固定化酶催化合成EPA/DHA型磷脂的研究

以大豆卵磷脂和富含二十碳五烯酸(EPA)/二十二碳六烯酸(DHA)的鱼油为底物,在固定化磷脂酶A_(1)(PLA_(1))的催化作用下,制备EPA/DHA型磷脂(EPA/DHA-PLs)。考察了PLA_(1)的固定化酶用量、水用量、反应温度、底物鱼油与磷脂质量比对EPA/DHA-PLs制备的影响,并通过响应面法分析了影响EPA/DHA-PLs合成的关键因素。研究结果表明:EPA甲酯保留时间约为54.594 min,DHA甲酯保留时间约为69.317 min,原料鱼油中EPA和DHA的总量为83.27%。EPA/DHA-PLs合成的最佳反应条件为:固定化PLA_(1)的添加量为21.81%(以底物鱼油/磷脂的总质量为基准),鱼油与磷脂质量比为5.45∶1,反应温度为54.3℃,水用量为1.08%(以底物的总质量为基准)。在此条件下,EPA/DHA的最大结合率可达65.5%。固定化PLA_(1)经5次重复使用后,剩余的酶活性仍不低于52.3%。

三种不同EPA/DHA组成鱼油乳液的体外消化特性比较

探究不同二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA)和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)组成比例的鱼油乳液的体外消化特性。制备不同EPA/DHA(5.13、2.45、1.34)比例的O/W鱼油乳液,对消化过程中粒径、ζ-电位、微观结构及小肠阶段脂肪酸的释放行为进行研究。结果表明,不同EPA/DHA比例的鱼油乳液在消化过程中的变化趋势相似,同时各乳液消化特性有所区别。具体而言,三种初始乳液均具有较高的稳定性,电荷性介于-40.02 mV和-43.77 mV,粒径主要分布于0.1~1.0μm之间。经口腔与胃阶段消化后,各体系电荷绝对值显著降低(P<0.05),乳滴中心脂质暴露,粒径呈多峰分布且主要集中于10~100μm区间。小肠阶段各组乳液粒径显著降低至8~13μm(P<0.05),游离脂肪酸(Free Fatty Acids,FFA)相对释放结果表明,EPA/DHA=5.13组乳液(103.21%)>EPA/DHA=2.45组乳液(73.54%)>EPA/DHA=1.34组乳液(62.51%),EPA与DHA相对水平是影响三种鱼油乳液消化的重要因素。该研究可为富含EPA与DHA的海洋脂类膳食摄入及鱼油递送系统的开发设计提供一定参考。

EPA/DHA型磷脂酰胆碱对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

为探究EPA/DHA型磷脂酰胆碱(PCEPA/DHA)抗帕金森病(PD)的活性及其机制,采用MPP+诱导SH-SY5Y细胞构建PD体外模型,分析PCEPA/DHA干预对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞活力、细胞形态及活性氧(ROS)水平等的影响,并结合转录组学技术筛选关键基因及通路。结果表明:1)PD造模的最佳条件为600μmol/L MPP+处理SH-SY5Y细胞24 h,PD模型组细胞相对活力下降(53.71±3.21)%;2)PCEPA/DHA可剂量依赖性增强MPP+诱导的SH-SY5Y细胞活力,改善细胞形态和降低细胞氧化应激水平;3)转录组学结果表明:PCEPA/DHA对MPP+诱导SH-SY5Y细胞的保护作用与改善线粒体功能障碍,改善多巴胺和突触核蛋白相关功能以及抑制细胞凋亡等密切相关。

光滑念珠菌毒力因子Epa黏附素的研究进展

光滑念珠菌为一种常见的念珠菌病病原体,其感染率呈现不断上升的趋势。相较于其他非白念珠菌,光滑念珠菌凭借其较强的适应性黏附能力和生物膜生成能力,其引发的感染往往呈现出更高的致病性。其中,位于菌株细胞壁表面的上皮黏附素(epithelial adhesin,Epa)家族发挥了关键作用,其能够介导菌株与宿主细胞及非生物表面的黏附和生物膜的形成,从而影响菌株的毒力表现。该文从光滑念珠菌毒力因子Epa黏附素的结构、其在菌株致病中的作用以及EPA基因相关分子调控机制等方面,对光滑念珠菌Epa黏附素的相关研究进行综述。

饲料中DHA与EPA比例对星斑川鲽雌鱼性类固醇激素及繁育性能的影响

为了探索饲料中DHA与EPA比例对星斑川鲽(Platichthys stellatus)雌性亲鱼繁育性能的影响,配制等氮等脂含不同DHA与EPA比例(0.65、1.33、2.12、3.08和3.92)饲料5组,每组设3重复,室内循环水系统养殖,试验周期90 d,试验结束后取亲鱼血清及性腺检测。结果表明,随着饲料DHA与EPA比值的升高,亲鱼雌二醇(E 2)呈先升后降趋势,DHA与EPA比值为1.33时,促进作用显著(P<0.05)。性腺中FSHR、StAR和芳香化酶表达量也显著高于对照组(P<0.05);添加DHA和EPA后亲鱼的绝对繁殖力显著提高,但DHA与EPA比值为1.33效果更显著(P<0.05);在DHA与EPA比值为0.65、1.33组和2.12时,雌鱼性腺中单不饱和脂肪酸的含量显著高于其他组(P<0.05),n-6多不饱和脂肪酸出现显著下降(P<0.05),n-3多不饱和脂肪酸明显上升,差异显著(P<0.05)。由此可见,饲料中添加DHA和EPA能有效促进星斑川鲽雌性亲鱼的性腺发育,DHA与EPA比值为1.33时能提高亲鱼E 2分泌,FSHR、StAR和芳香化酶表达以及单不饱和脂肪酸的吸收,增加性腺发育能量供给,促进亲鱼性腺成熟,提高繁育性能。

裂殖壶藻油提取及高浓度 EPA/DHA分离纯化工艺研究

为实现藻油中ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFAs)的简单、绿色、高效分离纯化工艺,首先利用裂殖壶菌原始菌株及定向驯化菌株ALE40为原料提取油脂,通过优势性评估及细胞通透性对比二者提油效果,并通过测定油脂指标对比3种提油方法(酸解法、超声干法、超声湿法)优劣。对超声湿法提取的粗藻油采用酯交换法进行乙酯化后,联合尿素包埋法和分子蒸馏技术富集高浓度二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA),对酯交换及尿素包埋工艺条件进行单因素实验优化,通过对分子蒸馏重相DHA和EPA含量测定确定分子蒸馏级数,并对纯化藻油的理化指标进行测定。结果表明:相比裂殖壶菌原始菌株,ALE40的细胞通透性明显较好,在无需干燥的情况下,超声10 min即可达到最高油脂得率(53.2%),缩短超声时间的同时提高了破壁效率;3种提油方法中超声湿法提取的藻油理化指标较好;酯交换反应最佳条件为反应温度60℃、KOH添加量3%、醇油比10∶1、反应时间0.5 h,尿素包埋最佳工艺条件为脲酯比0.8∶1、溶酯比8∶1、包埋温度4℃、包埋时间8 h;尿素包埋后的藻油经二级分子蒸馏纯化后,藻油中EPA和DHA总含量从17.40%(酯交换反应)升高到90.86%,总回收率为62.28%;得到的纯化藻油的各项理化指标均符合行标要求,且储存3个月内无沉淀,具备一定稳定性。综上,该提取分离纯化工艺全程实现试剂循环利用,且制备的藻油酸值低、无异味。

第三届高端制造电子电镀论坛(FEPAM-2024)在厦门召开

5月10日至12日,第三届高端制造电子电镀论坛(FEPAM-2024,简称“论坛”)在厦门召开。中国科学院院士、厦门大学党委书记张荣教授,中国科学院院士、厦门大学孙世刚教授,厦门市人民政府党组成员、副市长庄荣良,厦门市科技局副局长黄慰萍,中国化学会电化学专业委员会主任、中国科学院长春应用化学研究所邢巍研究员。

气相色谱-质谱法测定鱼油中EPA和DHA 含量的方法研究

建立气相色谱-质谱(GC-MS)法测定鱼油中EPA、DHA的含量。方法:采用安捷伦DB-FastFAME石英毛细管柱(20 m×0.18 mm×0.20μm),质谱检测器,内标法定量检测。样品经由氢氧化钠-甲醇溶液甲酯化,经离心过滤后由GC-MS法测定。结果:EPA和DHA分别在27.150~434.41μg/mL和27.244~435.91μg/mL质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(相关系数分别为0.995 9和0.997 5)。该方法EPA和DHA的检出限分别为1.530μg/g、2.312μg/g,样品平均添加回收率为96.92%~100.42%。

脂肪酶催化鱼油醇解富集EPA和DHA的研究

研究了固定化脂肪酶Lipozyme RM IM催化鱼油部分醇解反应,探讨了油醇比、酶加量等因素对反应的影响,在优化条件下,可以使鱼油中EPA、DHA的含量由26.1%升至43.0%,得率大于75%,对鱼油醇解产物进行了分子蒸馏提纯,得到了富含EPA、DHA的甘油酯型鱼油产品。

高效液相色谱/质谱联用直接测定鱼油中EPA/DHA含量

建立快速、简单、准确测定鱼油样品中EPA和DHA两种ω-3PUFA含量的高效液相色谱/电喷雾质谱联用(HPLC-ESI/MS)分析方法。鱼油经2mol/LNaOH乙醇溶液皂化、3mol/LHCL酸化后,使用Waters液相色谱仪、SymmetryC8柱(2.1×150mm),以甲醇—水为流动相、十七酸为内标,利用质谱定性定量测定EPA/DHA含量。质谱在电喷雾负离子模式下,对m/z301、m/z327和m/z269进行选择离子监测。该方法下EPA、DHA分别在5.55～55.50μg/mL和0.90～9.00μg/mL范围内峰面积和浓度呈良好的线性关系,相关系数REPA=0.9995、RDHA=0.9993;EPA、DHA的回收率分别为98.63%～99.23%、97.12%～99.17%,EPA、DHA的相对标准偏差分别为1.57%、1.20%(n=5)。此方法流动相简单,分析时间短且无需衍生处理,不受色谱分离度的限制并可实现对样品的重复分析,能准确快速测定鱼油中EPA和DHA含量。

n-3多不饱和脂肪酸DHA、EPA研究进展

以DHA和EPA为代表的多不饱和脂肪酸（PUFAs）是指碳原子数多于或等于18且含有两个或两个以上双键的一类脂肪酸。通常按照第一个双键的位置把多不饱和脂肪酸分为3类：n-3 PUFAs，即从甲基端数第1个双键的位置在第3碳位的多不饱和脂肪酸，如二十二碳六烯酸（22：6n-3，DHA）和二十碳五烯酸（20：5n-3，EPA）；n-6 PUFAs，指第一个双键的位置在从甲基端数的第6碳位，如花生四烯酸（20：4n-6，AA）和γ-亚麻酸（18：3n-6，GLA）；

真鲷仔稚鱼微粒饲料中DHA与EPA最佳比例的研究

制备4种n-3HUFA含量相同 ,DHA和EPA含量比(m(DHA)∶m(EPA))分别为1.70∶1 ,2.00∶1,2.30∶1和2.60∶1的微粒饲料 ,探讨DHA与EPA的配比对真鲷 (Pagrusmajor)仔稚鱼生长、存活和体内相关成分的影响。30d的养殖试验结果表明 ,m(DHA)∶m(EPA)≥2.30∶1的2种微粒饲料与m(DHA)∶m(EPA)≤2.00∶1的2种微粒饲料相比 ,真鲷仔稚鱼的生长速度和成活率 ,前者明显优于后者。该比例即m(DHA)∶m(EPA)≥2.30∶1应是真鲷微粒饲料中DHA与EPA的最佳配比。养殖试验结束后 ,对仔稚鱼体内相关成分的分析结果表明 ,仔稚鱼体内DHA的含量随微粒饲料中DHA含量的增加而增大。

尿素包合法富集鱼油中的EPA和DHA的研究

用尿素包合法（脲包法）对大连鱼油中的ＥＰＡ和ＤＨＡ进行富集，得到较佳操作条件为温度０℃，脲酯比１３，鱼油甲酯为脲包客体，以甲醇作溶剂。

尿素包合法富集蛇鲻鱼油中EPA和DHA的研究

以蛇鲻精制鱼油为原料,采用氢氧化钾乙醇皂化和硫酸酸化制备鱼油混合脂肪酸,以EPA和DHA含量为指标,探讨了尿素包合法富集鱼油中EPA和DHA的工艺条件。结果表明:以乙醇为溶剂,在尿脂质量比为2︰1和包合温度0℃的条件下进行一次性包合20 h后,富集产物中EPA和DHA总含量达到了69.74%,其中EPA含量为22.05%,DHA含量为47.69%,达到了保健鱼油的生产要求。

脂肪酶催化乙酯甘油酯酯交换制备富含EPA和DHA的甘油三酯

采用脂肪酶催化乙酯型鱼油和甘油酯型鱼油进行酯交换制备富含EPA和DHA的甘油三酯。对脂肪酶进行了筛选,并确定了两种脂肪酶TLIM和K酶用于后续研究。应用填充床反应器作为反应装置,采用正交试验对影响酯交换反应的几个主要因素条件进行了优化,得到了反应的最佳条件为:以K酶为催化剂,反应温度40℃,加酶量6%,反应时间18 h,底物摩尔比2.0∶1.0。同时,也得到了以TLIM酶为催化剂,获得最高含量EPA和DHA反应的最佳条件。

有机碳源对产EPA微藻(Nannochloropsis sp.)生长及光合作用的影响

研究了几种有机碳源对Nannochloropsis sp.生长及光合作用的影响. 结果表明,Nannochloropsis sp.具有混合营养生长的能力,葡萄糖对其生长有明显的促进作用,乙醇对藻细胞的生长有一定的促进作用,乙酸钠不能促进其生长,而乙酸、草酸、甘氨酸则抑制其生长. 在含30 mmol/L葡萄糖的培养基中培养8 d后,该藻细胞生长的最大生物量干重可达550 mg/L,是光自养培养条件下(最大生物量干重为392 mg/L)的1.4倍. 通过测定该藻细胞的光合放氧速率发现,该藻细胞在自养和混养条件下,最大净光合放氧速率几乎不变,混养条件下的暗呼吸速率、光补偿点高于自养条件,而光饱和点低于自养条件.

从鱼油中提取分离高纯度EPA和DHA的试验研究

进行了硝酸银络合与超临界ＣＯ２精馏相结合的方法，从鱼油中提取高纯度ＥＰＡ和ＤＨＡ的试验研究，结果表明：用该两步法可同时获得纯度为９０％以上的ＥＰＡ和ＤＨＡ。

细胞融合法构建EPA和DHA高产异养藻株的研究

利用细胞融合技术 ,将富含EPA和DHA的自养微藻绿色巴夫藻和生长迅速的异养微藻四鞭藻相融合 ,并筛选出兼养的融合藻株。融合藻株的总脂、EPA、DHA和EPA/DHA等各指标均比异养亲本四鞭藻有较大提高 ;在兼养条件下生长速率高于亲本微藻 ,脂肪酸组成以多不饱和脂肪酸为主 ;而在异养条件下以饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸为主。

气相色谱法测定鱼油微胶囊中EPA和DHA的含量

鱼油富含ω-3不饱和脂肪酸,主要包括二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA)和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)。本文主要研究了用气相色谱内标法测定鱼油微胶囊产品中的EPA和DHA的含量。在充氮保护下,采用氢氧化钾-甲醇酯化法将鱼油微胶囊中的脂肪酸快速、有效地转化成脂肪酸甲酯,以二十一碳脂肪酸甲酯为内标,建立了EPA和DHA的定量分析法。使用HP-INNVOWAX毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm),载气为氦气,其流速为1.8mL/min,检测器温度为280℃。该方法对EPA和DHA定量分析的相对标准偏差分别为1.09%和1.05%,平均回收率分别为99.5%和99.3%。此检测方法简便快速、准确度高,适合于对大量样品的分析。

尿素包合法联合分子蒸馏技术提纯乙酯化鱼油中EPA及DHA的工艺研究

联合尿素包合法及分子蒸馏技术对乙酯化鱼油中的EPA和DHA进行提纯。尿素包合试验中考察了脲酯比、醇脲比、结晶温度及结晶时间等因素对产品纯度及回收率的影响,选择试验条件为脲酯比2∶1、醇脲比4∶1、结晶温度0℃及结晶时间1 h进行尿素包合试验,得到EPA及DHA总纯度为63.5%的产品,回收率为48.5%。分子蒸馏试验中考察了蒸馏温度、预热温度、内冷温度、刮膜器转速及进料速率等因素对试验结果的影响,选择在蒸馏温度90℃、预热温度40℃、内冷温度15℃、刮膜器转速360 r/min、进料速率2 mL/min及真空度0.1 Pa的条件下对乙酯化鱼油进行二次提纯,产品中EPA及DHA总纯度为78.9%,回收率为49%。