基于响应面法对枯草芽孢杆菌WB600-eg2发酵产内切葡聚糖苷酶条件的优化

出发菌株枯草芽孢杆菌WB600-eg2是通过分子生物学手段构建的重组菌,内切葡聚糖苷酶酶活为1.174IU/mL.本文通过响应面法对装液量、初始pH、接种量、转速、酵母粉添加量等发酵条件进行优化,得到最优发酵条件为装液量55mL/250mL、初始pH7.2、接种量10%、转速170r/min、酵母粉添加量0.4%.在此发酵条件下测得内切葡聚糖苷酶酶活为1.573IU/mL,比未优化条件下提高了33.9%.

鼻息肉中嗜酸性粒细胞浸润和活化与白细胞介素5表达

目的通过观察鼻息肉中嗜酸性粒细胞的浸润和活化状态,以及白细胞介素5(interleukin-5,IL-5)的表达水平,揭示二者的关系,探索鼻息肉中嗜酸性粒细胞浸润增多调节的机制。方法对30例鼻息肉组织,分别采用chromotrope2R法标记鼻息肉组织中的嗜酸性粒细胞,采用免疫组织化学ABC法,观察嗜酸性粒细胞的活化状态和IL-5的表达水平,然后进行相关性分析。结果①chromotrope 2R染色可特异性地将嗜酸粒细胞的胞浆染成粉红色,活化嗜酸性粒细胞(EG2阳性细胞)和IL-5阳性细胞胞浆中可见棕褐色颗粒。30例鼻息肉中嗜酸性粒细胞的密度为50.7±16.1/0.25mm2,活化嗜酸性粒细胞的密度为20.7±14.3/0.25mm2,IL-5阳性细胞密度为15.9±5.7/0.25mm2,上述三项指标在变应性患者和非变应性患者比较未见显著性差异(P>0.05);②鼻息肉中IL-5阳性细胞密度与chromotrope2R阳性细胞密度密切相关(y=14.723+2.012x,r=0.642,P<0.01),与EG2阳性细胞密度也存在相关关系(y=11.817+1.092x,r=0.602,P<0.05)。结论嗜酸性粒细胞是鼻息肉组织中IL-5的来源之一,IL-5的表达水平是鼻息肉中嗜酸性粒细胞的浸润和活化的调节因素之一。

低纤维素酶背景里氏木霉菌株的构建和应用

丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei)产生的纤维素酶主要包括纤维二糖水解酶和内切葡聚糖酶。在使用里氏木霉表达外源基因时,它们会形成较高的纤维素酶背景,而且其表达还可能会导致对细胞转录、翻译和分泌等相关资源的占用。应用CRISPR/Cas9技术,在体外组装Cas9/gRNA复合物并转化里氏木霉以定点敲除主要的纤维二糖水解酶cbh1基因,同时结合RNAi干扰技术来沉默主要的内切葡聚糖酶eg2基因,以期一步构建里氏木霉低纤维素酶背景的表达系统。获得了一株纤维素酶表达显著下降的11号转化子SUS6。该转化子中,cbh1的表达完全消失,而eg2基因的表达水平较出发菌株SUS5降低了98%。以该转化子为宿主表达外源基因NfBgl3A,两个代表性转化子的β-葡萄糖苷酶酶活最高分别为172.4和79.3 U·mL^-1,远高于以出发菌株(高纤维素酶背景)为宿主表达β-葡萄糖苷酶酶活(两个代表转化子分别为11.6和31.9 U·mL^-1)。因此,构建低纤维素酶背景的菌株作为表达宿主,还可明显的提高某些异源基因的表达水平。

基于全局引导策略的多智能体火灾疏散研究

为提高大型建筑火灾环境中人员的疏散效率,解决动态环境中的多智能体路径规划问题,文中提出一种基于全局引导策略的多智能体深度强化学习路径规划EG2RL模型。该模型通过火灾数值仿真技术模拟建筑室内火灾环境,并将深度强化学习与多智能体相结合进行路径规划;同时,对全局引导策略和神经网络结构进行改进,以更加适用于复杂动态且多出口环境时的多人员疏散情况。疏散人员基于全局引导信息的帮助,能够在动态的火灾环境中避免拥挤,躲避障碍物,并向安全出口移动。最后,进行半导体厂房中火灾仿真及火灾环境中人员疏散训练实验。结果表明,文中模型可用于建筑室内火灾环境中的多人员疏散,相比于其他方法,该模型能够优化人员疏散的路径选择,提高人员疏散的效率。

哮喘致死患者肺组织EG_1和EG_2的检测及分析

目的 为了研究哮喘发作致死患者肺组织嗜酸性粒细胞浸润情况。方法 研究分成 3组 ,A组为死于哮喘发作 ,B组有哮喘病史但死于非哮喘发作 ,C组无哮喘病史。应用免疫组化技术 ,检测不同死因肺组织单克隆抗体EG1 和EG2 的阳性细胞。结果 ( 1)哮喘发作致死组的肺组织EG1 和EG2 的阳性细胞明显高于其他两组 ,而哮喘患者非哮喘发作致死组的肺组织EG1 和EG2 的阳性细胞与无哮喘病史组比较无显著差异。 ( 2 )在哮喘发作致死组的支气管与肺实质EG1 阳性细胞数无明显差异 ,但在肺实质的EG2 的阳性细胞明显高于较大的支气管。结论 在哮喘发作致死患者气道和肺组织有大量的嗜酸性粒细胞浸润 。