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ELF1负调控TRIM16促进胃腺癌上皮间质转化
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作者 马福军 钱征 +4 位作者 杨新 张新新 王玮 吴泉霖 蔡磊 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第4期405-412,共8页
目的探讨E74样因子1(ELF1)对胃腺癌细胞迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响及其机制。方法利用基因表达谱交互分析2(GEPIA2)数据库分析ELF1在胃腺癌组织中的表达情况。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot分析胃癌细胞和正常胃... 目的探讨E74样因子1(ELF1)对胃腺癌细胞迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响及其机制。方法利用基因表达谱交互分析2(GEPIA2)数据库分析ELF1在胃腺癌组织中的表达情况。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot分析胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中ELF1的表达水平。ELF1短发夹RNA(sh-ELF1)或其阴性对照短发夹RNA(sh-NC)转染AGS细胞,分别命名为sh-ELF1组和sh-NC组。划痕实验检测细胞迁移能力,Tranwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测EMT相关分子Snail、E-cadherin、Vimentin及三重基序包含蛋白16(TRIM16)的表达情况。染色质免疫共沉淀-PCR(ChIP-PCR)实验检测ELF1与TRIM16启动子区的结合情况。选取AGS细胞进行挽救实验,分为sh-ELF1+si-TRIM16组(sh-ELF1和TRIM16小干扰RNA共同转染)和sh-ELF1+si-NC组(sh-ELF1和阴性对照小干扰RNA共同转染),Western blot检测TRIM16、Snail、E-cadherin及Vimentin的表达情况,划痕实验和Tranwell侵袭实验分别检测细胞迁移和侵袭能力。结果ELF1在胃腺癌组织和胃癌细胞中高表达(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-ELF1组细胞迁移能力和侵袭能力显著降低(P<0.05);与sh-NC组相比,sh-ELF1组Snail和Vimentin表达水平显著下降(P<0.05),而E-cadherin和TRIM16表达水平显著上升(P<0.05)。ChIP-PCR结果显示,ELF1与TRIM16的启动子区结合,进而抑制TRMI16的表达。挽救实验表明,与sh-ELF1+si-NC组相比,sh-ELF1+si-TRIM16组Snail、Vimentin的表达上调(P<0.05),而E-cadherin的表达下调(P<0.05),细胞迁移能力和侵袭能力均增加(P<0.05)。结论ELF1可通过靶向负调控TRIM16促进胃腺癌细胞的迁移、侵袭和EMT。 展开更多
关键词 胃腺癌 elf1 TRIM16 迁移 侵袭 上皮间充质转化
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牡丹PsELF1基因的克隆及表达分析
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作者 张艳萍 张英昊 +2 位作者 付祥梅 张玉喜 刘春英 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期5247-5251,共5页
本研究以已获得的早花基因的EST序列为模板设计引物,通过RACE技术扩增全长,使用生物学软件和q RT-PCR技术分别进行生物信息学分析和表达模式分析,获得牡丹早花基因Ps ELF1的全长及其表达模式,为后续研究其功能提供条件。结果显示,扩增得... 本研究以已获得的早花基因的EST序列为模板设计引物,通过RACE技术扩增全长,使用生物学软件和q RT-PCR技术分别进行生物信息学分析和表达模式分析,获得牡丹早花基因Ps ELF1的全长及其表达模式,为后续研究其功能提供条件。结果显示,扩增得到7 107 bp的Ps ELF1全长cDNA,其中,包括3'UTR485 bp,5'UTR 464 bp和6 258 bp的编码区,共编码2 085个氨基酸,分子量为238.43 kD。Ps ELF1包括4个可能的磷酸化位点,且均位于N端。二级结构预测显示,Ps ELF1含α-螺旋和无规卷曲较多。同源性分析结果表明,Ps ELF1与杨树ELF1同源性最高。表达特性分析表明,Ps ELF1在花芽休眠解除过程中Ps ELF1的表达水平在0~14 d下调,在14~21 d上调,然后在21~28 d下调。而在低温21 d移入温室后的开花过程中呈下调模式。本研究结果对培育牡丹早花或晚花品种、延长牡丹的观赏期、提高牡丹观赏质量和经济价值具有重要意义。 展开更多
关键词 牡丹(Paeonia suffruticosa) Ps elf1 RACE扩增 表达分析
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山茱萸多糖对胃癌细胞增殖和凋亡的机制 被引量:7
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作者 聂志勇 李守淼 +2 位作者 王卫杰 李焕焕 袁冬冬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期222-227,共6页
目的探讨山茱萸多糖对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法用不同剂量山茱萸多糖灌胃接种AGS细胞的裸鼠,检测裸鼠体内肿瘤体积;TUNEL法检测细胞凋亡指数;胃癌细胞AGS分为对照组、山茱萸多糖低、中、高剂量组、si-NC组、si-ELF3... 目的探讨山茱萸多糖对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法用不同剂量山茱萸多糖灌胃接种AGS细胞的裸鼠,检测裸鼠体内肿瘤体积;TUNEL法检测细胞凋亡指数;胃癌细胞AGS分为对照组、山茱萸多糖低、中、高剂量组、si-NC组、si-ELF3-AS1组、山茱萸多糖+pcDNA组、山茱萸多糖+pcDNA-ELF3-AS1组。MTT检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测lncRNA ELF3-AS1表达水平。结果山茱萸多糖处理的裸鼠体内移植瘤体积减少,细胞凋亡指数升高(P<0.05)。山茱萸多糖处理胃癌细胞AGS后,细胞增殖抑制率升高,凋亡率升高,ELF3-AS1表达水平降低,且呈剂量依赖性(P<0.05)。胃癌细胞AGS中ELF3-AS1表达水平升高(P<0.05)。抑制ELF3-AS1表达后,细胞增殖抑制率升高,凋亡率升高(P<0.05)。ELF3-AS1过表达逆转了山茱萸多糖对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的作用。结论山茱萸多糖可能通过下调ELF3-AS1抑制胃癌AGS细胞增殖,促进AGS细胞凋亡。 展开更多
关键词 山茱萸多糖 lncRNA ELF3-AS1 胃癌 增殖 凋亡 移植瘤
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靶向加工番茄elF4E1的CRISPR/Cas9载体有效性验证 被引量:1
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作者 付紫梅 袁伦 +3 位作者 邵冬南 郝小军 崔百明 向本春 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期230-237,共8页
【目的】验证基于CRISPR/Cas9系统构建的靶向编辑加工番茄(Solanum lycopersicum)e IF4E1基因载体的有效性,为CRISPR/Cas9系统在培育PVY抗性植株中的应用提供技术支持。【方法】构建靶向编辑番茄真核翻译起始因子el F4E1基因的CRISPR/C... 【目的】验证基于CRISPR/Cas9系统构建的靶向编辑加工番茄(Solanum lycopersicum)e IF4E1基因载体的有效性,为CRISPR/Cas9系统在培育PVY抗性植株中的应用提供技术支持。【方法】构建靶向编辑番茄真核翻译起始因子el F4E1基因的CRISPR/Cas9系统表达载体,用农杆菌渗透法瞬时转化番茄植株,PCR扩增已转化植株靶位点周围DNA序列后用HaeⅢ进行酶切,回收未切开的条带与p GEM-T载体连接后进行单克隆测序。【结果】对测得的9个克隆序列进行比对分析,在PAM(protospacer adjacent motifs)上游的6~8 bp的碱基处均发生突变,并且都为单碱基的替换,导致多肽链中单个氨基酸的替换。【结论】利用CRISPR/Cas9基因组编辑系统构建的载体能够特异性地靶向加工番茄e IF4E1基因,为利用CRISPR/Cas9系统敲除e IF4E1基因,获得抗PVY病毒的番茄育种材料奠定了基础。 展开更多
关键词 加工番茄 PVY elF4E1 CRISPR/Cas9 瞬时转化
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The RALF1-FERONIA Complex Phosphorylates eIF4E1 to Promote Protein Synthesis and Polar Root Hair Growth 被引量:10
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作者 Sirui Zhu Jose Manuel Estevez +9 位作者 Hongdong Liao Yonghua Zhu Tao Yang Chiyu Li Yichuan Wang Lan Li Xuanming Liu Javier Martinez Pacheco Hongwei Guo Feng Yu 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2020年第5期698-716,共19页
The molecular links between extracellular signals and the regulation of localized protein synthesis in plant cells are poorly understood.Here,we show that in Arabidopsis thaliana,the extracellular peptide RALF1 and it... The molecular links between extracellular signals and the regulation of localized protein synthesis in plant cells are poorly understood.Here,we show that in Arabidopsis thaliana,the extracellular peptide RALF1 and its receptor,the FERONIA receptor kinase,promote root hair(RH)tip growth by modulating protein synthesis.We found that RALF1 promotes FERONIA-mediated phosphorylation of elF4E1,a eukaryotic translation initiation factor that plays a crucial role in the control of mRNA translation rate.Phosphorylated elF4E1 increases mRNA affinity and modulates mRNA translation and,thus,protein synthesis.The mRNAs targeted by the RALF1-FERONIA-elF4E1 module include ROP2 and RSL4,which are important regulators of RH cell polarity and growth.RALF1 and FERONIA are expressed in a polar manner in RHs,which facilitate elF4E1 polar丨ocalization and thus may control local f?OP2 translation.Moreover,we demonstrated that high-level accumulation of RSL4 exerts negative-feedback regulation of RALF1 expression by directly binding the RALF1 gene promoter,determining the final RH size.Our study reveals that the link between RALF1-FERONIA signaling and protein synthesis constitutes a novel component regulating cell expansion in these polar growing cells. 展开更多
关键词 elF4E1 FER polar cell growth RALF1 root hairs RSL4
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