路有:mTOR、VEGF、HDAC、Cox2、microRNA等。如今高危型HPV感染与宫颈癌的关系已经得到了确认,慢性持续性高危型HPV感染是宫颈癌发生的主要诱因。随着近几年对HPV研究的深入,人们已初步揭示了HPV致癌的分子机制,E6和E7蛋白与宫颈癌发病机制最为密切。E6和E7蛋白是如何调控这些细胞调亡通路的,我们将主要从mTOR、VEGF、HDAC、Cox2、microRNA这5条通路去阐明E6和E7蛋白如何与这些通路上的分子物质发生反应,引起这些通路的阻断,进而发生宫颈的癌变,转移,复发。

人乳头瘤病毒E6/E7蛋白在子宫颈癌中的研究进展

子宫颈癌的发生是多种致癌因素长期协同作用的结果.人乳头瘤病毒（HPV）与子宫颈癌的发生密切相关,是引起子宫颈癌的主要生物学因素,而HPV E6/E7蛋白在其恶性转化中扮演重要角色.文章探讨了HPV E6/E7的致癌机制及其在子宫颈癌筛查中的应用,并针对以HPV E6/E7为目标的靶向治疗进行了综述.

HPV16-E6、E7蛋白在宫颈癌组织中的表达与病理特征的相关性

目的探讨HPV16-E6、E7蛋白在宫颈癌(CC)组织中的表达与病理特征的相关性。方法56例CC患者设为A组,43例高度鳞状上皮内病变(HSIL)患者设为B组,48例低度鳞状上皮内病变(LSIL)患者设为C组。3组均采集病理组织样本行HPV16-E6、E7蛋白检测,对比3组HPV16-E6、E7蛋白阳性率,探讨CC患者淋巴结转移、肿瘤最大径、临床分期、病理类型、宫旁浸润等病理特征与HPV16-E6、E7蛋白阳性的相关性。结果A组HPV16-E6、E7蛋白阳性率均高于B组、C组(均P<0.05),B组HPV16-E6、E7蛋白阳性率均高于C组(均P<0.05);HPV16-E6、E7蛋白阳性率与CC患者年龄、肿瘤最大径、淋巴结转移及组织学分级间差异均无统计学意义(均P>0.05),与临床分期、宫旁浸润及病理类型差异均有统计学意义(均P<0.05);CC患者HPV16-E6阳性与HPV16-E7阳性呈正相关(r=0.542,P<0.05)。结论HPV16-E6、E7蛋白在CC患者癌组织中表达水平较高且与病理特征间存在相关性。

人乳头瘤病毒16/18型E6和E7蛋白在宫颈上皮内病变中的表达水平及临床价值

目的:探讨HPV E6/E7蛋白在宫颈癌早期筛查方面的临床应用价值。方法:收集2015年11月～2017年11月间中日友好医院妇产科宫颈病变门诊就诊和住院的400例患者,选取其中53例HPV16/18型阳性患者检测E6和E7蛋白的表达,分析其表达水平与组织病理学符合情况。结果:HPV E6蛋白在炎症、CIN 1、CIN 2-3和宫颈癌中的阳性表达率为0、37.5%、64.0%和84.6%;HPV E7蛋白分别为14.3%、37.5%、80.0%和92.3%。随着病变级别增加,HPV E6/E7蛋白的阳性表达率显著增加(P<0.01)。HPV E6、E7蛋白检测的灵敏度(71.1%、84.2%)均高于LCT(63.2%),阳性预测值(90.0%、88.9%)均高于HPV-DNA检测(71.7%)。结论:HPV E6/E7蛋白可能成为高度鳞状上皮内病变及宫颈癌的早期检测标志物,其检测可能提高筛查的准确性。

改造的人乳头瘤病毒16型E6/E7融合蛋白疫苗抗肺癌作用的实验研究

目的 研究经改造的HPV16E6/E7蛋白质疫苗 (HPV 16mE6Δ/mE7)对表达HPV16E6和E7的小鼠肺癌细胞的体内生长抑制作用 ,为肺癌免疫治疗提供新线索。方法 预防性实验 :对C5 7BL/6小鼠先进行免疫 ,然后接种表达HPV 16E6和E7癌蛋白的TC 1肿瘤细胞 ;第 3 3天 ,对未出瘤小鼠进行第二次大剂量肿瘤细胞攻击。治疗性实验 :C5 7BL/6小鼠先接种TC 1细胞 ,然后进行两次免疫治疗 ,再对未出瘤小鼠进行第二次大剂量TC 1细胞攻击实验。计算各组肿瘤发生率、肿瘤体积。采用MTT方法检测淋巴细胞增殖反应。结果 预防性实验 :在 10 0天的观察时间内 ,免疫组小鼠可以有效抵抗第一、二次肿瘤细胞攻击 ,所有小鼠均未见肿瘤发生 ;而PBS组及单纯佐剂组小鼠在第一次肿瘤细胞接种后 6～ 12天内均有肿瘤形成 ,3 0天内因肿瘤负荷出现衰竭。在治疗性实验中 ,免疫组、PBS组、单纯佐剂组小鼠成瘤率分别为 2 0 %、90 %、60 % ;第二次攻击实验中 ,免疫组仍有 87.5 %的小鼠无肿瘤生长 ,而其他两组动物在 4～ 6天内均有肿瘤形成。MTT实验表明经mE6Δ/mE7免疫的小鼠脾淋巴细胞增殖反应明显强于对照组。结论 经改造的HPV16型mE6Δ/mE7蛋白质疫苗对于实验动物肺癌有较好的抑制作用 。

HPV E6/E7在自噬调控中的作用机制研究进展

自噬在病毒感染的反应中调节细胞命运^([1]),在维持细胞稳态和功能中发挥关键作用^([2])。大量证据表明,自噬不仅对氧化应激、DNA损伤、缺氧、营养缺乏、内质网应激以及外源生物或药物的暴露做出一系列适应性反应,以维持体内平衡,而且还参与了人类疾病的发展,包括癌症、脑卒中、神经退行性疾病等^([3-5])。

基于蛋白的宫颈癌相关基因生物信息学分析

目的/意义运用生物信息学方法挖掘与宫颈癌相关的基因,探讨与HPV E6/E7密切相关差异表达基因的特征及临床意义。方法/过程以UCSC的TCGA和GTEx中宫颈癌的宫颈组织及临床信息作为训练集。以GEO中与宫颈癌相关的表达谱芯片GSE63514作为验证集。首先,使用R软件limma包筛选肿瘤和正常样本的DEGs,制作与MigDB中E6/E7蛋白相关基因的韦恩图。利用survival包进行生存分析,通过ROC和蛋白表达水平进行验证。其次,通过拷贝数变异和甲基化相关性得到关键基因。最后,构建特异性共表达网络并进行富集分析和免疫浸润分析。结果/结论与HPV E6/E7蛋白相关的差异表达基因有101个,经筛选有3个基因意义显著,分别是E2F1、MCM4和PCNA。同时,经通路分析后发现特异性共表达网络中的基因显著富集在DNA复制、染色体组织等通路。通过免疫相关性分析发现关键基因与CD4 T细胞、B细胞和中性粒细胞显著相关。DNA复制、染色体组织等为宫颈鳞癌发生发展以及HPV E6/E7编码蛋白显著相关的分子机制和关键基因。

蛋白质组学在HPV研究中的进展

蛋白质组学是近年来飞速发展的一门学科，它在分子水平上阐明了蛋白的相互作用及其发生的系统动态差异变化。综述了蛋白质组学在HPV研究中的应用，探索E6E7蛋白在HPV致病机制中的作用，研究紫杉醇、5-FU等化疗药物的作用靶位及耐药产生机制，寻找新的蛋白靶点开发疫苗用于预防和治疗HPV感染。

HPV致宫颈癌机制研究进展

人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)是一类无包膜的具有嗜上皮特性的双链DNA病毒,由核酸及衣壳蛋白构成,其基因组可分为早期编码区(E区)、晚期编码区(L区)和长控制区(LCR),研究表明高危型HPV的持续感染与宫颈癌的发生密切相关,当HPV病毒感染机体后,其基因组可随机整合到宿主细胞DNA中,随后沉默E2基因的表达,削弱E2蛋白对E6、E7基因的抑制,使E6、E7蛋白过表达,辅以E5蛋白的表达,促使感染细胞永生化甚至癌变。因此研究HPV的病毒结构及其致病机制对防治HPV感染及预防HPV相关恶性肿瘤,尤其是宫颈癌的发生、发展尤为重要。本文拟就HPV的病毒结构、致病机制研究进展进行综述。

HPV检测和免疫治疗进展

人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的疾病包括良性增生性疾病、宫颈癌、头颈与直肠恶性肿瘤。全球发病率居高不下,不仅影响健康也造成很大经济负担。快速、可靠和有效的HPV检测对疾病诊断和预防非常重要。目前检测方法包括聚合酶链反应(PCR),DNA原位杂交、杂交捕捉法HC-2、高危HPV感染相关生物学标记的免疫组织化学检测、以及高危型HPV E6/E7 mRNA检测等。HPV病毒蛋白免疫组化以及DNA/RNA微阵列或芯片技术在HPV检测中的应用价值非常大但尚未推广普及。对HPV免疫学机制和致癌机制的最新研究促进了HPV相关肿瘤免疫治疗的研究。预防性HPV疫苗不能诱导细胞免疫清除HPV感染、尤其无法治疗HPV相关肿瘤,故迫切需要寻求治疗HPV感染和相关肿瘤的有效手段。已经研发的几种类型治疗性疫苗,包括活载体、蛋白质或肽、核酸和基于细胞的疫苗已在进行临床前和临床试验研究。另外一些新的免疫治疗策略,如免疫检查点抑制剂、过继性T细胞疗法等仅在临床前评估阶段。