间接ELISA检测牛分枝杆菌抗体方法的建立及初步应用

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种以上抗原的特异性抗体为阳性时,即可判断为结核检测阳性。以TST为标准,判断ELISA方法的敏感性与特异性。结果证明,ELISA方法具有较好的敏感性(71.4%)。对ELISA检测为强阳性的奶牛进行细菌分离,并对5头结核菌分离阳性奶牛进行TST检测,结果有3头为TST阳性,2头可疑,显示出ELISA方法对严重感染牛的检测较TST具有更高的敏感性。由于TST与ELISA分别以细胞免疫与体液免疫为基础,两种检测方法结合应用可进一步提高牛结核病的检出率。

ELISA法测定火腿肠中大豆蛋白的含量

本文详细介绍了用ELISA法测定肉制品中大豆蛋白含量的步骤。并对干扰试验和回收率试验的结果进行了讨论。通过对市售14种火腿肠总蛋白含量与大豆蛋白含量的测定,初步了解此类产品植物蛋白的添加情况以及肉蛋白占有率。

ELISA检测试剂盒在出入境检验检疫中的应用与质控

介绍了ELISA检测试剂盒在检验检疫中的应用情况、面临的问题及当前的监管现状,并探讨了ELISA检测试剂盒的质控评价方法。

间接竞争ELISA检测兔肉中氯霉素残留方法的确定

建立了快速定量测定氯霉素(CAP)含量的间接竞争酶联免疫吸附试验方法。游离氯霉素与氯霉素辣根过氧化物酶标记物(HRP)在同一系统中竞争数量有限的氯霉素抗体结合位点,氯霉素酶标记物与氯霉素抗体结合的数量反比于游离氯霉素的数量。氯霉素浓度在0.2～20μg·ml-1范围内具有良好的线性关系回归方程为y=0.8327-0.5260x,r2=0.9862;测定低限为20ng·ml-1;方法平均回收率为83.5%,符合目前国际上氯霉素残留量检测的要求。

酶联免疫吸附法(ELISA)在肉制品检测中的应用

介绍了酶联免疫吸附法(ELISA)的基本原理和肉制品检测所面临的问题,综述了ELISA在肉制品检测中的研究进展,主要包括ELISA用于肉制品中抗生素、激素、致病菌、中枢神经系统组织、辐照食品和肉的组成的检测。

鸡、鸭肉中金刚烷胺、金刚乙胺、索金刚胺间接竞争ELISA检测方法研究

目的:建立一种检测鸡肉、鸭肉中金刚烷胺、金刚乙胺、索金刚胺的间接竞争酶联免疫吸附方法(Indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA)。方法:本研究基于间接竞争酶联免疫方法的原理,在酶标板微孔中预包被偶联抗原,样本中含有的金刚烷胺、金刚乙胺、索金刚胺与微孔中预包被的偶联抗原特异性地竞争酶标记抗体,催化底物显色,根据显色深浅来计算样本中金刚烷胺类药物的含量。结果:金刚烷胺、金刚乙胺、索金刚胺的检测限分别为:0.57、0.42、0.41μg/kg(鸡肉)和0.59、0.40、0.38μg/kg(鸭肉);定量限分别为0.85、0.63、0.69μg/kg(鸡肉)和0.94、0.68、0.52μg/kg(鸭肉);添加回收率范围为67.0%~117.9%;日内变异系数6.3%~12.7%,日间变异系数8.1%~14.5%,且实际样品检测结果与HPLC-MS一致性较高(R 2=0.9990),表明该方法具有良好的准确度和精密度。结论:本研究建立的ic-ELISA方法适用于鸡鸭肉样品中金刚烷胺类药物残留的检测,方法的灵敏度高、稳定性好,可应用于批量样本的快速筛查,具有良好的实际应用价值。

用双抗夹心ELISA鉴别不同肉类的研究

以辣根过氧化物酶标记兔抗不同动物肌肉和血清球蛋白抗血清检查860份牛肉、510份马肉、510份猪肉、310份羊肉和100份驼肉,检出率均在95％以上;经与其它血清学方法比较,证实用该法鉴别不同肉类,具有较高的敏感性和特异性,而且方法简便,设备简单,判断指标客观真实,经研制配套的商品化诊断盒,可供肉品检疫部门及有关单位野外应用。

牛结核γ—干扰素ELISA检测方法在检疫工作中的应用

为评价牛γ—干扰素ELISA检测方法检测牛结核的效果及国产试剂盒的检测效果,本试验首先将国产试剂盒与Prionics试剂盒对42份相对阳性的样品和105份相对阴性的样品进行对比研究。然后对5个规模化牛场的3000头奶牛首先进行国产单纯结核菌素颈部皮内变态反应试验,3天后选取皮内变态反应阳性和可疑及部分阴性牛共418头,进行牛γ—干扰素试验。结果国产试剂盒对阳性和阴性样品的检测敏感性和特异性分别为95.2%和100%,与Priobics试剂盒的符合率为99.3%。表明国产试剂盒与进口试剂盒的检测能力一致,牛γ—干扰素检测方法准确可靠。5个牛场的3000头奶牛单纯结核菌素颈部皮内变态反应试验阳性为138头,可疑105头。γ—干扰素试验对418头奶牛的检测,其中阳性74头,与颈部皮内变态反应(可疑牛暂时视为阴性)的符合率为60.5%。

ELISA技术在饲料安全检测中的应用

近年来随着兽药在饲料中的使用日益广泛,饲料安全检测工作在畜牧生产中更加重要,具有高选择性、高灵敏度、高分析效率、低成本、低环境污染特点的ELISA技术成为当今饲料安全检测工作中应用日益广泛的测定技术之一.ELISA技术在饲料安全检测中的运用及其试验条件的要求就显得非常重要.

用Dot—ELISA方法检测生肉中的沙门菌

目的检测生肉中的沙门菌带菌情况,为预防沙门菌食物中毒提供理论参数。方法应用Dot—ELISA法对西宁市某屠宰厂85份猪胴体,101份羊胴体和71份牛胴体进行沙门菌的检测,同时用常规分离培养鉴定技术作为对照试验。结果 Dot—ELISA法检出沙门菌阳性率分别为76.47%(65/85),55.44%(56/101)和46.48%(33/71);而常规分离培养鉴定技术检出沙门菌阳性率分别为78.82%(67/85)、47.52%(48/101)和43.66%(31/71)。两种方法的阳性符合率分别为86.57%、85.71%和81.82%,两种方法在检测中的差异无显著性(P>0.05)。结论 Dot-ELISA法检测沙门菌快速、准确,且与分离培养法阳性符合率较高;生肉中沙门菌带菌现象较为严重,存在一定的食品安全隐患。

“猛香系”杜长大三元猪相关屠宰性能、肉质测定的分析

为充分研究家育“猛香系”杜×长×大三元猪的屠宰性能及肉品质,对其进行屠宰实验及品质检验。选择30头同一饲养环境、管理条件的体重约为115 kg三元猪进行屠宰测定,分析其屠宰性能、胴体性状以及肉品品质。结果表明:胴体指标分析得出,胴体均重为85.25 kg,屠宰率为70.25%,胴体长为97.45 cm,背膘厚为23.59 mm,皮厚为2.66 mm,眼肌面积为49.31 cm^(2),腿臀比例为33.19%;肉质指标分析得出,肌肉色值L_(24)42.93,pH_(1)值6.37,pH_(24)值为5.76,48 h滴水损失2.53%,系水力92.58%。实验为进一步提高和改善三元猪的胴体品质和优质选育育种方案提供参考的数据支撑。

免疫层析试纸条检测轻度感染小鼠肉汁抗旋毛虫抗体的研究

目的观察免疫层析试纸条对轻度感染小鼠肉汁中抗旋毛虫抗体的检测效果。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条。将70只雄性昆明小鼠随机分为7组（每组10只），每组分别经口感染30、25、20、15、10、5、3条旋毛虫幼虫，感染后6周用试纸条进行血清及肉汁抗体检测，并与ELISA、镜检法及消化法的检测结果进行比较。结果30、25、20、15、10条旋毛虫幼虫感染的小鼠，试纸条与ELISA的血清及肉汁抗体阳性率均为100（10／10）,镜检法与消化法的幼虫检出率均为100％（10／10）。5条旋毛虫感染的10只小鼠，镜检法和消化法的幼虫检出率分别为70％（7／10）和100％（10／10），消化法检查时10只小鼠的每克肌肉虫荷为0．88～3．14条幼虫（平均为1．58条），试纸条与ELISA检测时的血清及肉汁抗体阳性率均为100％（10／10）。3条旋毛虫感染的10只小鼠，4种方法检测时均为阴性。结果表明，试纸条检验肉类中旋毛虫的敏感性与ELISA和消化法相同，且明显高于镜检法（P〈0．05）。低剂量旋毛虫感染小鼠后6周的肉汁抗体水平与感染剂量呈正相关（P〈0．05），肉汁与血清抗体水平均具有相关性（P〈0．05）。结论每克小鼠肌肉仅含0．88条旋毛虫幼虫时也可被试纸条检出，试纸条可用于轻度感染肉类中旋毛虫检疫的初筛。

肉类食品中庆大霉素残留的监测与分析

[目的]了解深圳市龙岗区肉类食品中庆大霉素的残留水平,为促进畜牧养殖业抗生素的合理使用,以及加强肉类食品的监管提供依据。[方法]应用ELISA法检测肉类食品中庆大霉素的残留量。[结果]检测64份肉类样品,9份超过标准,阳性率14.08%,残留率较高。[结论]相关部门应加强对畜牧养殖业抗生素的使用进行科学指导,并按相关的法规进行监督和约束。

生物检测技术在食品检验中的研究

生物检测技术在食品检验中应用越来越广泛,对食品检测中的主要生物检测方法及其主要应用领域进行了综述,并对发展前景做了展望。

闽西地区猪伪狂犬野毒株感染的血清学调查

美国IDEXX公司生产的PRV-gE（gE-ELISA）酶联免疫试剂盒,能对已免疫PR缺失gE的基因工程疫苗或未免疫的猪群,区分疫苗株和野毒株感染。2005～2007上半年,对闽西地区使用gE-基因缺失疫苗的规模化猪场母猪、仔猪和生长猪,不分健康状况,进行PR野毒株感染的血清学调查,结果显示2005年至2006年上半年,该地区母猪PR野毒感染阳性率较高,达41.5%和43.8%,2006年下半年至2007上半年,该地区母猪PR野毒感染阳性率有较大幅度的降低,且阴性猪场很多,阳性率分别是21.3%和13.3%。同时3年来对54个规模化猪场监测结果分析,各猪场阳性率差异很大,3年来猪场阳性率也呈大幅度下降,2007年上半年猪场阳性率仅为33.3%。对仔猪和生长猪的监测结果显示,阳性率比母猪大大降低,并且也呈下降的趋势。

控制肉类食品检验质量的策略探析

肉类食品的质量在很大程度上影响其食用安全、营养价值和口感体验。虽然目前的肉类食品检验方法能够较好地反映食品的质量,为食品安全管理提供相关信息参考和行为指导,但是,由于食品检验流程多、环境复杂等,肉类食品检验的质量存在一定的不确定性。基于此,有必要根据食品检验的实际情况,以及可能存在的影响检验质量的因素,采取相应的质量控制措施,确保检验结果的客观性和准确性。本文结合现实情况,在概括介绍肉类食品检验的基础上,对可能影响肉类食品检验质量的因素,以及控制这些因素的策略进行了探讨分析,以期为肉类食品检验提供相关内容参考。

肉类食品检验质量控制对策

有效落实肉类食品检验工作对于保障食品安全、规范市场秩序具有至关重要的作用。落实肉类食品检验质量控制可以更好地保证肉类食品检验工作落实的规范性、科学性以及检验结果的准确性和真实性。本文主要从肉类食品检验流程、影响肉类食品检验质量的因素和肉类食品检验质量控制策略3个角度展开论述,以期为相关工作人员提供更多的参考与借鉴,保障肉类食品检验工作有序推进。

酶联免疫吸附法在肉制品快速检测中的应用

简单介绍了酶联免疫吸附法(ELISA),并且就其在肉制品分析中的应用进行了主要包括用于肉制品微生物、毒素、农药残留、肉类鉴别和重金属的检测。

酶联免疫吸附法在肉制品中抗生素检测中的应用

本文介绍了酶联免疫吸附法(ELISA)的基本原理和肉制品检测所面临的问题,综述了ELISA在肉制品中抗生素检测中的研究进展。

食品中沙门菌的检测

目的:检测超市奶类和肉类制品中沙门菌的污染情况,初步评价检测食品中沙门菌的检测方法。方法:样品经增菌后,用科玛嘉显色培养基培养、ELISA法、国标法对超市的奶类和肉类制品中的沙门菌进行平行检测,并对其灵敏性和特异性、符合率进行比较分析。结果:检测320份奶类制品和肉制品,科玛嘉显色培养基培养、ELISA法、国标法阳性样品数分别为23份、26份、20份,其阳性率分别为7.2%、8.1%、6.3%。科玛嘉显色培养基培养的敏感性和特异性分别为100%、99%,与国标法的符合率达99.1%。ELISA法的敏感性和特异性分别为100%、98%,与国标法符合率98.1%。ELISA法与科玛嘉显色培养基培养的符合率为99.1%。157份奶类制品,科玛嘉显色培养基培养、ELISA法、国标法检测阳性样品数分别为6、6及5份,阳性率分别为3.8%、3.8%和3.2%,有2份检测结果不一致。163份肉类制品,阳性样品分别为17、20、15份,阳性率分别为10.4%、12.3%和9.2%,有5份肉食品检测结果不一致。结论:科玛嘉显色培养基培养、ELISA法和国标法对超市的奶类和肉类制品中的沙门菌进行平行检测,符合率高。利用科玛嘉显色培养基培养、ELISA法,可以快速、方便地对食品中沙门菌的污染进行批量初筛,科玛嘉显色培养基鉴别培养特异性好,更适合食品沙门菌的分离与初筛检测。