混合脱钙液与EDTA脱钙液对骨组织切片HE染色影响的分析

目的 比较不同脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响.方法 选取16例大鼠胫骨标本,运用两种常用的脱钙液(混合脱钙液和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响.结果 两种脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别.结论 混合脱钙液时间最短,但切片和染色效果最差;EDTA脱钙液对骨组织损伤小,HE染色效果最好,但用时较长.

不同浓度EDTA脱钙液对骨骼DNA提取效率的影响

目的 比较不同浓度EDTA脱钙液对骨骼DNA提取效率,探讨快捷高效的骨骼DNA提取方法。方法 成人股骨预处理后,使用0.25mol/L、0.5mol/L、1mol/L EDTA脱钙液,分别脱钙3h、6h、12h、24h;提取DNA,并进行浓度测定和STR检测。结果 在3~24h时间段内,骨骼样本经3种不同浓度的EDTA脱钙液脱钙,提取的DNA浓度值不同;其中使用0.25mol/L EDTA脱钙,浓度值逐渐增高,12~24h最高,16个STR基因座全部检出率为62.5%;使用0.5mol/L EDTA脱钙,浓度值先升高再降低,6~12h最高,基因座全部检出率为90%;使用1mol/L EDTA脱钙,浓度值逐渐降低,3~6h最高,基因座全部检出率为67.5%。比较相同脱钙时间不同EDTA浓度脱钙效果,0.5mol/L EDTA所有时间段效率均为最高。结论 EDTA脱钙液浓度和时间对骨骼DNA的提取有一定影响,使用0.5mol/L EDTA脱钙液脱钙6~12h效果最佳。

不同脱钙方式对骨组织样本不同病理分析的影响

骨与软组织肿瘤生物学特性复杂,在临床病理工作中有时依据形态学较难做出准确的病理诊断,需行免疫组化、FISH、PCR、Sanger测序及NGS等检测^([1])。骨组织质地坚硬,应使用脱钙液将组织软化后制片。目前,临床使用较多的仍为混合酸性脱钙液,其脱钙速度快,但易对组织抗原及DNA造成不可逆的损伤;EDTA性质温和,对组织抗原及核酸保存较好,但缺点是脱钙时间久且效果差。有研究显示改良EDTA常温处理骨髓样本20~24 h,HE染色佳,免疫组化染色强度适中,定位准确^([2])。本科室采用酸性脱钙液和改良EDTA两种脱钙液通过5种不同的脱钙条件,寻找出最佳的脱钙方法,现报道如下。