EAE大鼠模型的构建及外周血淋巴细胞中多种炎症因子表达的意义

目的构建实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型,探讨炎症因子在EAE发病过程中的作用及意义。方法采用髓鞘碱性蛋白加完全弗氏佐剂,按体质量多点注入大鼠背部皮下来构建EAE模型,苏木素-伊红(HE)染色观察不同发病阶段EAE大鼠模型脊髓组织形态学改变,同时利用逆转录PCR(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测不同发病阶段大鼠外周血淋巴细胞中IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α和IFN-γ的mRNA和蛋白表达。结果成功建立了EAE大鼠模型,随着EAE大鼠病情的加重,实验组IL-1、IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α和IFN-γ的mRNA量和蛋白表达量较对照组逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05),IL-4和IL-10的mRNA量和蛋白表达量逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05),当大鼠症状缓解后两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论通过髓鞘碱性蛋白加完全弗氏佐剂,按体质量多点注入大鼠背部皮下的方法能很好地构建EAE模型,同时外周血淋巴细胞中多种炎症因子的表达与EAE大鼠模型的发病密切相关。

实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠丛上细胞扫描电镜观察

目的:观察实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠丛上细胞的变化。方法:以豚鼠脊髓匀浆和完全福氏佐剂制备急性EAE大鼠模型,以扫描电镜观察各实验组丛上细胞的变化。结果:正常对照组丛上细胞较少,胞体扁平或长杆状,伪足体积大、数目少,放射状分布于胞体周围。EAE发病前组丛上细胞较正常对照组增多,胞体较丰满,伪足多且分布规律,丝状伪足和扁铲样结构分别位于胞体的两侧。EAE发病组丛上细胞显著增多,胞体呈球形,表面可见泡球样结构,伪足以丝状为主,数量少且分布不规律。结论:EAE发病前就有循环中的免疫细胞从脉络丛进入CSF,丛上细胞以巨噬细胞为主,可能与EAE的脑室周病变有关。