七叶皂苷钠通过PI3K/AKT/mTOR通路抑制eIF4F复合物缓解大鼠肝纤维化

目的探究七叶皂苷钠对肝纤维化的作用及机制。方法通过四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,治疗组给予七叶皂苷钠处理,通过HE、Masson染色及免疫组织化学染色检测模型组与治疗组大鼠肝组织胶原增生及纤维化程度。在细胞试验中,通过MTT、克隆形成实验检测HSC-T6细胞的生长增殖活性,通过流式细胞术检测HSC-T6细胞凋亡,通过蛋白免疫印迹检测HSC-T6细胞内蛋白表达情况。结果七叶皂苷钠使大鼠肝脏胶原纤维生成减少,纤维化减轻。七叶皂苷钠使HSC-T6细胞生长增殖抑制,蛋白表达降低,细胞凋亡增加。七叶皂苷钠抑制HSC-T6细胞内PI3K/AKT/mTOR通路和eIF4F复合物的形成。结论七叶皂苷钠通过PI3K/AKT/mTOR通路抑制eIF4F复合物的合成进而缓解大鼠肝纤维化的进展。

萝卜硫素下调结直肠癌中eIF4F翻译起始复合物的表达

目的研究eIF4F复合物的表达与人类结直肠癌(CRC)的相关性,以及萝卜硫素(SFN)影响CRC细胞增殖的可能机制。方法应用免疫组织化学染色法检测12例CRC患者的肿瘤组织与癌旁组织中eIF4F复合物相关蛋白的表达水平;MTT比色法检测经SFN处理后CRC细胞的活性;Western blot法检测经SFN处理后CRC细胞中eIF4F复合物相关蛋白的表达;动物实验(裸鼠成瘤)比较腹腔注射SFN后裸鼠皮下肿瘤的生长情况,采用免疫组织化学染色法检测PI3K/AKT/mTOR/4EBP1信号通路相关蛋白和eIF4F复合物相关蛋白的表达。结果在CRC患者标本中,eIF4F复合物相关蛋白在肿瘤组织细胞中表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。SFN对CRC细胞的增殖起抑制作用,且浓度越高,抑制能力越强。SFN能抑制CRC细胞生长发育,并下调CRC细胞中eIF4F复合物的表达。结论eIF4F复合物的表达与CRC的发展密切相关,SFN可能通过PI3K/AKT/mTOR/4EBP1信号通路影响eIF4F复合物的上调,从而影响CRC细胞的发展。

病毒“劫持”真核细胞翻译系统的研究进展

病毒依赖于宿主细胞进行复制的同时又受到宿主体内各种条件的制约,为了在宿主细胞内生存并实现快速复制和增殖,病毒通过激活宿主体内各种信号通路来抢夺宿主翻译系统以及逃避先天性免疫。如果病毒无法进行自身m RNA的翻译将对病毒的增殖、扩增和进化产生致命性的打击。因此,许多病毒在感染后能够征用或者控制宿主的翻译系统来进行病毒m RNA的翻译。病毒对宿主翻译系统的控制可以发生在翻译起始、延伸和终止3个阶段中的任何一个步骤,可能是对真核翻译因子以及相关信号通路的调控,也可能是通过自身编码的具有类似真核翻译因子活性的病毒蛋白来实现对核糖体的募集,文章就一些特定病毒对宿主翻译系统的抢夺机制进行综述,为病毒特异性治疗的研究提供重要的理论基础。

PP242通过下调Akt/mTOR/4EBP1/eIF4E信号通路与柔红霉素存在协同抗急性白血病作用

目的通过研究PP242单药及与柔红霉素(DNR)联合抗急性白血病的效应及作用机制,探寻急性白血病治疗的新方法。方法以NB4、THP-1、SUP-B15三种急性白血病细胞株为研究模型,采用MTT药物敏感试验检测PP242、DNR单药及两药联合的抗细胞增殖作用;Western Blot方法分析药物对Akt/mTOR/4EBP1/eIF4E信号通路关键点蛋白磷酸化的表达水平的影响;7-甲基鸟嘌呤帽亲和分析法分析药物对eIF4F翻译起始复合物中4EBP1、eIF4E、eIF4G表达的影响;流式细胞学检测PP242的促凋亡作用。结果 (1)MTT显示PP242、DNR单药对急性白血病细胞株均有显著的抗细胞增殖作用,而100 nmol/L的PP242与DNR联合使IC_(50)下降明显,计算协同指数均小于1,表明两药存在协同作用。(2)Western Blot显示PP242可有效下调Akt/mTOR/4EBP1/eIF4E轴的关键磷酸化蛋白及Mcl-1表达,而DNR却反馈上调这个通路的蛋白表达,PP242可协同DNR下调这条通路表达。(3)7-甲基鸟嘌呤帽亲和分析法显示PP242可增加eIF4E与4EBP1的结合,减少与eIF4G的结合,从而抑制eIF4F的形成,而DNR单药并没有这个作用。(4)流式细胞学显示PP242可促进细胞凋亡发生。结论 PP242单药可抑制三种急性白血病细胞株的增殖,具有明显的抗急性白血病作用,分析其可能作用机制为:通过抑制Akt/mTOR/4EBP1/e IF4E信号通路活性,抑制eIF4F翻译起始复合物形成以及促进细胞凋亡的发生。PP242与DNR联合有协同抗急性白血病作用。

真核细胞翻译起始复合物4F对HCC患者的预后价值

目的研究真核细胞翻译起始复合物4F(EIF4F)与肝细胞肝癌(HCC)患者临床预后的相关性。方法通过对标本库中743例HCC患者的临床数据进行随访,筛选出94位具有随访信息的HCC组织标本,并收集临床资料。将其配对的组织标本制作为组织芯片,进行免疫组化染色。使用Image J分析组织芯片染色的吸光度值,通过R4.0.5软件对实验数据和随访数据进行非参数检验分析、绘制KM生存曲线、Cox回归分析、Nomogram统计分析。结果4EBP1的磷酸化在HCC肿瘤组织中更多的是处于激活状态(P<0.001),4EBP1磷酸化的激活与HCC患者的临床预后相关(P=0.038)。结论肿瘤组织中的4EBP1的磷酸化的激活预示着HCC患者更短的总体生存时间。

病毒唑对白血病的治疗机制研究

为了探索治疗慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)的新方法,研究了病毒唑单药及与伊马替尼联合治疗CML的效果及机制。结果显示,病毒唑、伊马替尼单药均可以抑制K562细胞株增殖,2种药对K562细胞株的IC50值分别为92.2、0.145μmol/L,与20μmol/L的病毒唑联合使伊马替尼的IC50值下降至0.077μmol/L;病毒唑单药可以下调K562细胞株和CML患者原代细胞mTOR/4EBP1/eIF4E信号通路关键蛋白mTOR、4EBP1、eIF4E的磷酸化水平,与伊马替尼联合,上述信号通路关键蛋白的磷酸化水平下调更明显;病毒唑单药可增加K562细胞株中eIF4E与4EBP1的结合,减少与eIF4G的结合,抑制eIF4F翻译起始复合物的形成,与伊马替尼联合后上述作用更强,表现出协同抑制eIF4F组装的作用。这些体外实验提示病毒唑单药具有抗白血病作用,而且能增强伊马替尼的抗CML作用。