USP5表达水平在急性髓系白血病中的意义及其对AKT/mTOR/4EBP1信号通路的调控作用研究

目的:探讨USP5在急性髓系白血病(AML)中的临床意义、功能作用和潜在下游机制。方法:基于TCGA数据库分析USP5在AML和正常组织中的表达及其与患者生存的相关性。利用慢病毒在Jurkat和HL-60细胞中敲低和过表达USP5,分别通过RT-qPCR和Western blot检测USP5 mRNA和蛋白的表达。通过CCK-8和甲基纤维素集落形成实验进行细胞增殖和生长检测,流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡。结果:与正常组织相比,USP5在AML中高表达,USP5的上调与AML患者的生存呈负相关。敲减和过表达USP5分别会抑制和促进AML细胞的增殖和集落生长。敲减USP5的Jurkat和HL-60细胞可导致细胞周期停滞和细胞凋亡,此外,敲除USP5可以抑制AKT、mTOR和4EBP1的磷酸化。结论:过表达USP5与AML患者的不良预后相关。靶向调控USP5可抑制AKT/mTOR/4EBP1信号传导,抑制AML细胞的增殖和生长。

健脾化瘀解毒法对结肠癌裸鼠模型癌及癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1表达的影响研究

目的研究健脾化瘀解毒法对结肠癌原位种植瘤癌及癌旁组织中蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化真核细胞起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)表达的影响。方法建立裸鼠结肠癌模型,随机分为空白组、模型组、健脾益气组、化瘀解毒组、健脾化瘀解毒组、雷帕霉素组及5-氟尿嘧啶组,每组5只。干预各组4周后,检测各组癌组织与癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平。结果与空白组比较,模型组癌组织与癌旁组织中AKT1、mTOR、p-4EBP1的表达均上调,差异有显著性(P<0.05),且AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平均为癌组织>癌旁组织>正常肠黏膜组织。与模型组比较,健脾化瘀解毒法能在一定程度上抑制结肠癌癌组织及癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05);健脾益气法、化瘀解毒法均能下调癌组织与癌旁组织中AKT、mTOR、p-4EBP1蛋白,但其降低水平不如健脾化瘀解毒法。结论健脾化瘀解毒法能够降低AKT、mTOR、p-4EBP1蛋白的表达,健脾益气法与化瘀解毒法协同增效,以获得最佳疗效。

EIF4EBP1在肿瘤中的研究进展

本综述探讨了EIF4EBP1基因在肿瘤研究中的进展,强调了其在多种肿瘤类型中的表达模式、功能作用以及作为潜在治疗靶点的重要性。EIF4EBP1,作为mTOR信号通路的关键调控因子,参与调控蛋白质合成和细胞生长。研究表明,EIF4EBP1在肾细胞癌、肝细胞癌、卵巢癌、子宫内膜癌和食管鳞癌等多种肿瘤中表现出不同的表达水平和生物学功能,其异常表达与肿瘤的发展和预后密切相关。在信号通路方面,EIF4EBP1与mTOR、AKT等通路的相互作用在肿瘤增殖、转移、凋亡逃逸和药物抗性中扮演着关键角色。此外,EIF4EBP1还通过其他信号通路如PI3K/AKT/mTOR、EGFR等影响肿瘤的发生和发展。这些发现为肿瘤的诊断、预后评估和治疗提供了新的视角。在治疗策略方面,综述讨论了针对EIF4EBP1的多种潜在治疗方法,包括mTOR抑制剂、AKT抑制剂、基因治疗以及联合治疗策略。这些策略在实验室研究中显示出显著的抗肿瘤效果,为未来的临床应用提供了希望。总之,EIF4EBP1作为一个多面性的调控因子,在肿瘤研究中具有重要的研究价值。未来的研究需要进一步阐明其在肿瘤发展中的具体作用机制,并探索其在临床治疗中的应用潜力。

pmTOR和4EBP1蛋白在慢性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及临床意义

目的:研究磷酸化mTOR蛋白(pmTOR)和下游特异性转录因子(4EBP1)在慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者外周血中的表达及临床意义。方法:随机选取我院血液病中心30例初诊CLL患者,分别留取初次治疗前后的外周血标本,作为初发组和治疗组。另外收集20例同期健康志愿者外周血标本作为对照,qPCR法检测pmTOR和4EBP1 mRNA表达,Western blot法检测pmTOR和4EBP1蛋白表达。结果:初发组pmTOR和4EBP1 mRNA水平均明显高于治疗组和对照组(P<0.05)、治疗组高于对照组(P<0.05)。初发组中pmTOR和4EBP1 mRNA、蛋白表达均呈正相关(P<0.05)。高危及极高危组、中危组pmTOR和4EBP1表达均高于低危组(P<0.05),高危及极高危组pmTOR和4EBP1表达均高于中危组(P<0.05)。结论:CLL中存在pmTOR和4EBP1的表达升高且与CLL危险度相关,pmTOR和4EBP1有望成为CLL临床诊治与判断预后的独特标志物。

Ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖的抑制作用

目的研究异位表达ebp1基因对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖能力的影响。方法pcDNA3.1-ebp1真核表达载体稳定转染舌鳞状细胞癌细胞系(Tca8113)。Western blot和RT-PCR验证稳定转染细胞中ebp1的表达;观察细胞生长、增殖,细胞周期改变,通过软琼脂克隆形成,裸小鼠体内成瘤等方法来评价ebp1抑制肿瘤细胞生长的作用。结果Ebp1转染细胞的细胞生长、增殖明显受抑制,细胞周期改变,G0/G1和G2/M细胞增多,而S期细胞减少,软琼脂克隆形成率明显下降;移植小鼠模型中肿瘤平均直径和重量Tca-0细胞明显大于Tca-1细胞和Tca-3细胞。结论Ebp1异位表达对Tca8113有多种抗肿瘤特性,可进一步探讨将ebp1基因作为舌鳞状细胞癌的治疗措施的可能性。

Ebp1和Ki67蛋白在胃癌组织中的表达变化及临床意义

目的观察Ebp1和Ki67蛋白在胃癌组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测121例胃癌组织和60例癌旁组织中的Ebp1和Ki67蛋白,分析二者的关系及其与临床病理参数的关系。结果胃癌组织中Ebp1和Ki67蛋白阳性表达率分别为26. 45%、73. 55%,均高于癌旁组织的5. 00%和0(P均<0. 05),且二者在胃癌组织中的表达呈正相关(r=0. 34,P <0. 05)。Ebp1蛋白在Borrmann分型Ⅲ型+Ⅳ型、低分化、有淋巴结转移胃癌组织中的阳性表达率均高于Borrmann分型Ⅰ型+Ⅱ型、高中分化及无淋巴结转移者(P均<0. 05),但Ebp1蛋白表达在不同性别、年龄、民族患者及肿瘤直径、TNM分期之间差异无统计学意义(P均> 0. 05)。Ki67蛋白在Borrmann分型Ⅲ型+Ⅳ型、低分化、TNM分期T3～T4期、有淋巴结转移胃癌组织中的阳性表达率均高于Borrmann分型Ⅰ型+Ⅱ型、高中分化、TNM分期T1～T2期、无淋巴结转移者(P均<0. 05),但Ki67蛋白表达在不同性别、年龄、民族患者及肿瘤直径之间差异无统计学意义(P均> 0. 05)。结论 Ebp1与Ki67蛋白均在胃癌组织中高表达,共同参与胃癌的发生、发展,二者联合检测有助于判断胃癌的恶性程度及侵袭、转移能力。

erbB-3结合蛋白ebp1对Tca8113细胞生长增殖的影响

目的探讨erbB3结合蛋白ebp1对口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞生长增殖的影响。方法免疫组化筛选erbB2/erbB3双阳性的口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞系;转染pcDNA3.1ebp1质粒至Tca8113细胞,G418筛选阳性细胞;RTPCR检测转染后细胞中ebp1的转录水平;通过细胞生长曲线、3HTdR摄入量以及集落形成率观察转染前后细胞生长增殖能力的改变。结果Tca8113细胞同时表达erbB2/erbB3;RTPCR显示转染后细胞中ebp1转录水平明显升高;Tca8113ebp1细胞生长曲线平缓,生长减慢;3HTdR摄入量明显减少,细胞增殖能力减弱。结论ebp1在体外能显著抑制Tca8113肿瘤细胞的生长增殖。

食管癌组织中Ebp1基因的表达及意义

目的研究人食管癌组织中Ebp1 mRNA表达水平及其与临床参数的关系。方法采用实时荧光定量PCR对220例食管癌组织和癌旁正常食管组织中Ebp1 mRNA表达水平进行测定。结果 150(68.18%)例食管癌样本中Ebp1 mRNA表达上调,单因素分析显示,与Ebp1 mRNA表达高度相关的临床参数包括年龄、家族史、淋巴结转移、肿瘤体积、分化程度、浸润深度和临床分期。而性别、病理类型和肿瘤位置与Ebp1 mRNA的表达无关。多因素分析结果表明:家族史、肿瘤体积、分化程度、浸润深度和临床分期均是Ebp1 mRNA表达的危险因素,而病理类型是Ebp1 mRNA表达的保护因素,髓质型的Ebp1 mRNA表达比溃疡型和蕈伞型高。结论 Ebp1在食管癌发展过程中起重要作用,可能作为食管癌病情进展的监测、转移潜能及预后评估方面的一个靶基因。

p-mTOR和p-4EBP1在横纹肌肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨p-mTOR、p-4EBP1在横纹肌肉瘤组织中的表达及临床意义,并探讨其相关性。方法:采用免疫组化(SABC法)检测70例横纹肌肉瘤组织p-mTOR、P-4EBPl的表达,分析其与横纹肌肉瘤患者临床病理特征及预后的关系。结果横纹肌肉瘤组织中p-mTOR、p-4EBP1蛋白阳性表达率分别为75.7%和65.7%,均呈正相关(P<0.05)。p-mTOR蛋白表达与其病理亚型相关性有统计学意义(P<0.05),p-mTOR蛋白阴性组患者3年总生存率、无疾病进展生存率均优于阳性组患者(P=0.001,P=0.014)。P-4EBPl蛋白表达与患者的肿瘤大小的相关性有统计学意义(P<0.05),p-4EBP1蛋白阴性组患者3年总生存率、无疾病进展生存率均优于阳性组患者(P=0.017,P=0.052)。单因素分析显示,p-mTOR、p-4EBP1、分期、病理类型、肿瘤大小是不良预后因素(P<0.05),而淋巴结转移情况、性别、年龄与预后无关(P>0.05)。结论:横纹肌肉瘤组织中存在p-mTOR、p-4EBPl蛋白的高表达与肿瘤临床特点有关,p-mTOR、p-4EBP1的表达存在相关性,p-mnTOR和p-4EBP1表达是横纹肌肉瘤的不良预后因素。

雷帕霉素及mTOR siRNA对宫颈癌HeLa细胞mTOR和4EBP1表达的影响

目的探讨mTOR蛋白与宫颈癌发生、发展过程的相关性及雷帕霉素和mTOR siRNA对宫颈癌细胞中mTOR、4EBP1表达的影响。方法应用免疫组织化学方法检测正常宫颈鳞状上皮组织、CIN组织和宫颈癌组织中mTOR蛋白的表达情况;应用RNAi技术及雷帕霉素分别处理宫颈癌HeLa细胞,运用原位杂交、免疫细胞化学技术分别检测处理前后HeLa细胞中mTOR、4EBP1 mRNA及蛋白的表达情况。结果 mTOR蛋白在30例正常宫颈上皮组织、20例CIN组织和45例宫颈癌组织中的阳性表达率分别为36.7%(11/30)、55.0%(11/20)和71.1%(32/45),正常宫颈组织、CIN组织与宫颈癌组织中mTOR阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);三种不同浓度的雷帕霉素及mTOR siRNA分别处理宫颈癌HeLa细胞24、48和72 h后,各组与相应对照组相比,mTOR、4EBP1 mRNA及蛋白的表达量均有显著下降(P均<0.05)。结论mTOR蛋白在宫颈癌组织中过表达,其过表达可能与宫颈癌的发生、发展过程相关;雷帕霉素和mTOR siRNA可抑制宫颈癌细胞mTOR mRNA及蛋白的表达,同时影响其下游4EBP1分子的表达。

磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌细胞中的定位表达研究

目的研究磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌细胞中的表达部位。方法随机选取于2005年3月—2009年9月就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院的285例乳腺癌患者,挑选乳腺癌组织及癌旁组织蜡块,重新切片,使用免疫组化方法检测磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在细胞中的表达部位。结果在285例癌组织切片中,p-mTOR、p-4EBP1和p-S6K1的染色阳性例数分别为279例、161例和226例;在285例癌旁组织切片中,p-mTOR、p-4EBP1和p-S6K1的染色阳性例数分别为239例、81例和136例。p-mTOR在癌组织中表达定位于细胞核有1例,细胞浆有270例,核浆共表达有8例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有0例,细胞浆有234例,核浆共表达有5例,癌组织与癌旁组织差异未见明显统计学意义(P=0.554);p-4EBP1在癌组织中表达定位于细胞核有3例,细胞浆有45例,核浆共表达有113例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有1例,细胞浆有6例,核浆共表达有74例,癌组织与癌旁组织差异有统计学意义(P=0.001);pS6K1在癌组织中表达定位于细胞核有3例,细胞浆有28例,核浆共表达有195例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有6例,细胞浆有0例,核浆共表达有130例,癌组织与癌旁组织差异有统计学意义(P=0.000)。结论mTOR信号通路中磷酸化4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌细胞浆中表达增高与乳腺癌相关。

Ebp1蛋白在贲门癌组织中的表达及临床意义

目的研究人贲门癌组织中Ebp1蛋白表达及其与临床参数的关系。方法采用免疫组织化学染色对120例贲门癌患者的癌组织和配对的癌旁正常组织中Ebp1蛋白表达水平进行测定。结果94(78.33%)例贲门癌样本中Ebp1蛋白表达下调。单因素分析显示,与Ebp1蛋白表达水平相关的临床参数有:家族史、淋巴结转移、肿瘤体积、分化程度和临床分期。有家族史组Ebp1蛋白表达水平显著低于无家族史组,淋巴结转移组Ebp1蛋白表达水平显著低于淋巴结未转移组。肿瘤体积越大、分化程度越低、临床分期越高,Ebp1蛋白表达水平越低。多因素分析显示,在贲门癌中淋巴结转移和临床分期均是Ebp1表达的保护因素。结论Ebp1在贲门癌发展过程中起重要作用;可能作为贲门癌病情进展的监测、转移潜能及预后评估方面的一个靶基因。

肝细胞癌组织中Ebp1蛋白的表达变化及意义

目的观察肝细胞癌(HCC)组织中ErbB-3结合蛋白Ebp1的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测36例HCC组织和癌旁组织中的Ebp1蛋白。结果 HCC组织中Ebp1蛋白阳性20例(55.6%),癌旁组织中3例(8.3%);两者比较,P<0.01。HbsAg阳性者Ebp1蛋白阳性表达显著高于HbsAg阴性者(P<0.01)。结论 HCC组织中Ebp1蛋白表达上调;Ebp1在HCC发生发展中发挥重要作用,且其表达与HBV感染有关。

erbB3结合蛋白-ebp1在腺样囊性癌组织中的表达及其临床意义

目的研究ebp1在涎腺腺样囊性癌中的表达,并探讨其与病理生物学特征及患者术后生存时间的关系,以期为评价ebp1作为涎腺腺样囊性癌早期诊断和患者预后的可能性提供实验依据。方法采用PV6000二步法免疫组化染色检测有完整随访资料的35例涎腺腺样囊性癌及相应癌旁正常组织中ebp1表达的差异。结果正常涎腺组织中ebp1的阳性表达(97.1%)明显高于涎腺腺样囊性癌组织中(74.3%)的表达(P=0.016)。ebp1蛋白表达强度与肿瘤的组织学类型及分期密切相关(P<0.05),但与患者的年龄、性别和侵袭转移类型无明显相关性(P>0.05)。其中,单纯筛状和筛状管状型ACC中ebp1的表达明显高于坏死型;T1-T2期患者中ebp1表达显著高于T3-T4期患者(P<0.05)。此外,ebp1阳性表达组患者的生存期明显高于ebp1阴性表达组,且具统计学差异(P=0.048)。结论 ebp1的下调可能促进涎腺腺样囊性癌的发生发展,可考虑作为涎腺腺样囊性癌临床评价肿瘤生物学行为及评估预后的指标。

贲门癌组织中Ebp1 mRNA的表达及其临床意义

背景与目的:Ebp1是近年发现的一种新型蛋白质,为表皮生长因子受体ErbB-3胞内近膜区结合蛋白,影响细胞增殖与分化。本研究旨在探讨人贲门癌组织中Ebp1 mRNA表达及其与临床参数的关系。方法:采用实时荧光定量PCR对120例贲门癌患者的癌组织和癌旁至少5cm处的正常贲门组织Ebp1 mRNA的表达水平进行测定。结果:73(60.83%)例贲门癌样本中Ebp1 mRNA表达下调,单因素分析显示,与贲门癌中Ebp1 mRNA的表达高度相关的临床参数包括年龄、淋巴结转移、家族史、肿瘤体积、病理分级和临床分期。多因素分析显示,年龄、家族史、肿瘤体积、病理分级及临床分期均是Ebp1表达的保护因素,而性别是Ebp1 mRNA表达的危险因素,即女性中Ebp1 mRNA表达高于男性。结论:Ebp1在贲门癌发展过程中起重要作用,可作为贲门癌病情进展的监测、转移潜能及预后评估方面的一个靶基因。

Ebp1、雄激素受体在前列腺癌中表达及相关性研究

目的:检测良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)和前列腺癌(Prostate cancer,PCa)中Ebp1(ErbB-3binding protein,Ebp1)和雄激素受体(Androgen receptor,AR)的表达,并分析其与PCa分级、前列腺特异性抗原(Prostate specificantigen,PSA)水平、分期的相互关系。方法:21例BPH,55例PCa,采用免疫组织化学(SP法)检测Ebp1、AR的表达情况,并分析二者在BPH、PCa中的表达关系,二者表达与PCa的病理分级、术前PSA水平、临床分期的关系。结果:PCa组织中Ebp1的阳性表达明显低于BPH组织(P<0.05),BPH、PCa组织中AR的阳性表达无明显差异(P>0.05),PCa组织中Ebp1、AR的表达与病理分级、临床分期密切相关(P<0.05),与PSA值无明显关系(P>0.05);PCa组织中Ebp1、AR在的表达存在正相关关系(P<0.05)。结论:Ebp1表达在BPH、PCa组织中有差异性,Ebp1可以作为诊断前列腺癌的一个潜在指标;随着PCa进展AR、Ebp1表达逐步减少,二者的表达存在正相关关系,两者结合可作为PCa预后评价的指标。

食管癌组织中Ebp1蛋白表达及意义

目的探讨Ebp1蛋白在食管癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化染色法检测220例食管癌患者的癌组织及其癌旁正常食管组织中Ebp1蛋白表达水平。结果食管癌组织中Ebp1蛋白阳性率显著高于正常食管组织(t=23.140,P=0.000)。单因素分析显示,与Ebp1 mRNA表达高度相关的临床参数包括年龄、家族史、淋巴结转移、病理分级、浸润深度和临床分期;多因素分析结果表明,家族史、淋巴结转移、肿瘤体积、浸润深度、病理分级均是Ebp1蛋白表达的危险因素。结论 Ebp1在食管癌发生、发展过程中起重要作用,可作为食管癌病情进展监测、转移潜能及预后评估方面的一个靶基因。

鼻咽癌组织p-eIF4E和p-4EBP1高表达与预后不良正相关

目的探讨磷酸化的真核细胞翻译起始因子4E(p-eIF4E)和磷酸化的eIF4E结合蛋白1(p-4EBP1)与鼻咽癌(NPC)临床病理特征和预后的相关性。方法免疫组织化学染色法检测314例NPC组织中p-eIF4E和p-4EBP1蛋白表达,利用SPSS16.0软件分析p-eIF4E和p-4EBP1蛋白表达与NPC临床病理特征及预后的相关性。结果 NPC组织中存在p-eIF4E和p-4EBP1蛋白异常高表达,阳性表达率分别为74.2%(233/314)、72.9%(229/314);p-eIF4E和p-4EBP1蛋白表达在淋巴结转移NPC组织中阳性表达率显著高于无淋巴结转移NPC组织,但与性别、年龄、临床分期和组织类型无关;NPC组织中p-eIF4E与p-4EBP1蛋白表达呈正相关,且p-eIF4E和p-4EBP1蛋白阳性的NPC患者生存时间明显短于p-eIF4E和p-4EBP1阴性患者,是NPC判断预后的独立因素。结论 p-eIF4E和p-4EBP1蛋白过表达可能与NPC的发生、发展及不良预后密切相关,p-eIF4E和p-4EBP1有望成为NPC临床诊治和判断预后的分子标志物。

濒危药用植物青天葵器官大小调控基因EBP1的克隆与分析

表皮生长因子受体3结合蛋白(ErbB3 binding protein,EBP1)是植物器官大小生长的关键调控因子。本研究应用RACE-PCR技术从濒危药用植物青天葵(Nevilia fordii(Hance)Schltr.)中克隆获得EBP1编码基因并命名为NfEBP1。该基因全长为1 188 bp(Genbank登记号JN854245),编码395个氨基酸。生物信息学分析表明,NfEBP1蛋白分子量为43.4 kD,等电点为6.12,整体表现为亲水性。NfEBP1不含信号肽、叶绿体转运肽或线粒体靶向肽,整体位于细胞膜外;其二级结构由21个α-螺旋、21个延伸链、18个β-转角和28个随意卷曲构成。NfEBP1含有PA2G4细胞增殖功能域,与其他植物EBP1有着高度的同源性,均归属APP_MetAP超级家族。NfEBP1在青天葵不同组织均有表达,相对表达量以叶片最高,球茎次之,叶柄则最低。本研究成功克隆青天葵EBP1基因并分析其在青天葵不同组织的表达水平,为下一步利用该基因促进青天葵器官生长研究提供了基础数据。

HER-2与Ebp1在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的研究HER-2与Ebp1蛋白在结直肠癌组织中的表达,并探讨其与结直肠癌临床病理特征的关系及意义。方法应用免疫组织化学EnVision法对65例结直肠癌患者的肿瘤组织及正常结直肠组织分别行HER-2与Ebp1蛋白检测,结果与临床病理特征进行分析。结果结直肠癌组织中HER-2的表达明显高于正常结直肠组织(P<0.05),Ebp1的表达明显低于正常结直肠组织(P<0.05);结直肠癌组织中HER-2与Epb1表达与患者年龄、性别以及家族史无关,HER-2的高表达与Epb1的低表达与肿瘤的TNM分期、分化程度以及淋巴结转移呈正相关(P均<0.05);HER-2与Ebp1蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论 HER-2和Ebp1的联合检测有助于对肿瘤转移及预后情况的判断,并为以Ebp1作为生物学靶点的肿瘤免疫治疗研究提供了依据。