良、恶性前列腺病变组织P_(53)、C-erbB-2和EGF-R表达及其临床意义

目的 探讨P_(53)、C-erbB-2和EGF-R在良、恶性前列腺病变组织中的表达差异及其临床意义。方法 采用免疫组织化学ABC法,分别对34例良性前列腺增生(BPH)、29例前列腺癌(Pca)组织中P_(53)、C-erbB-2和EGF-R表达进行研究。结果 在29例Pca中P^(53)阳性染色5例,阳性率为17％(5/29),而在良性前列腺组织中则无一例阳性染色(P<0.05)。在良性前列腺增生征中C-erbB-2和EGF-R阳性表达率分别为18％(6/34)和88％(30/34);而在前列腺癌中C-crbB-2和EGF-R的阳性率分别为21％(6/29)和17％(5/29),前列腺癌分期和分级与P_(53)、C-erbB-2和EGF-R的表达之间没有明显的相关性(P>O.05)。结论 尽管P_(53)、EGF-R在良性,恶性前列腺病变之间表达有差异(P<0.05),但是他们与肿瘤的分期和分级等预后因素无关。

EGF-R和C-erbB-2在前列腺癌中的表达及其相关性研究

目的:探讨 EGF- R(C- erb B- 1)和 C- erb B- 2在前列腺癌 (PCa)中的表达及其相关性。方法 :采用免疫组化 ABC法 ,分别对 2 9例前列腺癌患者进行了 EGF- R(C- erb B- 1)和 C- erb B- 2表达的研究。结果 :2 9例前列腺癌患者 ,EGF- R表达仅有 5例阳性 (17.2 % ,5 / 2 9) ,C- erb B- 2阳性表达有 13例 (4 4.8% ,13/ 2 9) ,阳性表达率之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;EGF- R阳性表达与肿瘤的临床分期及病理分级无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,而同时 C- erb B- 2的阳性表达与肿瘤的分期、分级有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :EGF- R表达与前列腺癌的临床分期和分级可能无关 ,而 C- erb B- 2表达与前列癌的临床分期和分级等因素可能有关。

全反式维甲酸对VSMC、EGF-R基因表达和[Ca^(2+)]_i的影响

应用细胞培养、斑点杂交和荧光探针技术,观察到全反式维甲酸明显抑制胎牛血清诱导的血管平滑肌细胞表皮生长因子受体 mRNA 表达和[Ca^(2+)]_i 增加。

恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 EGF2结构域的表达及免疫反应特点

目的制备恶性疟原虫红内期抗原MSP1C-末端EGF2区域,用于分析该区域在自然感染条件下的免疫应答特点。方法制备恶性疟原虫裂殖体表面蛋白1(MSP1)C-末端的EGF2片段,并将其与谷胱甘肽转移酶(GST)片段融合,通过电转化整合入毕氏酵母的基因组,进行诱导表达,纯化表达产物,并对其免疫特性进行初步分析。结果初始对单个EGF2片段表达未成功,与GST片段融合后检测到表达,经过Ni柱浓缩纯化的诱导表达上清,经SDS-PAGE分析在33kDa处出现表达的蛋白条带,经Western blot检测表明该蛋白为所需的目的蛋白;ELISA结果表明GST-EGF2重组蛋白能够与免疫兔血清反应,且平均抗体滴度可达5981。结论利用毕氏酵母表达系统表达了EGF2结构域,并证明该蛋白能与特异抗体反应,可用于EGF2相关的疟疾保护性免疫的研究。

益气健脾活血中药对萎缩性胃炎TNF-α、IL-2和EGF表达的影响

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-2和表皮生长因子(EGF)在气虚血瘀型萎缩性胃炎(CAG)进程中的变化及益气健脾活血中药的干预效应。方法将90只大鼠随机分为空白组(n=10)和模型组(n=80),除空白组外其余大鼠采用综合法复制气虚血瘀型CAG动物模型,并于造模中抽检大鼠,至第12 w评估大鼠胃黏膜肠化生形成后,CAG模型大鼠采用随机数字表法分为模型组、益气健脾活血中药大、中、小剂量组和维酶素组,分别施药治疗90 d后对各组大鼠胃黏膜TNF-α、IL-2和血清EGF进行检测。结果与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜TNF-α、IL-2和血清EGF水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,益气健脾活血中药可显著降低TNF-α、IL-2和EGF水平(P<0.05),且大剂量组作用显著。结论益气健脾活血中药具有改善胃黏膜血流量,减轻炎症反应和调整免疫功能的作用。

原癌基因c-erbB_2在原始卵泡启动生长中的作用

目的:探讨原癌基因c-erbB2在原始卵泡启动生长中表达变化及可能的作用。方法:选用2日龄SD大鼠卵巢在Waymouth培养体系中进行体外培养,用原位杂交、RT-PCR和免疫组化方法检测c-erbB2mRNA和蛋白在原始卵泡启动生长中及在表皮生长因子(EGF)作用下的表达情况,用Westernblot方法同步测定卵泡活化生长的重要标志物——增殖细胞核抗原(PCNA)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的表达情况,并分析p-ERK1/2与c-erbB2mRNA表达变化的相关关系。结果:伴随原始卵泡启动生长过程,PCNA表达逐渐增加,EGF能促进原始卵泡的增殖和分化;原始卵泡中有c-erbB2mRNA及蛋白的表达,且随原始卵泡的启动生长及在EGF作用下表达增强;RT-PCR结果显示,c-erbB2mRNA表达在2日龄大鼠卵巢培养8d后与培养0d相比显著增加(0.297±0.018vs0.178±0.011,P<0.05),并在EGF作用下进一步增强;p-ERK1/2含量的变化与c-erbB2mRNA表达的变化呈显著的正相关关系(rs=0.900,P<0.05)。结论:c-erbB2在原始卵泡启动生长中起重要促进作用,并为介导EGF促进原始卵泡启动生长的关键信号分子;ERK-MAPK信号通路可能在介导c-erbB2调控原始卵泡生长中起作用。

海洛因依赖期间大鼠下颌下腺EGF及IL-2阳性细胞的免疫组织化学研究

目的观察海洛因依赖对大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及白细胞介素2(IL-2)阳性细胞形态及功能的影响。方法正常SD大鼠,随机分为空白对照组、盐水对照组及海洛因依赖组。皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38d取下颌下腺组织。用免疫组织化学SABC法、图像分析及细胞计数方法进行研究。结果1.与空白对照组相比,盐水对照组大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的数量及强度均无明显改变。2.海洛因依赖期间,大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的免疫反应增强,细胞数量明显增加(P<0.05)。图像分析结果显示,在整个海洛因依赖期间,EGF、IL-2阳性细胞的平均灰度值始终低于空白组及盐水对照组(P<0.05)。3.EGF与IL-2在大鼠下颌下腺内分泌细胞中有共存现象。结论在海洛因依赖期间,大鼠下颌下腺EGF、IL-2阳性细胞的数量及反应强度均发生了规律性改变,提示大鼠下颌下腺分泌的EGF及IL-2参与了机体对海洛因依赖的调节过程。

BMP-2和EGF对神经干细胞向神经元分化及Notch信号分子表达的影响

采用BMP-2(bonemorphogeneticprotein2)和EGF(epidemicgrowthfactor)诱导体外培养的神经干细胞分化,通过免疫荧光染色以及细胞计数方法,观察其分化为神经元的情况;用RTPCR和Westernblot检测Notch信号分子Notch1、PS1、RBPJk和HES1的表达水平。结果表明:BMP2组分化为神经元的比例明显高于对照(control,Ctrl)组和EGF组;EGF组分化为神经元的比例与Ctrl组相比无显著差别;与Ctrl组相比,BMP-2组和EGF组中Notch通路4种信号分子的mRNA表达量均无显著差异;PS1蛋白表达量也无明显差异。结果提示,BMP-2对神经干细胞分化为神经元的诱导作用强于EGF和自主分化,其分化为神经元的比例增加与Notch信号分子的表达水平无关。

EGF调控HepG-2细胞增殖和迁移的分子机制

目的:探讨表皮生长因子(EGF)调控HepG-2细胞增殖和迁移的分子机制。方法:采用MTT法检测EGF和MAPK信号通路抑制剂PD98059对HepG-2细胞增殖能力的影响,Transwell小室检测其对HepG-2细胞体外迁移能力的影响,RT-PCR检测细胞中survivin mRNA的表达水平。结果:EGF能够促进肝癌细胞的增殖,增强其体外迁移能力,而MAPK信号通路抑制剂PD98059对HepG-2细胞的增殖和迁移能力则具有抑制作用;RT-PCR显示,EGF能增加HepG-2细胞中survivin mRNA的表达,而抑制剂PD98059能逆转EGF的作用,使survivin mRNA的表达下降。结论:EGF能够促进HepG-2细胞的增殖和体外迁移能力,其发挥作用的机制可能是通过MAPK信号通路上调survivin mRNA的表达。

研究HB-EGF、C-erbB-2检测对于卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断以及判断病情复杂程度的意义

目的：研究HB-EGF、C-erbB-2检测对于卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断以及判断病情复杂程度的意义.方法：收集我院 2012 年 6 月至2013年 5 因卵巢肿瘤行手术治疗的患者80例,其中良性卵巢瘤各20例,上皮性卵巢癌40例,其中在上皮性卵巢癌中,Ⅰ期13例,Ⅱ期14例,Ⅲ-Ⅳ期13例,另取30例正常子宫内膜志愿者的卵巢组织,采用组织流式细胞术检测HB-EGF、C-erbB-2在卵巢组织中的表达情况;采用免疫组织化学法检测40例子宫内膜癌、30例正常子宫内膜中c-erbB-2的表达.结果：HB-EGF、C-erbB-2在卵巢癌组织中阳性细胞率显著高于良性卵巢瘤,差异具有统计学意义（P〈0.05）;CerbB-2 在正常子宫内膜为低表达,在子宫内膜癌中的含量比正常子宫表达增高,差异有统计学意义（P〈0.05）;子宫内膜癌的病理分期不同,C-erbB-2 表达也不同,其中子宫内膜癌中CerbB-2 的表达中Ⅰ期、Ⅱ期明显低于Ⅲ、Ⅳ期,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论：HB-EGF、C-erbB-2检测可作为卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断的辅助指标,C-erbB-2 蛋白高表达与子宫内膜癌的发生、发展有关,CerbB-2 的检测有助于临床上评估子宫内膜癌的生物学行为和预后.

EGF通过STAT5调控肺腺癌A549细胞中COX-2的机制

背景与目的已有的研究表明COX-2在肺癌发生发展过程中起关键作用,它被一些细胞因子和生长因子所诱导产生,并受到JAK/STAT等信号通路的调控,抑制COX-2的表达能阻止肺癌的发展。本研究旨在探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)在人肺腺癌A549细胞中对STAT5激活效应,以及STAT5信号通路对COX-2调控机制。方法应用免疫荧光法及Western印迹法检测人肺腺癌A549细胞中EGF对STAT5的激活现象。分别用野生型STAT5(AdWT STAT5),STAT5显性负突变体(AdCMV5 Stat5a△740)以及STAT5 siRNA转染A549细胞,并用EGF对后两组转染细胞加以刺激,使STAT5及p-STAT5的表达发生变化,再用RT-PCR检测A549细胞中的COX-2mRNA表达。结果在体外A549细胞中STAT5无激活;EGF可以诱导STAT5的激活,促使磷酸化的STAT5穿梭入核;STAT5的激活是EGF诱导COX-2上调表达的必要条件;非磷酸化的STAT5可能通过非转录激活的途径参与了COX-2表达的调控。结论在A549细胞中STAT5可以通过磷酸化和非磷酸化两种途径来实现对COX-2的调控。

大天鹅睾丸和附睾的组织结构及EGF,Bax,Bcl-2蛋白和iNOS的表达

为了解大天鹅(Cygnus cygnus)睾丸和附睾的组织结构特征及相关活性物质的表达情况,用生物显微技术观察了大天鹅睾丸和附睾的组织结构,用免疫组织化学方法检测了EGF,Bax蛋白,Bcl-2蛋白和iNOS在睾丸和附睾中的表达.结果表明,大天鹅睾丸内生精小管主要由支持细胞和各级生精细胞构成,众多生精小管被睾丸间质隔开;附睾由输出小管和附睾管组成;大天鹅睾丸生精小管直径、生殖细胞大小、附睾管直径及上皮厚度等与其他脊椎动物存在差异;EGF,Bax蛋白,Bcl-2蛋白在睾丸生精小管管周的肌样细胞、精原细胞、精母细胞、精子细胞、间质细胞和附睾管上皮细胞等处呈免疫反应阳性;iNOS在睾丸间质内的血管壁及间质细胞、附睾管上皮细胞、附睾结缔组织等处有阳性表达;EGF可能参与其精子发生、获能及激素生成的调控过程;Bax蛋白和Bcl-2蛋白可能共同参与调控正常大天鹅睾丸和附睾细胞的凋亡;iNOS可能也参与雄性大天鹅各种生殖活动的调节.

EGF受体在H_2O_2诱导的大鼠胸主动脉血管收缩中的作用

目的 研究表皮生长因子受体 (EGFR)是否参与了H2O2 诱导的大鼠胸主动脉血管收缩过程。方法 用EGFR阻断剂肝素、酪氨酸激酶抑制剂 (AG1478)分别从受体外和受体内阻断EGFR ,测定H2O2 诱导的去内皮大鼠胸主动脉血管收缩张力。 结果 300μMH2O2 诱导的缩血管作用可以被3μM的AG1478所拮抗 (P<0.05) ,100mg/L肝素对30μMH2O2 引起的血管环收缩阻断作用不明显 (P>0.05)。结论 H2O2 的缩血管作用可部分介导EGFR。

EGFR和Ca^(2+)在外源性EGF刺激大鼠A型精原细胞增殖中的作用

目的探究表皮生长因子受体(EGFR)和Ca2+在表皮生长因子(EGF)引起的大鼠A型精原细胞增殖中的作用。方法选用9 d龄的SD大鼠,使用Percoll不连续密度梯度分离纯化精原干细胞;实验一:将细胞分为对照组、AG1478组、EGF组和EGF+AG1478组,观察EGFR在EGF促A型精原细胞增殖中的作用;实验二:将细胞分为对照组、Ca2+鳌合剂(BAPTA)组、EGF组、EGF+BAPTA组,观察细胞内游离Ca2+在EGF促A型精原细胞增殖中的作用;实验三:将细胞分为对照组、EGF组和EGF+AG1478组,采用Fura-2/AM负载法检测细胞内游离的Ca2+浓度。结果外源性的EGF明显促进了A型精原细胞的增殖;AG1478和BAPTA明显减弱了EGF对细胞的促增殖作用。结论 EGF通过与EGFR特异性结合提高胞内Ca2+浓度对A型精原细胞增殖起促进作用。

表皮生长因子对HT-29细胞内游离Ca^(2+)和C-AMP的影响

本文应用荧光比色法和放射免疫法动态检测了表皮生长因子对大肠癌HT-29细胞内Ca^(2+)和C-AMP水平的影响。结果发表EGF可呈剂量依赖性升高Ca^(2+)水平,而EGF-R抗体则可阻断此作用;EGF可短时降低C-AMP水平,提示Ca2+和C-AMP参于EGF作用的信息传递。

透明质酸合成酶2真核表达载体的构建及表达

构建了透明质酸合成酶2真核表达载体,并观察其在真核细胞中的表达。利用RT-PCR法从MG63细胞总RNA中扩增,获得人透明质酸合成酶2cDNA,并克隆至真核表达载体pEGFP-N3,将经双酶切鉴定和DNA测序证实的阳性重组子命名为pEGFP-N3-HAS2。脂质体法转染HEK293细胞,用倒置荧光显微镜检测、分析其在HEK293细胞表达及定位。双酶切鉴定和DNA测序证实成功构建pEGFP-N3-HAS2真核表达载体。转染HEK293细胞后可见HAS2-EGFP融合蛋白高表达并定位于浆膜。该载体的成功构建为进一步探讨透明质酸合成酶2在治疗骨性关节炎、修复关节软骨缺损中的应用价值奠定了基础。

健胃消痞汤联合雷贝拉唑对慢性萎缩性胃炎患者EGF、Bcl-2、Bax的影响

目的探讨健胃消痞汤联合雷贝拉唑对慢性萎缩性胃炎(CAG)患者表皮生长因子(EGF)、B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白基因(Bax)的影响。方法选取2017年3月至2020年4月收治的96例CAG患者作为研究对象,根据随机数字表法将其分为对照组与观察组,各48例。对照组采用常规治疗联合雷贝拉唑,观察组在对照组基础上给予健胃消痞汤。比较两组患者治疗前、后的中医证候积分、胃蛋白酶、EGF、Bcl-2、Bax水平。结果治疗后,两组的主症、次症积分均降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组的G-17、PGⅠ、PGⅡ水平均升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组的EGF、Bax水平均降低,Bcl-2水平均升高,且观察组优于对照组(P<0.05)。结论健胃消痞汤联合雷贝拉唑治疗CAG的效果满意,可改善患者的中医证候及胃蛋白酶水平,调节EGF、Bcl-2、Bax表达。

清燥救肺汤对结肠癌增殖侵袭相关蛋白c-myc、EGF、ICAM-1、MMP2、TGF-α表达的影响

【目的】观察清燥救肺汤对小鼠结肠癌CT26细胞增殖相关蛋白原癌基因c-myc,表皮细胞生长因子(EGF)及侵袭相关蛋白细胞间黏附分子1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶2(MMP2),转化生长因子α(TGF-α)表达的影响。【方法】将50只雄性BALB/c小鼠随机分为模型组,化疗组,清燥救肺汤高、中、低剂量组,每组10只。右腋下注射CT26细胞建立结肠癌小鼠模型,清燥救肺汤治疗组以15.2、7.6、3.8 g·kg^(-1)·d^(-1)剂量于造模前两周开始灌胃给药,化疗组给予25 mg·kg^(-1)剂量5-氟尿嘧啶(5-FU)腹腔注射,模型组以等体积生理盐水灌胃给药。2周后处死各组小鼠并取瘤组织,称质量计算抑瘤率,以Western-blot法检测EGF,TGF-α,c-myc,ICAM-1及MMP2蛋白表达。【结果】清燥救肺汤高、中剂量组EGF,ICAM-1,MMP2及TGF-α蛋白表达显著降低,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);清燥救肺汤高、中、低剂量组c-myc蛋白表达显著降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】清燥救肺汤可能通过降低EGF、TGF-α及c-myc、ICAM-1、MMP2蛋白表达,发挥抑制荷CT26小鼠结肠癌细胞增殖侵袭的功效。

HB-EGF、C-erbB-2在卵巢癌组织中的表达及意义

目的：探讨肝素结合样表皮生长因子（HB-EGF）、C-erbB-2癌基因在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法：选取2010年1月～2012年12月间于我院因卵巢肿瘤行手术治疗的患者60例，其中良性卵巢瘤、交界性卵巢瘤、上皮性卵巢癌各20例，取卵巢组织，采用组织流式细胞术检测卵巢组织中HB—EGF、C～erbB～2的表达情况。结果：HB-EGF、C—erbB一2在卵巢癌组织中阳性细胞率显著高于良性卵巢瘤，组间比较差异有统计学意义（P〈0．05），且两种因子在卵巢癌Ⅲ～Ⅳ期组织中表达高于I～1I期（P〈0．05）。结论：HB—EGF、C-erbB一2检测可作为卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断的辅助指标，且与卵巢癌病情严重程度呈正相关，二者联合检测可更准确反映卵巢癌病情。

肝素结合样表皮生长因子和C-erbB-2检测对于卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断及程度的临床意义

目的探讨肝素结合样表皮生长因子（HB-EGF）和C-erbB-2检测在卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断及判断病情程度的临床价值。方法收集该院2014年8月至2015年7月因卵巢肿瘤行手术治疗的患者80例,其中良性卵巢瘤各20例,上皮性卵巢癌40例,Ⅰ期13例,Ⅱ期14例,Ⅲ-Ⅳ期13例。另选取30例志愿者的正常子宫内膜卵巢组织。采用流式细胞术检测HBEGF、C-erbB-2的表达情况;使用免疫组织化学法检测子宫内膜癌和正常子宫内膜的C-erbB-2表达。结果 HB-EGF和C-erbB-2在卵巢癌组织中阳性细胞率显著高于良性卵巢瘤,差异有统计学意义（P〈0.05）;C-erbB-2在正常子宫内膜低表达,在子宫内膜癌的含量比正常子宫表达增高,差异有统计学意义（P〈0.05）;子宫内膜癌的病理分期不同,C-erbB-2表达也不同,Ⅰ、Ⅱ期明显低于Ⅲ、Ⅳ期,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 C-erbB-2蛋白高表达与子宫内膜癌的发生、发展相关,检测C-erbB-2有助于临床评估子宫内膜癌的生物学行为和预后。