EPB41L3基因对胶质瘤细胞增殖、侵袭及迁移的影响

目的探讨Erythrocyte Membrane Protein Band 4.1 Like 3(EPB41L3)基因对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法分析TCGA数据库中EPB41L3在胶质瘤和正常组织中的表达差异及预后。Western blotting检测人正常胶质细胞(NHA)和人胶质瘤细胞中(U251,LN229、SNB19)的EPB41L3蛋白表达。U251细胞过表达EPB41L3后,CCK-8法、EDU法测定细胞增殖,划痕实验和Transwell实验测定细胞迁移和侵袭,蛋白印迹法测定细胞AKT磷酸化水平及上皮间质化(EMT)相关蛋白的表达。结果EPB41L3在胶质瘤组织中较正常组织显著低表达,Kaplan-Meier生存分析显示高表达EPB41L3组OS及PFS更高。胶质瘤细胞中的EPB41L3的蛋白表达水平明显降低,过表达能显著提高EPB41L3表达。过表达EPB41L3组与对照组相比细胞的增殖活性、迁移率、侵袭率均显著降低,p-AKT蛋白表达水平均显著下调,N-cadherin表达量显著降低,E-cadherin表达量显著上调。结论EPB41L3在胶质瘤细胞中表达下调,过表达EPB41L3能够降低胶质瘤细胞的AKT磷酸化水平,以及上皮间质化,发挥抑癌基因的作用。

宫颈癌组织EPB41L3和骨膜蛋白表达及意义

宫颈癌是预后较差的一种常见恶性肿瘤,5年生存率较低[1]。宫颈癌缺乏明确的标志物来判定其不良预后,成为目前研究的热点之一。红细胞膜蛋白配体4.1样3(EPB41L3)是4.1蛋白家族中一个新发现的抑癌基因,具有抑制肿瘤细胞生长的功能[2-3]。骨膜蛋白为细胞外基质蛋白,与多种肿瘤的血管生成、细胞的恶性分化和不良预后相关[4-5]。EPB41L3及骨膜蛋白是否参与宫颈癌的发病机制至今尚未清楚。本研究检测宫颈癌组织EPB41L3及骨膜蛋白表达水平,探讨EPB41L3和骨膜蛋白在宫颈癌发病机制中的作用,报道如下。

miR-181b-5P和EPB41L3蛋白在喉癌中的表达及临床意义

目的 miR-181b-5P和红细胞膜蛋白配体4.1样3(EPB41L3)目前在喉癌中表达关系及作用机制尚不明确。论文主要通过研究miR-181b-5P、EPB41L3蛋白在喉癌组织及癌旁正常组织中表达水平并进行相关性分析,探讨miR-181b-5P靶向调控EPB41L3对喉癌组织增殖、侵袭及转移的影响。方法 通过生物信息学数据库预测miR-181b-5P在喉癌中的表达情况,采用实时荧光定量PCR技术测定喉癌及癌旁正常组织中miR-181b-5P的表达量。预测miR-181b-5p的靶基因并进行生物信息学分析,EPB41L3蛋白的相对表达由免疫组化SP法测定。结果 喉癌组织中miR-181b-5P的表达明显较癌旁正常组织高(P<0.001),且在有无淋巴结转移间有显著差异(P=0.027 3)。EPB41L3蛋白在喉癌组织的表达明显较癌旁正常组织低(P<0.001)。EPB41L3蛋白在喉癌中的阳性表达率于不同病理分化程度、临床分期及有无淋巴结转移中差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-181b-5p及EPB41L3蛋白在喉癌组织中的表达呈负相关(r=-0.420 8,P=0.002 3)。结论 miR-181b-5P可能通过负性调控EPB41L3的表达,影响喉癌组织的增殖、侵袭、转移,研究可为喉癌的临床靶向治疗提供新的思路。

miR-452-5p对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响及作用靶点预测

目的观察miR-452-5p对肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并预测其作用靶点。方法将肝癌SMMC7721细胞分为miR模拟组、对照1组、miR抑制组、对照2组;miR模拟组转染miR-452-5p mimic,对照1组转染miR-452-5p mimicNC,miR抑制组转染miR-452-5p inhibitor,对照2组转染miR-452-5p inhibitorNC;转染24 h后,采用细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测肝癌细胞迁移能力,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。miRNA靶基因预测软件得出EPB41L33'UTR含有miR-452-5p的结合位点,利用双荧光素酶报告实验验证miR-452-5p与EPB41L33'UTR的结合;采用Westernblotting法检测miR模拟组、对照1组、miR抑制组、对照2组细胞中的EPB41L3蛋白。结果miR模拟组细胞迁移率及Transwell实验迁移细胞数、侵袭细胞数高于对照1组(P均<0.05)。miR抑制组细胞迁移率及Transwell实验迁移细胞数、侵袭细胞数低于对照2组(P均<0.05)。双荧光素酶报告实验结果提示miR-452-5p可以直接结合EPB41L33'UTR,即EPB41L3是miR-452-5p的直接靶基因。miR模拟组细胞中EPB41L3蛋白表达低于对照1组,miR抑制组细胞中EPB41L3蛋白表达高于对照2组(P均<0.01)。结论miR-452-5p高表达可提高肝癌细胞的迁移侵袭能力,作用机制可能与靶向调控EPB41L3有关。

基因在食管鳞癌组织和血浆中的甲基化特征及临床意义

目的:将食管鳞癌组织和癌旁组织相对比,将食管鳞癌患者的血浆与正常人的血浆相对比,检测EPPB41L3的甲基化状态和频率,并结合患者的临床病理特征,分析EPPB41L3基因甲基化在食管鳞癌中的意义。方法:收集42例食管鳞癌组织标本和相对应的癌旁组织标本,同时收集42例食管鳞癌患者和50例正常人的血浆标本;应用甲基化特异性PCR(MSP)结合琼脂糖凝胶电泳检测EPB41L3在组织和血浆中的甲基化情况。结果:EPB41L3在肿瘤组织中的甲基化频率为59.5%,显著高于癌旁组织4.8%(P<0.001)。EPB41L3在肿瘤患者血浆中的甲基化频率为31.0%,在正常对照组的血浆中没有检测到甲基化。组织中的甲基化频率在肿瘤≥5 cm组和病理分期为T3组分别明显高于肿瘤<5 cm组和病理分期T1-T2组。血浆中的甲基化频率在病理分期N2组明显高于病理分期N0-N1组。结论:EPB41L3在食管鳞癌组织的甲基化频率高于癌旁组织,在食管鳞癌患者血浆中的甲基化频率显著高于正常人,且临床分期越晚的甲基化频率越高。