基层兽医实验室ELISA试验中常见问题的分析与应对

随着养殖业的快速发展,基层兽医实验室在保障动物健康和食品安全方面发挥着越来越重要的作用。酶联免疫吸附试验(ELISA)作为实验室常用的一种免疫学检测方法,具有操作简便、特异性强、重复性好等优点。然而在实际操作中,基层兽医实验室可能会遇到一些问题,影响试验结果的准确性和可靠性,需要给予解决。文章主要就其存在的问题与应对措施进行分析,以供同行参考。

应用液相阻断ELISA试验和正向间接血凝试验(IHA)检测猪O型口蹄疫抗体的比较分析

口蹄疫,是由口蹄疫病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病,易感动物达70多种,主要侵害偶蹄类动物,少见于人。猪口蹄疫是国家要求强制免疫的重大动物疫病之一,对其免疫抗体检测的科学、准确性对有效防控口蹄疫尤为重要,但在实际检测过程中,常因检测方法不同而使检测结果有所差异,即使同一份血清用不同检测方法,其监测结果不一致的现象时有发生。

3A蛋白间接ELISA试验检测猪口蹄疫感染抗体的研究

用表达的口蹄疫3A蛋白作为包被抗原,建立了间接ELISA试验,对口蹄疫病毒感染血清、免疫血清 和其它非口蹄疫病毒血清进行了检测研究。结果表明,3A蛋白间接ELISA试验对口蹄疫具有较好的特异性,可 以区分感染口蹄疫病毒的猪血清和疫苗免疫猪血清。

基因缺失鉴别ELISA试验在种猪场控制与净化猪伪狂犬病的应用

猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒（PRV）引起的一种急性、高度接触性传染病，以发热、奇痒及脑脊髓炎为主要症状。该病毒可引起各种家畜及野生动物发病，猪是该病原的传播者和自然宿主，临床表现为母猪流产、死产、产弱仔猪等繁殖障碍症状，新生仔猪发热、出现神经症状、死亡率较高。近年来，随着猪伪狂犬病疫苗特别是基因缺失疫苗的使用，猪伪狂犬病的发病率与死亡率大大减少，但目前该病仍然是威胁广西壮族自治区养猪业发展的重要疫病。2005～2006年我们应用gpI基因缺失鉴别ELISA试验对广西4个种猪场进行了猪伪狂犬病的检测，并清除带毒猪，做了控制与净化猪伪狂犬病的试验，达到了预期的净化效果。现报告如下。

ELISA试验操作过程中应注意的两个问题

在传染病防治工作中，应用最多的实验室诊断方法是血清学试验。血清学试验是基于抗原抗体结合的高度特异性原理，用已知抗体检测抗原，或用已知抗原检测抗体的方法。目前，血清学试验的最常用方法是酶联免疫吸附试验（ELISA法），用ELISA法进行血清学试验，操作过程中有一些易被人们忽视但对试验结果会产生直接影响的问题，应引起检验人员注意。

ELISA试验检测抗核抗体（ANA）及其临床应用

ＥＬＩＳＡ试验检测抗核抗体（ＡＮＡ）及其临床应用杨文（新疆乌鲁木齐铁路局中心医院，８３００１１）于利凌（山东济宁市中区人民医院）王艾丽（南京军区总医院临免科２１０００２）抗核抗体（ａｎｔｉｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｂｏｄｙ，ＡＮＡ）是以真核细胞的核成份为...

盐城地区血站实验室ELISA试验室内质控回顾性分析

目的通过对盐城市中心血站实验室ELISA试验室内质控数据分析，查找误差的来源、监测和控制本室常规工作的精密度，不断提高本实验室常规工作的检测质量。方法对2012年本站实验室ELISA试验项目（HB-sAg、抗-HCV、抗-HIV及梅毒）的所有室内质控数据进行回顾性分析。结果2012年本站实验室ELISA试验共有7261次室内质控结果，其中288次（3．97％）属于“警告”，107次（1．47％）属于“失控”，失控中18次（0．25％）为随机误差，89次（1．22％）为系统误差；ELISA试验的室内质控共有64个RCV，其值在5．50％-24．50％。结论从总体上看本站实验室ELISA试验室内质控效果处于可接受范围内，达到了室内质控的预期要求。

2016年盐城市献血者ELISA试验室内质控结果分析

目的通过对2016年盐城市中心血站献血者ELISA试验室内质控数据回顾性分析以确定误差来源、监控常规工作的精密度,进一步提高实验室的检测质量。方法根据2016年献血者HBsAg、抗-HIV、抗-HCV、TP四项ELISA试验室内质控数据并结合L-J质控图予以分析。结果 2016年本站献血者ELISA试验共有8622次质控结果,发现质控结果异常176次(2.04%),其中2S告警125次(1.45%),失控51次(0.59%),失控中随机误差14次(0.16%),37次(0.43%)属于系统误差。结论将Westgard多规则选择性地应用到L-J质控图中,较好的提高了室内质控效率。

核酸检测联合ELISA试验对无偿献血者输血传播疾病残余风险的影响

目的探讨核酸检测联合酶联免疫吸附试验(ELISA)对无偿献血者输血传播疾病残余风险的影响。方法收集在本市血液中心进行无偿献血者3674例,均行ELISA试验,对经ELISA试验筛选为阴性的标本进行核酸检测,观察有无血清学转换,以确定感染状态。结果 3674份无偿献血样本经初检及复检发现3494份血样呈阴性反应,所占比例为95.10%,另180份初检及复检结果呈阳性反应,所占比例为4.90%,其中乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性率为11.11%、艾滋病抗体(抗-HIV)阳性率为6.11%;ELISA初/复检均为阴性的血样3494份,其中献血体积为300mL或200mL的血样1062份,6样本汇集池数量为176个,其中8个汇集池核酸检测为阳性,单人份检测出核酸反应阳性样本4份,ELISA试验漏检率为0.38%(4/1062)。结论核酸检测结合ELISA试验有助于减少病毒漏检的发生,最大限度降低输血传播疾病残余风险。

牛结核分枝杆菌γ-干扰素ELISA试验和牛结核菌素PPD试验检测奶牛结核病的探讨

本试验利用牛结核分枝杆菌γ-干扰素ELISA试剂盒对同一奶牛养殖小区经牛结核菌素试验(PPD)阳性牛及同群牛结核菌素检测阴性牛进行检测。结果发现,两种试验结果符合率为86.25%。牛结核菌素试验用于奶牛结核病,虽然操作简便、价格低廉,但存在假阴性和假阳性的现象,直接影响了我县奶牛结核病确诊工作。本文旨在指导我县奶牛结核病诊断提供科学依据。