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鼻咽癌病人血清抗EB病毒特异性DNA多聚酶活性的研究
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作者 马建山 黄迪 +1 位作者 方思明 陈丽珍 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1989年第3期5-9,共5页
本文报道了111例鼻咽癌病人,30例其他癌瘤病人和93例正常人血清抗EB病毒DNA多聚酶抗体的水平。将血清抗酶率≥30%看作是该抗体阳性,血清阳性率分别是:鼻咽癌病人85.6%,其他癌瘤病人6.7%,正常人6.5%,鼻咽癌病人血清抗酶率与病人的病... 本文报道了111例鼻咽癌病人,30例其他癌瘤病人和93例正常人血清抗EB病毒DNA多聚酶抗体的水平。将血清抗酶率≥30%看作是该抗体阳性,血清阳性率分别是:鼻咽癌病人85.6%,其他癌瘤病人6.7%,正常人6.5%,鼻咽癌病人血清抗酶率与病人的病理、分期、病型、年龄及性别无关。检测该抗体可望发展成一种鼻咽癌早期诊断的辅助方法。 本文还探讨了影响检测结果的几个因素,认为用抗酶率表示抗体水平比用抗酶单位更好。 展开更多
关键词 鼻咽癌 eb病毒dna多聚酶
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乙型肝炎病毒DNA多聚酶P结构域研究进展 被引量:5
2
作者 陈国凤 成军 +2 位作者 王琳 张玲霞 李莉 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第2期393-397,共5页
0 引言。乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA病毒属,是一组以侵袭肝脏为主的病毒,主要感染哺乳动物和鸟类.HBV DNA的长度为3.2kb,具有4个开放读码框架(ORF),分别编码HBV的表面抗原蛋白,核心/e抗原蛋白,X蛋白以及HBV DNA多聚酶(HBV DNA... 0 引言。乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA病毒属,是一组以侵袭肝脏为主的病毒,主要感染哺乳动物和鸟类.HBV DNA的长度为3.2kb,具有4个开放读码框架(ORF),分别编码HBV的表面抗原蛋白,核心/e抗原蛋白,X蛋白以及HBV DNA多聚酶(HBV DNA P).HBV DNA P基因在ORF中最长,并且与C、S、X基因区有重叠,其编码的P蛋白含有N-末端蛋白(TP)、逆转录酶(RT)/DNA多聚酶、RNase H和隔离片(spacer,SP)等4个结构域,各结构域分别位于2307—2840nt、133—1128nt、1129—1621nt和2841—0—132nt.目前对多聚酶及其所编码的各个结构域的研究取得了一定的进展. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 dna HBV 多聚P结构 抗原 核苷酸
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酶联免疫电转移印迹技术(EITB)检测抗EB病毒特异性DNA酶抗体 被引量:4
3
作者 田勇泉 彭勇炎 +3 位作者 陶正德 肖健云 李韵萍 姚开泰 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 1993年第2期1-2,76+81,共4页
本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52~59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈... 本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52~59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈部肿瘤患者血清无一例在此区域内出现阳性显带,表明其特异性甚高。 展开更多
关键词 鼻咽癌 eb 病毒特异性 dna 联免疫电转移印迹技术
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EB病毒DNA聚合酶基因的表达与纯化及其在鼻咽癌病人诊断中的应用 被引量:3
4
作者 黄滨 李伯军 +3 位作者 周为民 皮国华 唐慰萍 谷淑燕 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期258-261,共4页
以Epstein -Barr病毒 (EBV)DNA聚合酶为抗原 ,建立了简便、快速、敏感和特异的鼻咽癌诊断方法。构建原核表达载体 pRSET -DNA聚合酶及其亚克隆 pRSET -A1和 pRSET -A2 ,在BL2 1 (DE3 )中表达的产物 ,经Western -blot检测其抗原性并用于... 以Epstein -Barr病毒 (EBV)DNA聚合酶为抗原 ,建立了简便、快速、敏感和特异的鼻咽癌诊断方法。构建原核表达载体 pRSET -DNA聚合酶及其亚克隆 pRSET -A1和 pRSET -A2 ,在BL2 1 (DE3 )中表达的产物 ,经Western -blot检测其抗原性并用于检测鼻咽癌 (nasopharyngealcarcinoma,NPC)病人血清中的抗体。在NPC病人血清中存在抗EB病毒DNA聚合酶的IgG抗体 ,并证明DNA聚合酶的抗原性主要集中于后 2 / 3片段 (A2 )上。Western -bolt检测A2 /IgG抗体的敏感性和特异性分别为 80 %和 1 0 0 %。对 4 6份NPC病人血清和 4 6份非NPC头颈癌症病人血清 ,用ELISA检测A2 /IgA ,敏感度为 89% ,特异度为 93 %。初步建立了ELISA检测NPC病人血清中A2 /IgG抗体的方法 ,获得较高的敏感性和特异性。 展开更多
关键词 eb病毒 dna聚合 诊断 鼻咽癌
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鼻咽癌患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶抗体的变化 被引量:3
5
作者 李泽卿 王秋萍 +3 位作者 田勇泉 肖健云 赵素萍 陶正德 《医学研究生学报》 CAS 2001年第5期406-408,共3页
目的:了解鼻咽癌(NPC)患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶(EBV-DNase)抗体的变化,以评估其预后. 方法:用Western Blot及放射免疫法检测24例NPC患者放疗前后血清EBV-DNase抗体,并用免疫酶法测定血清EB病毒壳抗原IgA(EBVCA-IgA). 结果... 目的:了解鼻咽癌(NPC)患者放疗前后血清EB病毒特异性DNA酶(EBV-DNase)抗体的变化,以评估其预后. 方法:用Western Blot及放射免疫法检测24例NPC患者放疗前后血清EBV-DNase抗体,并用免疫酶法测定血清EB病毒壳抗原IgA(EBVCA-IgA). 结果:①用Western Blot检测NPC患者放疗前后血清EBV-DNaes抗体,放疗前抗体阳性率87.50%(21/24),放疗后为29.16%(7/24),差异显著(P<0.01);②放免法测得两组血清抗酶率(AER)平均值分别为74.02%、31.75%,二者有显著差异(P<0.05);③放疗后的血清EBVCA-IgA平均几何滴度(GMT)为1∶23.4,较放疗前明显降低(P<0.05). 结论:PNC放疗后血清EBV-DNase抗体水平有明显下降,比EBVCA-IgA检测更加准确地反映了病情变化.提示血清EBV-DNase抗体检测对评估NPC预后、疗效监测可能有帮助. 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 eb病毒特异性dna WESTERNBLOT法 放疗
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EB病毒特异性DNA酶与鼻咽癌的早期诊断 被引量:2
6
作者 朱振宇 黄迪 马涧泉 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1997年第12期47-49,共3页
首创巴豆油和正丁酸联合诱导Raji细胞获得EBV-DNase,确定了其产生的时态曲线。建立了检测NPC病人DNase抗体的方法,首次采用“抗酶率”表示抗体水平,并根据其滴度分布曲线确定了抗酶率大于30%为阳性截止值,... 首创巴豆油和正丁酸联合诱导Raji细胞获得EBV-DNase,确定了其产生的时态曲线。建立了检测NPC病人DNase抗体的方法,首次采用“抗酶率”表示抗体水平,并根据其滴度分布曲线确定了抗酶率大于30%为阳性截止值,经双盲法检测、普查及5万余例NPC门诊病人标本的检测,证明抗酶率检测结果稳定可靠,对发现早期NPC有重要作用。首次用PCR扩增出DNase全基因,并高效表达成功;重组的DNase有较高的活性和良好抗原性,可用于临床检测。首创用PCR扩增组织中DNase和核抗原1基因来发现早期NPC或用于其相关疾病鉴别诊断;并用PCR扩增石蜡包埋组织中该两种基因片段来进行回顾性病因研究。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 诊断 eb病毒 dna
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血清EB病毒特异性DNA酶抗体与鼻咽癌分期的关系 被引量:2
7
作者 李泽卿 周玫 +3 位作者 田勇泉 肖健云 赵素萍 陶正德 《医学研究生学报》 CAS 2000年第4期221-223,共3页
目的 :探讨血清非洲淋巴细胞瘤病毒特异性 DNA酶 ( Epstein-Barr virus-specific deoxynuclease,EBV-DNase)抗体与鼻咽癌 ( nasopharyngeal carcinoma,NPC)分期的关系。方法 :用 Western Blot法检测 2 64例 NPC血清 ,按“92分期法”对... 目的 :探讨血清非洲淋巴细胞瘤病毒特异性 DNA酶 ( Epstein-Barr virus-specific deoxynuclease,EBV-DNase)抗体与鼻咽癌 ( nasopharyngeal carcinoma,NPC)分期的关系。方法 :用 Western Blot法检测 2 64例 NPC血清 ,按“92分期法”对所有血清进行分期 ,分别计算各 T、N、M期及临床病期的 EBV-DNase抗体阳性率并进行统计学处理。 结果 :NPC各 T、N、M组及临床分期组血清 EBV-DNase抗体阳性率均无显著差异 ( P>0 .0 5 )。 结论 :早期 ( 期 ) NPC血清 EBV-DNase抗体阳性率与 ~ 期血清无明显差异 ,EBV-DNase抗体有可能成为 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 eb病毒特异性dna抗体 WESTERN BLOT法 诊断
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羊开口提取物的分离及对艾滋病毒逆转录酶和DNA多聚酶活性的抑制作用 被引量:5
8
作者 孟正木 小野克彦 +2 位作者 中根英雄 小濑洋喜 坂井至通 《中国药科大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第2期103-106,共4页
羊开口经提取分离为Y-1、Y-P、Y-A、Y-E、Y-A-1和Y-A-1和Y3~11等部分,通过其对艾滋病毒逆转录酶(HIV-RT)和DNA多聚酶(DNAPol)活性试验,发现Y-1、Y-A、Y-A-1、Y-9和Y-... 羊开口经提取分离为Y-1、Y-P、Y-A、Y-E、Y-A-1和Y-A-1和Y3~11等部分,通过其对艾滋病毒逆转录酶(HIV-RT)和DNA多聚酶(DNAPol)活性试验,发现Y-1、Y-A、Y-A-1、Y-9和Y-11有极强的抑制酶活性作用。50%酶活性抑制浓度(IC50)对HIV-RT分别为0.1~0.5μg/ml,对DNApolα为0.5~2.5μg/ml。HIV-RT的抑制率当浓度Y-A、Y-A-12.5μg/ml,Y-9、Y-112μg/ml和Y-15μg/ml时分别为99.37%,93.35%,98.24%,99.92%和90.0%:DNApolα的抑制率当Y-A、Y-9、Y-11的浓度为2.5μg/ml和Y-1浓度为5μg/ml时,分别为95.45%,93.33%,93.01%和99.11%。结果提示羊开口中存在抑制HIV-RT和DNApolα的物质。 展开更多
关键词 羊开口 艾滋病毒 逆转录 dna 多聚
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用简并寡核苷酸探针筛选对虾白斑综合征病毒DNA多聚酶基因片段 被引量:1
9
作者 石正丽 Durand Stephanie Bonami Jean-Robert 《中国病毒学》 CSCD 2000年第3期302-307,共6页
根据一些病毒的DNA多聚酶氨基酸序列中特有的保守序列VYGDTD设计的简并寡核苷酸 ,经地高辛标记后与对虾白斑综合征病毒基因库克隆杂交 ,筛选出一段长度为 70 7bp的EcoRI基因片段 ,该片段在一个开放阅读框内。并含DNA多聚酶B家族特有的... 根据一些病毒的DNA多聚酶氨基酸序列中特有的保守序列VYGDTD设计的简并寡核苷酸 ,经地高辛标记后与对虾白斑综合征病毒基因库克隆杂交 ,筛选出一段长度为 70 7bp的EcoRI基因片段 ,该片段在一个开放阅读框内。并含DNA多聚酶B家族特有的保守序列YGDTDS。经与基因库比较 ,其氨基酸序列与藻类DNA病毒科 (Phycodnaviridae)的几株藻类病毒的DNA多聚酶片段有部分相似 ,因此推测该核苷酸片段为对虾白斑综合征病毒DNA多聚酶基因的部分序列。 展开更多
关键词 白斑综合征病毒 dna多聚 探针 筛选 对虾
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联合化学诱导制备EB病毒特异性DNA酶
10
作者 李泽卿 王秋萍 +5 位作者 周文光 周玫 田勇泉 肖健云 赵素萍 陶正德 《医学研究生学报》 CAS 2002年第5期381-384,共4页
目的 :探索EB病毒特异性DNA酶 (EBV DNase)可靠实用的制备方法 ,为建立一种新的鼻咽癌 (NPC)血清学诊断方法———血清EBV DNase抗体检测奠定基础。 方法 :采用TPA +正丁酸联合化学诱导的方法诱导处理P3 HR 1细胞株 4 8h ,超声破碎 ,... 目的 :探索EB病毒特异性DNA酶 (EBV DNase)可靠实用的制备方法 ,为建立一种新的鼻咽癌 (NPC)血清学诊断方法———血清EBV DNase抗体检测奠定基础。 方法 :采用TPA +正丁酸联合化学诱导的方法诱导处理P3 HR 1细胞株 4 8h ,超声破碎 ,离心收集上清液即得EBV DNase粗提物。用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)及放免酶活性检测法测定粗提物中的EBV DNase。 结果 :①在SDS PAGE凝胶上 ,与未经诱导的粗提物相比 ,诱导后的粗提物有多条增强表达的蛋白质带 ,尤以相对分子质量为 5 2 0 0 0的蛋白质更加明显。②用放免法酶活性测定时 ,经诱导的粗提物CPM值及根据公式计算的每毫升酶单位 (U/ml)分别 >170 0 0和 4 0 ,而对照物则≤ 2 0 0 0和4 .0。 结论 :联合化学诱导方法能成功地使EBV DNase在P3 HR 1细胞株中增强表达 ,是一种制备EBV 展开更多
关键词 化学诱导 制备 eb病毒 特异性dna 鼻咽癌
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大肠杆菌表达EB病毒特异性DNA酶基因的研究Ⅰ:重组DNA克隆的建立
11
作者 田勇泉 彭勇炎 +1 位作者 陶正德 肖健云 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 1994年第1期13-14,80,共3页
本研究用基因重组技术,试图由大肠杆菌表达EB病毒特异性DNA酶基因.从而获得EB病毒特异性DNA酶,以用于进一步临床研究.
关键词 eb病毒 dna 基因 重组dna
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基因表达谱芯片技术筛选乙型肝炎病毒DNA多聚酶P结构域反式调节基因
12
作者 陈国凤 王琳 +5 位作者 刘妍 成军 张健 邵清 张玲霞 李莉 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2005年第2期107-109,共3页
目的:应用基因芯片技术,对乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)聚合酶P结构域蛋白/逆转录酶(PR)的基因表达谱进行分析,探索PR对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能。方法:设计并合成PR基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增PR... 目的:应用基因芯片技术,对乙型肝炎病毒DNA(HBVDNA)聚合酶P结构域蛋白/逆转录酶(PR)的基因表达谱进行分析,探索PR对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能。方法:设计并合成PR基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增PR蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术将获得的PR编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,构建真核表达载体pcDNA3. 1(-) PR。以脂质体转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3. 1(-)的HepG2细胞进行DNA芯片分析。结果:基因芯片技术所检测的1 152个基因表达谱的筛选中, 79条基因表达水平上调, 90条基因表达水平下调。结论:应用基因表达谱芯片成功筛选了HBVDNA聚合酶PR转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明PR蛋白可能的分子生物学机制提供依据。 展开更多
关键词 PR蛋白 乙型肝炎病毒dna 反式调节基因 多聚 基因表达谱芯片技术 HBVdna 基因芯片技术 结构域 基因表达水平 PCdna3
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多重半巢式聚合酶链反应检测巨细胞病毒DNA多聚酶基因
13
作者 周琳 钱景 Harder TC 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2001年第6期272-275,共4页
目的 :探讨多重半巢式聚合酶链反应 ( msn PCR)在研究巨细胞病毒 ( CMV) DNA多聚酶基因 ( UL -54)中的应用价值。方法 :从 8例心肺移植患者血标本中提取 DNA,以 CMV-UL 54为模板 ,自行设计 6条特异性引物 ,建立 msn PCR扩增系统。扩增... 目的 :探讨多重半巢式聚合酶链反应 ( msn PCR)在研究巨细胞病毒 ( CMV) DNA多聚酶基因 ( UL -54)中的应用价值。方法 :从 8例心肺移植患者血标本中提取 DNA,以 CMV-UL 54为模板 ,自行设计 6条特异性引物 ,建立 msn PCR扩增系统。扩增产物在 DNA测序仪上自动测序。结果 :msn PCR能扩增出 42 7bp和 1 0 52 bp两条目的片段 ,扩增产物测序表明存在导致氨基酸改变的碱基有义突变。结论 :msn PCR扩增结合测序 ,可检测 CMV-UL 54的 7个功能区目片段中的碱基突变 ,msn PCR比普通 PCR更加省时和经济。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 器官移植 多重半巢式聚合链反应 多聚基因 dna CMV
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用多聚酶链反应检测何杰金氏淋巴瘤中的EB病毒
14
作者 郭琳琅 肖莎 曹长安 《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第1期55-56,共2页
应用多聚酶链反应技术检测37例何杰金氏淋巴瘤(HL)组织中的EB病毒的存在情况,结果显示:EB病毒DNA的检出率为48.6%(18/37),淋巴细胞为主型(LP)检出2/7,结节硬化型(NS)检出2/10,混合型(M... 应用多聚酶链反应技术检测37例何杰金氏淋巴瘤(HL)组织中的EB病毒的存在情况,结果显示:EB病毒DNA的检出率为48.6%(18/37),淋巴细胞为主型(LP)检出2/7,结节硬化型(NS)检出2/10,混合型(MC)检出9/12,淋巴细胞消减型(LD)检出5/8。结果提示国内HL的发病可能与EB病毒的感染有关。 展开更多
关键词 多聚链反应 eb病毒 淋巴瘤 何杰金氏病 病理学
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腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达 被引量:2
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作者 钟建辉 银巍 +3 位作者 藏林泉 江伟健 邱鹏新 颜光美 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期622-625,共4页
【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制,构建其重组腺病毒载体,并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列,TA克隆测序,酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒p... 【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制,构建其重组腺病毒载体,并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列,TA克隆测序,酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞,用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致,同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带。DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后,感染Ad-polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光,重组腺病毒Ad-polβPCR鉴定含目标条带,Ad-polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达。 展开更多
关键词 dna多聚β 病毒载体 PC12细胞
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聚合酶链反应检测EB病毒DNA在鼻咽癌诊断中的应用 被引量:1
16
作者 陈鸿雁 陈佩君 李素芳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第1期23-25,共3页
流行病学、血清学和分子生物学的资料证实,爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV感染与鼻咽癌(NPC)有密切关系。血清EBV-VCA-IgA,EBV-EA-IgA测定和聚合酶链(PCR)检测组织中EBV-DNA已用于NPC的临床诊... 流行病学、血清学和分子生物学的资料证实,爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV感染与鼻咽癌(NPC)有密切关系。血清EBV-VCA-IgA,EBV-EA-IgA测定和聚合酶链(PCR)检测组织中EBV-DNA已用于NPC的临床诊断。本文评价上述方法在NPC诊断中的实用价值。85例病人双盲法测定血清EBV-VCA-IgA(I),EBV-EA-IgA(Ⅱ):鼻咽活检组织用PCR法检测EBV-DNA(Ⅲ)和组织病理检测(Ⅳ)。组织病理学证实:NPC57例;非NPC28例作为对照组。57例NPC中,(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)的阳性率分别为66.7%,21.1%,80.7%;(Ⅰ)+(Ⅱ),(Ⅰ)+(Ⅲ),(Ⅱ)+(Ⅲ)或(Ⅰ)+(Ⅱ)+(Ⅲ)的阳性率分别为21.1%,56.1%,19.3%,19.3%(P<0.005)。28例对照组(Ⅰ)、(Ⅱ)或(Ⅲ)的阴性率分别为75%,100%,100%;(Ⅰ)+(Ⅱ),(Ⅰ)+(Ⅲ),或(Ⅰ)+(Ⅱ)+(Ⅲ)均为对.4%(P<0.005)。本组结果提示,PCR法检测EBV-DNA具有灵敏度高(NPC的阳性率高)和特异性强(对照组的阴性率高)的特点。 展开更多
关键词 鼻咽癌 聚合链反应 eb病毒 诊断 dna
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大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒重组体构建
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作者 钟建辉 邱鹏新 颜光美 《热带医学杂志》 CAS 2006年第1期2-4,F0003,共4页
目的构建大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒介导的表达载体。方法提取大鼠脑组织总RNA,用逆转录PCR扩增DNA多聚酶β(POLB)的编码区,与T载体连接,作DNA测序后,酶切POLB基因并连入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架... 目的构建大鼠DNA多聚酶β基因克隆及其腺病毒介导的表达载体。方法提取大鼠脑组织总RNA,用逆转录PCR扩增DNA多聚酶β(POLB)的编码区,与T载体连接,作DNA测序后,酶切POLB基因并连入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。酶切鉴定,重组腺病毒质粒(pAd-polb)和Lipofectamine2000转染293细胞,用293细胞扩增重组腺病毒。结果 8个TA克隆中有2个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLB cDNA序列完全一致。DNA序列正确的POLB重组腺病毒质粒 Ad-polb转染293细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光。结论用TA克隆和AdEasy系统,成功构建了大鼠 DNA多聚酶β的腺病毒重组体。 展开更多
关键词 dna多聚β 逆转录PCR TA克隆 病毒载体
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嗜肝DNA病毒多聚酶的研究进展 被引量:2
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作者 季伟 《国外医学(流行病学.传染病学分册)》 2002年第3期155-157,共3页
嗜肝DNA病毒多聚酶是病毒复制的关键蛋白,与病毒复制相关的重要的酶活性均聚其上,包括病毒DNA复制的引物作用、DNA聚合酶活性、逆转录酶活性、RNaseH活性等。此外,病毒多聚酶在病毒的致病作用、致癌作用、抗干扰素活性等方面也具有重要... 嗜肝DNA病毒多聚酶是病毒复制的关键蛋白,与病毒复制相关的重要的酶活性均聚其上,包括病毒DNA复制的引物作用、DNA聚合酶活性、逆转录酶活性、RNaseH活性等。此外,病毒多聚酶在病毒的致病作用、致癌作用、抗干扰素活性等方面也具有重要意义。病毒核壳外多聚酶的发现已引起了人们的广泛关注。 展开更多
关键词 嗜肝dna病毒 多聚 dna复制 研究进展 临床意义
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采用多聚酶链反应检测成人玫瑰糠疹患者外周血浆和外周血单核细胞内人类疱疹病毒-8的DNA含量 被引量:1
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作者 Chuh A.A.T. Chan P.K.S. +1 位作者 Lee A. 任建文 《世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册)》 2006年第10期7-7,共1页
Background:Herpesvirus-like particles have been reported to be detectable by electron microscopy in lesional biopsy of patients with pityriasis rosea(PR).We report a study investigating the association of PR with huma... Background:Herpesvirus-like particles have been reported to be detectable by electron microscopy in lesional biopsy of patients with pityriasis rosea(PR).We report a study investigating the association of PR with human herpesvirus-8(HHV-8)infection.Methods:Our setting is a teaching clinic affiliated to a university.We recruited eight patients aged 28-47 years(mean:34.5 years)diagnosed with PR during a one-year period.We collected acute blood specimens at presentation and convalescent blood specimens three to four weeks later.We also collected skin scrapings from the herald patch where present and from truncal secondary lesions.Results:We detected HHV-8 DNA by a nested PCR(polymerase chain reaction)targeting,respectively,a 233-bp and a 160-bp fragment of ORF 26.PCR for HHV-8 DNA was negative in the peripheral blood mononuclear cells and plasma of acute and convalescent specimens of all patients,and negative in all skin scrapings.We detected anti-HHV-8 IgG and IgM antibodies by the indirect immunofluorescence.Four patients had IgG antibodies against HHV-8,but with no significant rise of titre.None were positive for anti-HHV-8 IgM antibody.Conclusion:We conclude that PR is not associated with HHV-8 infection. 展开更多
关键词 玫瑰糠疹 dna 人类疱疹病毒 外周血单核细胞 多聚链反应 病毒样颗粒 急性期 电子显微镜检查
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血浆EB病毒游离DNA检测对监测鼻咽癌患者预后的意义 被引量:30
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作者 曹素梅 闵华庆 +6 位作者 高劲松 洪明晃 肖锡宾 张昌卿 刘晓东 张爱兰 郭翔 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期302-306,共5页
背景与目的:有报道,测定血浆中的EB病毒游离DNA(EBV-DNA)的拷贝数可作为诊断及监测鼻咽癌患者病情变化的手段之一。本研究旨在评价血浆EBV-DNA检测在鼻咽癌患者预后监测上的价值,并进一步与VCA/IgA、EA/IgA进行比较。方法:比较鼻咽癌放... 背景与目的:有报道,测定血浆中的EB病毒游离DNA(EBV-DNA)的拷贝数可作为诊断及监测鼻咽癌患者病情变化的手段之一。本研究旨在评价血浆EBV-DNA检测在鼻咽癌患者预后监测上的价值,并进一步与VCA/IgA、EA/IgA进行比较。方法:比较鼻咽癌放疗后30例远处转移患者、22例局部复发患者、24例无瘤生存者血浆中EBV-DNA、VCA/IgA、EA/IgA水平。分别应用荧光定量PCR方法检测血浆EBV-DNA水平,免疫酶法检测VCA/IgA、EA/IgA;前瞻性观察20例初诊鼻咽癌患者放疗前、放疗剂量达40Gy时及放疗结束时上述指标的变化。结果:放疗后各组不同预后患者的血浆EBV-DNA含量的中位数有显著性差异,远处转移组为135100copies/ml(四分线区域5525~1003750copies/ml)>局部复发组的20500(四分线区域0~58500copies/ml)>无瘤生存组的0copy/ml(四分线区域0~0copy/ml),P均<0.05。远处转移组的血浆EBV-DNA水平高者较多,当阳性标准为1000000copies/ml时,诊断远处转移组的敏感性为27.3%,而诊断局部复发组的敏感性为0.0%,特异性均为100.0%。在初诊患者放疗前、放疗剂量达40Gy时及放疗结束时,EBV-DNA水平逐渐降低,平均含量分别为32050copies/ml(四分线区域3880~317750copies/ml)、0copy/ml(四分线区域0~14375copies/ml)。 展开更多
关键词 eb病毒 dna 鼻咽肿瘤 聚合链反应 预后
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