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HP8: The cDNA clone of a novel member of C/EBP gene family
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作者 徐砺新 万大方 +4 位作者 刘彦仿 李宏年 张萍萍 隋延仿 顾健人 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1996年第4期285-289,293,共6页
HP8:ThecDNAcloneofanovelmemberofC/EBPgenefamily¥(徐砺新)(万大方)(刘彦仿)(李宏年)(张萍萍)(隋延仿)(顾健人)XuLixin,WanDafang,LiuYanf... HP8:ThecDNAcloneofanovelmemberofC/EBPgenefamily¥(徐砺新)(万大方)(刘彦仿)(李宏年)(张萍萍)(隋延仿)(顾健人)XuLixin,WanDafang,LiuYanfang,LiHongnian,Zh... 展开更多
关键词 C/ebp family geneS LEUCINE ZIPPER CDNA
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Ebp1-绿色荧光蛋白融合基因的构建及在HEK293T细胞中的表达
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作者 许东元 金政 《延边大学医学学报》 CAS 2005年第4期235-237,共3页
[目的]构建绿色荧光蛋白融合表达Ebp 1基因载体,并检测其在HEK 293 T细胞中的表达.[方法]采用PCR扩增Ebp 1基因,利用其片断和质粒pEGFPC 1的EcoRⅠ及XhoⅠ限制性酶切位点构建融合表达载体pEGFPC 1-Ebp 1,通过脂质体介导将其转染到HEK 29... [目的]构建绿色荧光蛋白融合表达Ebp 1基因载体,并检测其在HEK 293 T细胞中的表达.[方法]采用PCR扩增Ebp 1基因,利用其片断和质粒pEGFPC 1的EcoRⅠ及XhoⅠ限制性酶切位点构建融合表达载体pEGFPC 1-Ebp 1,通过脂质体介导将其转染到HEK 293 T细胞中,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白融合基因的表达情况.[结果]成功地构建融合表达载体pEGFPC 1-Ebp 1,将其转染到HEK 293 T细胞后可观察到其中有EGFP表达. 展开更多
关键词 ebp 1-绿色荧光蛋白融合基因 HEK293T细胞 基因表达 聚合酶链反应 荧光抗体技术 乳腺癌 前列腺癌
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胰岛素诱导牛成肌细胞成脂分化的研究 被引量:2
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作者 皇甫一凡 昝林森 +5 位作者 王洪宝 成功 刘扬 高建斌 李耀坤 杨宁 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第3期1-9,16,共10页
【目的】建立稳定成熟的牛成肌细胞胰岛素诱导成脂分化体系,为肉牛肉脂品质的改良提供参考。【方法】取1日龄荷斯坦公牛犊后腿肌肉,用Ⅳ型胶原酶消化法分离成肌细胞,用胰岛素诱导成肌细胞成脂分化,以未添加胰岛素的培养基为对照组,检测... 【目的】建立稳定成熟的牛成肌细胞胰岛素诱导成脂分化体系,为肉牛肉脂品质的改良提供参考。【方法】取1日龄荷斯坦公牛犊后腿肌肉,用Ⅳ型胶原酶消化法分离成肌细胞,用胰岛素诱导成肌细胞成脂分化,以未添加胰岛素的培养基为对照组,检测成肌细胞成脂分化过程中细胞形态的变化,并分析与成肌细胞和脂肪细胞分化相关基因(C/EBPα、C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ、Myf5、MyoD)分别诱导第3,6,9,12,15天相对表达量的变化,分析牛成肌细胞的诱导分化情况。【结果】成功分离培养了牛原代成肌细胞。胰岛素处理组细胞中脂滴的油红O染色明显,C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ和MyoD相对表达量明显增高,C/EBPα和Myf5基因相对表达量则下降;用DMEM高糖培养基+体积分数10%胎牛血清(FBS)培养时,C/EBPs基因相对表达量总体高于DMEM高糖培养基+体积分数20%FBS+体积分数10%马血清(HS)。【结论】成功分离并鉴定了牛成肌细胞,建立了适于牛成肌细胞的体外培养体系,用胰岛素诱导成肌细胞成脂分化效果好。 展开更多
关键词 成肌细胞 成脂分化 胰岛素 C ebps基因 PPARΓ基因
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增强子结合蛋白家族一个新基因的3′-非编码区序列对肝癌细胞7721生长的影响
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作者 徐砺新 王缨 +3 位作者 万大方 刘彦仿 隋延仿 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期1-3,共3页
目的观察所获得的增强子结合蛋白家族一个新基因HP8的3′┐非编码区(3′UTR)对肝癌细胞生长的影响。方法将3′UTR序列亚克隆至真核表达载体pBKCMV中,运用磷酸钙沉淀法转染肝癌细胞7721。结果观察到细胞的生长... 目的观察所获得的增强子结合蛋白家族一个新基因HP8的3′┐非编码区(3′UTR)对肝癌细胞生长的影响。方法将3′UTR序列亚克隆至真核表达载体pBKCMV中,运用磷酸钙沉淀法转染肝癌细胞7721。结果观察到细胞的生长受到较明显抑制。结论表明该基因参与真核细胞转录调控,结合以前的实验结果(该基因在肝癌细胞中普遍高表达)。 展开更多
关键词 肝肿瘤 基因 肿瘤细胞 细胞分化
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有关序列特异性DNA结合蛋白的一些最新研究进展
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作者 魏荣 李佐 杜翠花 《山西农业大学学报》 CAS 2000年第1期83-85,共3页
本文对有关序列特异性DNA结合蛋白的最新研究情况作了叙述。在其结构研究中 ,介绍了同源结构域的拓扑学结构 ,同源结构域上的氨基酸基序 ,共价和非共价二聚结构域。在其作用研究中 ,介绍了非放射标记的凝胶阻滞分析法 ,C/EBP调节启动子... 本文对有关序列特异性DNA结合蛋白的最新研究情况作了叙述。在其结构研究中 ,介绍了同源结构域的拓扑学结构 ,同源结构域上的氨基酸基序 ,共价和非共价二聚结构域。在其作用研究中 ,介绍了非放射标记的凝胶阻滞分析法 ,C/EBP调节启动子活性的机制 ,雌激素受体在前转录起始复合物形成中的作用以及一种新的人SPI激活转录必需的共激活因子———CRSP复合物。在编码基因与其DNA序列上的结合位点研究中 ,介绍了荧光原位杂交技术进行染色体定位 ,C/EBP家族在小鼠的乳腺泌乳期和回复期的表达 ,HNF— 1结合位点对SI基因启动子上葡萄糖阻遏作用的操纵 。 展开更多
关键词 结构域 启动子 HNF-1结合位点 DNA结合蛋白
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The Apoptotic Effect of the Methanol Extract of <i>Polygonum cuspidatum</i>through Up-Regulation Death Receptor 5 and CHOP in HSC-2 Human Oral Cancer Cells
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作者 Hyun-Ju Yu Ji-Ae Shin +3 位作者 Eun-Sun Choi Jae-Gyu Jeon Nam-Pyo Cho Sung-Dae Cho 《Journal of Cancer Therapy》 2012年第1期1-6,共6页
Polygonum cuspidatum is used as a traditional medicinal herb for the therapy of various diseases including several types of cancers. In the present study, we focused on addressing the anti-cancer activity and molecula... Polygonum cuspidatum is used as a traditional medicinal herb for the therapy of various diseases including several types of cancers. In the present study, we focused on addressing the anti-cancer activity and molecular mechanism of methanol extract of Polygonum cuspidatum (MEPC) in HSC-2 human oral cancer cells. The effect of MEPC on oral cancer cells was estimated by 3-(4,5-dimethylthiazol-20yl)-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulphophenyl)-2H-tetrazolium (MTS) assay, 4’-6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining and Western blot analysis. MEPC inhibited the cell viability and induced apoptosis through the induction of death receptor (DR) 5. MEPC also increased the expression of C/EBP homologous protein/growth arrest and the DNA damage-inducible gene 153 (CHOP), a transcription factor induced by ER stress. Thus, we concluded that the induction of CHOP leading to DR5 up-regulation is required for the anti-cancer activity of MEPC in HSC-2 cells and MEPC may be a promising drug candidate for oral cancer. 展开更多
关键词 POLYGONUM cuspidatum Endoplasmic Reticulum Stress C/ebp Homologous Protein/Growth Arrest and the DNA Damage-Inducible gene 153 (CHOP) Death Receptor 5 (DR5) Apoptosis HUMAN Oral Cancer Cell
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维吾尔族宫颈鳞癌C/EBP β基因甲基化与HPV16感染关系 被引量:5
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作者 蒋旭鹏 潘晓琳 +2 位作者 潘泽民 张东辉 张鑫芝 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1409-1410,共2页
目的通过对新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌组织C/EBPβ基因甲基化与HPV16感染关系的研究,探讨该基因在宫颈癌发生发展过程中的作用。方法提取26份子宫颈癌组织和16份子宫颈正常组织DNA,用PCR方法对样本进行HPV16检测,再利用基质辅助激光解析... 目的通过对新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌组织C/EBPβ基因甲基化与HPV16感染关系的研究,探讨该基因在宫颈癌发生发展过程中的作用。方法提取26份子宫颈癌组织和16份子宫颈正常组织DNA,用PCR方法对样本进行HPV16检测,再利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱方法进行C/EBPβ基因甲基化分析。结果子宫颈鳞癌组织HPV16感染率为69.32%(18/26),2份正常子宫颈组织感染HPV16,差异有统计学意义(χ2=12.780,P<0.05);子宫颈鳞癌与子宫颈正常组织中C/EBPβ基因CpG10/11和CpG17/18 2个CpG岛甲基化差异有统计学意义(t=2.221、2.278,P均<0.05);C/EBPβ基因在以上2个CpG岛位点上的甲基化率与HPV16感染偏相关系数分别为1.323和-4.36,差异无统计学意义(P>0.05)。结论新疆维吾尔族妇女宫颈鳞癌发生与HPV16感染相关;C/EBPβ基因2个CpG岛位点甲基化与维吾尔族子宫颈鳞癌发生相关,而与HPV16感染无相关性。 展开更多
关键词 C/ebpβ基因 子宫颈鳞癌 HPV16感染 基因甲基化 维吾尔族妇女
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转录因子C/EBPβ对肝癌细胞SMMC-7721影响 被引量:1
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作者 陈利荣 贾艳梅 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1609-1612,共4页
目的探讨靶向CCAAT/增强子结合蛋白-β(C/EBPβ)基因沉默对肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡、迁移的影响。方法设计C/EBP-β及e GFP、shRNA序列,装入p LKO.1-TRC质粒,进行慢病毒包装,感染肝癌SMMC-7721细胞,嘌呤霉素筛选并培养稳定干扰细胞... 目的探讨靶向CCAAT/增强子结合蛋白-β(C/EBPβ)基因沉默对肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡、迁移的影响。方法设计C/EBP-β及e GFP、shRNA序列,装入p LKO.1-TRC质粒,进行慢病毒包装,感染肝癌SMMC-7721细胞,嘌呤霉素筛选并培养稳定干扰细胞株,cell counting kit-8(CCK-8试剂盒)法、transwell细胞迁移实验分别检测沉默C/EBP-β基因对SMMC-7721细胞增殖和迁移能力的影响,蛋白印迹(Western blot)检测干扰效率及沉默C/EBP-β基因对SMMC-7721细胞的凋亡相关蛋白影响。结果沉默C/EBP-β基因的SMMC-7721-p LKO-sh-C/EBP-β肿瘤细胞的增殖速度明显提高(相对增值率136.8%,P<0.05),细胞迁移能力也明显增强(迁移抑制率为-292.3%,P<0.05),且细胞周期蛋白cyclin B1的表达增强(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达增强(P<0.05),凋亡相关蛋白Bax的表达下降(P<0.05)。结论沉默C/EBP-β对肝癌细胞SMMC-7721的增殖、迁移有促进作用,对其凋亡有抑制作用。 展开更多
关键词 C/ebp—β基因 SMMC-7721细胞系 SHRNA慢病毒
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普通牛CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPs)家族基因的生物信息学分析 被引量:1
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作者 周子航 张娟 +10 位作者 封元 黄增文 马正旭 王瑜 蒋秋斐 郭菊 冯小芳 王影 母童 虎红红 顾亚玲 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2944-2958,共15页
CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPs)家族是具有碱性一亮氨酸拉链结构的一类蛋白家族。为对普通牛CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPs)家族基因编码蛋白的结构和功能进行生物信息学探析,本研究运用多个生物信息学分析软件分别对普通牛C/EBPs蛋白的理... CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPs)家族是具有碱性一亮氨酸拉链结构的一类蛋白家族。为对普通牛CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPs)家族基因编码蛋白的结构和功能进行生物信息学探析,本研究运用多个生物信息学分析软件分别对普通牛C/EBPs蛋白的理化性质、亲疏水性、基因结构、保守基序、亚细胞定位、染色体定位等进行了具体分析,构建了不同物种C/EBPs基因家族编码蛋白的系统发育树,并比对多种软件寻找准确的预测工具。通过分析研究发现,普通牛C/EBPs基因家族不同基因所编码蛋白质为亲水性不稳定蛋白,无跨膜结构和信号肽,均为非分泌型蛋白,家族中6个成员都是丝氨酸(Ser)磷酸化位点占比最大;但是普通牛C/EBPs基因家族不同基因所编码的氨基酸数、理论等电点、二级结构、染色体定位、保守基序等却存在一定差异;普通牛C/EBPs基因与牦牛、水牛、瘤牛亲缘关系较近,与鸡的遗传距离最远。这些研究结果为后续对牛C/EBPs家族基因功能的深入研究提供了重要的科学依据和参考,为其他使用软件对基因进行生物信息学分析的研究者提供了借鉴。 展开更多
关键词 C/ebps基因家族 增强子结合蛋白 生物信息学 系统发育树
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C/EBP β对APP基因的表达调控作用的研究 被引量:2
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作者 柴娟 李永玲 +5 位作者 芦晓红 张茜 马琳 Huichen Wang 孙涛 崔建奇 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第4期500-507,共8页
该研究成功地构建了C/EBP β过表达慢病毒载体,在体外人胚肾细胞(HEK293FT)进行病毒包装并感染小鼠海马神经元细胞(HT22)。通过荧光素酶报告基因实验(luciferase assay)检测C/EBPβ对淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)启... 该研究成功地构建了C/EBP β过表达慢病毒载体,在体外人胚肾细胞(HEK293FT)进行病毒包装并感染小鼠海马神经元细胞(HT22)。通过荧光素酶报告基因实验(luciferase assay)检测C/EBPβ对淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)启动子活性的影响;通过实时荧光定量PCR(Q-PCR)来检测C/EBPβ对APP和Sp1在转录水平上的表达;通过蛋白免疫印迹分析(Western blot assay)检测C/EBPβ对APP和Sp1蛋白表达的作用。萤火虫荧光素酶分析结果显示,C/EBPβ对APP启动子的表达有正调控作用;Western blot和Q-PCR分析的结果表明,C/EBPβ对APP和Sp1基因的表达有正调控作用。C/EBPβ对APP基因表达的调控作用的机制可能在于C/EBPβ上调了内源性转录因子Sp1的基因表达,而Sp1基因表达的增强直接导致了APP基因表达的上调。 展开更多
关键词 C/ebp β 淀粉样前体蛋白 阿尔茨海默病 SP1 基因表达调控
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一例X连锁点状软骨发育不全2型患儿的临床及突变分析 被引量:1
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作者 常国营 周云芳 +5 位作者 殷蕾 顾龙君 应大明 陈惠金 王秀敏 王剑 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期527-530,共4页
目的分析1例重度矮小合并畸形患儿的临床特点及基因变异,探讨其遗传学病因。方法对患儿进行病史采集和辅助检查,提取患儿及其部分家系成员的外周血基因组DNA,用Agilent SureSelect方法构建测序文库,在Illumina平台上进行高通量测序... 目的分析1例重度矮小合并畸形患儿的临床特点及基因变异,探讨其遗传学病因。方法对患儿进行病史采集和辅助检查,提取患儿及其部分家系成员的外周血基因组DNA,用Agilent SureSelect方法构建测序文库,在Illumina平台上进行高通量测序,并用Sanger测序法进行验证。结果患儿,女,6岁10个月,表现为非匀称性身材矮小、特殊面容、四肢及脊柱畸形,左眼弱视,右眼白内障,呼吸道频发感染,尿频等,实验室检查提示总25-羟维生素D缺乏,其母亲、姨妈、弟弟亦表现为身材矮小。基因检测显示患儿EBP基因存在C.184C〉T(p.Arg62Trp)杂合突变,其母亲携带同样的突变,父亲和弟弟则未发现该突变。结论EBP基因C.184C〉T(p.Arg62Trp)杂合突变可能是该家系的发病原因。 展开更多
关键词 身材矮小 点状软骨发育不全 X-连锁 ebp基因 突变
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苏云金芽胞杆菌bkd基因簇的转录调控 被引量:3
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作者 王冠男 彭琦 +3 位作者 郑庆云 李杰 张杰 宋福平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1129-1137,共9页
【目的】通过分析苏云金芽胞杆菌bkd基因簇的转录调控和bkdR突变体的表型特征,明确bkdR所在基因簇的转录调控机制和对Cry蛋白产量的影响。【方法】通过生物信息学方法分析bkdR所在基因簇的结构,RT-PCR分析基因簇的转录单元,采用同源重... 【目的】通过分析苏云金芽胞杆菌bkd基因簇的转录调控和bkdR突变体的表型特征,明确bkdR所在基因簇的转录调控机制和对Cry蛋白产量的影响。【方法】通过生物信息学方法分析bkdR所在基因簇的结构,RT-PCR分析基因簇的转录单元,采用同源重组技术敲除苏云金芽胞杆菌HD73菌株的bkdR基因,利用启动子融合lacZ的方法分析启动子的转录活性。利用总蛋白定量确定Cry1Ac蛋白产量。【结果】bkd基因簇由8个基因组成,其中ptb-bkdB7个基因组成1个转录单元。ptb基因的启动子转录活性在sigL和bkdR突变体中均明显降低。bkdR基因的缺失对菌体生长、芽胞形成率和Cry1Ac蛋白产量无影响,但使运动能力减弱。【结论】bkd操纵子受Sigma 54控制,并由BkdR激活,bkdR基因的缺失对Cry蛋白产量无影响,对菌株的运动能力有影响。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 增强子结合蛋白(Enhancer BINDING Proteins 简称ebps) bkdR基因 转录起始因子Sigma54
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