EGF偶联牛血清白蛋白纳米载体的构建

目的:制备表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)偶联牛血清白蛋白纳米载体,作为多种高表达表皮生长因子受体(Epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的肿瘤细胞主动靶向给药的新途径。方法:采用二次超声乳化和溶剂挥发技术制备白蛋白纳米载体,通过化学交联试剂将EGF与白蛋白纳米载体偶联,制得EGF偶联白蛋白纳米载体并进行核素标记,通过葡聚糖凝胶柱及聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证偶联效果和EGF偶联的程度。结果:成功制备得到平均粒径为34nm的牛血清白蛋白纳米载体,而且EGF与白蛋白纳米载体偶联率较高,所得的EGF-BSA纳米载体室温稳定性和血清稳定性均较好。结论:成功制备得到体积较小的牛血清白蛋白纳米载体和EGF偶联牛血清白蛋白纳米载体,为进一步探讨其体外肿瘤细胞靶向性及体内分布规律奠定了实验基础。

EGF偶联白蛋白靶向纳米载体在荷瘤裸鼠体内分布的研究

目的:本研究旨在探讨125I-EGF-BSA靶向纳米载体在荷人乳腺癌SK-BR3裸鼠体内的分布。方法:采用超声乳化-化学交联方法制备牛血清白蛋白纳米载体,经过羧和反应将与白蛋白纳米载体表面的活性氨基与EGF进行偶联反应,制备EGF偶联白蛋白纳米载体。在裸鼠体内进行荷人乳腺癌实验,将荷瘤裸鼠随机分为3个实验组,125I-BSA非纳米载体组(直接在BSA上标记125I),125I-EGF-BSA靶向纳米载体组和125I-BSA纳米载体组,检测不同时间点各组织的放射分布。结果:125I-EGF-BSA靶向纳米载体的瘤/血比值和瘤/肌肉比值明显高于其它两个给药组,差异有统计学意义(P<0.05)。125I-EGF-BSA靶向纳米载体在荷瘤裸鼠体内的放射性瘤/血比值和瘤/肌肉比值随时间逐渐升高,在2h达峰值,后略有下降。做方差分析,同一时间点125I-EGF-BSA靶向纳米载体的放射性瘤/血比值和瘤/肌肉比值均高于其他两个给药组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。25I-EGF-BSA靶向纳米载体在肝、脾、肺等器官分布明显低于其它两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:125I-EGF-BSA靶向纳米载体对裸鼠体内的人乳腺癌SK-BR3肿瘤具有明显的靶向性,而肝、脾、肺等器官的分布少。

190例胃癌患者中医证型与血清EGF水平的相关性研究

探讨胃癌患者辨证分型与血清表皮生长因子(EGF)水平之间的关系。方法:临床收集190例不同证型胃癌患者,ELISA测定血清EGF水平,SPSS 16.0软件分析胃癌证型与血清EGF水平的相关性。结果:痰浊凝滞证与脾胃虚弱、胃热阴伤、气阴两虚、湿热蕴毒以及瘀血内阻证之间有统计学差异(P<0.05)。性别分层分析显示,男性痰浊凝滞证与脾胃虚弱、胃热阴伤、湿热蕴毒以及瘀血内阻证之间有统计学差异(P<0.05)。结论:血清EGF水平与胃癌患者辨证分型可能存在相关性。

不同血清浓度对bFGF联合EGF诱导BMSCs向神经细胞分化的影响

目的:探讨不同血清浓度条件下碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向神经细胞分化方向的影响。方法:全骨髓贴壁法体外分离培养BMSCs,流式细胞法检测BMSCs表面骨髓基质标志CD90和造血细胞标志CD45,MTT法绘制第3(P3)代BMSCs生长曲线。取P4代细胞分为3组给予不同诱导条件,分别给予含20 ng/ml的bFGF和20 ng/ml EGF的无胎牛血清(A组)、10 ml/L胎牛血清(B组)及100 ml/L胎牛血清(C组)的DMEM/F-12培养液进行诱导,倒置显微镜观察细胞的形态变化,诱导6 d时免疫组织化学法检测细胞内神经元特异性烯醇化酶(NSE)及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,台盼蓝染色检测各组细胞的活力。结果:BM-SCs经3-4次传代培养后形态大致呈单一的长梭形或扁平形,流式细胞鉴定显示CD90阳性,CD45阴性;细胞生长曲线近似呈"S"形;诱导后可见细胞胞体收缩,呈双极、多极并伸出突起;诱导6 d时3组活细胞率分别为:86.57%、95.29%、97.32%;免疫组化各组均见NSE、GFAP表达,3组NSE阳性率高于GFAP,A组NSE阳性率高于B、C组,差异具有统计学意义(P<0.01),C组NSE阳性率高于B组,差异具有统计学意义(P<0.01),A组GFAP阳性率低于B、C组,差异具有统计学意义(P<0.01),C组GFAP阳性率高于B组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:bFGF联合EGF可诱导BMSCs向神经细胞分化,在无血清条件下趋向于向神经元分化,在高浓度血清条件下趋向胶质细胞分化。

白内障患者血清及房水氧化应激及EGF、FGF、NO、TNF-α的变化

目的:研究探讨白内障患者血清及房水氧化应激及EGF、FGF、NO、TNF-α的变化情况。方法:选取本院收治的70例白内障患者,将其列为观察组,之后再选取同年收治的70例眼外伤患者为对照组,检测和对比两组房水氧化应激、血清及NO、EGF、TNF-α、FGF的变化水平,同时检测比较观察组患者中不同分期者的房水和血清。结果:观察组血清及房水CAT、SOD均低于对照组,血清及房水MDA及EGF、FGF、NO、TNF-α水平则均高于对照组,并且初发期、未成熟期、成熟期及过熟期患者的房水检测、血清差异对比有统计学意义(P<0.05)。结论:白内障患者血清及房水氧化应激及EGF、FGF、NO、TNF-α的变化较大,且不同疾病分期者之间的差异也较为明显。

慢性乙型肝炎病理舌苔形成与唾液、血清h-EGF含量变化的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者舌苔变化与唾液、血清表皮生长因子(h-EGF)含量变化及舌苔上皮细胞表皮生长因子受体(h-EGFR)的关系,探讨唾液血清h-EGF在乙肝病理舌苔形成中的作用。方法选取128例慢性乙型肝炎患者为研究对象,以15例其它消化系统疾病、15例其它系统疾病及15例健康人做对照组,放免法检测受试者唾液、血清h-EGF含量,免疫组化法检测舌苔上皮细胞h-EGFR表达,观察并记录病理舌象进行分析。结果与正常对照组相比,病理厚苔组唾液、血清h-EGF含量明显升高(P<0.01)。乙肝组白厚(腻)苔、黄腻苔舌h-EG FR表达增强,唾液、血清h-EG F含量明显升高,与其它对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论慢性乙肝病理舌苔的形成与唾液h-EGF含量的改变有关。

再生障碍性贫血患者血清VEGF、EGF、EPO、TPO及氧化应激的变化

目的研究及探讨再生障碍性贫血患者血清VEGF、EGF、EPO、TPO及氧化应激的变化。方法选取54例再生障碍性贫血患者为观察组,54名健康同龄人员为对照组,将2组研究对象的血清VEGF、EGF、EPO、TPO、酶抗氧化指标及非酶抗氧化指标进行检测及比较,比较观察组中不同Camitta分型与分类患者的血清VEGF、EGF、EPO、TPO、酶抗氧化指标及非酶抗氧化指标,并以Logistic分析上述血清指标与再生障碍性贫血患者的关系。结果观察组的血清VEGF及EGF水平均显著低于对照组,而血清EPO及TPO水平均显著高于对照组,血清酶抗氧化指标中的TAC、SOD及CAT均显著低于对照组,血清MDA则显著高于对照组,血清非酶抗氧化指标中的MT、GSH、Zn及Se均显著低于对照组,血清Cu则显著高于对照组。观察组中不同Camitta分型患者的血清VEGF、EGF、EPO、TPO、酶抗氧化指标及非酶抗氧化指标水平也存在显著差异。经Logistic分析显示,上述血清指标均与再生障碍性贫血有密切的关系(P<0.05)。结论再生障碍性贫血患者的血清VEGF、EGF、EPO、TPO及氧化应激指标呈现明显异常的状态,且上述检测指标均与本病有密切的关系。

慢乙肝患者舌苔与舌苔细胞凋亡、唾液、血清EGF含量变化及血清HBV DNA的关系

目的:研究慢性乙型肝炎患者病理舌苔与表皮生长因子(EGF)、舌苔细胞凋亡及血清HBV DNA定量的关系,探讨表皮生长因子、细胞凋亡及HBVDNA在乙肝病理舌苔形成中的作用。方法:选取128例慢性乙型肝炎患者为研究对象,以15例其它消化系统疾病病人,15例其它系统疾病病人及15例健康人做对照组。放免法检测受试者唾液、血清EGF含量;免疫组化法检测舌苔上皮细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达;末端标记测定法检测舌苔凋亡细胞;荧光定量PCR法检测血清HBV DNA含量。结果:与生理性薄白苔组相比,各病理舌苔组唾液、血清EGF含量及舌上皮细胞EGFR阳性细胞率均升高,以黄腻苔和白厚苔组升高最明显,与其它组相比,差异有统计学意义(P<0.01);与生理性薄白苔组相比,除少苔或剥苔组外,各病理舌苔组凋亡细胞数目均有所增加,以黄腻苔和白厚苔组增多最明显,但黄腻苔和白厚苔组舌上皮细胞凋亡指数(AI)最低(P<0.01),少苔或剥苔组AI最高;各病理舌苔组相比,黄腻苔和白厚苔组血清HBV DNA含量最高,薄白苔组最低,与厚苔组相比,差异有统计学意义(P<0.05);薄白苔组病毒复制以少量(<105copies/ml)为主,与其它组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:慢乙肝患者病理舌苔的形成与唾液中EGF作用于舌上皮细胞引起舌苔上皮细胞不同程度的增殖、分化有关。

表皮生长因子与女性不孕关系的探讨

为探讨表皮生长因子 (EGF)与女性不孕的关系 ,用放射免疫法测定血清、尿液、子宫内膜、宫颈粘液的 EGF。结果显示不孕组血清、尿液 EGF均明显高于对照组 (P<0 .0 0 1 ) ;不孕组子宫内膜 EGF明显低于对照组 (P<0 .0 0 1 ) ;不孕组与对照组宫颈粘液 EGF无显著性差异。说明 EGF与女性不孕症有关系 ,不孕症患者血清 EGF呈高水平 ,而子宫内膜中

表皮生长因子和胎牛血清对猪体细胞克隆胚胎发育的影响

为了研究胚胎培养液中添加表皮生长因子(EGF)和胎牛血清(FBS)对猪体细胞克隆胚胎发育的影响,试验将卵母细胞成熟培养42h后构建克隆胚,进行电融合激活,再使用6-DMAP(2mmol/L)进行化学辅助激活,然后移入NCSU-23培养基培养,激活后第2天添加0,10,20,30ng/mLEGF,7d后检查囊胚率、囊胚细胞数;激活后第0,2,4,6天添加10%FBS,7d后检查囊胚率、囊胚细胞数。结果表明:2～4细胞阶段添加EGF,添加20ng/mLEGF组的囊胚率显著高于对照组(P<0.05)及其他处理,而囊胚细胞数与对照组无显著差异(P>0.05);在第4天添加FBS组的囊胚率显著高于对照组(P<0.05)和其他处理组,而囊胚细胞数与对照组无显著差异(P>0.05)。结果说明添加20ng/mL的EGF能促进猪体细胞克隆胚胎的发育率,在第4天添加FBS更有利于胚胎的发育。

安胃汤对胃溃疡大鼠溃疡修复及表皮生长因子的影响

目的探讨安胃汤对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型的作用机制。方法采用放射免疫方法和免疫组织化学方法观察安胃汤对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型愈合时血清EGF和胃黏膜EGF表达的影响,对后者进行图像分析及统计学处理。结果与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组可提高血清表皮生长因子,差异具有统计学意义(P<0.01),安胃汤大剂量组与雷尼替丁组相比差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组可显著增强胃黏膜EGF,差异具有统计学意义(P<0.01),安胃汤大剂量组强于雷尼替丁组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论安胃汤可能通过提高血清EGF和增强胃黏膜EGF表达,而促进溃疡愈合、提高溃疡愈合的质量。

增殖性糖尿病视网膜病变患者血清及玻璃体中胰岛素样生长因子-1及表皮生长因子含量测定

目的 :观察增殖性糖尿病视网膜病变 (PDR)中胰岛素样生长因子 - 1 (IGF - 1 )和表皮生长因子 (EGF)的变化。方法 :2 0例PDR伴不同程度增生性玻璃体视网膜病变 (proliferativevitreoretinopathy ,PVR)的患者为观察组 ,2 0例健康人及无眼病的尸体眼 1 0眼为对照 ,用放射免疫方法检测观察组和对照组血清及玻璃体切割物中IGF - 1及EGF的含量。结果 :PDR患者血清及玻璃体切割物中IGF - 1及EGF的含量明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;观察组玻璃体与血清中IGF - 1及EGF含量差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :PDR患者血清及玻璃体切割物中高表达IGF - 1及EGF ,IGF -

不同水平表皮生长因子对早期断奶仔猪生产性能、血清理化指标及免疫功能的影响

为探讨表皮生长因子E(GF)对早期断奶仔猪生产性能、血清理化指标及免疫功能的影响,选取21日龄断奶仔猪25头,初重(5.83±0.60)kg,公母比例3:2,随机等分为5组,分别注射不同水平EGF,对照组为生理盐水,试验期14天。结果表明:仔猪生产性能、血清理化指标及IgG含量与每天所用剂量在1.0～9.0μgk/gB W范围之内随剂量增加日趋改善,最佳水平为每天6.0μg k/gB W。与对照组相比,日增重提高65.42%P(<0.05),料肉比减少48.15%P(<0.01),血清TP、ALB、GLO和IgG水平分别增加35.57%P(<0.01)、34.41%P(<0.01)、25.31%P(<0.05)和22.22%P(<0.1);同时血清CK与LDH含量分别降低34.45%P(<0.05)和48.41%P(<0.1);EGF作用具有后续性,效果主要体现在断奶后第2周。

饲粮中添加表皮生长因子对断奶仔猪血清生化指标、血清游离氨基酸和小肠黏膜水解氨基酸含量的影响

本试验旨在研究饲粮中添加表皮生长因子(EGF)对断奶仔猪血清生化指标、血清游离氨基酸和小肠黏膜水解氨基酸含量的影响。选取体重相近、健康的21日龄断奶仔猪42头,随机分成3组,每组14个重复,每个重复1头仔猪。Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮;Ⅱ组和Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加200和400μg/kg EGF的试验饲粮。试验期为14 d。结果表明:1)饲粮中添加EGF对断奶仔猪平均日增重、平均日采食量和料重比没有显著影响(P>0.05)。2)断奶后7 d,Ⅱ组血清尿酸含量显著高于Ⅰ组(P<0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组血清免疫球蛋白A含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。断奶后14 d,Ⅲ组血清肌酐含量显著低于Ⅰ组(P<0.05),且Ⅲ组血清谷草转氨酶/谷丙转氨酶值显著低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。饲粮中添加EGF对断奶仔猪血清尿素氮、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、球蛋白、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、胰岛素样生长因子-1、生长激素含量,白蛋白/球蛋白,谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性没有显著影响(P>0.05)。3)断奶后7 d,Ⅱ组血清牛磺酸、丙氨酸、瓜氨酸和组氨酸含量显著低于Ⅲ组(P<0.05),Ⅱ组血清精氨酸、谷氨酸和丝氨酸含量显著低于Ⅰ组和Ⅲ组(P<0.05),各组之间其他血清氨基酸含量无显著差异(P>0.05)。4)断奶后14 d,与Ⅰ组和Ⅲ组比,Ⅱ组空肠黏膜缬氨酸和回肠黏膜半胱氨酸含量显著升高(P<0.05),Ⅱ组空肠黏膜丝氨酸、谷氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸和组氨酸含量也有升高趋势(P<0.10)。综上所述,饲粮中添加高剂量EGF能够降低断奶仔猪血清免疫球蛋白A等生化指标含量,而饲粮中添加低剂量EGF能够降低血清和小肠黏膜部分氨基酸含量。

中西药结合治疗消化性溃疡的临床研究

目的:探讨中西药物结合治疗消化性溃疡的疗效及抗复发作用。方法:选取我院2011-2012年期间治疗的消化性溃疡患者90例,随机分为三组:中药组30例,中西药组30例,西药组30例,分别给予益气和胃胶囊、益气和胃胶囊+奥美拉唑、奥美拉唑,观察期均为3个月,采用放射免疫法,检测治疗前后患者血清及内镜下钳取黏膜组织中的EGF和PGE_2含量。结果:中西药物结合治疗后,胃镜疗效(86.7%)及6、9个月溃疡复发率控制均优于中药组和西药组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);血清及黏膜EGF和PGE_2含量均显著增加,三组比较总体差异有统计学意义(P<0.05)。结论:提高溃疡愈合质量,增加血清及黏膜EGF和PGE_2含量是中西药物结合抗消化性溃疡复发的关键。

原因不明习惯性流产主动免疫治疗后血清表皮生长因子水平变化

目的:检测原因不明习惯性流产(UHA)患者免疫治疗前后血清中表皮生长因子(EGF)水平变化,探讨其变化在UHA发病及治疗中的作用。方法:采用皮下注射丈夫淋巴细胞的方法治疗UHA患者;应用ELISA法检测正常非孕妇女30例和UHA妇女30例免疫治疗前后血清EGF水平变化(Pg/mL)。结果:UHA患者血清中EGF水平(107.5±47.9)明显低于正常非孕妇女(169.1±56.6),P<0.01;免疫治疗后EGF水平(152.3±63.9),比治疗前明显升高,P<0.01。结论:血清EGF水平降低可能与UHA的发生相关,免疫治疗可上调UHA患者血清中EGF水平,利于胎盘胎儿生长,使妊娠成功。

康复新液结合臭氧对复发性阿弗他溃疡唾液表皮生长因子及血清IL-6、SOD、SIgA的影响

目的探讨复发性阿弗他溃疡发病群体、发病部位和治疗的方法,同时对康复新液结合臭氧的治疗效果进行讨论,分析其对唾液表皮生长因子(EGF)及血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)的影响。方法选取2016年1月-2018年1月杭州师范大学附属医院收治的64例复发性阿弗他溃疡患者,应用抽签法将患者随机分为2组,对照组应用臭氧治疗,研究组在对照组的基础上应用康复新液治疗。比较2组治疗前后IgG、SIgA、SOD变化、VAS评分和溃疡持续时间及血清TNF-α、IL-6水平等。结果研究组治疗后IgG和SIgA变化大于对照组(均P<0.05),研究组IgG、SIgA、SOD值分别为(23.52±6.44)g/L、(64.62±11.23)g/L、(290.26±57.33)g/L;研究组VAS评分为(2.01±0.23)分和溃疡持续时间为(3.25±0.96)d,均低于对照组(均P<0.05);研究组治疗后TNF-α、IL-6及EGF水平分别为(134.02±20.15)ng/mL、(73.23±8.73)ng/mL、(3.2±0.6)ng/mL,均低于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论使用康复新液结合臭氧治疗复发性阿弗他溃疡,效果理想,并且对患者受损表皮的再生和修复起到了一定的促进作用,有效改善了患者唾液EGF及血清IL-6、SOD、SIgA水平。

大黄与虫对药含药血清对胰岛素样生长因子-I和表皮生长因子促进人子宫肌瘤细胞增殖的影响

目的:观察大黄虫对药不同剂量含药血清对胰岛素样生长因子-I(IGF-I)和表皮生长因子(EGF)促进原代培养人子宫肌瘤细胞增殖的影响。方法:原代培养并建立人子宫平滑肌瘤细胞系,采用中药血清药理学方法处理细胞,以MTT比色法检测不同剂量含药血清作用于经IGF-I、EGF处理的子宫肌瘤细胞12、24、48、72h的光密度值,计算细胞存活率。结果:大黄虫对药含药血清可抑制IGF-I、EGF对子宫肌瘤细胞的促增殖作用。结论:大黄虫对药含药血清通过抑制IGF-I、EGF对子宫肌瘤细胞的增殖作用,发挥其抑制肌瘤生长的作用,这可能是该对药治疗子宫肌瘤的机理之一。