重组Ad-CRM8-survivin-EHV4 TK腺病毒的构建及对肝癌移植瘤的抑制作用

目的:构建含有肝癌特异性的HS-CRM8增强子、survivin启动子及EHV4 TK自杀基因的腺病毒,探讨该重组病毒对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用。方法:构建重组Ad-CRM8-survivin-EHV4 TK腺病毒,获取重组腺病毒。构建裸鼠肝癌皮下移植瘤模型,给予重组腺病毒结合更昔洛韦(GCV)治疗,2周后观察肿瘤大小。对肿瘤组织切片使用HE染色,观察瘤内细胞坏死情况。结果:裸鼠肝癌移植瘤经腺病毒治疗后,EHV4 TK和GCV+EHV4 TK组肿瘤体积分别为(108.5±18.3)mm3和(37.6±8.7)mm3。GCV+EHV4 TK组与EHV4 TK相比,裸鼠的肿瘤重量减少,生存率提高。HE染色结果显示,GCV+EHV4 TK组肿瘤内出现大量细胞的坏死,而EHV4 TK组肿瘤内仅有少量细胞的坏死。结论:重组肝脏特异性腺病毒Ad-CRM8-survivin-EHV4 TK结合GCV能够有效地在体内促进肝癌细胞的坏死从而抑制裸鼠移植瘤的生长,对肝癌的治疗有良好的效果。

应用一步PCR法检测并鉴定马疱疹病毒1型和4型

聚合酶链反应 (PCR)可作为一种快速检测并鉴别马疱疹病毒 1型 (EHV 1)和马疱疹病毒 4型 (EHV 4)的诊断方法。PCR引物是根据编码EHV 1和EHV 4的糖蛋白B(gB)基因上的共有的核苷酸序列或型特有的核苷酸序列设计的。利用这两种病毒的型特异性混合引物 ,在一步PCR反应中检测并鉴别EHV 1和EHV 4,而同一疱疹病毒科的单纯疱疹病毒 1型 (HSV 1)、伪狂犬病毒 (PRV)、马立克氏病病毒 (MDV)均无特异性扩增。应用建立的PCR方法检测了普氏野马流产胎儿病料 ,实验结果表明 ,这种PCR方法是一种直接检测并鉴定EHV 1和EHV 4的快速、敏感的诊断方法 ,同时 ,它可在一步PCR反应中直接鉴别这两种病毒 ,可用于病料中EHV 1和EHV 4检测的初步筛选。