ELISA一步法检测乙型肝炎病毒标志物影响因素的实验研究

为了探讨临床检验工作中 ,除试剂和操作原因外 ,造成ELISA一步法检测乙肝病毒 (HBV)标志物“假阳性”结果的原因。就标本中常见的溶血、带红细胞以及黄疸等因素 ,对检测结果的影响及其程度进行实验研究。结果表明 :溶血、带红细胞标本 (与文献报道相比 )只对手工洗板几乎无影响。而黄疸标本对检测结果影响极为明显 ,可造成ELISA一步法HBV标志物检测假阳性。

ELISA一步法检测轮状病毒抗原

用牛轮状病毒(NCDV株,A组)抗原免疫家兔,制备兔抗牛NCDV多克隆抗体。用该抗体与辣根过氧化物酶联结,建立了检测轮状病毒(RV)的ELISA一步法。该法实验过程为: 40孔酶标板用兔抗RV包被,4℃过夜后加入50μl处理过的待测标本和50μl HRP-

ELISA一步法检测梅毒抗体钩状效应三例

笔者在用ELISA双抗原夹心一步法试剂检测梅毒抗体（TP-Ab）工作中遇到高滴度标本检测结果假阴性1例、弱阳性2例,经进一步实验判定此结果为钩状效应（Hook effect）引起,现报告如下。

ELISA一步法与两步法检测乙肝表面抗原结果对比分析

目的比较ELISA一步法与两步法检测HBsAg结果的阳性率。方法通过实验室2010年4月～2011年3月用一步法检测乙肝表面抗原阳性率与2011年4月～2012年3月用两步法检测HBsAg阳性率进行对比分析。结果两步法检测阳性率高于一步法。结论两步法检测乙肝表面抗原用于血站实验室能够减少漏检。

双抗原夹心ELISA一步法检测梅毒螺旋体抗体前带现象的初步分析

梅毒的实验室诊断主要有RPR法、TRUST法、TPPA法、TPHA法和ELISA法等.

徐州市无偿献血者梅毒ELISA一步法、两步法、TPPA检测结果分析

目的探讨通过对徐州市无偿献血者TP-ELISA与TP-PA检测结果分析,了解本地区无偿献血者梅毒感染情况,并以此建立无偿献血者标本检测和献血者告知策略的可行性。方法应用TP-ELISA对无偿献血者血液标本进行梅毒抗体筛查,筛查有反应性标本及灰区标本用TPPA法进行检测。结果XC1、JH1、XC2、WT2试验结果与TPPA试验结果阳性符合率分别为81.42%、65.2%、91.0%、89.7%;一步法和两步法初筛试验结果与TPPA试验结果的阳性符合率分别为61.74%和88.51%,本地区无偿献血者梅毒初筛阳性率为0.376%,本市无偿献血人群初筛和TPPA同为阳性的梅毒感染率为0.282%,

ELISA一步法检测pre—S_2Ab的建立

ＥＬＩＳＡ一步法检测ｐｒｅ—Ｓ_２Ａｂ的建立高仕卿（唐山市传染病医院，０６３０２０）ｐｒｅ─Ｓ２Ａｂ是判断机体受ＨＢＶ感染后是否产生免疫效果及疾病预后的一项重要指标。本文在常规方法（ＥＬＩＳＡ法）的基础上进行了改进（以下简称一步法）。方法简便、快速结?..

ELISA一步法检测HBsAg后带现象初探

目前HBsAg的检测由经典的ELISA二步法改为一步法,虽然简化了操作,缩短了测试时间,但也带来了许多弊端。抗原与抗体结合需要一定的比例时才出现可见的反应,不适合的比例不出现反应为抑制带,抗原过剩出现的抑制带为后带。

金标法在ELISA一步法检测HBsAg可疑标本中的应用

目的：应用胶体金免疫层析法（GICA）试长对ELISA一步法测定乙型肝炎表面抗原（HBsAg)其S／CO值可疑标本进行复查分析，探讨GICA法在上述可疑标本中的应用价值。方法：GICA法与ELISA一步法同时对阴性对照及低定值质控血清进行测定，比较两者的特异性与灵敏度；采用GICA法与ELISA二步法对ELISA一步法测定HBsAg其S／CO值可疑的80份标本进行重复测定，并对所得结果进行分析。结果：GICA法对1ng/ml的灵敏度为95％，特异性100％。对80份可疑标本，GICA法假阳性为0，假阴性6．67％，准确度96．25％；而ELISA一步法假阳性高达54．29％，假阴性0，准确度76．25％。结论：GICA法在ELISA一步法测定HBsAg其S／CO值可疑标本的复查具有简单，快速，灵敏度高，特异性好，结果准确等优点，是HBsAg复查的良好方法。

加样时间对ELISA快速一步法检测乙型肝炎血清标志物的影响

目前,实验室常规做乙型肝炎(HBV)血清标志物检测多采用快速酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunoadsordent Assay;ELISA)一步法,即样本和包被的相应抗体或抗原以及相应酶标抗体同时在30 min内反应完成,而多数实验室仍采用手工加样法,在此过程中如果样本量较大,同一批检样中加在前面的样本与加在最后的样本时间相差较大,少则半小时,多则一个小时,这一时间差远超过了样本和酶标抗体同时反应的时间,这样的差异是否对检测结果有影响?为此我们作了相关的实验观察,现报告如下.

检测肾综合征出血热血清IgM的ELISA捕捉一步法的建立及初步应用

目的 :建立一种快速、简便、敏感 ,适合医院和基层门诊应用的检测肾综合征出血热血清特异性IgM的方法。 方法 :以羊抗人 μ链为包被抗体 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的抗 -HFRS病毒特异性单克隆抗体 (McAb)与HFRS病毒抗原(Ag)结合成复合物为指示标记物 ,建立了检测HFRS血清特异性IgM的ELISA反向捕捉一步法。 结果 :整个试验过程仅需1h ,操作简便。用该法与山东省淄博市生产的ELISA二步法试剂盒对比检测HFRS血清 6 0份 ,两法均为阳性 5 4份 ,均为阴性 3份 ,总符合率 95 %。结论 :ELISA捕捉一步法快速、简便、敏感 ,适合医院和基层门诊应用 。

排溢法ELISA,一种改进的二步法标记免疫实验技术

目的:建立一种简便的血清HBsAg检测二步法标记免疫试验。方法:在既往G6ELISA的基础上建立血清HB-sAg检测排溢法ELISA,采用系列稀释实验对方的相对显色强度,敏感性,及其对Hooks效应的拮抗能力进行考核,将其用于对一组临床标本的检测,并与经典二步法及一步法ELISA进行比较。结果:在大致相同的实验条件下排溢法,二步法及一步法ELISA三者实验信号的强度大致相当;其敏感性分别为19.2、12.6及14.5pg/ml。当被检标本HBsAg浓度在37.5μg/ml时一步法ELISA开始显现Hooks效应,至2400μg/ml时测值已接近阈值;而排溢法及经典二步法ELISA两者对Hooks效应则表现出相似的拮抗。对231例临床标本进行检测,112例高滴度阳性标本(经稀释实验证实)中出现中重度Hooks效应者一步法ELISA17例,占15.2%,而排溢法及其二步法ELISA则未见Hooks效应的影响。结论:在保证实验结果的前提下,排溢法ELISA在操作程度简化上与一步法相当,但可完全克服Hooks现象的干扰。

酶联免疫吸附试验一步法检测HBsAg有关问题探讨

酶联免疫吸附试验（ELISA）是检测HBsAg常用方法，根据反应模式可分为一步法和二分法。一步法是将待测样品和酶标记抗体同时加入到反应孔中进行反应。从而达到简便、快速的目的；两步法是先将样品加入到反应孔中，待反应结束后再加入酶标记抗体，从而使待测样品的“捕获反应”和酶标记抗体的“酶联反应”分开进行，因而反应更加稳定、重复性也更好，但反应时间比一步法长。目前国内用于检测HBsAg的试剂盒多为ELISA一步法，在实际工作中，某些因素使一步法检测结果受到影响，若不注意，将出现假阳性或假阴性。现对操作中出现的问题进行探讨，旨在提高HBsAg检测结果的准确性。

金标法与ELISA在检测脐血HBsAg中的应用

目的:探讨金标法和ELISA在检测脐血HBsAg中的应用价值。方法:对108例脐血血清同时应用金标法和ELISA(一步法)测定HBsAg,对结果进行分析。结果:通过Kappa分析,两种测定方法具有一致性,但一致性不是很强。用ELISA两步法对结果不一致标本进行复核,经判读都为阳性(有1例为污染,两步法仍为阴性)。结论:建议脐血测定HBsAg应用ELISA两步法。

ELISA法检测HBsAb产生钩状效应2例临床分析

ELISA检测抗原抗体因其成本低、灵敏度高、特异性强等优点被实验室广泛应用。由于目前多采用一步法检测，当血清中抗原抗体浓度过高时可能会产生钩状效应（HOOK效应），而引起假阴性[1-14]。在采用一步法检测时，钩状效应很难被发现。对此效应的报道主要集中在HBsAg的检测。本课题组在临床工作中遇到两例体检者，应用ELISA一步法检测结果均提示HBsAb阴性，但被检测对象均对结果表示异议，自述3个月前曾检测HBsAb为弱阳性，并于当时分别注射过10μg乙肝疫苗。后经倍比稀释[15]用ELISA一步法检测，确认其HBsAb为阳性，现报告如下。

影响乙型肝炎表面抗原在ELISA检测中的2种因素分析

目的:探讨乙型肝炎表面抗原在ELISA法检测中受溶血标本、洗涤过程影响而使检测结果产生异常的分析。方法:在应用ELISA酶免疫一步法对乙型肝炎表面抗原进行检测的过程中采用以上影响因素进行检测,再与其正常结果加以对照分析。结果:乙型肝炎表面抗原受上述因素影响后易产生假阳性或假阴性的结果。结论:如何避免以上因素对乙型肝炎表面抗原检测结果的影响,这就要求对实验条件、操作规程、试剂与仪器、实验人员的操作水平等进行严格的质量控制,对于已溶血的标本不能使用。