EMP1基因对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭影响的体外研究

目的:体外观察EMP1基因对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:构建pEGFP-N1-EMP1表达载体,稳定转染口腔鳞癌细胞系Tb3.1,并以野生型Tb3.1和pEGFP-N1稳转的Tb3.1为对照,用MTT检测细胞增殖,绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期变化;用Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力;组间比较采用单因素方差分析。结果:相比野生型Tb3.1和Tb3.1-pEGFP-N1细胞,Tb3.1-pEGFP-N1-EMP1细胞生长受到抑制,同时其S+G2-M期细胞比例减少(P<0.05),迁移和侵袭细胞数目减少(P<0.05)。结论:EMP1在口腔鳞癌的发生、发展中作为抑癌基因可能对口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭起抑制作用。

SNAT1和EMP1在胃癌组织和细胞株中的表达及临床意义

目的探讨人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1(SNAT1)和上皮膜蛋白1(EMP1)在胃癌组织及胃癌细胞株中的表达水平,分析两者在胃癌组织中表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测82例胃癌组织和67例对应癌旁组织样本中SNAT1和EMP1的蛋白表达情况,根据二级计分法分为低表达(<5分)和高表达(≥5分),分析两者不同表达水平与胃癌临床病理特征的关系。同时采用Western blotting检测20例胃癌组织及其癌旁组织、正常胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌不同分化细胞株(未分化BGC823、低分化AGS、中分化SGC7901和高分化MKN28)中SNAT1和EMP1的蛋白水平。结果胃癌组织的SNAT1高表达率高于癌旁组织(67.1%vs.34.3%,P<0.05),而EMP1高表达率则低于癌旁组织(40.2%vs.62.7%,P<0.05)。胃癌组织中SNAT1与EMP1表达呈负相关(r=-0.272,P=0.014),且两者表达与临床分期和分化程度均有关;另外,SNAT1与年龄、淋巴结转移有关,EMP1与浸润深度有关。胃癌细胞株中的SNAT1蛋白水平均高于癌旁组织和CES-1细胞,而EMP1蛋白水平则相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SNAT1表达在胃癌组织及细胞株中分别较癌旁组织和正常胃黏膜细胞株高,EMP1则相反,胃癌组织中两种蛋白均与临床分期和分化程度有关,提示两者可能在胃癌的发生发展中起重要作用,可用于辅助胃癌的诊断和病情评估。

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中EMP1、COX-2及Stathmin蛋白表达与上皮化生程度的关系

目的检测鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中上皮细胞膜蛋白1(EMP1)、环氧化酶2(COX-2)及Stathmin蛋白的表达情况,分析其与上皮化生程度的相关性。方法选取2015年1月~2016年3月在本院就诊的鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者28例作为实验组,20例肥厚性鼻炎患者的下鼻甲黏膜组织作为对照组,采用免疫组化技术和q RT-PCR检测鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤、下鼻甲黏膜组织EMP1、COX-2以及Stathmin的表达情况,并比较三种因子在不同组织中的表达情况。结果实验组EMP1蛋白表达的阳性率显著低于对照组(P<0.05),COX-2及Stathmin蛋白表达的阳性率显著高于对照组(P<0.05)。实验组EMP1的m RNA水平显著低于对照组(P<0.05),COX-2及Stathmin m RNA水平显著高于对照组(P<0.05)。EMP1蛋白表达水平与上皮化生的严重程度呈负相关,COX-2及Stathmin蛋白表达水平与上皮化生的严重程度呈正相关。结论鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中EMP1、COX-2及Stathmin蛋白的异常表达与上皮化生程度有关,联合检测EMP1、COX-2及Stathmin蛋白表达可评估鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤上皮异常重塑情况。

EMP1基因在喉癌中的表达下调及其意义

目的研究EMP1在喉癌中的表达,探讨与临床资料的相关性。方法选取本院51例喉癌标本及其癌旁组织,应用免疫组化和Western blot技术检测EMP1蛋白表达,应用Quantitative real-time PCR技术检测mRNA表达,并分析与各临床因素之间的相关性。结果喉癌组中EMP1的蛋白及m RNA表达水平均明显低于癌旁组织。免疫组化评分经统计学分析发现EMP1的表达与病理分级有显著的相关性(P=0.02)。结论 EMP1基因在喉癌中表达明显降低,与病理分级相关。提示其在喉癌的发生发展中可能发挥抑癌基因的作用。

肝癌组织EMP1表达生物学意义

目的探讨上皮膜蛋白(epithelial membrane protein-1,EMP1)在肝癌组织中的表达水平及过表达对肝癌细胞生物表型的影响。方法采用免疫组织化学方法、蛋白质印迹法检测唐山市人民医院2008-01-01-2012-12-30 65例肝癌组织及35例癌旁肝脏组织中的表达情况(距其癌组织边缘≥2cm,镜下未见癌浸润)。采用慢病毒转染建立EMP1过量表达的肝癌HepG2细胞株。荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测EMP1转染后肝癌HepG2细胞株中EMP1表达含量的变化。MTT法、流式细胞术及Transwell检测EMP1过量表达对肝癌细胞增殖、细胞凋亡及细胞侵袭转移的影响。结果免疫组织化学结果表明,EMP1蛋白在肝癌组织中的表达阳性率为32.3%(21/65),明显低于癌旁肝脏组织的85.7%(30/35),χ2=26.118,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果表明,EMP1蛋白在肝癌组织的表达相对量(0.257±0.022)较癌旁肝脏组织(0.863±0.086)明显降低,两者比较差异有统计学意义,t=11.824,P<0.001。EMP1蛋白表达水平与肝癌有无淋巴结转移、临床分期、组织分级以及血行转移有关(P<0.05),而与肝癌患者年龄、性别、病理类型及T分期无关,P值均>0.05。EMP1高表达的肝癌细胞其增殖能力明显减弱,细胞凋亡及侵袭转移能力明显降低,Caspase-9蛋白表达上调,而血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor C,VEGFC)与基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白的表达量明显下调,P<0.05。结论肝癌组织中EMP1蛋白表达减低,可能通过调控Caspase-9及VEGFC蛋白表达影响肝癌细胞增殖、凋亡与转移的生物学过程。

食管鳞癌组织中EMP1蛋白的表达及意义

[目的]探讨上皮膜蛋白(epithelial membrane protejn 1,EMP1)在食管鳞癌中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学、Western blot方法检测64例食管鳞癌癌组织及距其癌组织边缘2cm以上的镜下未见癌浸润的正常组织中EMP1蛋白的表达情况。[结果]免疫组织化学结果表明,EMP1蛋白在食管鳞癌组织表达阳性率明显低于正常食管组织(48.4%vs 82.8%,P<0.05)。Western blot结果表明,EMP1蛋白在食管鳞癌组织的相对表达量较正常食管组织的相对表达量明显降低,二者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。EMP1蛋白表达与食管鳞癌患者年龄、性别及肿瘤大小无关(P>0.05);而与有无淋巴结转移、肿瘤临床分期以及细胞分化程度有关(P<0.05)。[结论]食管鳞癌组织中EMP1蛋白表达明显减低,且与食管鳞癌有无淋巴结转移、临床分期及肿瘤细胞分化程度有关。

EMP1对喉癌hep2细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的研究EMP1在喉癌中的作用。方法选取51例喉癌标本及其癌旁组织,构建EMP1过表达载体,转染人喉癌Hep-2细胞系,应用MTT法、克隆形成实验、流式细胞术及Transwell法分别检测细胞的增殖、凋亡及迁移情况,明确EMP1过表达后对喉癌细胞产生的生物学效应。结果 EMP1过表达后,Hep2细胞的增殖能力明显减弱,细胞克隆形成数目平均值明显减少,细胞的凋亡率平均值明显上调,穿过小室滤膜的细胞数平均值明显下调。即喉癌细胞的增殖能力及迁移能力减弱,凋亡增强。结论 EMP1基因在喉癌的发生发展中发挥抑癌基因的作用。

恶性疟原虫PfEMP1蛋白N-末端片段与铜绿假单胞菌去毒外毒素的偶联构建

目的将恶性疟原虫红细胞膜表面蛋白1(Plasmodium falciparum erythrocyte membrane protein 1,Pf EMP1)N-末端区段(N-terminal segment,NTS)共价偶联到重组铜绿假单胞菌去毒外毒素(recombinant exoprotein A,r EPA)上,构建NTS-r EPA偶联蛋白,以提升NTS的免疫原性。方法用偶联试剂Sulfo-EMCS将马来酰亚胺基团加到r EPA上,利用NTS所携带的1个自由巯基将NTS共价连接到马来酰亚胺化的r EPA上,形成NTS-r EPA偶联蛋白,通过分子排阻层析从偶联反应产物中去除未偶联的蛋白。采用Ellman反应测定r EPA上所携带的马来酰亚胺基团数量以及NTS-r EPA偶联蛋白的偶联比,SDS-PAGE鉴定纯化的偶联蛋白。结果通过偶联试剂Sulfo-EMCS在每摩尔r EPA上加上了4.3摩尔的马来酰亚胺基团;NTS与马来酰亚胺化的r EPA反应生成了NTS-r EPA偶联蛋白,偶联比为4.1;通过分子排阻层析去除了未偶联的蛋白,得到了纯化的偶联蛋白。结论成功构建了NTS-r EPA偶联蛋白,为今后针对NTS的研究奠定了基础。

上皮膜蛋白1在鼻咽癌组织中的表达特征

目的探讨上皮膜蛋白1(EMP1)在鼻咽癌组织与正常鼻黏膜组织中的表达差异及其与疾病发展的关系.方法收集40例鼻咽癌患者的癌组织(实验组)与正常鼻黏膜组织(对照组)各40份标本,RT-qPCR、免疫荧光染色和免疫印记技术检测EMP1在两种组织中的表达情况;40例鼻咽癌标本免疫印迹测定EMP1灰度值与其对应的肿瘤分化程度、临床分期进行二元线性回归分析.结果与正常鼻黏膜上皮对比,鼻咽癌上皮细胞的EMP1表达明显降低(P<0.05),肿瘤细胞EMP1的表达与肿瘤分化程度呈正相关(P<0.05),与临床分期不存在线性关系(P>0.05).结论EMP1在鼻咽癌细胞和正常鼻黏膜细胞表达有差异,其值可能预示肿瘤分化程度.

miR-95对结肠癌细胞系SW620侵袭和迁移的影响及机制

目的探讨小分子非编码RNA-95(miR-95)表达对结肠癌细胞系SW620侵袭、迁移能力的影响及其机制。方法将miR-95干扰慢病毒转入结肠癌细胞系SW620,用qRT-PCR检测细胞中miR-95表达,用Transwell小室和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;MTT法检测细胞同种、异种细胞黏附能力;用Western印迹检测3组细胞的EMP1,VEGFC和MMP2蛋白表达。结果 SW620转染miR-95干扰慢病毒72 h后,转染率较高;与空病毒组和对照组比较,转染组miR-95的表达降低(P<0.05);侵袭和迁移能力减弱(P<0.05);同种黏附能力增强(P<0.05);异种黏附能力减弱(P<0.05);同时转染组EMP1蛋白表达明显增高,VEGFC、MMP2蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 miR-95能够促进SW620细胞侵袭和迁移能力,可能是通过EMP1、VEGFC和MMP2实现的。

核电CPR1000机组大件吊装机械选型

核电站CPR1000堆型施工建设过程,从目前国内在建项目的施工状态来看,大件吊装工作主要有EMP3设备、EMP1设备、常规岛行车以及穹顶等的吊装,这些设备的吊装都是需采用400t级以上履带吊来完成吊装作业。