丙烯酸酯与苯胺嘧啶杂合的EGFR激酶抑制剂的研究

设计合成了8个苯胺嘧啶类EGFR激酶抑制剂8a-h,并对其抗EGFRT790M突变的NSCLC细胞增殖活性进行了研究。结果表明:所有的化合物对吉非替尼耐药性的NSCLC细胞株H1975具有一定的抗增殖活性,并强于吉非替尼;其中含N-甲基哌嗪的化合物8a-d活性优于含吗啉环的化合物8e-h,且丙烯酸酯与苯环之间的连接臂为一个碳原子的化合物(如8d和8h)的活性优于其它,因此,化合物8d具有较好的抗EGFRT790M突变NSCLC细胞增殖的活性,可作为先导化合物进行深入研究。

EGFR酪氨酸激酶及其抑制剂的研究进展

表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor, EGFR)信号通路在肿瘤无限制生长、抗凋亡、侵袭和转移中发挥重要作用。筛选、评估和开发应用EGFR抑制剂已经成为靶向抗肿瘤药物研究的热点和趋势。目前,已有三代小分子EGFR抑制剂被研发并应用于非小细胞肺癌的临床治疗,但经过一段时间的治疗会出现耐药的现象,第四代的小分子EGFR抑制剂正处于研发阶段。本文对具有代表性的EGFR酪氨酸激酶抑制剂的结构、药效及其与EGFR蛋白的相互作用进行了综述,以此推进基于结构的药物设计策略在药物研发中的重要作用。

小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂盐酸埃罗替尼

盐酸埃罗替尼是一种小分子表皮生长因子酪氨酸激酶可逆抑制剂,通过抑制酪氨酸激酶的磷酸化,阻断信号传导,抑制肿瘤生长。临床前研究表明其对表皮生长因子酪氨酸激酶有抑制作用;临床研究显示该药对多种肿瘤有抗肿瘤活性,不良反应较轻,与化疗药物合用不增加毒性。2004年经FDA批准上市,用于一线化疗失败的局部晚期或转移性非小细胞肺癌的治疗。

非小细胞肺癌中EGFR酪氨酸激酶抑制剂获得性耐药的机制

表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）酪氨酸激酶抑制剂——厄洛替尼，可有效治疗含有EGFR突变的非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer,NSCLC），然而，分子靶向药物疗效维持时间较短，几乎所有起初治疗有效的患者最终均会复发，提示对此类药物产生耐药。因此，阐明其耐药的具体机制并研发第二代酪氨酸激酶抑制剂以有效治疗这些肿瘤就显得尤为重要。近年的研究已证实存在两种不同的EGFR酪氨酸激酶抑制剂的耐药机制，

EGFR酪氨酸激酶抑制剂的研究进展

恶性肿瘤是一种严重危害人类健康的常见病和多发病。每年癌症导致全世界700多万人丧生,其中我国就有100多万人。据估计,2015年全世界将有900万人死于癌症,2030年将增长到1140万人。因此攻克和治愈癌症成为当今各国研究的热点。1863年,Virchow[1]注意到恶性肿瘤组织中血管绝对数急剧增多,血管发生卷曲和扩张,新生血管集中于肿瘤边缘的现象。1971年,Folkman[2]提出肿瘤生长和转移是血管依赖性的,阻断肿瘤血管生成是遏止肿瘤生长的有效策略这一学说。

EGFR基因突变及其预测酪氨酸激酶抑制剂对非小细胞肺癌疗效的作用

肺癌是目前发病率、死亡率最高的肿瘤之一，其中约80％是非小细胞肺癌fnon—smallcellungcancer,NSCLC）．而且大部分患者确诊时已属晚期。尽管手术、化疗、放疗等综合治疗有所进步，但总的治疗效果并不理想。近年来随着分子生物学的进展和对癌症发病机制的深入研究．出现了以特定分子为靶点的抗肿瘤药物。表皮生长因子受体（epidermalgrowtllfactorreceptor．EGFR）在多种上皮肿瘤中过表达．在肿瘤的发生发展中起重要作用．成为抗肿瘤药物的重要靶点之一。目前肺癌分子靶向治疗中研究较多的是以gefitinib（Iressal和erlotinib（Tarceva）为代表的EGFR酪氨酸激酶抑制剂fEGFR—tyrosinekinaseinhibitor。早期临床试验表明,EGFR-TKI）EGFR-TKI在部分化疗耐药的NSCLC中仍然有较好的效果．统计显示EGFR—TKI在女性、腺癌、不吸烟患者和东亚人群中疗效更佳。有研究表明EGFR酪氨酸激酶区突变与TKI疗效密切相关。本文综述了EGFR突变和它在预测EGFR—TKI疗效中的进展。

非小细胞肺癌EGFR酪氨酸激酶抑制剂的耐药机制及逆转

晚期非小细胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)的治疗以含铂双药联合化疗为标准治疗方案,多项研究表明,化疗药物对于NSCLC的疗效已经进入平台期,因此,寻求新的治疗方式已迫在眉睫。表皮生长因子受体(EGFR)在40%～80%的NSCLC中过表达,通过干预EGFR酪氨酸激酶信号转导已成为治疗NSCLC的主要方式。临床应用的EGFR抑制剂主要有EGFR单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb)及特异性小分子酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)。目前已证实EGFR-TKI的疗效肯定,但其原发性及继发性耐药是一个不容忽视的问题,且耐药机制复杂。文章对EGFR-TKI在临床中的应用,EGFR突变与TKI敏感性的关系,EGFR-TKI的耐药机制及逆转耐药的方法进行综述。

选择性EGFR酪氨酸激酶抑制剂-吉非替尼

吉非替尼(Gefitinib,ZD1839,Iressa)是一种口服选择性表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂。表皮生长因子受体在一些类型的人类肿瘤细胞中存在过度表达,吉非替尼通过抑制表皮生长因子受体酪氨酸激酶的ATP结合位点发挥抗肿瘤作用。2003年5月经FDA批准上市,用于一线化疗失败的局部晚期或转移性非小细胞肺癌的治疗。

高效高选择性EGFR酪氨酸激酶抑制剂作为抗癌药的合理设计

随着对酪氨酸激酶的亚型血管生长因子受体(EGFR)的功能和结构了解的提高，以及他们在多种癌症的开始和发展中起到的作用，人们开始寻找有可能被证明的癌症治疗中非常重要的信号分子的抑制剂。EGFR的天然混合物为包括增生的，血管原的，侵入的，和转移等方面在内的一系列癌症的治疗中寻找EGFR抑制剂提高了一个潜在的机会。

EGFR-TKIs治疗晚期非小细胞肺癌的研究进展

肺癌是我国及世界各国发病率和死亡率较高的恶性肿瘤之一。在过去的几十年里,预测靶向治疗的致癌驱动基因的识别,推动了肺癌治疗从组织学向分子亚型的彻底转变,从而建立了精确医学的新模式。表皮生长因子受体(EGFR)基因激活突变是2004年在肺癌中发现的第一个分子预测生物标志物,随着EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)的研制开发,晚期非小细胞肺癌进入了一个全新的靶向治疗时代。随着EGFR-TKIs类药物的迭代更新,药物的有效性、安全性以及相关的不良反应、耐药以及相互作用都是值得临床深入研究的内容。本文针对上述内容做一综述。

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂在非小细胞肺癌治疗的研究进展及展望

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)突变是我国晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)最常见的驱动基因,EGFR络氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor, EGFR-TKI)已经成为其最主要的和首选的治疗方式。EGFR敏感突变主要包括19号外显子缺失(19Del)突变和21号外显子L858R突变,约占EGFR突变的90%,而19Del亚型对EGFR-TKI更加敏感和有效。对于EGFR敏感突变的晚期NSCLC患者选择任何一种在我国已经获得一线适应症的EGFR-TKI作为一线治疗都是规范的和合理的,其中奥希替尼是较优的选择。奥希替尼在早中期NSCLC术后的辅助治疗已经获得突破性进展,大大降低了疾病复发或死亡风险。未来在EGFR通路的研究重点将聚焦于克服EGFR-TKI耐药性,EGFR罕见突变抑制剂的研发和新辅助靶向治疗等。

灰毡毛忍冬抑制表皮生长因子受体激酶活性及活性部位UPLC-Q-TOF/MS分析

应用高通量药物筛选技术，筛选发现具有表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR）激酶抑制活性的中药提取物，同时采用超高效液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱仪联用技术（UPLC-Q-TOF／MS）对其活性部位进行分析和鉴别。灰毡毛忍冬药材经石油醚渗滤、乙醇提取、乙酸乙酯萃取和水煎煮后，得到4个相应的提取部位。采用均相时间分辨荧光（HTRF）法检测抑制EGFR激酶活性，于波长为620和665nm处测定荧光信号的变化及信号值，计算提取物对EGFR激酶的抑制率。采用AcquityUPLCBEHC18色谱柱，以0．1％甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相梯度洗脱，210—400nm扫描，使用ESI离子源，在正离子模式下采集数据。结果显示，灰毡毛忍冬的乙酸乙酯部位显示较强的EGFR激酶抑制活性，IC50 为2．027μg／mL。Q—TOF／MS测定的一级、二级质谱信息及结合文献鉴定灰毡毛忍冬乙酸乙酯提取物中11个化合物，其中7个分别是：咖啡酸（caffeicacid），七叶内酯（esculetin），槲皮素（quercetin），3，5-二咖啡酰奎尼酸（3，5-O-dicaffeoylquinicacid），扁柏黄酮（hinokiflavone），绿原酸（chlorogenicacid），β-谷甾醇（β-sitoster01）。3，5-二咖啡酰奎尼酸、咖啡酸、扁柏黄酮为灰毡毛忍冬的主要成分，灰毡毛忍冬中含有的酚酸类和黄酮类化合物可能是抑制EGFR激酶活性的主要成分。

新型EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂的设计、合成与抗肿瘤活性研究

目的发现结构新颖的表皮生长因子受体/胰岛素样生长因子-1受体(epidermal growth factor receptor/insulin-like growth factor 1 receptor,EGFR/IGF-1R)双靶点抑制剂。方法以IGF-1R抑制剂BMS-754807的结构为基础,参照前期合成的EGFR酪氨酸激酶抑制剂ET-1的结构和激酶结合模式,设计、合成一类4位连有2-氨基苯并咪唑片段的喹唑啉类化合物,通过氨基咪唑片段与EGFR和IGF-1R铰链区的关键氨基酸残基形成氢键结合,从而获得新型EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂。结果合成了10个4-(苯并咪唑-2-氨基)喹唑啉类化合物,通过^(1)H-NMR和ESI-HRMS表征了目标化合物的结构;激酶活性实验表明目标化合物对EGFR和IGF-1R均具有一定的抑制活性;分子模拟对接结果表明目标化合物结构中的氨基咪唑片段是其产生EGFR/IGF-1R双靶点抑制活性的关键药效团。结论合成的目标化合物为EGFR/IGF-1R双靶点抑制剂,后续通过结构优化有望发现新型抗肿瘤药物。

表皮生长因子受体抑制剂新药研究进展

表皮生长因子受体（EGFR）抑制剂的耐药问题亟需新的治疗方法克服。新的EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR TKIs）重在加强对EGFR通路的抑制，并克服对不可逆抑制剂突变相关的耐药，强调增加EGFR TKI的抑制效力，双重抑制血管内皮细胞生长因子（VEGF）和EGFR途径，或抑制EGFR家族的多个成员等等，单克隆抗体也正在研究之中（见表1）。

EGFR-TKI在非小细胞肺癌中耐药机制的研究进展

目前,肺癌是全世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占全部肺癌的80%左右,而NSCLC患者中有很大一部分在确诊时已经处于晚期。因此,对于晚期NSCLC的治疗也越来越受到人们的重视。虽然晚期NSCLC的标准治疗为含铂双药联合化疗,但是化疗药物对改善晚期NSCLC患者的生存期方面作用十分有限,因此寻求新的治疗方式迫在眉睫。随着对肺癌发病机制及其生物学行为的深入研究,分子靶向治疗已成为治疗晚期NSCLC最具前景的研究领域。其中表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)在晚期NSCLC治疗方面取得了突破性进展,其代表药物为吉非替尼和厄洛替尼,这两种EGFR-TKIs已在全世界范围内得到认可并被广泛用于晚期NSCLC的治疗,尤其是对于EGFR敏感突变者。然而,经过一段时间(中位时间为6个月-12个月)的治疗后,大部分患者会对EGFR-TKIs产生耐药,其耐药机制主要包括原发性和获得性耐药。由于EGFR-TKIs在改善晚期NSCLC患者总生存期和无进展生存期方面的突出作用,对于EGFR-TKIs耐药机制的探索已成为国内外研究的热点。该文章就EGFR-TKI耐药机制的研究进展进行了综述。

血清CEA水平与EGFR-TKI治疗晚期非小细胞肺癌疗效及预后分析

目的探讨非小细胞肺癌患者血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)水平与EGFR-TKI治疗疗效及预后之间的关系。方法收集88例(腺癌69例,非腺癌19例)经吉非替尼或厄罗替尼治疗、疗效可评价的晚期非小细胞肺癌患者,有完整的血清CEA检测结果,分析CEA水平与EGFR-TKI药物治疗反应及预后之间的关系。结果血清CEA<5 ng/ml者的有效率(CR+PR)为18.2%(6/33),稳定率(SD)为18.2%(6/33),进展率为63.6%(21/33);CEA≥5 ng/ml者的有效率为30.9%(17/55),稳定率为43.6%(24/55),进展率为25.5%(14/55)。2组EGFR-TKI治疗的疗效差异有统计学意义(P=0.003)。血清CEA水平高的患者,服用TKI药物后疗效更好,而较低CEA值的患者效果较差。生存分析结果表明,血清CEA≥5 ng/ml组患者经EGFR-TKI治疗后有更长的无疾病进展时间及生存优势,差异有统计学意义(P=0.020,P=0.019)。结论血清CEA水平可作为预测晚期非小细胞肺癌患者服用EGFR-TKI药物疗效及预后指标。

血清肿瘤标志物与一线EGFR-TKIs治疗晚期EGFR突变型肺腺癌患者疗效相关性分析

背景与目的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)在EGFR突变型肺腺癌人群中能显著提高生存,从而改变了晚期肺癌的治疗模式,但并不是所有EGFR敏感突变者均能从EGFR-TKIs治疗中获益。本研究欲通过外周血肿瘤标志物的检测对突变型肺腺癌患者的靶向治疗进行预测及指导。方法回顾性分析2009年6月-2014年6月于北京大学肿瘤医院胸部肿瘤内一科一线接受EGFR-TKIs治疗的EGFR突变型IIIb期-IV期肺腺癌患者的临床资料,分析其基线肿瘤标志物与EGFR-TKIs疗效及生存的关系。结果总体人群客观有效率(objective response rate,ORR)52.8%,疾病控制率(disease control rate,DCR)89.3%。基线癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)水平升高者对EGFR-TKIs疗效更佳(ORR 61.3%vs35.9%,DCR 95.2%vs 74.4%,P<0.001),治疗1个月后CEA、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragments,CYFRA21-1)以及CA125水平下降者有效率更高(ORR分别是61.5%vs 25%,P=0.002;58.5%vs 37.5%,P=0.004;61.8%vs 20%,P=0.027)。生存分析中,基线CEA水平正常者较高水平者无进展生存期(progression-free survival,PFS)明显缩短(中位PFS 5.9个月vs 9.8个月,P=0.027),而基线CYFRA21-1、CA125水平升高者PFS明显缩短(中位PFS 9.0个月vs11.4个月,P=0.029;9.0个月vs 11.5个月,P=0.023)。多因素分析显示,美国东部肿瘤协作组(Eastern Cooperative Oncology Group,ECOG)评分0-1分、基线CYFRA21-1正常水平、治疗1月后CEA下降阳性患者PFS更长。总生存期(overall survival,OS)与CYFRA21-1、CA125升高有关(中位OS分别为25.1个月vs 52.5个月,P=0.003;22.7个月vs55.0个月,P<0.001),而多因素分析中总生存与CEA下降有关(P=0.046)。结论治疗前高水平CEA以及治疗后CEA下降可以预测晚期肺腺癌患者一线接受EGFR-TKIs的疗效,而治疗前高水平CYFRA21-1以及CA125则预示着生存期缩短。

非小细胞肺癌中EGFR和K-ras基因突变与蛋白表达相关性的研究

背景与目的:当前表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因靶向治疗已成为晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗的研究的热点之一。本研究旨在探讨NSCLC患者中EGFR基因和K-ras(Kirsten rat sarcoma viral oncogene)基因突变的情况,分析其与蛋白表达的相关性及对吉非替尼(gefitinib)治疗的指导意义。方法:收集200例NSCLC患者新鲜组织,采用基因测序法检测EGFR及K-ras基因突变的状态;同时采用免疫组织化学法检测EGFR和K-ras蛋白的表达。结果:200例患者中,EGFR基因突变率为33%,主要发生在19号和21号外显子;K-ras基因突变率为5.5%,主要位于第12密码子;不存在同时携带有EGFR和K-ras两种基因突变的病例。腺癌尤其是含细支气管肺泡癌(bronchioloalveolar carcinoma,BAC)病理分型的患者、非吸烟患者和女性患者EGFR突变率较高。EGFR蛋白表达阳性率为16%,与总的EGFR突变无关(P>0.05),但与19号外显子突变具有统计学意义(P<0.05)。K-ras蛋白表达阳性率为52.5%,与K-ras基因突变无关(P>0.05)。15例携带有EGFR基因突变的NSCLC患者服用吉非替尼,12例(其中8例为EGFR蛋白表达阴性)有效。结论:EGFR蛋白表达与EGFR基因19号外显子突变具有一定相关性;联合检测EGFR和K-ras基因突变可用来筛选对EGFR酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)治疗敏感的人群,并预测吉非替尼治疗晚期NSCLC的疗效及预后。

非小细胞肺癌患者血清CEA水平与EGFR-TKI疗效的关系

背景与目的:靶向治疗药物表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKI)在晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的疗效预测评估成为近年来研究的热点之一。本研究旨在探讨NSCLC患者血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)水平与EGFR-TKI治疗疗效的关系。方法:收集83例(腺癌67例,非腺癌16例)经吉非替尼或厄罗替尼治疗且疗效可评价的晚期NSCLC患者,有完整的血清CEA检测结果,分析CEA水平与EGFR-TKI药物治疗疗效的关系。结果:血清CEA<5 ng/mL者的有效率(CR+PR)为15.6%(5/32),疾病控制率(CR+PR+SD)为34.4%(11/32);CEA≥5 ng/mL者的有效率为29.4%(15/51),疾病控制率为74.5%(38/51)。两组EGFR-TKI治疗的疗效差异有显著的统计学意义。血清CEA水平高的患者,服用EGFR-TKI药物后疗效更好,而CEA值较低的患者疗效较差。进一步分析血清CEA<5 ng/mL与CEA≥5 ng/mL患者一般临床特征,发现两组患者差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血清CEA水平可作为预测晚期NSCLC患者服用EGFR-TKI药物的疗效指标。

直接测序法与蝎形探针扩增阻滞突变系统检测肺癌小活检标本EGFR基因突变的比较

背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的突变状态与肺癌患者应用EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)的疗效密切相关。目前,临床上缺乏统一的方法检测EGFR基因突变。本研究旨在探讨直接测序法与蝎形探针扩增阻滞突变系统(scorpions amplification refractory mutation system,scorpions ARMS法)在检测肺癌临床活检小标本EGFR突变时敏感性的差异,以及相关靶向治疗疗效的分析。方法:采用直接测序法和ARMS法共同检测168例石蜡包埋肺癌标本,并随访评估其中行靶向治疗患者的临床疗效。结果:手术标本80例中,直接测序法与ARMS法所检出的突变阳性率分别为18.8%和25.0%,敏感性分别为71.4%和95.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。而活检小标本88例中,直接测序法与ARMS法所检出的突变阳性率分别为19.3%和42.0%,敏感性分别为42.5%和92.5%,前者均显著低于后者(P<0.01)。靶向治疗疗效方面,直接测序法与ARMS法野生型患者客观缓解率(objectiveresponse rate,ORR)分别为26.3%和3.8%,前者明显高于后者(P<0.05),而在小活检标本中,直接测序法野生型患者ORR达32.0%。直接测序法野生型患者中位无进展生存期(progression-free survival,PFS)为4.0个月,明显长于ARMS法野生型患者的1.5个月(P<0.05)。结论:对活检小标本而言,ARMS法较直接测序法的敏感性更高,其检测结果与临床疗效的一致性更好,纤维支气管镜活检等小标本EGFR突变检测更适合用ARMS法。