小鼠腹腔巨噬细胞的制取与鉴定方法探讨

目的建立一种简单、有效的小鼠腹腔巨噬细胞制备培养与鉴定方法。方法以(磷酸盐缓冲液)PBS溶液灌洗FVB小鼠腹腔,5 min后分离获取小鼠腹腔灌洗细胞,转入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中贴壁培养。光学显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞表面标志F4/80和CD11b表达情况。结果形态学观察发现温孵培养2h更换培养基后,贴壁细胞形态改变明显。流式检测未经贴壁处理的腹腔灌洗细胞,F4/80阳性率仅为13.7%;而经贴壁培养的腹腔灌洗细胞,F4/80阳性率为73.2%。此外,F4/80阳性细胞CD11b的阳性率为91.8%。结论本法是一种简单、实用的体外制取培养腹腔巨噬细胞的方法。