期刊文献+
共找到13篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
HPV52 E6和E7基因多态性与宫颈上皮内瘤变相关性 被引量:1
1
作者 王巧祎 赵希芹 +3 位作者 郭雨辰 张璐 李晓欣 王云 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2022年第5期667-671,共5页
目的探讨人乳头瘤病毒52型(HPV52)E6和E7基因多态性与宫颈上皮内瘤变(CIN)的相关性。方法收集来自青岛地区的177例HPV52阳性且进行宫颈活检病人的宫颈脱落细胞样本,采用PCR直接测序法检测E6和E7基因序列,在GenBank中剪切HPV52标准株和... 目的探讨人乳头瘤病毒52型(HPV52)E6和E7基因多态性与宫颈上皮内瘤变(CIN)的相关性。方法收集来自青岛地区的177例HPV52阳性且进行宫颈活检病人的宫颈脱落细胞样本,采用PCR直接测序法检测E6和E7基因序列,在GenBank中剪切HPV52标准株和变异株序列,应用Lasergene和MEGA软件对序列进行比对和系统进化树分析。比较正常、低级别上皮内瘤变(CIN1)和高级别上皮内瘤变(CIN2/3)样本中E6和E7基因变异型的分布。结果138例样本成功获得E6和E7基因序列。与标准株比较,132例(95.7%)样本在E6区同时出现1处错义突变(K93R)和1处同义突变(g350t),经系统进化树分析,确定为B变异型;其余样本有5例(3.6%)属于A变异型,1例(0.7%)属于C变异型。135例(97.8%)样本在E7区同时出现2处同义突变(c751t和a801g),为B变异型;其余样本有2例(1.5%)属于A变异型,1例(0.7%)属于C变异型。正常、CIN1和CIN2/3样本之间E6和E7变异型的分布差异均无显著性(P>0.05)。结论来自青岛地区正常及CIN样本中HPV52 E6和E7基因均以亚洲株B变异型为主,E6和E7基因多态性可能与CIN发生发展无明显相关性。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒52 乳头瘤病毒e6蛋白质 乳头瘤病毒e7蛋白质类 宫颈上皮内瘤样病变 多态性 单核苷酸
下载PDF
HPV16 E7、TGFβ1和MT1-MMP在宫颈病变中的表达及其意义 被引量:1
2
作者 栾笑天 戴淑真 《齐鲁医学杂志》 2008年第3期207-209,212,共4页
目的 检测宫颈病变组织中人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7蛋白、转化生长因子β1(TGF β1)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)的表达情况,探讨其在宫颈病变形成及演进过程中的意义。方法 应用免疫组织化学SP法检测了64例石蜡包埋的不同... 目的 检测宫颈病变组织中人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7蛋白、转化生长因子β1(TGF β1)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)的表达情况,探讨其在宫颈病变形成及演进过程中的意义。方法 应用免疫组织化学SP法检测了64例石蜡包埋的不同病变宫颈组织中HPV16 E7、TGF β1和MT1-MMP表达。结果 在宫颈病变由良性到恶性的发展过程中,TGF β1和MT1-MMP表达水平均逐渐升高(F=501.98、244.22,q=14.81~48.49,P〈0.05);HPV16 E7蛋白阳性组TGF β1和MT1-MMP表达水平均较阴性组高(t=2.76、2.78,P〈0.01);TGF β1和MT1-MMP表达水平呈正相关(r=0.96,P〈0.01)。结论 TGF β1和MT1-MMP宫颈病变中的表达与病变良恶性有关,TGF β1和MT1-MMP表达是宫颈恶性肿瘤的表现之一;HPV16感染可能通过HPV16 E7蛋白影响TGF β1和MT1-MMP的表达。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 乳头瘤病毒e7蛋白质类 转化生长因子Β 间质胶原酶
下载PDF
自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体检测尖锐湿疣皮损的研究 被引量:2
3
作者 曹蕾 程浩 +5 位作者 王惠 周强 汤怡 姜少杰 丁杨 陈贤祯 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期774-777,共4页
目的 采用自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体检测外生殖器尖锐湿疣皮损组织中HPV6b和11型E7蛋白的表达,探讨该抗体在临床检验中的应用价值。 方法 55例经临床和病理确诊的尖锐湿疣皮损石蜡标本,用自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多... 目的 采用自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体检测外生殖器尖锐湿疣皮损组织中HPV6b和11型E7蛋白的表达,探讨该抗体在临床检验中的应用价值。 方法 55例经临床和病理确诊的尖锐湿疣皮损石蜡标本,用自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体进行免疫组化检测,其中18例皮损冰冻标本用RT-PCR法测定HPV6b和11型E7蛋白mRNA表达,分析与免疫组化结果的符合率。 结果 55例尖锐湿疣皮损的免疫组化染色显示,HPV6b和11型E7蛋白为胞核染色,且皮损全层表皮细胞均有阳性表达,但基底层阳性细胞较多。HPV6b和11型E7蛋白阳性表达率分别为76.36%(42/55)和58.18%(32/55),总阳性表达率为94.55%(52/55),两蛋白双阳性率为40.00%(22/55),两蛋白均阴性表达为3例(5.45%)。18例尖锐湿疣冰冻标本经RT-PCR法检测,HPV6b和11型E7 mRNA阳性表达分别为15例和10例,双阳性表达7例,其阳性表达型别与免疫组化结果完全一致,符合率均为100%。 结论 该自行制备的HPV6b和11型E7蛋白多克隆抗体免疫组化法检测尖锐湿疣皮损,检测结果直观,可以观察到HPV6b和11型感染细胞在病损中的分布位置。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒6 人乳头瘤病毒11 乳头瘤病毒e7蛋白质类
原文传递
人乳头瘤病毒E7蛋白检测在子宫颈意义不明的非典型鳞状细胞患者分流中的意义 被引量:3
4
作者 戴凌 邓伟 《肿瘤研究与临床》 CAS 2020年第5期323-326,共4页
目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E7蛋白检测在子宫颈意义不明的非典型鳞状细胞(ASCUS)患者分流中的意义。方法收集2018年3月至12月就诊于南京中医药大学附属昆山医院液基薄层细胞学(TCT)检查结果为ASCUS的205例患者资料。以细胞免疫化学方法... 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E7蛋白检测在子宫颈意义不明的非典型鳞状细胞(ASCUS)患者分流中的意义。方法收集2018年3月至12月就诊于南京中医药大学附属昆山医院液基薄层细胞学(TCT)检查结果为ASCUS的205例患者资料。以细胞免疫化学方法对TCT检测后剩余标本行子宫颈脱落细胞HPV E7蛋白检测,并行阴道镜检查及子宫颈活组织病理检查,以组织病理学检查结果为金标准,分析HPV E7蛋白细胞学检测诊断子宫颈病变的效能。结果205例患者中,子宫颈活组织病理检查结果为炎症144例(70.24%)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)32例(15.61%)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)29例(14.15%)。炎症、LSIL、HSIL患者子宫颈脱落细胞HPV E7蛋白的阳性率分别为10.42%(15/144)、75.00%(24/32)、86.21%(25/29),差异有统计学意义(χ2=97.940,P<0.01)。HPV E7蛋白诊断ASCUS中子宫颈鳞状上皮内病变的灵敏度和特异度分别为80.33%(49/61)和89.58%(129/144)。结论HPV E7蛋白检测可以较好分流ASCUS患者,减少不必要的阴道镜及活组织检查,及时发现潜在的高级别病变,避免高危患者漏诊。 展开更多
关键词 宫颈疾病 乳头瘤病毒 e7蛋白质类 薄层细胞学检测 意义不明的非典型鳞状细胞 低度鳞状上皮内病变 高度鳞状上皮内病变
原文传递
人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用 被引量:26
5
作者 刘集鸿 何晓清 +4 位作者 张丽科 蒋楠楠 周潇 张育超 谢小妤 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期532-536,共5页
目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA在筛检宫颈癌前病变-子宫颈上皮内瘤变(CIN)2级及以上CIN2+(CINⅡ和CIN11I)病变的应用价值。方法横断面调查设计,标本来源于2011年12月至2013年12月期间惠州市第一人民医院和惠州市第三... 目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA在筛检宫颈癌前病变-子宫颈上皮内瘤变(CIN)2级及以上CIN2+(CINⅡ和CIN11I)病变的应用价值。方法横断面调查设计,标本来源于2011年12月至2013年12月期间惠州市第一人民医院和惠州市第三人民医院妇产科门诊和住院部宫颈疾病疑似患者,采集345例妇女宫颈脱落细胞用支链DNA(b-DNA)技术检测高危HPVE6/E7mRNA,以液基细胞学(thin—prepcytologictest,TCT)和组织病理学结果为参照,对HPVE6/E7mRNA的临床CIN诊断价值进行效能分析。结果(1)与TCT比较:325例HPVE6/E7mRNA阳性率分别为:未见上皮内病变细胞(NILM)21.1%(40/190)、非典型鳞状细胞(ASC)38.5%(15/39)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)76.9%(30/39)、非典型鳞状细胞不能排除高级别上皮内病变(ASC—H)8/10、高度鳞状上皮内病变(HSIL)72.3%(34/47),TCT分级与HPVE6/E7mRNA阳性率呈线性关联(x。=67.654,P〈0.01;r=0.497,P〈0.01);与HPVE6/E7mRNA拷贝数也具有相关性(r=0.511,P〈0.01)。(2)与病理结果比较:164例HPVE6/E7mRNA阳性率分别为NILM27.8%(10/36)、CINI65.9%(29/44)、CIN1180.6%(54/67)、CINⅢ82.4%(14/17),病理分级与HPVE6/E7mRNA阳性率呈线性关联(x。=26.426,P〈0.01;r=0.438,P〈0.01);与HPVE6/E7mRNA拷贝数具有相关性(r=0.543,尸〈0.01)。(3)筛检效能分析:HPVE6/E7mRNA敏感度为84.6%、TCT敏感度为47.7%,联合序贯检测时敏感度为40.0%,特异度为91.1%;受试者工作特征曲线确定的CIN2+(CINn和CINHI)最佳诊断临界点为890.26个拷贝/ml,敏感度为58.5%,特异度为93.7%。结论HPVE6/E7mRNA检测对宫颈病变检出率优于TCT,联合序贯检测时特异度明显提高;采用最佳诊断临界点进行分析时,检出CIN2-4-病变的敏感度和特异度均较高;可能对宫颈癌癌前病变的筛检及风险评估具有一定临床价值。 展开更多
关键词 宫颈上皮内瘤样病变 乳头状瘤病毒科 癌基因蛋白质 病毒性 乳头瘤病毒e7蛋白质类
原文传递
人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在宫颈上皮内瘤变1预后中的预测价值 被引量:3
6
作者 张璐 张永欣 张友忠 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2018年第1期44-50,共7页
目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA检测在宫颈上皮内瘤变(CIN)1患者预后中的预测价值。方法选取2013年7月至2014年10月,于烟台市烟台山医院妇科经阴道镜下宫颈活组织病理学检查,首次确诊为CIN1的107例患者为研究对象。所有受试者均于... 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA检测在宫颈上皮内瘤变(CIN)1患者预后中的预测价值。方法选取2013年7月至2014年10月,于烟台市烟台山医院妇科经阴道镜下宫颈活组织病理学检查,首次确诊为CIN1的107例患者为研究对象。所有受试者均于首次确诊为CIN1前1个月内,同时接受宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)、HPV DNA基因分型及HPV E6/E7mRNA检测;于阴道镜下宫颈活组织病理学检查确诊为CIN1后,对其进行为期2年的随访,每6个月随访1次。随访检查项目包括宫颈TCT、HPV DNA基因分型及HPV E6/E7mRNA检测,并对可疑病变者予以阴道镜下宫颈活组织病理学检查。根据随访结束时受试者的TCT、HPV DNA基因分型、HPV E6/E7mRNA检测结果及阴道镜下宫颈活组织病理学检查结果,将本研究受试者分为转阴组与持续或进展组。采用χ~2检验,对2组受试者的HPV E6/E7 mRNA阳性率进行比较;采用Mann-Whitney U秩和检验,对2组HPV E6/E7mRNA表达水平进行比较;计算3种宫颈病变筛查方法对于预测CIN1预后的敏感度和特异度;绘制HPV E6/E7mRNA表达水平预测CIN1预后的受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(ROA-AUC),根据约登指数最大原则,确定HPV E6/E7mRNA表达水平预测CIN1预后的最佳临界值,同时计算其敏感度和特异度。本研究遵循的程序符合烟台市烟台山医院伦理委员会所制定的标准,获得该伦理委员会批准,并与受试者均签署临床研究知情同意书。结果 (1)根据随访结束时受试者的TCT、HPV DNA基因分型、HPV E6/E7mRNA检测结果及阴道镜下宫颈活组织病理学检查结果,将本研究受试者分为转阴组(n=63,随访结束时,TCT、HPV DNA基因分型及HPV E6/E7mRNA检测结果均为正常,或阴道镜下宫颈活组织病理学检查结果为阴性),持续或进展组(n=44,随访结束时,阴道镜下宫颈活组织病理学检查结果为CIN1及以上)。2组患者的年龄等一般临床资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)持续或进展组受试者确诊为CIN1时的HPV E6/E7 mRNA阳性率及其中位表达水平分别为61.9%(39/63)和3 738.4copy/mL,转阴组分别为81.8%(36/44)和583.5copy/mL,持续或进展组HPV E6/E7mRNA阳性率及其中位表达水平均显著高于转阴组,并且差异均有统计学意义(χ~2=4.901,P=0.027;U=821.000,P<0.001)。(3)HPV-16/18阳性患者CIN持续或进展率为50.8%(31/61),显著高于HPV-16/18阴性者的28.3%(13/46),并且差异有统计学意义(χ~2=5.512,P=0.019)。HPV E6/E7mRNA阳性患者CIN持续或进展率为48.0%(36/75),显著高于HPV E6/E7 mRNA阴性者的25.0%(8/32),并且差异亦有统计学意义(χ~2=4.901,P=0.027)。TCT、HPV DNA基因分型及HPV E6/E7mRNA定性检测对于预测CIN1患者预后的敏感度分别为50.0%、70.5%、81.8%,特异度分别为66.7%、52.4%、38.1%。(4)HPV E6/E7 mRNA表达水平预测CIN1患者预后的ROC曲线分析结果显示,HPV E6/E7mRNA表达水平预测CIN1持续或进展的ROC-AUC为0.704(95%CI:0.601~0.806,P<0.001),HPV E6/E7mRNA表达水平预测CIN持续或进展的最佳临界值为2 724.0copy/mL,此时其预测CIN1持续或进展的敏感度为54.5%,特异度为81.0%。结论 HPV E6/E7mRNA定性检测结果对于预测CIN1患者预后的敏感度较高,而其定量检测结果对于预测CIN1患者预后的特异度较高。HPV E6/E7mRNA检测可能对CIN1患者预后的预测具有一定临床价值。 展开更多
关键词 宫颈上皮内瘤样病变 人乳头瘤病毒 乳头瘤病毒e7蛋白质类 基因分型 预后 女(雌)性
原文传递
慢病毒介导的靶向沉默HPV16 E7-shRNA对SiHa细胞DNA甲基转移酶表达的影响 被引量:1
7
作者 杨佳 李黎明 +4 位作者 许翠 龙嘉 王尧 杨雪源 蒋明军 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期81-85,共5页
的 探讨慢病毒携带的靶向人乳头瘤病毒16(HPV16)E7基因的短发夹干扰RNA(shRNA)对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞中4种甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L)表达水平的影响。方法 构建HPV16 E7基因靶序列的shRNA重组质粒,用BLOCK-... 的 探讨慢病毒携带的靶向人乳头瘤病毒16(HPV16)E7基因的短发夹干扰RNA(shRNA)对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞中4种甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L)表达水平的影响。方法 构建HPV16 E7基因靶序列的shRNA重组质粒,用BLOCK-iT^TM Lentiviral RNAi Expression System试剂盒进行慢病毒包装,分别转染293T细胞48、72 h后收集病毒上清液。分别用含靶向HPV16 E7-shRNA重组质粒的病毒上清液与完全培养基(1∶1)的混合液(shRNA组)、含空白质粒(即不含靶向HPV16 E7-shRNA序列)的病毒上清液与完全培养基(1∶1)的混合液(阴性对照组)、完全培养基(空白对照组)培养SiHa细胞。感染0、48、96 h后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测3组SiHa细胞中HPV16 E7和4种甲基转移酶mRNA的表达,Western印迹检测4种甲基转移酶的蛋白表达。结果 感染0 h时,shRNA组、阴性对照组、空白对照组SiHa细胞HPV16 E7、DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(均P 〉 0.05);感染48、96 h时,3组细胞间HPV16 E7和4种DNMT mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(均P 〈 0.05)。shRNA组HPV16 E7、DNMT1、DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L mRNA表达水平在48 h时的沉默效率分别为71.13%、50.53%、13.72%、46.27%和17.92%,96 h时分别为83.50%、74.2%、47.8%、64.7%和48.9%;而阴性对照组和空白对照组各时间点表达水平差异无统计学意义(均P 〉 0.05)。慢病毒感染48、96 h时,3组细胞间上述4种DNMT蛋白表达量差异有统计学意义(均P 〈 0.01)。shRNA组4种DNMT蛋白表达水平随感染时间的延长而逐渐下降,感染48 h时DNMT1、DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L蛋白表达抑制率分别为84%、37.2%、59.8%、49.3%,96 h时分别为73.1%、68.7%,55.5%、65.5%。结论 靶向沉默HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞E7基因能够干扰DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L mRNA及蛋白的表达。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 乳头瘤病毒e7蛋白质类 RNA 小分子干扰 甲基转移酶 细胞系 肿瘤
原文传递
人IFNα-2b对HPV11-E7 DNA疫苗的免疫佐剂效应
8
作者 相文忠 王飞 +7 位作者 康健 王群 张蕙 张永臣 王勇 苏川 张兆松 毕志刚 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期625-627,共3页
目的探讨人IFNα-2b对HPV11-E7DNA疫苗的免疫佐剂效应。方法将28只BALB/c小鼠随机分为4组,每组7只。融合基因组pcDNA3.1(+)-IFNα-2b—HPV11-E7组,分别肌内注射。初次免疫后2周以同样方法和相同剂量加强免疫,2次免疫后再以同样... 目的探讨人IFNα-2b对HPV11-E7DNA疫苗的免疫佐剂效应。方法将28只BALB/c小鼠随机分为4组,每组7只。融合基因组pcDNA3.1(+)-IFNα-2b—HPV11-E7组,分别肌内注射。初次免疫后2周以同样方法和相同剂量加强免疫,2次免疫后再以同样方法和相同剂量加强免疫。于6周后剖杀BALB/c小鼠,取脾并分离脾淋巴细胞,进行细胞培养并刺激单个核细胞产生细胞因子,用流式细胞仪检测Th1、Th2细胞因子比例。结果融合基因组pcDNA3.1(+)-IFNα-2b—HPV11-E7组的IFN-γ水平明显高于pcDNA3.1(+)-HPV11-E7组,差异具有统计学意义(P〈0.001);融合基因组与pcDNA3.1(+)-HPV11-E7组的IFN-γ水平明显高于对照组PBS组及空载质粒pcDNA3.1(+)组,差异有统计学意义(P〈0.001);两对照组之间的IFN-γ水平差异无统计学意义(P〉0.05)。各组之间的IL-4及IL-10水平差异无统计学意义(P〉0.05)。结论人IFNα-2b能明显加强HPV11-E7的免疫原性,提高免疫小鼠的T淋巴细胞免疫能力,IFNα-2b以增强Th1型应答为主,对Th2型应答无明显影响。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒 乳头瘤病毒e7蛋白质类 干扰素Α-2B
原文传递
温热对HPV-6/11型早期基因E6和E7表达的影响
9
作者 祝立丽 高兴华 +5 位作者 李晓东 马远平 王雅坤 王晓琴 齐瑞群 陈洪铎 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期305-307,共3页
目的探讨不同温热条件对HPV感染皮损中E6/E7基因表达的影响。方法采用PCR法确定6例尖锐湿疣标本HPV型别。利用37℃,42℃,45qc不同的温热条件处理置于培养液中的离体尖锐湿疣皮损,采用实时定量PCR法检测HPV-6/11型早期基因E6/E7mRN... 目的探讨不同温热条件对HPV感染皮损中E6/E7基因表达的影响。方法采用PCR法确定6例尖锐湿疣标本HPV型别。利用37℃,42℃,45qc不同的温热条件处理置于培养液中的离体尖锐湿疣皮损,采用实时定量PCR法检测HPV-6/11型早期基因E6/E7mRNA的表达水平。结果6例标本中,各有1例分别感染HPV-6、HPV-11,4例同时感染HPV-6和HPV-11。E6、E7 mRNA的表达水平均随温度升高而逐渐减少。HPV-6 E6 mRNA的相对表达量分别为37℃(1.00±0.00),42℃(0.61±0.17),45℃(0.27±0.15);HPV-6 E7 mRNA的相对表达量分别为37℃(1.00±0.00),42℃(0.56±0.21),45℃(0.16±0.11);HPV-11 E6 mRNA的相对表达量分别为37℃(1.00±0.00),42℃(0.60±0.22),45℃(0.16±0.08);HPV-11 E7 mRNA相对表达量分别为37℃(1.00±0.00),42℃(0.55±0.15),45℃(0.24±0.06)。组间比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论温热对HPV-6/11型E6和E7基因表达的抑制作用可能是感染消退的机制之一。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒6 人乳头瘤病毒11 发热 乳头瘤病毒e7蛋白质类
原文传递
HPV16E7靶向小干扰RNA对SiHa细胞增殖凋亡及6种抑癌基因的影响 被引量:1
10
作者 龙嘉 李黎明 +2 位作者 许翠 杨佳 蒋明军 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期717-721,共5页
目的:探讨HPV16E7在SiHa细胞株中对抑癌基因(MT1G、NMES1、RRAD、SFRP1、SPARC、TFPI2)的表达及细胞增殖能力和凋亡水平的影响。方法 SiHa细胞转染E7SiRNA 48 h后,qPCR检测E7及6种抑癌基因mRNA水平变化,CCK-8检测细胞增殖能力改变... 目的:探讨HPV16E7在SiHa细胞株中对抑癌基因(MT1G、NMES1、RRAD、SFRP1、SPARC、TFPI2)的表达及细胞增殖能力和凋亡水平的影响。方法 SiHa细胞转染E7SiRNA 48 h后,qPCR检测E7及6种抑癌基因mRNA水平变化,CCK-8检测细胞增殖能力改变,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果 SiHa细胞转染后48 h,qPCR结果显示实验组E7 mRNA显著降低(0.25±0.036,P〈0.05);6种抑癌基因的mRNA水平均显著增加(MT1G 1.403±0.190、NMES11.720±0.060、RRAD 1.390±0.160、SFRP11.493±0.120、SPARC 2.157±0.144、TFPI22.060±0.122,P〈0.05)。细胞增殖结果显示,与阴性对照组及空白组比较,实验组细胞增殖能力显著降低(0.554±0.130,P〈0.05),阴性对照组和空白组之间差异无统计学意义(P〉0.05)。细胞凋亡结果提示,实验组细胞凋亡细胞频率为9.222%较阴性对照组(0.246%)及空白组(0.123%)明显增加(P〈0.05),空白组与阴性对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 HPV16导致细胞恶性转化过程中,E7可能通过抑制(MT1G、NMES1、RRAD、SFRP1、SPAR、TFPI2)6种抑癌基因的表达参与作用。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 乳头瘤病毒e7蛋白质类 细胞增殖 细胞凋亡 SiRNA 抑癌基因
原文传递
流式细胞术检测人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA对宫颈病变的诊断价值 被引量:7
11
作者 郭慧敏 朱镭 +5 位作者 高景波 白丽霞 孙志勇 张晋丽 杨波 郝超群 《中国综合临床》 2019年第6期490-494,共5页
目的探讨流式细胞术检测人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)E6/E7 mRNA对于宫颈病变的诊断价值。方法选取2017年1月至2018年9月山西省妇幼保健院妇产科就诊疑似宫颈病变且行阴道镜下宫颈活检组织检查的妇女119例作为观察对象。应... 目的探讨流式细胞术检测人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)E6/E7 mRNA对于宫颈病变的诊断价值。方法选取2017年1月至2018年9月山西省妇幼保健院妇产科就诊疑似宫颈病变且行阴道镜下宫颈活检组织检查的妇女119例作为观察对象。应用流式细胞术对妇女宫颈脱落细胞行HPV E6/E7 mRNA检测,应用杂交捕获二代法(digene hybrid capture 2,HC2)检测HPV DNA,阴道镜下宫颈活组织进行病理学分型。结果119例中31.09%(37/119)HPV E6/E7 mRNA阳性,57.14%(68/119)HPV DNA检测阳性。HPV E6/E7 mRNA阳性率在子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)2+组77.78%(28/36),与CIN1组20.00%(4/20)比较差异有统计学意义(χ^2=15.246,P<0.01),与未见上皮内病变细胞(NILM)组7.94%(5/63)比较差异有统计学意义(χ^2=50.286,P<0.01)。在NILM组HPV E6/E7 mRNA阳性率7.94%(5/63)与HPV DNA阳性率30.16%(19/63)比较差异有统计学意义(χ^2=10.088,P=0.001),在CIN1组HPV E6/E7 mRNA阳性率20.00%(4/20)与HPV DNA阳性率85.00%(17/20)比较差异有统计学意义(χ^2=14.436,P<0.001)。流式细胞术检测HPV E6/E7 mRNA诊断宫颈病变的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为75.00%、89.16%、72.72%、90.24%;HC2方法检测HPV DNA诊断宫颈病变的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为88.89%、56.63%、47.06%、92.16%。结论流式细胞术检测HPV E6/E7 mRNA诊断宫颈病变特异度和阳性预测值优于HC2检测HPV DNA法。HPV E6/E7 mRNA检测对宫颈癌癌前病变筛查具有潜在临床价值。 展开更多
关键词 宫颈上皮内瘤样病变 流式细胞术 乳头状瘤病毒科 乳头瘤病毒e7蛋白质类
原文传递
HPV16E7多肽体外诱生抗原特异性细胞毒性T细胞表型及功能的研究
12
作者 钱起丰 李芳谷 李青 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期342-345,共4页
目的 探讨高致癌性HPV16E7病毒抗原肽体外诱生HLA-A2阳性正常人外周血抗原特异性CD8+细胞毒性T细胞(CTL)的表型及功能状态.方法 以HPV16E711-20合成多肽、重组人IL-7、IL-2体外刺激26例HLA-A2阳性正常人外周血T细胞,用HLA-A*0201限... 目的 探讨高致癌性HPV16E7病毒抗原肽体外诱生HLA-A2阳性正常人外周血抗原特异性CD8+细胞毒性T细胞(CTL)的表型及功能状态.方法 以HPV16E711-20合成多肽、重组人IL-7、IL-2体外刺激26例HLA-A2阳性正常人外周血T细胞,用HLA-A*0201限制性表位肽/YMLDLQPETT五聚体技术,结合流式细胞仪对抗原特异性CTL进行频率、表型[CD45RA+CD27-效应性CTL、CD45RA-CD27-效应性记忆CTL(TEM)、CD45RA-CD27+中枢性记忆CTL(TCM)、CD45+CD27+初始性CTL]及功能(穿孔素、颗粒酶B、FasL)分析,并以无关肽HBVcoxe18-27作为阴性对照.结果 病毒多肽体外刺激T细胞7 d后,抗原特异性CD8+CTL数为(0.73±0.33)%,比未刺激组的(0.02±0.03)%明显增多(P<0.01).进一步分析,在抗原特异性CTL中,效应性CTL、TEM、TCM及初始性CTL百分比分别为(26.07±13.46)%、(7.97±7.11)%、(33.25±19.68)%及(32.73±13.89)%,均比未刺激组的(0.02±0.03)%、(0.02±0.03)%、(0.02±0.03)%及(0.02±0.05)%明显增多,P值均<0.01.HPV16E711-20表位特异性CTL分泌穿孔素、颗粒酶B、Fas-L的水平分别为(47.01±18.69)%、(80.53±13.32)%及(26.48±7.81)%,均比未刺激组的(0.38±0.55)%、(0.34±0.22)%及(0.16±0.16)%明显增多,P值均<0.01.结论 HPV16E711-20多肽诱导CD8+T细胞克隆扩增,产生抗原特异性CD8+CTL,分泌毒性细胞因子,通过不同机制特异性杀伤病毒感染的靶细胞,在抗病毒免疫应答中发挥作用. 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 乳头瘤病毒e7蛋白质类 T淋巴细胞 细胞毒性 表型
原文传递
血清miRNA-9-5p、miRNA-21-5p和miRNA-3923对子宫颈癌的诊断价值 被引量:2
13
作者 王沛 王福花 +2 位作者 王晓娟 王晓燕 王春艳 《肿瘤研究与临床》 CAS 2021年第10期725-730,共6页
目的探讨血清miRNA-9-5p(miR-9-5p)、miRNA-21-5p(miR-21-5p)和miRNA-3923(miR-3923)对子宫颈癌的诊断价值。方法收集2016年7月至2018年6月山西省肿瘤医院收治的100例子宫颈癌患者(子宫颈癌组)和同期100名健康体检者(健康对照组)资料。... 目的探讨血清miRNA-9-5p(miR-9-5p)、miRNA-21-5p(miR-21-5p)和miRNA-3923(miR-3923)对子宫颈癌的诊断价值。方法收集2016年7月至2018年6月山西省肿瘤医院收治的100例子宫颈癌患者(子宫颈癌组)和同期100名健康体检者(健康对照组)资料。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)结合探针杂交检测子宫颈癌患者石蜡包埋组织和健康对照者子宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA的表达水平, 以Ct值≤40个循环为HPV E6/E7阳性。取3例子宫颈癌患者与3名健康对照者血清样本, 采用微RNA(miRNA)Array检测384个miRNA基因表达量, 并进行差异miRNA表达筛选及聚类分析, 采用qRT-PCR对筛选的miRNA进行验证。绘制最终筛选的各miRNA及HPV E6/E7单独或联合诊断子宫颈癌的受试者工作特征(ROC)曲线, 比较诊断子宫颈癌效能。结果 100例子宫颈癌患者石蜡包埋组织中, HPV E6/E7阳性65例(65%);100名健康对照者子宫颈脱落细胞HPV E6/E7均为阴性。3例子宫颈癌患者与3名健康对照者血清样本中发现248个差异表达的miRNA, 经聚类分析鉴定出前16个调控异常miRNA。经qRT-PCR验证, 确认在健康对照组和子宫颈癌组中miR-9-5p、miR-21-5p和miR-3923表达水平差异均有统计学意义(均P<0.01), 选取三者用于后续子宫颈癌的诊断。与健康对照组比较, HPV E6/E7阳性子宫颈癌组miR-9-5p、miR-21-5p和miR-3923表达水平均增高(均P<0.05), HPV E6/E7阴性子宫颈癌组miR-21-5p和miR-3923表达水平均增高(P=0.008和P=0.038);HPV E6/E7阳性组3个miRNA表达水平均高于HPV E6/E7阴性组(均P<0.05)。经ROC曲线分析, miR-9-5p、miR-21-5p和miR-3923单独诊断子宫颈癌时, miR-3923的曲线下面积(AUC)最大(0.843), 特异度也最高(82%, 截断值为2.88);miR-21-5p的灵敏度最高(85%, 截断值为4.08);3个miRNA联合诊断子宫颈癌的AUC(0.924)和灵敏度、特异度(85%、94%, 截断值为4.04)均高于单一指标。HPV E6/E7单独诊断的AUC为0.766, miR-9-5p、miR-21-5p、miR-3923分别联合HPV E6/E7的诊断效能进一步增高, AUC分别为0.914、0.848和0.932;四者联合的诊断效能最高, AUC为0.942。结论 miR-9-5p、miR-21-5p和miR-3923可能有助于子宫颈癌诊断。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 微RNAS 乳头瘤病毒e6蛋白质 乳头瘤病毒e7蛋白质类 诊断
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部