CLSI EP12-A2文件在HBeAb定性检测性能评价中的应用

目的对A和B 2种定性检测人血清抗乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒进行评估,为实验室选择合适的HBeAb试剂提供实验依据。方法参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP12-A2文件推荐方法,对A和B 2种HBeAb检测试剂做偏倚和不精密度分析,比较2种HBeAb检测试剂的C50、C5～C95区间以及不精密度曲线。用2种试剂同时检测910份标本的HBeAb,计算检测结果一致程度的95%可信区间(CI),计算(Kappa)值,评价一致性。结果 A试剂检测血清HBeAb的C50小于B试剂的C50,A试剂的C5～C95区间比B试剂的窄,A试剂的不精密度曲线比B试剂的陡峭;2种试剂检测标本HBeAb一致程度的95%CI为93.2%～96.1%,Kappa值约0.87。结论 EP12-A2作为定性检测的性能评价方法可行。

应用EP12-A2评价HBsAg定性分析不精密度

目的探讨EP12-A2在乙肝病毒表面抗原(HBsAg)定性试验分析性能评价中的作用。方法对一个HBsAg血清S逐步稀释,用ELISA试剂重复测定40次,得到试剂A和B的批内阳性率为5%、35%～65%范围和95%的浓度样本,分别用Roche公司电化学发光仪Cobas e411测定相应的C5、C50和C95发光值。以HBsAg发光值为横坐标,ELISA试验阳性率为纵坐标绘制批内不精密度曲线。将两试剂C5批内、C50批内、C95批内及C50批内±15%各浓度点每天用ELISA试剂重复检测3次,共测10 d,计算阳性率并绘制批间不精密度曲线。比较两HBsAg试剂的C50和C5～C95区间。结果通过ELISA试验和电化学发光检测得出,A试剂不精密度曲线的C5、C50和C95浓度点发光值分别为9.63、10.34和10.91 COI,B试剂为3.78、4.64和5.06 COI。对两试剂C5～C95区间的分析,A试剂C50批内±8%和B试剂C50批内±19%包含了各自的C5～C95区间,A试剂的精密度较B试剂好。两试剂的病人样本方法学比对的结果一致。结论比对HBsAg试剂的C50和C5～C95区间能反映试剂的灵敏度和不精密度。不精密度曲线可应用于定性分析的性能评价,并有较好的推广价值。

基于 EP12-A2文件评价尿蛋白定性检测性能

目的：评价 AX-4030与 Cobas U411尿干化学分析仪在尿蛋白定性检测的分析性能，探讨定性试验性能评价方法。方法参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP12-A2文件推荐方法，对日本京都 AX-4030和罗氏 Cobas U411尿干化学分析仪两检测系统尿蛋白定性检测做偏倚和不精密度分析，比较两检测系统的 C50，C5～C95区间以及不精密度区间。两系统同时检测310份临床尿标本蛋白，统计分析与评价两者结果的一致程度。结果尿干化学分析仪 AX-4030检测系统检测尿蛋白的 C50小于 CobasU411系统，AX-4030系统的 C5～C95区间比 U411系统的窄，AX-4030系统的不精密度曲线较 U411系统曲线陡峭；两套系统检测临床标本尿蛋白结果方法学的比较，一致性百分率为96.8％，阳性一致率为82.7％，阴性一致率为99.6％；95％CI 为94.2％～98.16％，Kappa 值为0.88。结论AX-4030检测系统在尿蛋白 C50临界值处的灵敏度及不精密度较 Cobas U411系统稍优，二者在临床标本检测中的尿蛋白结果一致性程度极强。EP12-A2推荐的定性试验性能评价方法可行、有效。

CLSI EP12-A2文件在儿童肺炎支原体肺炎检测方法的性能评价中的应用

目的利用EP12-A2文件推荐方法对肺炎支原体快速鉴定培养药敏法(培养法)和肺炎支原体抗体检测法(抗体法)进行性能评价。方法对我院儿科病区861名住院患儿的病历资料进行回顾性分析,这861名患儿均同时进行了肺炎支原体培养和肺炎支原体抗体检测,将两种方法的检测结果与患儿的出院诊断进行比较。结果两种方法各自的敏感度和特异性的95%可信区间:培养法是[13.2%,23.0%]和[95.1%,97.9%],抗体法是[78.9%,88.3%]和[55.0%,62.7%];两方法之间敏感度和特异性差值的95%CI分别是[-73.6%,-57.8%]和[-1.3%,0.6%],抗体法的敏感度高于培养法,差异有统计学意义。结论医生如果发现患者MP抗体结果与临床症状不符时,应根据用药效果、后期再次MP培养或MP抗体检测而做出综合判断。

应用CLSI EP12-A2和EP15-A2评估腺病毒IgM抗体的磁微粒化学发光法检测试剂

目的应用美国临床实验室标准化协会CLSI EP12-A2和EP15-A2文件,评估一种磁微粒化学发光法腺病毒IgM抗体检测试剂的性能。方法参照EP15-A2文件方法,选用高中低3个浓度的样本,每个样本每天重复测定4次,持续5 d,计算总不精密度。应用EP12-A2文件方法,制备C50、C50-20%、C50+20%浓度样本,重复检测40次,验证C50±20%是否在C5~C95区间之外。应用EP12-A2文件,与临床诊断标准比对,计算灵敏度和特异性;与同类ELISA法进行方法学比对,计算符合率和Kappa值。结果3批产品检测高中低3个浓度样本的总不精密度均小于8%,低于行业标准和说明书声称值。3批产品的C50±20%均在C5~C95区间之外,验证通过。以核酸为临床诊断标准,灵敏度为100%(95%CI:79.6%~100%),特异性为97.8%(95%CI:94.5%~99.1%),Kappa值=0.871(P=0.001)。与酶联免疫法同类产品的阳性符合率为66.7%(95%CI:53.6%~77.7%),阴性符合率为:97.4%(95%CI:95.4%~98.5%),总符合率为93.9%(95%CI:91.6%~95.6%),Kappa值=0.678(P=0.001)。结论本研究的全自动磁微粒化学发光法腺病毒IgM抗体检测试剂精密性良好,与临床诊断标准符合率较好。

CLSI EP12-A2和EP15-A2在磁微粒化学发光法肺炎支原体IgM抗体检测试剂性能评估中的应用

目的应用美国临床和实验室标准协会EP12-A2和EP15-A2文件,评估一种磁微粒化学发光法肺炎支原体IgM抗体检测试剂的性能。方法参照EP15-A2文件,选用高、中、低3个浓度的样本,每个样本4次/d测定,持续5 d,计算总不精密度。根据EP12-A2文件,制备C50、C50-20%、C50+20%浓度样本,重复检测40次,验证C50±20%是否在C5~C95区间之外;并选择郑州儿童医院792份样本,分别与被动凝集法和ELISA法进行方法学比对,计算符合率和Kappa值。结果高、中、低3个浓度样本的总不精密度均<6%,优于行业标准和说明书声称值。3批产品的C50±20%均在C5~C95区间之外,验证通过。磁微粒化学发光法与被动凝集法的阳性符合率为95.8%,阴性符合率为96.9%,Kappa值为0.893;ELISA法的阳性符合率为97.4%,阴性符合率为98.9%,Kappa值为0.956。结论磁微粒化学发光法肺炎支原体IgM抗体检测试剂精密性良好,与被动凝集法和ELISA法的符合率较好,性能满足临床要求。

^13C呼气试验与幽门螺杆菌抗体检测的比较研究

目的利用^13C呼气试验对两种幽门螺杆菌抗体检测试剂进行比较和评价。方法选取我院消化科门诊和住院部共41例因消化道症状而初次就诊的患者为研究对象，所有患者进行^13C呼气试验、同时用两种幽门螺杆菌抗体试剂检测患者的血清幽门螺杆菌抗体。以^13C呼气试验结果为标准，根据CLSIEP12-A2文件推荐方法，计算两种幽门螺杆菌抗体检测试剂的灵敏度和特异性的95％可信区间以及两种试剂灵敏度和特异性差值的95％可信区间。结果试剂1的灵敏度和特异性的95％可信区间分别是[26．8％，73．2％]和[87．5％，100％]；试剂2的灵敏度和特异性的95％可信区间分别是[38．7％，83．6％]和[71．9％，96．1％]。两种试剂灵敏度和特异性差值的95％可信区间是[-33．7％，7．7％]和[-3．3％，28．1％]。结论两种幽门螺杆菌抗体检测试剂的灵敏度和特异性差异无统计学意义，均可用于临床幽门螺杆菌感染的筛查和流行病学调查。

磁微粒化学发光法呼吸道合胞病毒IgM抗体检测试剂精密性和方法学比对性能评估

目的评估磁微粒化学发光法呼吸道合胞病毒IgM抗体检测试剂的精密性和方法学符合性。方法用CLSI(美国临床实验室标准化协会)EP12-A2和EP15-A2文件两种方法评估试剂精密性。制备C50、C50-20%、C50+20%浓度样本,每个浓度样本重复检测40次,验证C50±20%是否在C5~C95区间之外。选择3个浓度的样本,每个样本每天重复测定4次,持续5 d,计算总不精密度。方法学比对参考EP12-A2文件,与临床诊断标准比对,计算灵敏度和特异性;与同类ELISA法进行方法学比对,计算符合率和Kappa值。结果磁微粒化学发光法呼吸道合胞病毒IgM抗体检测试剂的总不精密度小于6%。C50±20%浓度在C5~C95区间之外,精密性验证通过。以核酸为临床诊断标准,灵敏度为95.2%(95%CI:77.3%-99.2%),特异性为98.0%(95%CI:95.6%-99.1%),Kappa值=0.839(P<0.05)。与酶联免疫法同类产品的阳性符合率为53.3%(95%CI:40.9%-65.4%),阴性符合率为:93.9%(95%CI:95.0%-98.4%),总符合率为91.3%(95%CI:88.4%-93.6%),Kappa值=0.574(P<0.05)。结论全自动磁微粒化学发光法呼吸道合胞病毒IgM抗体检测试剂精密性良好,与临床诊断标准符合率高于与同类ELISA方法试剂的符合率,可满足临床应用需求。