银杏叶提取物EGb761对急性抑郁样小鼠行为学及海马炎性细胞因子的影响

目的探讨银杏叶提取物EGb761预处理对急性抑郁样小鼠行为及海马炎性细胞因子、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、EGb761低剂量组、EGb761中剂量组和EGb761高剂量组,每组8只。EGb761低、中、高剂量组小鼠分别给予EGb76150 mg/(kg·d)、100 mg/(kg·d)和150 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组小鼠给予等量生理盐水灌胃,均连续灌胃12 d。灌胃第10天,EGb761各组和模型组小鼠均腹腔内注射脂多糖0.83 mg/kg,24 h后旷场实验评估小鼠自发活动情况,强迫游泳实验不动时间、悬尾实验不动时间和蔗糖水偏爱率实验评定小鼠的抑郁样行为;末次灌胃结束后,ELISA法测定小鼠海马组织中炎性细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-10(IL-10)]和BDNF含量。结果模型组和EGb761各组小鼠的垂直得分、水平得分均明显低于对照组(P均<0.05),模型组和EGb761各组间垂直得分、水平得分比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与对照组比较,模型组小鼠的强迫游泳不动时间和悬尾不动时间均明显延长(P均<0.05),蔗糖水偏爱率明显降低(P<0.05),海马组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A含量均明显升高(P均<0.05),海马组织中IL-10、BDNF含量均明显降低(P均<0.05);与模型组比较,EGb761中、高剂量组小鼠的强迫游泳不动时间和悬尾不动时间均明显缩短(P均<0.05),蔗糖水偏爱率明显升高(P均<0.05),海马组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A含量均明显降低(P均<0.05),海马组织中IL-10、BDNF含量均明显升高(P均<0.05)。结论EGb761预处理可显著减轻单次腹腔注射脂多糖小鼠的急性抑郁样行为,机制可能与降低海马组织中促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17A含量,升高海马组织中抗炎细胞因子IL-10和BDNF含量有关。

周围神经损伤后银杏叶提取物EGb761对感觉神经元的保护作用

目的 研究大鼠坐骨神经损伤后 ,银杏叶提取物 (EGb76 1)对感觉神经元的保护作用。方法 SD大鼠36只 ,分为EGb76 1组和生理盐水 (SAL)组。制作大鼠坐骨神经部分切除断端结扎模型 ,术后每天经腹腔分别注射EGb76 1(10 0mg·kg-1·d-1)和同体积的生理盐水直到取材。 2、4、6周处死大鼠取材L4、5脊神经节 ,酶组化染色观察乙酰胆碱酯酶 (AChE)及酸性磷酸酶 (ACP)的活性变化 ,冰冻切片硫槿染色计数神经节感觉神经元数目 ,电镜观察神经节感觉神经元超微结构的变化。结果 与对照组相比 ,治疗组乙酰胆碱脂酶、酸性磷酸酶活性、感觉神经元存活率及神经元超微结构有明显改善。结论 EGb76

银杏叶提取物EGb761神经保护作用研究进展

从提高痴呆病人认知能力到促进神经损伤后的恢复,银杏叶提取物EGb761对神经系统疾病的治疗具有广阔的应用前景。研究证实EGb761的神经保护机制包括抗凋亡、抗氧化、清除淀粉样蛋白的聚集和影响神经递质转运。这些研究成果使得对EGb761神经保护作用有了进一步的理解,也为探讨神经系统疾病和损伤的治疗提供了新的策略。

EGb761对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的 探讨银杏叶提取物 (EGb761 )对 NO供体硝普钠 (SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法 采用 MTT比色分析测细胞存活率、 Hoechst 332 58荧光染色及 DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果 不同剂量 EGb 761预处理海马神经元 6 h可剂量依赖地对抗 SNP引起的神经元凋亡 ,提高神经元的存活率 ;减少 SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象 ;DNA凝胶电泳图谱未见典型的“梯子状”改变。结论 EGb 761对 NO供体

银杏叶提取物EGb761对铜与高胆固醇共处理家兔主动脉病变的影响

目的观察银杏叶提取物EGb761对铜和高胆固醇诱导的家兔主动脉病变的保护作用。方法采用Sparks的方法复制铜和高胆固醇家兔模型,EGb761以50 mg.kg-1.d-1的剂量灌胃3 w后,苏丹Ⅲ和HE染色观察主动脉的大体和镜下形态改变,图像分析测量动脉粥样硬化面积占主动脉面积的百分比,酶法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,硫代巴比妥酸(TBA)法测定血清丙二醛(MDA)水平,实时定量RT-PCR法检测肝组织LDLR和LRP1mRNA表达。结果模型组主动脉可见明显的动脉粥样硬化改变,EGb761组动脉粥样硬化病变较模型组减轻,图像分析结果显示,EGb761组斑块面积百分比显著降低,与模型组相比差别具有统计学意义(P<0.05)。模型组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C和MDA水平均显著升高,与正常组相比差别具有统计学意义(P<0.05);EGb761组血清LDL-C和MDA水平均显著降低,与模型组相比差别具有统计学意义(P<0.05)。EGb761组肝组织LRP1mRNA表达显著升高,与模型组相比差别具有统计学意义(P<0.05)。结论 EGb761具有改善动脉粥样硬化病变的作用,其作用机制与调节血脂水平和抗过氧化损伤有关。

EGB761对铜和高脂诱导的AD家兔模型抗氧化功能的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对铜和高脂诱导的AD家兔模型血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)水平的影响。[方法]参照D.Larry Sparks等人的方法,采用铜和高脂饮食复制家兔AD模型,利用50 mg/(kg.d)EGB761灌胃3周后,检测血清SOD、MDA、GSH-PX水平。[结果]模型组家兔血清SOD、MDA和GSH-PX水平均明显升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。EGB761组血清SOD、GSH-PX、MDA水平均明显下降,与模型组比其差异具有统计学意义(P<0.05);EGB761组与对照组相比,SOD水平呈下降趋势,GSH-PX水平呈上升趋势,但其差异不具有统计学意义(P>0.05)。[结论]铜和高脂诱导的AD家兔模型体内存在明显的过氧化损伤,EGB761对其具有一定的保护作用。

银杏叶提取物EGB761对阿尔茨海默病家兔模型ACAT1和LCAT mRNA表达的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对阿尔茨海默(AD)病家兔模型胆固醇酰基转移酶(ACAT1)和卵磷脂-胆固醇酰基转移酶(LCAT)mRNA表达的影响。[方法]以2%高胆固醇饲料喂养雄性新西兰大白兔,建立AD家兔模型。模型建立后,用50 mg/(kg.d)EGB761灌胃3周作为EGB761组,以5 mg/(kg.d)辛伐他汀作为阳性药对照组。干预结束后,通过实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测海马卵磷脂-胆固醇酰基转移酶mRNA和胆固醇酰基转移酶1 mRNA的表达。[结果]银杏叶提取物EGB761可以下调ACAT1 mRNA的表达,不影响LCAT mRNA的表达。[结论]银杏叶提取物EGB761可下调AD家兔模型ACAT1 mRNA表达,对LCAT mRNA表达无调节作用。

银杏叶提取物EGb761对实验性变态反应性脑脊髓炎的影响

目的:探讨银杏叶提取物EGb761对实验性变态反应性脑脊髓炎的免疫机制的影响。方法:以豚鼠全脊髓均浆与福氏完全佐剂为抗原免疫豚鼠诱导实验性变态反应性脑脊髓炎(experimentalallergicencephalomyelitis,EAE)模型。同时以醋酸泼尼松和EGb761分别于免疫当日开始灌胃,连续5周。分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松治疗组和EGb761治疗组,观察EAE症状并评分。全部动物内眦采血,留取血清,采用双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)和放免法测白细胞介素12(IL-12),白细胞介素10(IL-10)含量。第5周后全部动物乙醚麻醉后内灌注固定,取出脑、脊髓,以多聚甲醛固定,石蜡包埋、切片,应用免疫组化法测定转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)、一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)表达。结果:与模型组相比,醋酸泼尼松治疗组和EGb761治疗组推迟了EAE发病,其临床评分在疾病的起始期、高峰期、缓解后的复发期都明显下降(P<0.05);IL-12含量在模型组、醋酸泼尼松治疗组、EGb761治疗组均较正常对照组明显升高(P<0.05),并且与疾病程度正相关(P<0.05);醋酸泼尼松治疗组和EGb761治疗组与模型组比较IL-10明显上升(P<0.05),TGF-β显著升高(P<0.05),NOS显著下降(P<0.05),且IL-10与TGF-β明显正相关(P<0.05)。

银杏叶提取物EGb761对大鼠脊髓损伤后神经损伤恢复的影响

目的研究银杏叶提取物EGb761对大鼠脊髓损伤后神经损伤恢复的作用。方法 SD大鼠120只,随机分为假手术组、损伤对照组、甲基强的松龙(MP)治疗组和EGb761治疗组,每组30只。用改良Allen法建立脊髓损伤的动物模型。采用斜板试验法和BBB行为学评分观察大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复情况;HE染色观察脊髓大体组织结构变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定脊髓组织中IL-10的含量。结果与损伤对照组比较,MP治疗组及EGb761治疗组大鼠术后7d和14 d临界角度显著增加、BBB评分显著升高、大鼠脊髓组织中IL-10的含量显著增高。HE染色显示,损伤对照组脊髓组织发生出血、水肿、坏死、轴突脱髓鞘改变以及炎症细胞浸润和胶质细胞反应,MP治疗组及EGb761治疗组术后7 d脊髓组织水肿、炎症反应减轻,神经元变性坏死不明显。结论 EGb761能减轻受伤脊髓的继发性损伤,对大鼠脊髓损伤后神经损伤恢复具有促进作用。

银杏叶提取物(EGb761)对红细胞脂质过氧化损伤的影响

观察银杏叶提取物(EGb761)对红细胞脂质过氧化损伤的影响,探讨其保护红细胞的机制。以活性氧(H2 O2 )作用于离体的正常红细胞,观察EGb761对红细胞溶血度、红细胞丙二醛含量(MDA)、红细胞超氧化物歧化酶(SOD)和ATP酶(ATPase)活性及红细胞膜骨架结构的影响。结果表明:EGb761能明显降低红细胞溶血度,且随着浓度增加其作用逐渐增强,与对照组比较差异有极显著性(t =4.13～19.41,P <0 .0 5 ,0 .0 0 1) ;EGb761能明显降低红细胞MDA含量,提高其SOD ,ATPase酶活性,与对照组比较差异有极显著性(t =2 .0 2～70 .0 6,P <0 .0 5 ,0 .0 0 1) ;EGb761能降低过氧化损伤对红细胞膜骨架的破坏,保护其完整性。可见EGb761能在膜水平上直接对抗氧自由基引发的红细胞脂质过氧化损伤,保护红细胞及其膜骨架结构。

银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔血脑屏障通透性的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对高胆固醇血症家兔血脑屏障是否具有保护作用。[方法]以2%高胆固醇饲料喂养雄性新西兰大白兔,建立高胆固醇血症家兔模型。模型建立后,用50mg/(kg·d)EGB761灌胃3周作为EGB761组,以5mg(/kg·d)辛伐他汀灌胃3周作为阳性药辛伐他汀组。干预结束后,耳缘静脉给予25g/L伊文思蓝(EB),3h后麻醉,生理盐水心脏灌流后取材,通过比色法测定皮质、海马和嗅球EB含量。[结果]银杏叶提取物EGB761可以降低海马和嗅球EB含量,与模型组相比分别为P<0.01、P<0.05;与阳性药辛伐他汀疗效相比差异无显著性,P>0.05。[结论]银杏叶提取物EGB761能够降低由高胆固醇血症导致的血脑屏障通透性。

EGb761减轻大鼠内耳血管纹损伤的实验研究

目的观察大鼠噪声暴露后其耳蜗电生理与血管纹细胞超微结构的改变,探讨使用银杏叶提取物(EGb761)后减轻血管纹损伤的保护作用的机制。方法实验组大鼠噪声暴露后腹腔注射EGb761,对照组动物噪声暴露后注射等量生理盐水,于处理前后对两组的听力及透射电镜所见耳蜗血管纹结构加以比较。生化检测耳蜗血管纹组织超氧化物歧化酶(superoxide dimutase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果实验组的听力损失明显小于对照组(P<0.05);耳蜗透射电镜观察发现,对照组血管纹边缘细胞核周间隙明显增宽,核异染色质明显边集,线粒体水肿,嵴断裂或消失,部分空泡化。实验组耳蜗细胞损伤明显轻于对照组。两组SOD、MDA检测差异有显著性。结论大鼠噪声暴露后应用EGb761能降低ABR阈移,其机制可能是清除氧自由基,保护血管纹细胞,从而减轻噪声性耳蜗损伤。

银杏叶提取物EGB761对高胆固醇家兔肝质量和形态的影响

[目的]观察银杏叶提取物(EGB761)对高胆固醇家兔肝质量和形态的影响。[方法]参照D.Larry Sparks等方法复制高胆固醇血症家兔模型。采用50mg(/kg·d)EGB761灌胃3周,以辛伐他汀5mg(/kg·d)作为阳性对照药。评价肝体指数,观察肝脏的形态学变化。[结果]EGB761可以有效降低肝体指数(P<0.01),与阳性药辛伐他汀疗效相比无显著性差异(P>0.05);大体和镜下形态学观察发现EGB761可以有效的改变脂肪变性肝脏的大体形态和组织学形态。[结论]EGB761可以有效防治高胆固醇血症所致脂肪肝的发生。

银杏叶提取物EGb761对兔视网膜缺血损伤的保护作用

目的:研究自由基清除剂EGb761对实验性视网膜缺血前后的图形视网膜电图(P-ERG)和形态学的影响,探讨EGb761抗氧化作用及视网膜缺血损伤的发病机制。方法:升高新西兰白兔眼压至130mmHg持续60min来诱导视网膜缺血,实验组动物给予EGb761,对照组动物给予生理盐水,在缺血前、中、后记录P-ERG波幅变化,并在再灌注19h摘除眼球,作光镜、电镜形态学观察。结果:缺血60min再灌注19h引起b波振幅降低,视网膜神经节细胞、内核层细胞缺失(调亡、坏死),给予EGb761后可以改善b波的恢复,并可抑制或减少视网膜细胞损害。结论:自由基清除剂EGb761可改善视网膜缺血损伤的功能恢复。

银杏叶提取物EGB761对AS家兔PON-1和ox-LDL的影响

[目的]观察银杏叶提取物EGB761对动脉粥样硬化家兔对氧磷酶-1(PON-1)和氧化低密度脂蛋白(oxLDL)的影响。[方法]将24只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、EGB761组(n=8)。正常组给予普通饮食,模型组和EGB761组高脂饮食10周。EGB761组从第7周起给予EGB761 50 mg/(kg·d)灌胃4周,正常组和模型组给予等量生理盐水。采用酶免疫吸附法(ELISA法)和生化法检测PON-1的活性和含量,ELISA法检测ox-LDL的含量。[结果]模型组PON-1活性和含量明显降低(P<0.05),ox-LDL的含量明显升高,银杏叶提取物组PON-1活性和含量明显升高,ox-LDL明显降低(P<0.05)。[结论]银杏叶提取物EGB761降低ox-LDL、抗动脉粥样梗化(AS)的机制可能与其上调PON-1活性和含量有关。

银杏叶提取物EGb761抗大鼠脑缺血损伤的作用机制研究

目的通过实验研究P38/MAPK和MEK/ERK在大鼠大脑中动脉栓塞模型中的变化及其与EGB761发挥药理作用的关系,探讨银杏叶制剂EGb761治疗脑缺血的机制。方法大鼠连续10 d口服EGb761 50、100 mg/kg后建立大脑中动脉栓塞-再灌模型,通过TTC染色,免疫组化和Western blot方法检测大鼠脑组织细胞的形态变化和大鼠皮质Caspase-9,Caspase-3,P38/MAPK,MEK/ERK相应蛋白的表达变化。结果EGb761给药可以减少脑缺血大鼠脑组织梗死面积,显著性抑制脑缺血大鼠海马Caspase-9和Caspase-3表达,显著性抑制大鼠海马神经细胞P-P38,P-MEK和P-ERK的表达水平。结论 EGb761可以减轻脑缺血缺氧引起的细胞损伤,其神经保护作用通过抑制内源性凋亡信号通路激活和P38/MAPK和MEK/ERK信号通路激活引起的细胞凋亡有关。

EGB761对U87胶质瘤细胞的促凋亡作用

目的:研究银杏叶提取物EGB761对U87胶质瘤细胞的促凋亡作用。方法:EGB761干预U87胶质瘤细胞后,CCK-8观察50、100和200mg/L不同浓度EGB761作用下U87细胞的增殖状况,流式细胞仪分析用AnnexinV-FITC和PI双染检测不同浓度EGB761对U87胶质瘤细胞凋亡的影响。结果:EGB761可抑制U87胶质瘤细胞的增殖,呈浓度和时间依赖性反应;EGB761 100mg/L、200mg/L干预U87胶质瘤细胞后,流式细胞仪检测显示细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论:EGB761可诱导U87胶质瘤细胞凋亡。

银杏叶标准提取物EGb761~及银杏叶制剂的质量评价(续完)

４银杏叶的标准德国和法国主要厂家对ＥＧｂ７６１○Ｒ质量标准和检验方法都不向外公开。近年来才公开了一部分（如上所述），最近美国药典论坛公布了一个供征求意见的银杏叶质量标准的草案［１６］，内容有基源、性状、显微镜鉴别和薄层色谱鉴别（黄酮甙及萜类内酯）、检...

Egb761对SD乳鼠心肌细胞外钙内流的影响研究

目的探讨银杏叶提取物（ Egb761）对 SD乳鼠心肌细胞外钙内流的影响。方法选择三天鼠龄的雄性 SD乳鼠心肌，按 Hoffman法行心肌细胞培养 10 12天。实验分二组：对照组和实验组（ Egb761分成三种浓度 10－ 3mol、 10－ 5mol、 10－ 7mol）。应用 Fura 2荧光探针的方法，观察各组静息状态和加氯化钾（浓度为 20mmol）后的心肌细胞游离钙浓度的改变。结果（ 1）基础状态下，氯化钾能促进心肌细胞外钙内流，使心肌细胞内游离钙浓度增高 (P<0.001)；（ 2） Egb761对氯化钾激发的细胞外钙内流的增加有抑制作用 (P<0.05)。结论 Egb761具有抑制 SD乳鼠心肌细胞外钙内流的作用，提示 Egb761可能对钙超载所致的心肌细胞损伤具有防治作用。

银杏提取物EGB761对过氧化氢诱导肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用研究

目的探讨银杏提取物EGB761对过氧化氢诱导肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用及发生机制。方法采用500μmol/L浓度的过氧化氢(H2O2)作用于对数生长期的肾小管上皮细胞(NRK52E),建立细胞氧化损伤模型。银杏提取物EGB761分为高中低3个浓度组进行干预,应用细胞生长曲线检测细胞生长情况,用流式细胞术检测肾小管上皮细胞的凋亡率,RT-PCR检测Caspase-3基因的表达差异。结果与过氧化氢组比较,高、中浓度组银杏提取物EGB761的凋亡阳性率均明显降低,而低浓度组虽有减少趋势但无显著性差异;高、中浓度组银杏提取物EGB761的Caspase-3表达阳性率较过氧化氢组明显降低,且随着浓度的增加而表达逐渐减少(P<0.05)。结论银杏提取物EGB761可以拮抗过氧化氢诱导肾小管上皮细胞凋亡的效应,其机制估计与下调Caspase-3的表达有关。