检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法的建立

本试验以新城疫病毒 (NDV)感染的鸡胚尿囊液经差速离心 ,庶糖密度梯度离心提纯的NDV为包被抗原 ,以纯化的鸡IgG、IgM及IgA免疫兔 ,制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG、IgM及IgA ,分别建立了检测NDV特异性IgG、IgM、IgA的间接ELISA方法 ,抗原最适包被量为 1.34μg/孔。酶标兔抗鸡IgG、IgM、IgA的最佳稀释度分别为 1∶40 0 ,1∶40 0 ,1∶10 0 ;血清样品检测IgG时 ,最适工作浓度为 1∶40 0 ,检测IgM时为 1∶5 0。该方法具有特异性强、灵敏度度、快速简便等优点 ,适合于对各类新城疫特异性抗体的动态监测和大批检测 。

ELISA对幽门螺杆菌感染血清IgG、IgA、IgM抗体检测的诊断价值

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对无选择性作内镜检查的90例患者血清,分别作抗HPlgG、lgA、lgM特异性抗体的检测,同时与胃粘膜活检组织块的镜检、培养、快速尿素酶试验的结果进行比较。ELISA检测结果显示血清lgG、lgA、lgM抗体的阳性率分别为71.1％(64/90)、56.6％(51/90)、56.6％(51/90),lgG检出率均高于镜检法65.6％(59/90),尿素酶试验55.6％(50/90)、培养法36.7％(33/90)、但lgA、lgM检出率略低于镜检法、而与尿素酶试验相近,高于培养法。三类抗体的灵敏度、特异度分别为81.4％、54.8％(lgG);57.5％、45.2％(lgA);50.8％、32.3％(lgM),提示对特异性lgG抗体水平的检测具有较高的诊断价值。

人外周血淋巴细胞培养上清液中IgG、IgA、IgM的ELISA测定方法

医学基础与临床研究中,常遇到检测人外周血淋巴细胞培养上清液中IgG、IgA、IgM的问题 国外已有多种方法,国内有关方面的报道目前较少。我们用国内现有市售材料为主,依标准ELISA法改良,成功地建立了本测定方法,现报道如下。

清除幽门螺杆菌过程中血清特异性IgG、IgA、IgM的变化

研究清除HP过程中血清抗体滴度的变化。方法51例pU伴Hp感染者，用三联疗法清除Hp，用ELISA法前瞻性定量检测血清特异性IgG、IgA、IgM的变化。结果治疗后9周，23例Hp转阴者，IgG、lgA、lgM平均滴度比治疗前分别下降14·2％、15．1％、7．2％。20周时分别下降32．5％、34．0％、7．0％。治疗前后IgG、IgA、滴度有显著性差异（t—3·83、3·56，P＜0·01）。治疗无效者16例，三类抗体呈上升趋势，其中9周时ItA、ItM滴度与治疗前相比有显著性差异（t=2．50、2．84，0．05＞P＞0．01）；12例9周转阴，而20周又阳性者，三类抗体呈先下降后升高趋势，尤以IgA、变化较为显著（F=3．46，0．05＞P＞0．01）。结论ELISA法定量检测IgG、IgA滴度的改变可以评价药物清除Hp的效果。

猪乳中抗猪瘟IgA、IgG、IgM抗体动态变化规律研究

以猪瘟弱毒疫苗免疫空怀母猪,待母猪分娩后,分别收集10 d内的乳汁,以建立的间接ELISA方法检测猪瘟IgA、IgG、IgM水平,并观察各种抗体动态变化规律。试验结果表明,猪初乳中的IgA、IgG、IgM抗体效价均在分娩当天达到最高值,随后迅速下降,7 d后抗体水平与常乳基本一致。对照组母猪仅在分娩当天检测到较低的抗体水平。

乳源活性肽对抗猪瘟病毒抗体IgG、IgA和IgM水平的影响

不同剂量乳源活性肽与2头份猪瘟活疫苗同时分点肌肉注射仔猪,每周一次耳静脉采血,间接ELISA法检测抗猪瘟病毒抗体IgG、IgA和IgM水平。发现乳源活性肽能够明显提高抗猪瘟病毒抗体水平。当乳源活性肽为15 g/L时,与对照组相比,IgG抗体水平在注射后28 d时提高了21.0%,IgA和IgM抗体水平在注射后14 d时分别提高了13.8%和7.8%。实验组腹泻率、发病率和死亡率明显比对照组低,同时发现乳源活性肽具有促进生长的作用。

Serum IgG response to differentiated antigens of Helicobacter pylori

AIM To detect antibodies against Helicobacter pylori spiral and coccoid antigens in human sera. METHODS Blood samples were collected from 278 patients with gastric diseases. A 3 day old culture of H. pylori on chocolate blood agar was used to provide spiral form. ‘Synchronous’ coccoids were cultured in (BHY) (brain heart infusion supplemented with 10% horse serum and 0 4% yeast extract) medium in a chemostat. Antigens from spiral and coccoid form were prepared using acid glycine extraction. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was performed to detect serum IgG antibodies against spiral and coccoid forms of H. pylori . RESULTS Seroprevalence of H. pylori infection was higher in patients with gastric ulcer (79%) and gastric cancer (83%) than those with non ulcer dyspepsia (NUD) (44%) and other diseases (45%) ( P <0 05). IgG antibodies against spiral and coccoid antigens were detected in 50 7% (141/278) and 49 6% (138/278) , respectively. CONCLUSION The spiral and coccoid forms of H. pylori coexist in patients infected with the bacterium.

幽门螺杆菌特异性IgM和IgG抗体、CA724、CEA联合检测对胃癌早期的临床诊断价值分析

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)特异性IgM抗体、IgG抗体,以及肿瘤标志物指标糖类抗原724(CA724)、癌胚抗原(CEA)联合检测对胃癌早期临床诊断的价值。方法收集2018年2月至2020年2月我院收治的胃癌患者、胃良性病变患者、健康志愿者的血清标本资料各50例,分别进行IgM抗体、IgG抗体的检测、肿瘤标志物指标CA724、CEA的检测。比较各组受检者相关指标阳性率差异及联合检测结果,分析在胃癌诊断中的价值。结果胃癌组IgM抗体、IgG抗体、CA724、CEA阳性率高于胃良性病变组、健康志愿者组,差异有统计学意义(P<0.05);胃良性病变组IgM抗体阳性率高于健康志愿者组,差异有统计学意义(P<0.05);胃良性病变组和健康志愿组在IgG抗体、CA724、CEA比较中,差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌组联合检测阳性率高于胃良性病变组、健康志愿者组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Hp特异性IgM抗体、IgG抗体,CA724、CEA可用于胃癌的早期诊断,HP感染与胃癌的发生密切相关,IgM抗体、IgG抗体,CA724、CEA联合检测可显著提升胃癌的检出率,减少漏诊的发生,对及早发现胃癌有重要价值。

ELISA 检测母乳中轮状病毒抗体的研究

目的：探讨健康母乳中轮状病毒特异性抗体水平及临床意义。方法：采用间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法测定了２５４份健康初乳和成熟乳中抗轮状病毒 Ｉｇ Ａ、 Ｉｇ Ｍ 和 Ｉｇ Ｇ 抗体（ａ Ｒ Ｉｇ Ａ、ａ Ｒ Ｉｇ Ｍ 、ａ Ｒ Ｉｇ Ｇ），分析其滴度变化。结果：初乳中 ａ Ｒ Ｉｇ Ａ 阳性率为８０３％ ，滴度达１ｖ２５６，随哺乳期延长逐渐降低。ａ Ｒ Ｉｇ Ｍ和 ａ Ｒ Ｉｇ Ｇ 可在部分母乳中测得。结论：健康母乳中广泛存在轮状病毒特异性抗体，以 ａ Ｒ Ｉｇ Ａ 为主，为婴幼儿抵御轮状病毒感染提供了重要的免疫保护作用。

幽门螺杆菌免疫奶羊的应答性实验研究

目的 以Hp全菌抗原免疫奶羊 ,观察羊奶中特异性抗体产生规律。方法 采用 6× 10 9CFU mLHp全菌抗原 ,通过滴鼻、多点皮下注射、妊娠期肌肉注射 3种途径免疫 3只产奶山羊。前两组于 0、14、2 1、2 8d接受 4次免疫接种 ,妊娠组于分娩前后 1个月每隔两周注射 1次。收集血清、乳清 ,以酶联免疫吸附试验进行样本中的IgA、IgG抗体测定。结果 3种途径免疫奶羊后都激发了奶羊的系统免疫 ,使血清中IgG较免疫前都有很大升高 ;羊奶中IgA抗体水平滴鼻组 >妊娠组 >皮下组 ,IgG抗体水平妊娠组 >皮下组 >滴鼻组。结论 3种途径都能激发奶羊机体的免疫应答 ,尤其是滴鼻免疫能够诱导机体同时产生不同部位的粘膜免疫和系统免疫 ,是一种敏感、安全。

抗幽门螺杆菌不同免疫途径免疫奶羊的研究

目的:以幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.polyri,Hp)全菌抗原免疫奶羊,观察羊奶中特异性抗体产生规律。方法:采用菌液浓度为60亿cfu/ml全菌抗原,通过滴鼻、多点皮下注射、妊娠期肌肉注射三种途径免疫3只产奶山羊。前两组都于0、14、21、28d接受四次免疫接种,妊娠组于分娩前后1个月每隔2w注射1次。收集血清、乳清样本,以酶联免疫吸附试验测定IgA、IgG抗体。结果:经滴鼻、多点皮下注射、妊娠期肌注三种途径免疫奶羊后产生了抗体。血清中IgA变化幅度不大,三组血清中IgG较免疫前都有很大升高。羊奶中IgA抗体较免疫前都有升高,抗体水平:滴鼻组>妊娠组>皮下组,羊奶中IgG抗体水平:妊娠组IgG>皮下组>滴鼻组。结论:滴鼻粘膜免疫、多点皮下注射、妊娠期肌肉注射三种途径都能激发奶羊机体的免疫应答,使羊奶中抗Hp-IgA、抗Hp-IgG抗体水平升高,血清中IgG抗体水平升高,尤其是滴鼻免疫能够诱导机体同时产生不同部位的粘膜免疫和系统免疫,且所需的抗原量远远少于其他两组,是一个敏感、安全、可行有效的免疫途径。

幽门螺杆菌免疫奶羊的免疫应答机制及其应用前景分析

目的观察Hp全菌抗原免疫奶羊中特异性抗体产生规律。方法采用菌液浓度为6×109cfuml全菌抗原,通过滴鼻、多点皮下注射、妊娠期肌肉注射三种途径免疫3只产奶山羊。前2组都于0、14、21、28天接受4次免疫接种,妊娠组于分娩前后1个月每隔两周注射1次。收集血清、乳清样本,并以酶联免疫吸附试验进行样本中的IgA、IgG抗体测定。结果3种途径免疫奶羊后都激发了奶羊的系统免疫,产生了血清循环抗体。血清中IgA变化幅度不大,三组血清中IgG较免疫前都有很大升高。羊奶中IgA抗体较免疫前都有升高,且抗体水平滴鼻组>妊娠组>皮下组,羊奶中IgG抗体升高幅度妊娠组>皮下组>滴鼻组。结论3种途径都能激发奶羊机体的免疫应答,使羊奶中抗HpIgA、抗HpIgG抗体水平升高,血清中IgG抗体水平升高,尤其是滴鼻免疫能够诱导机体同时产生不同部位的粘膜免疫和系统免疫,且所需的抗原量远远少于其他两组,是一个敏感、安全、可行有效的免疫途径。

幽门螺杆菌感染与老年脑梗死和心肌梗死关系的研究

目的 通过比较脑梗死和心肌梗死患者与对照组血清幽门螺旋杆菌特异抗体 Ig G、Ig A、IGM的阳性率 ,探讨幽门螺旋杆菌与脑梗死和心肌梗死的关系。方法 老年脑梗死组 6 9例 ,老年心肌梗死 32例 ,对照组 42例。应用酶联免疫分析法分别测定三组Ig G、Ig A、IGM的阳性率。结果 脑梗死组幽门螺旋杆菌特异抗体 Ig G、Ig A、IGM阳性率分别为 82 .6 %、5 7.8%、19.5 % ,心肌梗死组为 87.6 %、6 0 .2 %、2 3.7% ;对照组则分别为 5 2 .4%、2 8.6 %、7.2 % ,与患病组相差有高度显著性 (P<0 .0 1)。患病组 Ig G和 /或 Ig A组合以及 Ig G和 /或 Ig A和 /或 IGM组合阳性率明显高于对照组 (P<0 .0 1)。患病组甘油三酯与 HP特异抗体 Ig GIg A呈明显正相关 (分别 P<0 .0 1)。结论 幽门螺旋杆菌感染与脑梗死和心肌梗死的发病密切相关 ;

两种肺炎支原体抗体检测方法的临床应用研究

目的探讨两种实验室检测方法-被动颗粒凝集法(凝集法)和ELISA法检测在肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)诊断中的临床应用价值。方法选择191份MP感染疑似患者血清,采用凝集法检测各样本中MP抗体的水平,同时采用ELISA法对各样本中的MP IgM、IgA、IgG特异性抗体进行分型检测,并对检测结果进行统计学分析。结果两种方法检测结果的阳性符合率为88.4%,阴性符合率为75.8%,总符合率为84.3%。两种方法检测结果一致性Kappa=0.642(P=0.001),且检测结果存在相关性(r=0.642,P=0.025)。随着凝集法中抗体滴度由低到高,IgM、IgA亚型阳性的样本比例增加,且各滴度组间的比例差异均有统计学意义(P均<0.05)。凝集法阳性样本中既往感染比例为26.4%,现症感染率为58.1%。特异性IgM抗体在幼儿组(43.3%)及青少年组(36.1%)患者中检出率最高,而IgG(100.0%)及IgA(66.7%)在老年组患者中检出率最高。结论凝集法与FLISA法检测结果的符合性较好;较之凝集法,ELISA法检测IgM、IgA、IgG亚型可提示病程,区分现症感染和既往感染,对不同年龄段MP感染都具有诊断价值。建议同时参考抗体各亚型的检测结果来确定现症感染。

两种检测幽门螺杆菌感染方法的比较分析

通过对51名调查对象进行血清尿素酶抗体检测,同时进行胃镜检查,采取胃粘膜进行幽门螺杆菌培养,探索出一种更适于临床检测幽门螺杆菌感染的方法。

幽门螺杆菌感染过程中特异性抗体消长规律的研究

目的研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.py）感染Balb/c小鼠后多种抗原特异性抗体应答的消长特征,评估可用于血清学分析的抗原种类与检测窗口期。方法 70只Balb/c小鼠分为感染组和对照组,ELISA法检测血清中CagA、UreB、HpaA、KatA特异性IgG水平,Real-time PCR法检测胃组织H.py定植数量。结果小鼠感染组胃组织H.py定植数量显著高于对照组（P〈0.01）,且感染组小鼠胃组织中H.py定植数量较为恒定,拷贝数维持在106左右。在H.py感染的16周内,4种抗原特异性IgG水平存在不同的消长规律和阳性应答窗口期,其中CagA抗体阳性窗口期为4~12周,UreB抗体阳性窗口期为6~9周,HpaA抗体阳性窗口期为2~16周,KatA抗体阳性窗口期为5~6周和11~12周。结论由于不同抗原特异性IgG应答存在不同消长规律,可能影响H.py感染的血清学检测的准确性。

抗猪瘟免疫球蛋白在猪初乳中变化规律研究

以猪瘟弱毒疫苗免疫空怀母猪,待母猪分娩后,分别收集10d内的乳汁,以建立的间接ELISA法检测猪瘟IgA、IgG、IgM水平,并观察各种抗体动态变化规律。试验结果表明,猪初乳中的IgA、IgG、IgM抗体效价均在分娩当天达到最高值,随后迅速下降,7d后抗体水平与常乳基本一致(>0.05)。对照组母猪仅在分娩当天检测到较低的抗体水平。

AKA、CCP、类风湿因子在诊断类风湿性关节炎中的应用

目的探讨抗角蛋白抗体(AKA)、抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)、类风湿因子IgA、IgG、IgM抗体RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM在临床诊断自身免疫性类风湿性关节炎(RA)中的临床意义。方法收集2009年4月～2010年1月新疆库尔勒市巴州人民医院门诊就诊患者的370份血清标本,采用间接免疫荧光法(IIF)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测AKA、CCP、RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM水平。选取符合临床RA诊断患者225例,对照组113例分析AKA、CCP、RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM在不同性别、年龄RA患者中的分布情况。结果在225份检测标本中,AKA、CCP、RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM的阳性率分别为15.1%、20.9%、31.6%、29.3%、30.7%,男女比例分别为1:2.8、1:3、1:2.9、1:3、1:2.5。不同性别各指标阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。AKA、CCP、RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM在不同年龄组间阳性率差异也有统计学意义(χ2=112.9,P均<0.01)。RA组和对照组AKA、CCP、RF-IgA、RF-IgG和RF-IgM阳性率差异也有统计学意义(P<0.01)。结论临床RA就诊患者中AKA、CCP、RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM的阳性率在不同性别、年龄组间存在差异。