mir-133b对新生大鼠脑神经元细胞焦亡的影响和机制研究

目的miecroRNA(miRNA)是-类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子。它们在动植物中参与转录后基因表达调控。文章旨在研究mir-133b对新生大鼠脑神经元细胞焦亡的影响和机制。方法原代分离新生大鼠神经元细胞,采用缺糖缺氧/复斯复氧(oxygen gluose deprivationv/reperfusiom,0CD/R)法将细胞随机分为5组:对照组(C).模型组(0CD/R).mirRN A-nepative comntrol组(mir-NC),转染mimie组(mimic).转染inhibitor组(ibibior)进行后续实验。MITT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测细胞活力;Q-PCR检测mRNA水平;荧光索酶报告实验检测mir133b与ELAVLI靶向关系;蛋白免疫印迹检测白细胞介素la、白介素6.肿瘤坏死因子a,ELAVLI.核甘酸结合寡聚化结构域受体蛋白3.半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1.白细胞介素1β蛋白水平;将细胞分为过表达对照组(C),模型组(0CD/R).转染mimie组(mimic).过表达ELAVLI组(pe-ELAVL1).转染mimie+过表达ELAVL1组(minie+pc)5组。MITT细胞增维及细胞毒性检测试剂盒检测各组细胞活力,蛋白免疫印迹检测ELAVLI.NLRP3.easpuse-1.ILIB蛋白水平。结果结果表明,与mir-NC组相比,mimic组mi-133b中mRNA水平、细胞活力极显著升高(P<0.01).L-la.IL6.TNF-a.ELAVLI.NLRP3.eapuse-1.IL-IβB蛋白水平极显著降低(P<0.01)。inhibior组mir-133中mRNA水平极显著降低(P<0.01),细胞活力显著降低(P<0.05),l-...L6.TNF-a.ELAVILI.NLRP3.caspase-1.IL-IB蛋白水平极显著升高(P<0.05)。荧光素酶报告实验结果显示mir-133b可直接靶向作用于ELAVLI。0CD/R、mimie组ELAVLI。NLRP3。caspase-l.I1蛋白水平均极显著低于pe-ELAVLI组(P<0.01)。结论mir-133Bb通过下调lL-la.IL6.TNF-a.ELAVL1.NLRP3.capase-1.IL-1β蛋白表达对减缓新生大鼠脑神经元细胞焦亡。