CD14基因启动子区-159C/T多态性在H型高血压患者中的分布

目的:调查H型高血压患者中CD14基因启动子区-159C/T基因多态性分布情况。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术对H型高血压组、普通高血压组和对照组的CD14基因启动子区-159C/T多态性分布进行研究,同时检测血清同型半胱氨酸(HCY)及其他生化指标。结果:H型高血压组CC型、CT型、TT型分布频率分别为10%、43%、47%,C和T等位基因频率分别为31.5%、68.5%;普通高血压组CC型、CT型、TT型分布频率分别为10%、50%、40%,C和T等位基因频率分别为35%、65%;对照组CC型、CT型、TT型分布频率分别为13%、53%、34%,C和T等位基因频率分别为39.5%、60.5%,三组基因分型和等位基因频率均无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,H型高血压组、普通高血压组高密度脂蛋白(HDL-C)水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:H型高血压患者CD14基因启动子区-159C/T多态性分布无明显差异。

HLA-G14bp插入/缺失多态性与1型糖尿病的相关性研究

目的探讨湖北汉族糖尿病患者HLA-G14bp插入/缺失多态性与1型糖尿病易感性的相关性。方法采用聚合酶链反应-序列特异引物(PCR-SSP)方法,对湖北地区70例汉族1型糖尿病患者和100例正常对照者进行HLA-G14bp基因的插入/缺失位点检测,并对各基因型与临床症状的相关性进行分析。结果HLA-G14bp插入/缺失多态性在健康者和1型糖尿病患者均显示Hardy-Weinberg平衡;1型糖尿病患者与健康对照组比较,HLA-G14bp+/+、+/-及-/-基因型存在显著性差异(P<0.05);HLA-G14bp的插入/缺失位点在不同的病程中无显著性差异(P>0.05)。结论在湖北地区汉族人群中,HLA-G14bp插入/缺失多态性可能与1型糖尿病疾病易感性相关。

GTS14型与GTS12型探空仪平行观测差异性分析

采用分类汇总与正态统计方法对比GTS14型与GTS12型探空仪测量的海拔(气压)、温度、湿度的差异性。结果表明,GTS14型探空仪终止气压比GTS12型探空仪高1.5 hPa;GTS14型探空仪测量的海拔略高,分布较分散,反推其测量气压较低;GTS14型探空仪温度略高,分布较集中;GTS14型探空仪湿度在对流层≥500 hPa低层略低且集中,高层略高。整体上,二者的偏差属于同一级别,具有良好的一致性。GTS14型探空仪能替代GTS12型探空仪在业务上应用。

浙江省首例14型猪链球菌人源分离株鉴定及分子特征分析

目的对浙江省首例14型猪链球菌菌株进行综合鉴定与分子分型特征研究。方法对目标菌株进行镜检、生化、血清学玻片凝集试验、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI TOF MS)鉴定,同时利用聚合酶链(PCR)技术检测该菌株链球菌属(tuf)、猪链球菌种(16S rRNA)、猪链球菌血清型基因以及毒力基因,另采用脉冲场凝胶电泳技术(pulsed-fieId gel electrophoresis,PFGE)、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)以及最小核心基因组群(minimum core genome groups,MCG群)方法分别对菌株进行分子分型检测。结果传统细菌学方法和质谱鉴定技术以及核酸检测均将这株人源分离株鉴定为14型猪链球菌;25种毒力基因检测,除salKR与89K PAI基因检测为阴性,其它均为阳性;分子分型检测该菌株为高致病性ST1及MCG Group1型,PFGE检测结果表明此菌株同浙江省主要流行毒力株在同一主分支,相似性达94.95%。结论本次检出14型人源猪链球菌强毒力株,属高致病基因型ST1/MCG Group1型菌株,属浙江省首次报道,今后应密切关注省内该型别菌株流行趋势。

副猪嗜血杆菌14型的分离鉴定和药敏试验

为了明确河南省某规模化猪场断奶保育猪副猪嗜血杆菌感染情况,从濒死期病猪的肺脏、心血样品中分离获得1株细菌,通过对该株细菌分离鉴定、血清型分型、致病性试验、毒力基因检测和药敏试验等一系列试验,证实该株细菌为副猪嗜血杆菌14型,该菌株携带有capd、vta1、vta2、vta3、wza、hhdA、hhdB、ompP2、nanH、cdtA、cdtB、cdtC、espP等13种主要毒力基因;该菌株对保育仔猪表现出较强的致病性,对头孢他啶、氟苯尼考、头孢噻呋、氨苄西林、强力霉素、土霉素、氧氟沙星敏感,对青霉素、阿米卡星、诺氟沙星、复方新诺明耐药。研究结果可为副猪嗜血杆菌血清14型流行病学研究提供参考。

沃金黑牛FGF14基因单倍型与生长性状的相关性分析

研究旨在探究沃金黑牛成纤维细胞生长因子14(FGF14)基因第4外显子多态位点与生长性状的相关性。实验采集195头沃金黑牛(6~24月龄)血液,提取DNA,通过PCR测序技术检测沃金黑牛FGF14基因存在的突变位点,采用Haploview软件分析SNPs位点的连锁不平衡程度并构建单倍型,用SPSS 21.0软件分析不同单倍型与生长性状的相关性。结果显示:沃金黑牛FGF14基因第4外显子共检测到3个SNPs位点,共构建5种单倍型和8种双倍型,仅S1、S32个SNPs位点为强连锁不平衡关系;χ^(2)检验结果显示,3个SNPs位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);群体遗传参数分析可知,3个SNPs位点纯合度较高,多态信息含量(PIC)表现为第1、3处SNPs位点为中度多态(0.25<PIC<0.5),第2处SNP位点为低度多态(PIC<0.25)。关联性分析表明:在不同月龄中H2H3双倍型个体体重、体高、十字部高、体斜长、腹围、管围、背膘厚均显著或极显著大于H1H1、H1H2双倍型个体。研究表明FGF14基因可能是影响沃金黑牛生长性状的候选基因,可作为沃金黑牛遗传选育的分子标记提高选育效率。

幽门螺杆菌上调ADAMTS14激活Hippo信号通路对胃癌进展的影响及其机制

目的研究Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶14基因(ADAMTS14)对幽门螺杆菌(Hp)感染相关胃癌进展的影响及其机制,探讨ADAMTS14作为胃癌生物治疗新靶点的可能性。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)及高通量基因表达数据库(GEO)分析胃癌组织及Hp阳性胃黏膜中差异表达的基因,筛选可能的靶点;对于选定的靶点ADAMTS14,分析其在胃癌及Hp阳性胃黏膜中的表达模式;对胃癌中与ADAMTS14共表达的基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库分析;利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析ADAMTS14高低表达与胃癌患者预后的相关性;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组化方法分析30例胃癌患者的ADAMTS14表达水平,采用χ2检验分析ADAMTS14蛋白表达与临床病理特征之间的关系;利用GEO数据库分析Hp感染与ADAMTS14表达的关系,并通过细胞系感染实验验证;利用小干扰RNA沉默胃癌细胞系NCI-N87中ADAMTS14的表达,分析其对胃癌细胞功能的影响;利用RT-qPCR和Western blotting分析敲低ADAMTS14对Hippo信号通路下游靶基因表达的影响。结果通过分析TCGA和GEO数据库,共得到16个与Hp感染及胃癌密切相关的基因;在TCGA数据库中,ADAMTS14在胃癌组织中的表达水平高于健康人胃黏膜(P<0.001);RT-qPCR及免疫组化结果也显示,ADAMTS14在胃癌组织中的表达水平高于癌旁组织(P<0.01);生存分析显示ADAMTS14高表达患者的预后不良(P<0.001);GSE60427的数据显示ADAMTS14在Hp感染的胃黏膜及细胞系中表达上调(P<0.001);Hp P12菌株感染NCI-N87细胞后ADAMTS14表达高于未感染组(P<0.0001);敲低胃癌细胞系NCI-N87中ADAMTS14明显抑制了胃癌细胞的增殖及迁移(P<0.05),以及Hippo信号通路靶基因BMP7、BMPR2、FZD4、PARD3、SAV1的表达(P<0.05)。结论ADAMTS14在Hp感染的胃黏膜及胃癌组织中高表达,可能通过调控Hippo信号通路促进胃癌进展,有望作为Hp感染相关胃癌的新标志物及治疗靶点。

基于重组酶介导等温扩增技术建立人腺病毒14型快速检测方法及初步应用评价

目的 基于重组酶介导的等温扩增技术(recombinase-aided amplification, RAA)开发一种快速、准确的人腺病毒14型检测方法。方法 根据人腺病素14型(human adenovirus serotype 14, HAdV-14)的Hexon基因序列,使用Primer 6.0软件设计特异性引物及探针,并构建阳性质粒标准品,优化反应条件,建立一种快速RAA检测方法,并对该方法的灵敏度及特异度进行评价。收集2017~2022年中国人民解放军联勤保障部队第九〇三医院发热性呼吸综合征患者的咽拭子50份,应用建立的实时荧光RAA测定法进行检测,结果与实时荧光PCR检测结果进行比较。结果 最终确定了最佳引物探针组合为HAdV14-F1-4,HAdV14-R1和HAdV14-P;经反应条件优化,40℃进行RAA扩增效果最佳;该方法灵敏度为10~1 copies/μl,当质粒标准品浓度为10^(4),10^(3),10^(2)和10^(1) copies/μl时,批内变异系数均<5%;50例临床样本中HAdV-14的检测结果与实时荧光PCR一致。结论 建立了一种基于RAA技术的HAdV-14快速检测方法,可以在仅有简单恒温设备的条件下检测HAdV-14。

未足月胎膜早破并发组织型绒毛膜羊膜炎孕妇血液SII与Presepsin水平及其诊断价值分析

目的探讨系统性免疫炎症指数(systemic immune-inflammatory index,SII)与可溶性白细胞分化抗原14亚型(Presepsin)对未足月胎膜早破(premature rupture of membranes,PROM)孕妇并发组织型绒毛膜羊膜炎(histologicalchorioamnionitis,HCA)的诊断价值。方法选取2021年6月~2023年6月宿迁市第一人民医院收治的未足月PROM孕妇146例,根据是否并发HCA将患者分为非HCA组(n=44)和HCA组(n=102),另根据HCA的组织学分期将未足月PROM并发HCA患者分为Ⅰ期组(n=39),Ⅱ期组(n=33),Ⅲ期组(n=30)。检测所有研究对象的SII,Presepsin,C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)水平,采用Pearson相关系数分析指标间的相关性,受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析SII,Presepsin等指标对未足月PROM孕妇并发HCA的诊断价值。结果与非HCA组比较,HCA组的SII(638.96±168.12 vs 421.65±153.84),血清Presepsin(608.62±116.97 ng/L vs 453.84±102.15 ng/L),CRP(7.01±3.02 mg/L vs 4.35±1.86 mg/L),PCT(0.13±0.05μg/L vs 0.08±0.03μg/L)升高,差异具有统计学意义(t=7.347,7.611,5.410,6.165,均P<0.05)。Ⅰ期组、Ⅱ期组、Ⅲ期组的SII以及血清Presepsin,CRP,PCT水平依次升高,差异具有统计学意义(F=25.794,54.230,9.459,16.774,均P<0.05)。经Pearson分析显示,HCA组孕妇SII与Presepsin,CRP,PCT呈正相关(r=0.485,0.312,0.353,均P<0.05),Presepsin与CRP,PCT呈正相关(r=0.472,0.421,P<0.05)。经ROC曲线分析显示,SII,Presepsin诊断未足月PROM孕妇并发HCA的曲线下面积(95%置信区间)分别为0.859(95%CI:0.794~0.923),0.877(95%CI:0.820~0.934),明显大于CRP(0.773,95%CI:0.699~0.847)和PCT(0.774,95%CI:0.698~0.849)。结论未足月PROM并发HCA孕妇的SII,Presepsin水平升高,且两指标的水平与HCA的组织学分期密切相关,SII,Presepsin对未足月PROM孕妇并发HCA有较高的诊断价值。

血清sTREM-1、suPAR和sCD14水平对妊娠期肾病综合征妊娠结局不良的预测效能

目的观察血清可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)和可溶性CD14(sCD14)水平对妊娠期肾病综合征(NSP)患者妊娠结局不良的预测效能。方法选择2020年1月至2022年12月在该院诊断为NSP的患者98例作为NSP组,根据NSP患者24 h尿蛋白定量将其分为轻度蛋白尿组(32例)、中度蛋白尿组(22例)和重度蛋白尿组(44例)。另选择同期在本院定期产检的健康孕妇45例作为正常妊娠组。观察各组血清sTREM-1、suPAR和sCD14水平。采用二元Logistic回归分析影响妊娠结局不良的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sTREM-1、suPAR和sCD14水平对妊娠结局不良的诊断效能。结果NSP组血清sTREM-1、suPAR和sCD14水平均明显高于正常妊娠组(P<0.05);重度蛋白尿组血清sTREM-1、suPAR和sCD14水平均明显高于中度蛋白尿组和轻度蛋白尿组,而中度蛋白尿组血清sTREM-1、suPAR和sCD14水平均明显高于轻度蛋白尿组,差异均有统计学意义(P<0.05)。根据妊娠结局的不同,将NSP患者分为妊娠结局不良组(25例)和妊娠结局良好组(73例)。妊娠结局不良组尿蛋白、同型半胱氨酸、sTREM-1、suPAR和sCD14水平均明显高于妊娠结局良好组(P<0.05)。二元Logistic回归分析结果发现血清sTREM-1、suPAR和sCD14水平升高是发生妊娠结局不良的危险因素(P<0.05)。血清sTREM-1、suPAR和sCD14水平联合检测NSP患者发生妊娠结局不良的灵敏度为88.0%,特异度为95.9%,曲线下面积(AUC)为0.924,明显高于sTREM-1(z=2.039,P=0.041)、suPAR(z=2.143,P=0.032)和sCD14(z=2.417,P=0.016)单独检测,但血清sTREM-1、suPAR和sCD14单独检测的AUC比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清sTREM-1、suPAR和sCD14可以作为评估NSP严重程度的检测指标,且三项联合检测有助于提高NSP患者发生妊娠结局不良的诊断效能。

任务型教学案例研究--以蓝牙音响Mutisim 仿真为例

本文以蓝牙音响的Multisim仿真为实践载体,深入探索了任务型教学法在电子工程教育领域的创新应用与成效。利用Multisim 14软件平台,围绕双声道蓝牙音响灯光闪烁电路的工作原理,精心策划了涵盖仿真模拟、实操训练及成品展示的一体化教学流程,生动展现了任务型教学的实施脉络。此过程中,学生不仅深化了对“跑马灯”电路原理的理解,更在自主学习、动手实践及团队协作方面实现了显著提升。这一教学模式的成功实践,不仅为电子工程教育注入了新的活力,也为后续课程改革及任务型教学设计积累了宝贵的实战经验。

乙型脑炎减毒活疫苗病毒SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种后的生物学和分子生物学特性

目的研究乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后的生物学和分子生物学特性,进一步评价该株病毒的稳定性和安全性。方法将乙型脑炎病毒减毒活疫苗SA14-14-2株胸腔接种的三带喙库蚊研磨,离心收集上清液,接种于BHK21细胞中培养,得到SA14-14-2M1C1病毒液。应用空斑形成单位法测定病毒滴度,再进行小鼠脑内毒力测定和乳鼠脑内回传后毒力返祖试验。提取病毒RNA,RT-PCR扩增E基因片段,测序后与SA14-14-2原株的E基因序列进行比较分析。结果SA14-14-2M1C1病毒液滴度达1.4×107PFU/ml,小鼠脑内毒力测定结果无小鼠发病死亡,乳鼠脑内传代对小鼠的脑内致病力很低,毒力为1.9LgLD50/0.03ml,小于《中国药典》规定的3.0LgLD50,且皮下注射未见小鼠发病死亡。扩增出的E基因片段序列与原株相比较,只有E区1340位一个核苷酸的变化A→G,导致E447位1个氨基酸的改变D(Asp)→G(Gly),此差异位点不是SA14-14-2株发生基因变异的8个位点之一。结论SA14-14-2疫苗株病毒经三带喙库蚊胸腔接种繁殖后,其生物学(弱毒)特性和基因特征(E区8个氨基酸突变)未发生改变,进一步证实了该病毒的稳定性。

猪链球菌14型的分离鉴定及生物学特性研究

为了检测确定2019年5月河南某规模化猪场一栋保育仔猪发病猪群的病原,本研究从送检的发病猪关节液中分离获得1株细菌。通过细菌纯化培养、革兰氏染色、形态学观察及猪链球菌gdh基因PCR扩增,确定该分离菌株为猪链球菌。用猪链球菌分型引物对该菌株进行PCR扩增分型鉴定及软件比对分析,结果表明该分离菌株为猪链球菌14型,与猪链球菌JS14株(GenBank登录号:CP002465.1)同源性为100%。毒力基因检测结果表明,该菌株的同时携带有epf、mrp、sly、fbps、orf2毒力基因,属于高致病性菌株。小鼠致病性试验结果也证明该菌株是一株高致病性猪链球菌。药物敏感性试验结果显示,该菌株对β内酰胺类和喹诺酮类药物敏感,对氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类和磺胺类高度耐药,表现出多重耐药现象。对该菌株进行5大类24种耐药基因检测,该菌株同时携带有blaTEM、aadA1、strA、strB、aacC2、aphA1、tet(B)、gyrA、parC、sul2耐药基因。该研究为后续进一步开展猪链球菌14型流行特点和致病机制研究奠定了基础,为猪链球菌14型临床防控提供了理论依据,同时具有重要的公共卫生意义。

密度和追肥时期对大穗型小麦^(14)C-同化作用及其分配的调控效应

本研究结果表明 ,挑旗期叶片 (尤其是旗叶和倒 2叶 )是大穗型品种兰考 90 6最主要的同化器官 ,其同化量占单茎总同化量的 90 %以上 ,而叶鞘的同化量仅占1 0 %以下。密度过大不但抑制14 C 同化速率 ,而且降低14 C 同化物运输分配效率。适当推迟追肥有利于提高单茎同化量和同化物的运输分配效率。

流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株E蛋白基因在原核细胞中的高效表达及其表达产物的抗原性分析

目的 获得JEVE蛋白基因并使其在E coli中高效表达 ,以研究其抗原活性 ,为进一步研制ELISA早期诊断试剂盒奠定基础。方法 根据已发表的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株序列 ,设计一对特异性引物 ,通过RT -PCR扩增出E蛋白基因的cDNA片段 ,并将其克隆入 pET - 32a(+)表达载体中 ,构建重组融合表达载体pET -E ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)后 ,利用IPTG诱导获得高效表达。结果 扩增的E蛋白基因片段长 1113bp ,编码 371个氨基酸残基 ,该基因片段与国内发表的减毒株SA14 - 14 - 2碱基序列同源性为 10 0 %。表达产物分子量约为 6 2kD ,经Westernblotting分析表明表达产物具有较好的抗原性。结论 通过序列分析表明 ,我国的JEVSA - 14 - 14 - 2减毒株未发生基因突变。表达产物的稳定高效表达及其抗原特异性分析为今后ELISA早期诊断试剂盒的研制提供了依据。

0．14THz折叠波导行波管盒型窗设计与制作

研究用于0.14 THz折叠波导行波管的盒形窗结构,采用三维模拟软件HFSS进行计算与优化,设计出基于蓝宝石窗片的盒型窗结构。分析了结构参数对盒形窗电压驻波比的影响,主要结构参数在±0.01 mm范围变化时,盒形窗电压驻波比仍然低于1.2,保证零件加工的可行性。装配完成盒形窗测试结构,冷测结果显示,在0.135 THz^0.145 THz范围内衰减系数为0.7 dB左右,满足整管要求。

拮抗细菌菌株Pseudomonas fluorescens 7-14在水稻植株上的时间、空间定殖型

Pseudomonasfluorescens 7 14 (Pf 7 14 )是一株对水稻纹枯病、稻瘟病和恶苗病有拮抗作用的细菌菌株。在温室条件下 ,在水稻孕穗后期喷雾浓度为 1× 10 10 cfu/mL的菌株Pf7 14悬浮液 ,采用定期取样 ,用稀释平板法回收细菌 ,并通过图形测试和Shapiro Wilk正态测试 ,测定了该菌株在水稻剑叶和茎基部的时间、空间定殖型。结果表明 ,菌株Pf 7 14在稻株上的定殖型随着时间的变化而改变。从定殖的空间上看 ,无论是在剑叶还是在茎基部 ,其定殖型可划分为 3种类型或 3个阶段 ,从最初的正态分布、之后的对数分布 ,发展到后期的不规则分布。对每一种分布型来说 ,菌株Pf 7 14在稻茎基部持续的时间比其在稻剑叶上长。在剑叶上 ,这 3种分布型持续的时间分别是 2h、7d和 10d,而在茎基部分别是 1、2 4d和大于 11d(至收获期 )。从定殖的时间和数量关系上看 ,在剑叶上 ,菌株Pf7 14的平均群体在 2 4h内下降了 90 %以上 ,在 7d内下降了 99% ,在 19d下降到检测不到的水平。而在稻茎基部 ,在 2 4h内下降小于 30 % ,在 7d内下降了大约 6 0 % ,在 35d内 ,部分样品中仍能检测到其群体。这些结果表明菌株Pf 7 14在茎基部比在叶片上更稳定 ,定殖的时间更长 ,这也很可能表明叶部病害 (如稻瘟病 )的生物防治将比茎部病害 (如纹枯病 )

流行性乙型脑炎减毒活疫苗生产毒株(SA_(14)-14-2)的稳定性研究

流行性乙型脑炎病毒弱毒株经原代地鼠肾细胞连续传至17代后,毒株蚀斑形态与低代次毒株相似,均为一致的小斑,直径为1mm士,边缘整齐;高代次毒株对成龄小鼠的神经内和神经外毒力未发现增高现象;乳鼠脑内返传一代和返祖试验均未发现高代次较低代次毒力明显升高;不同抗原性的单克隆抗体在与低代和高代次弱毒株的免疫荧光反应中未发现抗原位点变化。

单纯型大疱性表皮松解症3个家系角蛋白14/角蛋白5基因突变研究

目的:检测单纯型大疱性表皮松解症(EBS)的基因突变情况,探讨EBS的基因型与表型的关系。方法:收集3个EBS家系的临床资料,提取外周血DNA、通过PCR扩增角蛋白KRT14和KRT5基因编码区的全部外显子及其侧翼序列并测序,以表型正常家系成员及50例健康人为正常对照。结果:全部患者均存在KRT14或KRT5基因的错义突变,分别为KRT14的c.1151T>C、c.1207G>T和KRT5的c.1261G>A,在家系中正常人及对照者未发现上述突变。结论:错义突变KRT14的c.1151T>C、c.1207G>T和KRT5的c.1261G>A可能分别为导致该3个家系临床表型的原因。