非酒精性脂肪性肝病合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21和分泌型卷曲相关蛋白5水平变化及其临床意义探讨

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)合并T2DM患者血清成纤维细胞生长因子-21(FGF21)和分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)水平变化及其临床意义。方法2020年5月~2023年3月我院诊治的NAFLD患者101例【单纯性脂肪肝(NAFL)64例、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)25例和肝硬化(LC)12例】和NAFLD合并T2DM患者81例(NAFL 58例、NASH 16例和LC 7例),检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用ELISA法检测血清FGF21和SFRP5水平。结果NAFLD合并T2DM患者FBG、血清FINS、HOMA-IR和血清FGF21水平分别为(8.7±1.4)mmol/L、(28.9±5.8)μIU/mL、(11.1±2.7)和(304.8±36.0)pg/mL,均显著高于NAFLD患者【分别为(5.5±1.2)mmol/L、(20.8±4.1)μIU/mL、(5.1±1.5)和(267.6±34.5)pg/mL,P<0.05】,而血清SFRP5水平为(6.8±1.2)pg/mL,显著低于NAFLD患者【(10.3±2.2)pg/mL,P<0.05】;NAFLD合并T2DM患者血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平分别为(6.7±1.0)mmol/L、(3.7±0.6)mmol/L、(1.3±0.2)mmol/L和(3.4±0.8)mmol/L,与NAFLD患者【分别为(6.2±0.9)mmol/L、(4.1±0.5)mmol/L、(1.3±0.3)mmol/L和(3.2±0.7)mmol/L】比,差异无统计学意义(P>0.05);T2DM合并NAFL、合并NASH和合并肝硬化患者血清SFRP5水平分别为(7.8±1.1)pg/mL、(6.4±0.8)pg/mL和(5.1±0.7)pg/mL,显著低于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(11.9±2.1)pg/mL、(9.8±1.6)pg/mL和(8.4±1.1)pg/mL,P<0.05】,而血清FGF21水平分别为(295.6±31.2)pg/mL、(316.8±32.9)pg/mL和(353.6±36.7)pg/mL,显著高于NAFL、NASH和肝硬化患者【分别为(255.1±32.5)pg/mL、(279.5±33.4)pg/mL和(309.7±35.8)pg/mL,P<0.05】。结论NAFLD合并T2DM患者血清FGF21水平显著升高,而血清SFRP5水平显著降低,可应用于对病情严重程度的评估,值得深入研究。

Ⅱ型肺泡上皮细胞来源外泌体miR-21-5p靶向SKP2缓解支气管肺发育不良

目的探讨来源于Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)外泌体(exosomal,Exos)-miR-21-5p(简称miR-21)靶向S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,SKP2)对支气管肺泡发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的保护效应及作用机制。方法使用60只6~8周龄的SD大鼠,其中30只通过差速贴壁离心法提取原代AEC-Ⅱ并进行培养。密度梯度离心法用于获得AEC-Ⅱ来源的外泌体,密度梯度离心法用于提取AEC-Ⅱ培养基中囊泡,并通过透射电镜及粒径分析对其验证,双荧光素报告基因实验以确认miR-21与SKP2的靶向关系。剩余的30只大鼠按照3∶1的雌雄比例混合,以便于进行怀孕检测。将这些新生小鼠随机分为4个不同的实验组:空气对照组(Con组)、高氧处理组(BPD+PBS组)、接受高氧和外泌体治疗的小鼠(BPD+Exos-miR-21组),以及高氧联合外泌体miR-21抑制剂处理组(BPD+Exos-AV-miR-21组)。新生SD大鼠将暴露于85%的氧气环境中,以此建立BPD模型。经过14 d高氧处理后,使用RTq-PCR技术检测肺组织和外泌体中miR-21的表达水平。肺组织经HE染色观察其病理学变化,并计算了平均肺泡线性截距(MLI)和放射状肺泡计数(RAC)。分光光度法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(T-AOC)的水平,荧光分光光度法测定活性氧簇(ROS)水平。此外,利用Western blot技术检测了SKP2、NR2F2和VEGF-A蛋白的表达水平。结果电镜及粒径分析结果显示AEC-Ⅱ细胞提取的小泡结构物质属于外泌体,miR-21在外泌体中表达显著上调(P<0.01),双荧光素酶基因报告实验证实SKP2为miR-21的作用靶标。与Con组比较,BPD+PBS组及BPD+Exos-AVmiR-21组肺组织HE可见肺组织结构紊乱,肺泡增大、简化,ROS、MDA、MLI增高及SKP2蛋白表达升高(P<0.01);而RAC、SOD、T-AOC、miR-21下调及NR2F2、VEGF-A蛋白表达降低(P<0.01);与BPD+PBS组比较,BPD+Exos-miR-21组肺组织HE可见无肺泡数目增加,肺泡简化程度好转,同时MLI、ROS、MDA降低及SKP2蛋白表达降低(P<0.01);而ROC、SOD、T-AOC、miR-21上调及NR2F2、VEGF-A蛋白表达升高(P<0.01)。结论AEC-Ⅱ来源的Exos-miR-21可能靶向SKP2通过促进NR2F2、VEGF-A蛋白表达抑制氧化应激促进肺泡发育改善BPD。

2型糖尿病合并桥本甲状腺炎患者血清微小RNA-22-5p和25羟维生素D水平变化及其预测价值研究

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)合并桥本甲状腺炎(HT)患者血清微小RNA-22-5p(miR-22-5p)、25羟维生素D水平变化及其预测价值。方法:选取T2DM患者96例,根据是否合并HT分为T2DM组(50例)和T2DM+HT组(46例)。另选择同期体检健康者40例为对照组。比较三组一般资料、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、甲功五项[游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)]、血清炎症因子[高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10]、25羟维生素D和miR-22-5p。采用Spearman法分析甲功五项、血清炎症因子与miR-22-5p及25羟维生素D的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-22-5p、25羟维生素D对T2DM合并HT的预测价值。结果:三组一般资料比较差异无统计学意义(均P>0.05)。与对照组比较,T2DM组FBG、HbA1c、hs-CRP、TNF-α、IL-6和miR-22-5p升高,25羟维生素D降低(均P<0.05);T2DM+HT组FBG、HbA1c、FT3、FT4、TSH、TPOAb、TGAb、hs-CRP、TNF-α、IL-6和miR-22-5p升高,IL-10和25羟维生素D降低(均P<0.05)。T2DM组FT3、FT4、TSH、TPOAb、TGAb、hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-10与miR-22-5p、25羟维生素D无相关性(均P>0.05)。T2DM+HT组FT3、FT4、TSH、IL-10与miR-22-5p、25羟维生素D无相关性(均P>0.05),TPOAb、TGAb、hs-CRP、TNF-α、IL-6与25羟维生素D呈负相关(均P<0.05),与miR-22-5p呈正相关(均P<0.05)。25羟维生素D、miR-22-5p以及两者联合检测预测T2DM合并HT的曲线下面积(AUC)分别为0.774、0.842、0.915,联合检测的预测价值较高。结论:T2DM合并HT患者25羟维生素D水平降低,miR-22-5p表达升高,两者与TPOAb、TGAb、hs-CRP、TNF-α、IL-6具有相关性,对T2DM合并HT具有较好的预测价值。

Ⅱ型肺泡上皮细胞来源外泌体miR-21-5p调控上皮钠离子通道减轻高氧性急性肺损伤

目的探讨Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)来源外泌体(exosomes,Exos)-miR-21-5p(miR-21)调控上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)对高氧性急性肺损伤(hyperoxia-induced acute lung injury,HALI)的保护效应及可能机制。方法6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠60只,其中20只使用差速贴壁离心法提取原代AEC-Ⅱ并培养,采用密度梯度离心法提取AEC-Ⅱ来源外泌体,透射电镜鉴定外泌体形态。余40只小鼠按随机数字表法分为(n=10):常氧(Control)组、高氧(HALI)组、高氧+Exos-miR-21(HALI+miR-21)组和高氧+siPI3K+Exos-miR-21(HALI+siPI3K+miR-21)组。除Control组外,余3组小鼠暴露于95%O 2的自制高氧饲养箱中构建HALI模型。72 h后RT-qPCR检测肺组织及外泌体miR-21表达;HE染色观察肺组织形态学变化并行肺损伤病理评分,计算肺组织湿/干质量比及肺泡液体清除率(alveolar fluid clearance,AFC);可见分光光度法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)水平;荧光分光光度法测定活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测PTEN、AKT、p-AKT、PI3K及α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与PTEN靶向关系。结果原代AEC-Ⅱ提取的囊泡状物质经鉴定为外泌体,外泌体中miR-21表达显著增高(P<0.05),PTEN为miR-21靶基因。与Control组比较,HALI组HE染色可见肺组织肺间隔增厚、大量炎症细胞浸润及肺泡萎陷,HALI组、HALI+miR-21组及HALI+siPI3K+miR-21组肺损伤病理评分、肺湿/干质量比、MDA及PTEN蛋白表达升高(P<0.05);SOD、T-AOC、AFC、miR-21及p-Akt、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC蛋白表达水平降低(P<0.05),以HALI+siPI3K+miR-21组最明显。与HALI组比较,HALI+miR-21组HE染色可见肺间隔增厚、炎症细胞浸润明显减少,肺泡萎陷显著减轻;肺损伤病理评分、肺湿/干质量比、MDA及PTEN蛋白表达显著降低(P<0.05);而SOD、T-AOC、AFC、miR-21及p-Akt、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论Ⅱ型肺泡上皮细胞来源外泌体miR-21-5p通过靶向PTEN激活PI3K/AKT信号通路调控上皮钠离子通道减轻高氧性急性肺损伤。

miR-21-5p通过调控TGF-β1减轻2型糖尿病心肌病小鼠的心肌损伤

目的探讨miR-21-5p对2型糖尿病小鼠心肌损伤的影响及潜在的分子机制。方法10只雄性db/m小鼠作为正常对照组(Con组),30只雄性db/db小鼠随机分成模型组(DCM组)、模型+miR-21-5p激动剂处理组(DCM+miR-agomir组)和模型+miR-21-5p拮抗剂处理组(DCM+miR-antagomir组),每组10只。DCM+miR-agomir组和DCM+miR-antagomir组小鼠每3 d分别经尾静脉注射100μl 10 nmol/L的miR-21-5p agomir和miR-21-5p antagomir,共10次。Con组和DCM组小鼠则在相同时间点经尾静脉注射同等剂量的生理盐水。超声心动图检测心脏功能(LVEF、LVFS),试剂盒测定心肌损伤标志物乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,TUNEL染色检测心肌细胞凋亡程度,Western blotting法检测TGF-β1、cleaved Caspase-3的蛋白表达,qRT-PCR法检测心肌组织miR-21-5p、TGF-β1 mRNA的表达。双荧光素酶报告系统验证miR-21-5p与TGF-β1的靶向关系。检测各组小鼠的氧化应激指标和炎症指标。结果与Con组相比,DCM组小鼠心肌miR-21-5p的表达显著降低,TGF-β1表达显著升高(P<0.05);且DCM组小鼠LVEF和LVFS值明显降低,血清LDH及CK-MB含量显著上升,心肌细胞凋亡明显增加(P<0.05);心肌丙二醛(MDA)水平、活性氧(ROS)生成及NOX2和NOX4 mRNA表达显著提高,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平明显减低(P<0.05);此外DCM组小鼠心肌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的水平显著增加,NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和cleaved Caspase-1的蛋白表达明显上调(P<0.05)。与DCM组相比,DCM+miR-antagomir组小鼠的心肌损伤(LDH及CK-MB)、心脏功能障碍(LVEF和LVFS)、心肌细胞凋亡、心肌氧化应激(MDA、ROS及NOX2和NOX4 mRNA表达)和炎症(TNF-α、IL-1β、IL-6、NLRP3、ASC和cleaved Caspase-1表达)均进一步加重(P<0.05)。而与DCM组相比,DCM+miR-agomir组小鼠的心肌损伤(LDH及CK-MB)、心脏功能障碍(LVEF和LVFS)、心肌细胞凋亡、心肌氧化应激(MDA、ROS及NOX2和NOX4 mRNA表达)和炎症(TNF-α、IL-1β、IL-6、NLRP3、ASC和cleaved Caspase-1表达)则明显减轻(P<0.05)。双荧光素酶报告系统检测表明miR-21-5p可靶向负调控TGF-β1的表达。结论miR-21-5p可通过靶向调控TGF-β1的表达抑制心肌氧化应激和炎症以减轻心肌细胞凋亡,进而改善2型糖尿病心肌病小鼠的心肌损伤。

凉血消银汤治疗老年寻常型银屑病疗效及对miR-21-5p、ERK1/2信号通路的影响

目的探讨凉血消银汤治疗老年寻常型银屑病的疗效,分析其治疗机制。方法选择90例老年寻常型银屑病患者,随机分为研究组和对照组,每组45例。对照组予以卡泊三醇软膏患处涂抹,早晚各1次,研究组在此基础上服用中药凉血消银汤。疗程均为8 w。比较两组治疗前后中医证候评分、皮损面积和严重程度指数(PASI)评分,并比较两组皮损组织miR-21-5p、细胞外信号调节激酶(ERK)1 mRNA、ERK2 mRNA相对表达量,比较两组血清血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素(Ang)-2、可溶性细胞黏附分子(sICAM)-1水平,并比较两组治疗总有效率。结果治疗后研究组中医证候皮疹、瘙痒、口渴、心烦易怒、大便干燥评分,皮损面积、红斑、鳞屑、浸润评分、皮损组织miR-21-5p、ERK1 mRNA、ERK2 mRNA相对表达量、血清VEGF、Ang-2、sICAM-1水平均明显低于对照组,治疗总有效率明显高于对照组(均P<0.05)。结论凉血消银汤可有效改善中医证候,降低PASI评分和血清VEGF、Ang-2、sICAM-1水平,治疗老年寻常型银屑病效果显著,安全性好,其机制可能与抑制miR-21-5p和ERK1/2信号通路有关。

对VB5型10kV真空断路器检修的若干建议

介绍比利时EIB公司VB5型(福州第一开关厂ZN21-10系列)真空断路器出现的问题,阐述该类真空断路器特性及检修标准,对检修过程中的问题做出分析,并对具体的检修项目提出改进建议。

2型糖尿病患者血清miR-21-5p与肠道菌群失调及炎症状态的关系研究

目的检测2型糖尿病(T2DM)患者血清微小RNA-21-5p(miR-21-5p)与肠道菌群失调及炎症状态的关系。方法选取2018年6月-2019年6月本院收治的T2DM患者65例作为研究对象,另选取同期在本院进行体检的健康者45例作为对照组。收集受试者的一般资料进行比较分析;采集受试者血清,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-21-5p水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测受试者血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-18(IL-18)水平。采集受检者粪便标本,采用平板培养法检测肠道肠球菌、肠杆菌、乳杆菌、双歧杆菌水平及双歧杆菌与肠杆菌的比值(B/E);Pearson法分析miR-21-5p与肠杆菌、乳杆菌、双歧杆菌、B/E、hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-18的相关性。结果与对照组相比,T2DM组血清miR-21-5p(2.34±0.35)、肠杆菌(9.08±0.65)、hs-CRP(3.41±0.62)mg/L、TNF-α(53.85±15.15)μg/L、IL-6(53.41±14.36)ng/ml、IL-18(215.62±42.46)μg/l水平升高(P<0.05);乳杆菌(9.41±0.36)、双歧杆菌(9.02±0.66)、B/E(0.96±0.19)水平降低(P<0.05)。Pearson法分析显示,miR-21-5p与肠杆菌、hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-18呈正相关(P<0.05),与乳杆菌、双歧杆菌、B/E水平呈负相关(P<0.05)。结论T2DM患者血清miR-21-5p水平与肠道菌群失调及炎症水平异常有关,可作为潜在的诊断指标。

miR-21-5p靶向调控TIMP3抑制2型糖尿病肾病小鼠肾脏系膜细胞增殖及细胞外基质堆积

目的探讨miR-21-5p对2型糖尿病肾病(T2DN)小鼠肾组织中组织金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)表达以及对肾脏系膜细胞增殖及细胞外基质堆积的影响。方法选取10只雄性db/m小鼠作为正常对照(Control)组,另选30只SPF级雄性db/db T2DN小鼠随机分成模型(T2DN)组、miR-21-5p激动剂(miR-21-5p agomir)组和miR-21-5p拮抗剂(miR-21-5p antagomir)组,每组10只。分别给予生理盐水、miR-21-5p agomir、miR-21-5p antagomir尾静脉注射,每3 d注射1次,共7次。qRT-PCR检测各组小鼠肾脏组织中miR-21-5p表达水平;ELISA法检测各组小鼠24 h尿蛋白(Upro/24 h)、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)的表达水平;HE染色观察各组小鼠肾脏病理变化;PAS染色观察小鼠肾小球细胞外基质堆积情况;Western bloting法检测肾组织TIMP3、Col IV及FN蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-21-5p和TIMP3的靶向关系。结果与Control组比较,T2DN组小鼠Upro/24 h、Scr和BUN水平均升高(tUpro/24 h=84.67,P<0.001;tScr=16.81,P<0.001;tBUN=19.26,P<0.001),miR-21-5p agomir组小鼠Upro/24 h、Scr和BUN水平均升高(tUpro/24 h=100.44,P<0.001;tScr=36.76,P<0.001;tBUN=52.42,P<0.001),肾脏肾小球系膜增生,基底膜增厚,系膜基质相对面积增加(t=9.10,P<0.001;t=14.16,P<0.001),TIMP3蛋白异常低表达(t=8.51,P=0.001;t=12.66,P<0.001),纤维化蛋白Col IV(t=10.04,P<0.001;t=23.54,P<0.001)和FN(t=11.49,P<0.001;t=22.34,P<0.001)异常高表达;与T2DN组比较,miR-21-5p antagomir组小鼠Upro/24 h、Scr和BUN水平均降低(tUpro/24 h=20.31,P<0.001;tScr=7.90,P<0.001;tBUN=8.91,P<0.001),肾脏肾小球系膜增生和基底膜增厚缓解,系膜基质相对面积降低(t=7.96,P=0.001),TIMP3蛋白升高(t=11.71,P<0.001),纤维化蛋白Col IV和FN降低(tCol IV=6.58,P=0.003;tFN=6.27,P=0.003);miR-21-5p agomir组小鼠与miR-21-5p antagomir组小鼠生化指标和肾脏肾小球的病症相反;双荧光素酶结果显示,miR-21-5p能靶向调控TIMP3基因的表达。结论miR-21-5p通过靶向调控TIMP3抑制T2DN小鼠肾脏系膜细胞的增殖及细胞外基质的堆积。

达格列净对糖尿病肾病患者肾功能及miR-21-5p和miR-423-5p水平的影响

目的 分析达格列净对2型糖尿病肾病患者血糖水平、肾功能及miR-21-5p、miR-423-5p水平的影响。方法 选择2022年2月至2023年10月安徽医科大学附属合肥医院收治的98例糖尿病肾病患者,根据随机数表法分为对照组(n=49)与观察组(n=49)。对照组接受二甲双胍治疗,观察组采取二甲双胍+达格列净治疗。对比两组治疗前后血糖水平、肾功能、血清促炎因子水平及miR-21-5p、miR-423-5p表达水平,同时记录两组不良反应发生情况。结果 两组治疗3个月后空腹血糖、糖化血红蛋白、肌酐、尿素氮、胱抑素C水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);两组治疗3个月后miR-21-5p、miR-423-5p水平及C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白介素6均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05)。观察组和对照组不良反应发生率差异无统计学意义(12.24%vs 6.12%,P>0.05)。结论 达格列净有助于改善糖尿病肾病患者的血糖水平及肾功能,降低miR-21-5p、miR-423-5p表达和血清促炎因子水平,安全性好。

产前诊断22号染色体三体嵌合1例并文献复习

目的总结22号染色体三体嵌合的临床特征,提高对22号染色体三体嵌合的产前诊断及遗传咨询水平。方法回顾性分析2018年就诊于安徽省立医院产前诊断中心确诊为22号染色体三体嵌合胎儿的病例1例,并检索相关文献,总结主要临床特征。结果病人28岁,17+6周无创DNA检测提示22号染色体三体高风险,孕18周产前超声筛查提示无明显异常,孕20周进行羊膜腔穿刺,羊水细胞核型为47,XX,+22[5]/46,XX[69],基因组拷贝数变异测序(CNV-Seq)结果提示22号染色体存在三体嵌合,比例约为20%。相关文献报道22号染色体三体嵌合的临床特征主要包括:低耳位、发育迟缓、先天性心脏病、身体对称生长受限、指甲发育异常、第5指内弯等。结论22号染色体三体嵌合病人的临床表型具有差异性,产前诊断时应联合多种检测方法尽量避免漏检,同时应告知病人该项检测的局限性,由病人自行决定是否继续妊娠。

微小RNA-21-5p调控Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的研究

目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)是否具有抗人Ⅱ型肺泡上皮细胞(ATⅡ)凋亡的作用。方法体外培养人ATⅡ细胞,待细胞生长至光镜下可见层状体和微绒毛时用于实验。将细胞分为空白对照组(直接培养,不予任何处理)、过氧化氢(H2O_(2))损伤组(加入0.5 mmol/L H2O_(2))、miR-21-5p过表达组〔加入感染复数(MOI)为100的miR-21-5p慢病毒过表达载体与0.5 mmol/L H2O_(2)共培养〕和空病毒对照组(加入miR-21-5p慢病毒空白载体与0.5 mmol/L H2O_(2)共培养)。各组分别于细胞培养0、12、24、36、48 h采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况;于培养24 h采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果①细胞增殖活性检测结果:随着细胞培养时间的延长,空白对照组细胞增殖活性逐渐增强,而加入0.5 mmol/L H2O_(2)处理后细胞增殖活性则逐渐下降;但miR-21-5p过表达组细胞增殖活性较H2O_(2)损伤组和空病毒对照组下降缓慢,48 h时细胞增殖活性明显高于H2O_(2)损伤组和miR-21-5p空病毒对照组〔吸光度(A)值:0.295±0.005比0.184±0.005、0.169±0.002,均P<0.05〕。说明H2O_(2)及慢病毒均加快了细胞损伤,而miR-21-5p可抑制细胞凋亡。②细胞凋亡检测结果:与空白对照组比较,加入0.5 mmol/L H2O_(2)处理后细胞凋亡率明显升高;而miR-21-5p过表达组细胞凋亡率较H2O_(2)损伤组和空病毒对照组均明显降低〔早期细胞凋亡率:(14.31±0.12)%比(24.50±0.12)%、(23.41±0.13)%,晚期细胞凋亡率:(8.12±0.13)%比(9.71±0.11)%、(10.41±0.15)%,总体细胞凋亡率:(22.33±0.12)%比(34.21±0.10)%、(33.82±0.14)%,均P<0.05〕,进一步证明miR-21-5p具有抗细胞凋亡作用。结论 miR-21-5p具有抗人ATⅡ凋亡的作用。

微小RNA-21-5p通过激活PI3K/Akt信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡减轻大鼠高氧性急性肺损伤

目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)是否通过激活磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路调控Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡减轻高氧性急性肺损伤(HALI)。方法将72只雄性SD大鼠按随机数字表法分为常氧对照组、HALI组、PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002+HALI组(LY+HALI组)、miR-21-5p过表达+LY294002+HALI组(miR-21-5p+LY+HALI组)、miR-21-5p过表达+HALI组(miR-21-5p+HALI组)及二甲基亚砜(DMSO)+HALI组,每组12只。用95%氧气制备HALI动物模型;常氧对照组动物在常氧状态下正常饲养。制模前3周经气管导管滴入200μL滴度(1×10^(12) TU/mL)的miR-21-5p腺相关病毒载体AAV6-miR-21-5p转染肺组织;DMSO及LY294002均以0.3 mg/kg于制模前1 h经尾静脉给药。制模后48 h,取颈动脉血检测氧合指数(OI)及呼吸指数(RI),采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-21-5p表达;取肺组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子〔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-6、IL-1β)〕水平,测定肺湿/干质量(W/D)比值,苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察肺组织病理学改变并进行病理学评分。每组取6只大鼠提纯AECⅡ细胞,应用流式细胞仪检测凋亡率,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)和PI3K/Akt信号通路蛋白的表达水平。结果与常氧对照组比较,高氧暴露后可见肺泡间隔增厚,大量炎症细胞浸润,RI、炎症因子、肺W/D比值、病理学评分,以及AECⅡ细胞早期凋亡率、PTEN蛋白表达和Akt磷酸化水平均升高,而OI及miR-21-5p表达降低,说明模型制备成功。LY294002预处理后,可进一步加重HALI大鼠肺组织病理损伤,RI、炎症因子、肺W/D比值均较HALI组进一步升高,OI进一步降低,同时可促进AECⅡ细胞凋亡,进一步上调PTEN蛋白表达,并抑制Akt磷酸化;而miR-21-5p预处理可负向调控PTEN,激活PI3K/Akt信号通路,抑制AECⅡ细胞凋亡,减轻HALI,与LY+HALI组比较,炎症因子水平降低〔TNF-α(μg/L):100.33±3.48比116.55±2.53,IL-6(ng/L):141.06±3.70比161.31±3.59,IL-1β(μg/L):90.82±3.69比112.23±2.87,均P<0.05〕,RI、肺损伤病理学评分、肺W/D比值及AECⅡ细胞早期凋亡率明显降低〔RI:0.81±0.02比1.05±0.07,病理学评分(分):0.304±0.008比0.359±0.007,肺W/D比值:5.29±0.03比5.52±0.08,细胞凋亡率:(27.20±2.34)%比(34.17±1.49)%,均P<0.05〕,OI、miR-21-5p表达均明显升高〔OI(mmHg,1 mmHg≈0.133 kPa):266.71±2.75比230.12±4.04,miR-21-5p(2^(-ΔΔCt)):2.21±0.13比0.33±0.03,均P<0.05〕,且AECⅡ细胞PTEN蛋白表达显著降低(PTEN/GAPDH:0.50±0.06比0.93±0.06,P<0.05),Akt磷酸化明显增加〔磷酸化Akt(p-Akt)蛋白(p-Akt/GAPDH):0.86±0.05比0.56±0.06,P<0.05〕。结论miR-21-5p可能通过负向调控PTEN激活PI3K/Akt信号通路,从而抑制AECⅡ细胞凋亡,减轻HALI。

进口330kV ELF SP型六氟化硫断路器的现场安装及特点

1 前言 ELF SP 5-21(22)型六氟化硫断路器系瑞士ABB公司产品。宁夏送变电工程公司在青铜峡330kV变电所首次安装5台该型断路器,这也是此种断路器在宁夏电网内的首次使用。通过对该设备的安装调试,明显感到该产品设计制造合理、工艺严格、质量过硬。与国内同类产品相比,有安装方便、技术性能高、运行维护简单等优点。

miR-21-5p过表达对高氧性急性肺损伤大鼠AECⅡ早期凋亡的影响

目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)过表达对高氧性急性肺损伤(HALI)大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)早期凋亡的影响。方法按随机数字表法将SD大鼠分为对照组(CON组)、高氧组(H组)、过表达组(OE组)及空载体组(EV组)4组,每组20只。以吸入90%以上高浓度氧制备HALI动物模型;CON组则吸入空气。OE组及EV组分别经气管导管往肺内滴入miR-21-5p腺相关病毒-?6(AAV-6)过表达载体或空载体,饲养3周后制备HALI模型。各组于制模0、24、48、60h分别取5只动物,检测肺损伤相关指标,如氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)、肺湿/干重比值(W/D)、肺组织病理评分;同时采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测AECⅡ中miR-21-5p表达,用流式细胞仪检测AECⅡ早期凋亡率。结果①肺损伤相关指标:H组OI随时间延长逐渐降低,RI、肺W/D比值及病理评分均随时间延长逐渐增高,24h即与CON组差异有统计学意义〔OI(mmHg,1mmHg=0.133kPa):336.04±5.79比400.22±19.70,RI:0.20±0.02比0.10±0.06,肺W/D比值:5.04±0.09比4.85±0.09,肺组织病理评分(分):0.13±0.01比0.07±0.01,均P<0.05〕,表明持续吸入高浓度氧可成功建立HALI模型。②miR-21-5p表达:H组、OE组及EV组AECⅡ细胞中miR-21-5p表达均随时间延长逐渐增高,且24、48、60h时miR-21-5p表达均显著高于CON组。OE组0、24、48、60h时miR-21-5p表达较H组进一步增高(2-ΔΔCt:3.75±0.11比0.98±0.14,3.98±0.12比1.18±0.13,4.28±0.18比1.49±0.06,4.66±0.12比1.80±0.12,均P<0.05)。③AECⅡ早期凋亡率:H组、OE组及EV组AECⅡ细胞早期凋亡率均随时间延长逐渐升高,且24、48、60h时细胞早期凋亡率均显著高于CON组。而OE组24、48、60h时AECⅡ早期凋亡率较H组显著降低〔(1.22±0.63)%比(2.84±0.59)%,(5.76±0.18)%比(13.10±2.01)%,(29.48±0.48)%比(49.04±1.36)%,均P<0.05〕。④EV组各时间点miR-21-5p表达和AECⅡ早期凋亡率与H组比较差异均无统计学意义。结论miR-21-5p过表达可抑制HALI大鼠AECⅡ早期凋亡。

冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清SFRP5、FGF21、IGF-I水平与血脂和冠状动脉病变严重程度的相关性研究

目的:探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者血清分泌型卷曲蛋白5(SFRP5)、成纤维细胞生长因子21(FGF21)、胰岛素样生长因子-1(IGF-I)水平与血脂和冠状动脉病变严重程度的相关性。方法:选择2018年6月至2021年6月我院收治的109例CHD患者(CHD组),根据冠心病类型分为稳定型心绞痛组(SAP组,32例),不稳定型心绞痛组(UA组,42例)、急性心肌梗死组(AMI组,35例),根据Gensini积分分为轻度病变组(≤20分,42例)、中度病变组(21~40分,44例)和重度病变组(>40分,23例),另选择同期在我院行冠脉造影检查结果为正常的53例患者为对照组。检测并比较各组血清SFRP5、FGF21、IGF-I、血脂水平,分析血清SFRP5、FGF21、IGF-I与血脂和Gensini积分的相关性。结果:不同类型、不同冠脉病变程度CHD患者的血清SFRP5、FGF21、IGF-I、HDL-C水平均低于对照组,血清TC、TG、LDL-C水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);血清SFRP5、FGF21、IGF-I水平的差异比较中,UA组低于SAP组,AMI组又低于UA组,中度病变组低于轻度病变组,重度病变组又低于中度病变组,差异均有统计学意义(P<0.05);血清TC、LDL-C水平的差异比较中,UA组高于SAP组,AMI组又高于UA组,中度病变组高于轻度病变组,重度病变组又高于中度病变组,差异均有统计学意义(P<0.05);而SAP组、UA组、AMI组之间两两比较以及轻度病变组、中度病变组、重度病变组之间两两比较的血清TG、HDL-C水平差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关性分析结果显示:血清SFRP5、FGF21、IGF-I水平与TC、LDL-C、Gensini积分呈负相关(P<0.05)。结论:CHD患者血清SFRP5、FGF21、IGF-I水平均降低,且与血脂水平增高以及CHD病变程度加重均有关。

CIA小鼠血清中IL-21、IL-22、IL-23的变化研究

目的观察鸡Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)小鼠血清中IL-21、IL-22、IL-23的动态变化。方法 36只DBA1/J小鼠随机分为正常组12只(每时间点各6只)和模型组24只(每时间点各12只)。分别在CIA小鼠加强免疫7d及35d无菌摘眼球取血,常规分离血清,应用流式细胞术检测各组小鼠在加强免疫7d及35d血清中细胞因子IL-21、IL-22、IL-23的变化情况。结果模型组IL-21及IL-23在加强免疫7d显著升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05;P<0.01),加强免疫35d与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);IL-22在病程进展中,模型组与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论细胞因子IL-21和IL-23参与了CIA的发病,可能与类风湿关节炎的炎症进展有一定关系。

儿童先天性气道发育异常与染色体病基因异常的相关性研究进展

先天性气道发育异常(Congenital Airway Anomalies,CAA)是指一类包括从鼻腔至肺泡任何气道的先天性发育异常。由于其临床表现多变,大部分可没有临床症状,部分可出现慢性咳嗽、反复喘息或呼吸道感染,多因合并其他疾病行支气管镜/喉镜、胸部CT气道重建时发现。目前CAA发病机制尚不明确,国外有研究发现某些染色体病/基因异常患儿的气道发育异常检出率显著升高,提示两者之间可能存在某种关系,但国内尚无相关文章发表,故本文就近年来先天性气道发育异常与染色体病/基因异常的国外有研究发现某些染色体病/基因异常患儿的气道发育异常检出率显著升高,提示两者之间可能存在某种关系,但国内尚无相关文章发表,故本文就近年来先天性气道发育异常与染色体病/基因异常的相关研究进行综述。

彩电总线进出方法及数据三洋CK21D5(GC3—21机心)——兼答2005年1期吴新中问题

进入／退出总线方法：先按住电视机面板“MENU”(菜单)键不放，再按一下遥控器“2号”键即可进入“S”状态，可以调整副色度、副亮度、副对比度及暗平衡。如果在按“MENU”键同时不按“2号”键而按“1号”键即可进入“D”状态。进入“D”状态后用“定时”键选项，用“音量”键调整数据(见表1)。