尾静脉注射EMT-6细胞建立转移性肺癌模型的研究

目的通过尾静脉注射EMT-6细胞建立一种临床特征明显、稳定可重复的转移性肺癌BALB/c小鼠模型。方法取对数生长期的EMT-6细胞,用0.25%胰蛋白酶消化,再用磷酸盐缓冲溶液调整细胞浓度至1×10~6个/m L(高)、5×10~5个/m L(中)和1×10~5个/m L(低)3个浓度,尾静脉注射0.2 m L EMT-6细胞悬液,对不同浓度模型的临床症状、成瘤时间、生存期、成瘤程度和病理学特征等生物学特征和评价指标进行研究,筛选出效果好的模型,并对该模型的重复性和稳定性通过3次重复实验加以确定,成功建立EMT-6细胞转移性肺癌BALB/c小鼠模型。结果 EMT-6细胞注射后解剖小鼠发现,高浓度组小鼠7 d肺表面开始出现肿瘤灶,18 d内所有小鼠死亡;中浓度组小鼠7 d肺表面开始出现肿瘤灶,28 d内所有小鼠死亡;低浓度组小鼠14 d肺表面开始出现肿瘤灶,21 d所有小鼠肺表面均有肿瘤灶,荷瘤小鼠24 d开始出现死亡,35 d肿瘤灶数量达到顶峰(平均12~15个/只)且肿瘤体积变大,42 d内全部死亡。结论相比之下,低浓度模型成瘤时间到小鼠全部死亡时间,为实验研究留有4周的处理、观察、评价的窗口期,其病理组织学符合肺癌的组织学特征,临床症状指标明显,模型重复性和稳定性好,是适合转移性肺癌研究的理想模型。

紫苏子油纳米乳诱导小鼠乳腺癌细胞EMT-6凋亡试验

采用滴定法制备紫苏子油纳米乳,用激光粒度测定仪分析其粒径,并进行其对体外培养的小鼠乳腺癌细胞EMT-6的凋亡诱导试验。结果显示,制备的紫苏子油纳米乳外观澄明,平均粒径为（50.3±1.1）nm。与紫苏子油软胶囊相比,质量浓度为100~800 mg/L时的紫苏子油纳米乳较紫苏子油软胶囊对EMT-6细胞的诱导凋亡作用均强,差异显著（P〈0.05）。透射电镜下,EMT-6细胞染色质边集,胞质内出现空泡,形成凋亡小体。800 mg/L剂量紫苏子油纳米乳处理EMT-6细胞48 h后,凝胶电泳可见明显的＂阶梯状＂DNA条带,为180~200 bp整数倍递增分布,表明紫苏子油纳米乳具有明显的诱导EMT-6细胞凋亡的作用。

纳秒级陡脉冲电场对荷瘤小鼠乳腺癌的杀伤作用研究

目的以BALB／c荷瘤小鼠为对象，探讨纳秒级陡脉冲电场对在体小鼠乳腺癌的杀伤效应。方法取24只皮下接种小鼠乳腺癌细胞EMT-6的BALB／c荷瘤鼠，分为实验组和对照组，每组12只。在麻醉状态下，采用场强为700V／cm、脉宽为70μs、上升时间为57ns、占空比为50％的陡脉冲电场，利用自制的电极针插入实验组小鼠肿瘤两端进行电刺激处理，脉冲个数为100个，能量为9．75J，有效作用时间仅为7ms。对照组不进行电刺激，其他处理相同。隔天测量动物体质量、肿瘤大小，并在处理后第1、3、5、7天分别取肿瘤组织做病理切片。结果与对照组相比，实验组小鼠肿瘤生长速度较慢，特别在处理后1-3d内肿瘤几乎停止生长。组织病理结果显示电刺激处理后肿瘤组织有明显的凝固性坏死表现，组织水肿明显，处理后第3天肿瘤组织中出现大量空泡样结构，血管损伤在早期即出现。结论在给定电场条件下，陡脉冲电场对肿瘤生长有一定的抑制作用。要想达到更理想的肿瘤治疗效果，需对陡脉冲剂量进行进一步的研究。