生肌玉红膏抑制自噬对血栓闭塞性脉管炎大鼠凝血系统、EPCs分化及Rho激酶活性的影响

目的探究生肌玉红膏抑制自噬对血栓闭塞性脉管炎大鼠凝血系统、内皮祖细胞(EPCs)分化及Rho激酶活性的影响。方法采用左下肢动脉注射月桂酸钠溶液建立血栓闭塞性脉管炎大鼠模型。将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、七叶皂苷钠凝胶组、生肌玉红膏组,每组10只。采用HE染色检测血管组织病理形态,免疫印迹法检测自噬相关蛋白表达,凝血检测仪检测凝血系统指标,流式细胞仪检测EPCs分化,免疫组化法检测Rho激酶活性。结果生肌玉红膏组可使血管组织中自噬标志蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、苄氯素1(Beclin1)、Rho激酶蛋白表达、血浆纤维蛋白原、EPCs中CD34阳性表达率降低,血清中凝血酶原时间、国际标准比率、EPCs中血管性血友病因子阳性表达率、血管组织中P62表达升高(P<0.05);体外实验表明,生肌玉红膏组可降低损伤的内皮细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达,升高P62表达(P<0.05)。结论生肌玉红膏可有效改善血栓闭塞性脉管炎大鼠凝血功能,促进EPCs分化,降低Rho激酶活性,其机制可能与抑制机体自噬有关。

参芪复方含药血清对高糖环境下大鼠骨髓EPCs的影响

目的 观察参芪复方对高糖环境下大鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)迁移、增殖功能的影响。方法 首先获取稳定的原代EPCs(密度梯度离心法),再筛选葡萄糖浓度(CCK-8、transwell法),确定后续实验高糖浓度为45 mM;然后通过CCK-8、transwell法观察5%、10%、15%浓度的参芪复方血清干预高糖环境下EPCs的迁移能力、增殖活性。结果 与高糖模型组相比,参芪复方血清组均可促进高糖环境下EPCs的迁移能力、增殖活性;干预24 h时,5%组迁移能力改善最高(P<0.05);干预48 h时,5%组增殖活性改善最佳(P<0.05),干预48 h各组的增殖改善均明显优于干预24 h(P<0.05);干预48 h,各浓度的参芪复方血清下EPCs迁移能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论 参芪复方可以改善高糖环境对EPCs增殖活性、迁移能力的抑制。

e^2EPCs语法规则的形式化

事件驱动过程链EPCs(Event-driven Process Chains)及其扩展eEPCs(extended Event-driven Process Chains)型是面向流程的建模语言,在eEPCs基础上作了进一步扩展,提出了二次扩展的事件驱动过程链e2EPCs(extended eEPCs),并针对E2PCs半形式化的弱点,对其语法规则EPCs进行了形式化描述。

灯盏细辛注射液对血瘀型急性脑梗死患者血清VEGF、MMP-9、EPCs水平的影响

目的研究灯盏细辛注射液对血瘀型急性脑梗死患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及内皮祖细胞(EPCs)水平的影响,了解其促血管新生机制。方法采用前瞻性随机、对照试验方案,连续选取40例住院治疗的急性脑梗死患者,在常规治疗基础上均分为灯盏细辛注射液治疗组和对照组,两组疗程均为7d。治疗前和后进行中医症征积分(SSTCM)、血瘀证积分、神经功能缺损评分(NIHSS)的比较;对治疗前和治疗后第1、3、7天的VEGF、MMP-9、EPCs血清学水平比较。结果 (1)两组患者经治疗后,SSTCM、血瘀证积分、NIHSS均较治疗前有改善(P<0.05);治疗组与对照组相比改善更明显(P<0.05)。(2)血清VEGF、MMP-9、EPCs水平随时间变化显著(P<0.05);灯盏细辛注射液治疗组血清VEGF在治疗后第3天明显增高,治疗7 d后与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),且治疗后第7天VEGF仍呈继续上升趋势;血清MMP-9在治疗3 d后达到高峰,与对照组相比,灯盏细辛注射液治疗组明显抑制血清MMP-9水平增高(P<0.05),之后逐渐回落,但仍高于正常水平;随着治疗时间的延长,治疗组、对照组血清EPCs水平均逐渐升高,但组间比较无统计学差异(P>0.05)。相关性分析发现,血瘀型急性脑梗死患者经灯盏细辛注射液治疗后第7天EPCs与VEGF呈线性正相关(r=0.561,P=0.010);EPCs与MMP-9呈线性负相关(r=-0.449,P=0.047)。结论灯盏细辛注射液可促进VEGF高表达,降低MMP-9血清学水平,从而动员外周血EPCs,促进血管新生,保护脑组织。

骨髓源性EPCs对脊髓源性NSCs增殖分化的影响

目的观察骨髓源性内皮祖细胞(EPCs)对脊髓源性神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法通过密度梯度离心法获取骨髓血单个核细胞,以EBM-2进行诱导培养EPCs并进行免疫细胞化学染色鉴定,成熟的方法获取及鉴定SD大鼠的脊髓NSCs,1×105/ml第3代NSCs置于Transwell小室下层与1×105/ml上层原代EPCs进行体外1∶1共培养,以单纯第3代的NSCs培养为对照,培养7 d,双盲法分别计数各组在相差显微镜下神经球形成的数目,并用目镜测微尺测量神经球的平均直径,通过5%血清诱导培养NSCs7 d后,行β-微管蛋白-Ⅲ免疫荧光染色,Hoechst细胞核染色后在显微镜下计算神经元/细胞总数得出百分率。结果骨髓源性EPCs与脊髓源性NSCs共培养组神经球平均数目为(22.27±3.85)个,平均直径为(61.70±7.21)μm,诱导培养后分化为神经元的平均百分率为(46.10±3.70)%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论骨髓源性EPCs能促进脊髓源性NSCs增殖及其向神经元分化。

舒冠方对冠心病PCI术后患者外周血EPCs动员和VEGF水平的影响

目的观察舒冠方对冠心病PCI术后患者外周血EPCs动员和VEGF水平的影响。方法符合入选条件而不具有排除条件并成功实施冠状动脉支架置入术的住院患者共40例,随机分为舒冠方组20例和西药组20例,并随机选取健康志愿者10例作为对照。西药组给予基础西药治疗,舒冠方组在基础西药治疗基础上于术后第2天开始给予舒冠方颗粒剂。于术后第4周抽取空腹外周血,应用ELISA法检测治疗前后VEGF水平,采用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞培养14d后免疫荧光进行EPCs鉴定计数。结果舒冠方组与西药组VEGF均明显高于对照组(P<0.05),舒冠方组和西药组与对照组EPCs比较,均明显低于对照组(P<0.05),治疗后舒冠方组EPCs和VEGF均高于单纯西药治疗的西药组(P<0.05)。结论舒冠方能够动员EPCs参与修复损伤血管内膜,与其能够上调外周血中的VEGF水平有关。

内皮祖细胞(EPCs)研究进展

组织工程血管以及组织工程化组织的血管化因目前内皮种子细胞扩增能力和生物活力的不足而受到限制。EPCs(内皮祖细胞 )是内皮细胞的前体细胞。在胚胎期 ,内皮细胞系与造血细胞系来源于血岛内共同的祖先细胞 ;出生后 ,EPCs存在于骨髓 ,并可被转移至外周血 ,参与缺血组织的血管重建和血管的内膜化。因此EPCs有望成为今后组织工程内皮种子细胞的重要来源。

E2-2基因腺病毒载体的构建及其对EPCs生长、增殖及ID1表达的影响

目的构建转录因子E2-2基因腺病毒载体,观测内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)过表达E2-2基因对DNA结合抑制因子-1(inhibitor of DNA binding/differentiation,ID1)表达的影响。方法分离、培养并鉴定小鼠骨髓EPCs。RT-PCR法扩增E2-2基因CDs全长DNA,克隆入载体pTG19-T后,亚克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建pAdTrack/E2-2重组载体,与pAdEasy-1骨架质粒同源重组形成重组病毒pAd/E2-2,经293细胞包装,获具高效感染力的重组pAd/E2-2病毒。将该病毒感染EPCs,倒置显微镜观测经感染的EPCs的GFP表达情况。CCK-8(cell count kit-8)法检测病毒pAd/E2-2对EPCs生长、增殖的影响。RT-PCR、Western blot分别检测经感染的EPCs中E2-2与ID1基因及其编码蛋白的表达情况,并予以定量分析。结果分离、培养并鉴定到小鼠骨髓EPCs。克隆到2013 bp的E2-2基因,并获得高效感染力的重组pAd/E2-2病毒。CCK-8法检测表明,与对照比较,过表达E2-2的EPCs的生长、增殖速度减慢,48h开始变得尤为明显(P<0.01);RT-PCR、Western blot及定量分析结果显示,E2-2能下调ID1的表达,与对照比较,差异具统计学意义(P<0.01)。结论分离、培养并鉴定小鼠骨髓EPCs,克隆出E2-2基因,证实E2-2能明显抑制EPCs的生长、增殖,并能下调ID1基因的表达。

同型半胱氨酸对脑血管疾病的始动因素-EPCs作用的研究进展

EPCs （endothelial progenitor cells, EPCs）有维持内皮的完整性和促进血管再生的功能，其在脑血管疾病中的作用日益受到关注。大量研究表明，EPCs损伤与动脉粥样硬化、血栓形成、高血压等有密切关系。同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）是心脑血管疾病中的一个独立危险因素，内皮细胞损伤及功能障碍在HCY致血管疾病的发病机理中有重要作用。本文分别从EPCs与血管损伤的关系、HCY与EPCs相关性临床研究及其可能机制等方面进行阐述，并就HCY对EPCs的相关性作用做一综述。

EPCs与肝硬化门脉高压症的关系及其治疗展望

肝硬化形成后．肝脏组织形态学发生了一系列病理改变。这些变化从不同层面造成了门静脉压力的升高，这种高压状态必然损伤血管内皮。肝硬化早期，血管内皮细胞（EndothelialCell，EC）数量及功能良好，尚能修复这些损伤，延缓门脉高压的发展：随肝硬化病程进展，肝功能障碍，凝血因子消耗过多，大量有毒物质进入血液，均加重了血管内皮细胞数量的减少和功能的损害，继而无法有效代偿门静脉高压带来的损伤，最终导致了门脉高压的恶性进展。血管内皮细胞的前体细胞是血管内皮祖细胞（EndothelialProgenitorCell，EPC），EPC能够迁移并定向分化为成熟的血管内皮细胞，在血管生成和内皮修复中起重要作用。

内皮祖细胞(EPCs)在心脏移植物血管病变(CAV)中的研究进展

内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是一类能分化为成熟内皮细胞(endothelial cells,ECs)的内皮前体细胞,具有促进损伤血管修复和新生血管形成的特点。研究发现EPCs在心脏移植物血管病变(cardiac allograft vasculopathy,CAV)的发生和发展中起着重要作用,移植后供心血管内皮损伤可以触发EPCs的修复过程。本文综述了移植物血管病变的发生发展过程中EPCs的归巢和分化,探讨了EPCs对CAV的预测、诊断和治疗价值。

补肾安胎合剂对肾虚流产小鼠EPCs动员、归巢的影响

目的研究补肾安胎合剂对肾虚流产小鼠EPCs动员、归巢的影响。方法对100只ICR小鼠作进行性骨髓移植+肾虚流产造模,分为空白组、模型组及补肾安胎合剂高、中、低剂量组。灌胃给药4周后,剖视小鼠子宫检测胚胎丢失率,流式细胞学检测骨髓、外周血、蜕膜组织内皮祖细胞(EPCs)数,ELISA法检测外周血基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)水平和蜕膜组织趋化性细胞因子受体-4(CXCR-4)表达。结果骨髓移植模型造模成功率为53.2%。与空白组比较,模型组、中药低剂量组胚胎丢失率升高(P<0.01);与模型组比较,中药高、中剂量组丢失率降低(P<0.01)。与空白组比较,各流产组骨髓、外周血、蜕膜组织中EPCs数目降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,中药高剂量组EPCs数目升高(P<0.01)。在外周血中,与空白组比较,模型组及中药低、中剂量组SDF-1α水平降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各中药组SDF-1α水平升高(P<0.01)。在蜕膜组织中,与空白组比较,各流产组CXCR-4水平降低(P<0.01);与模型组比较,中药高、中剂量组蜕膜组织中CXCR-4水平升高(P<0.01)。结论补肾安胎合剂可能通过提高外周血SDF-1α水平及蜕膜组织CXCR-4表达来促进EPCs动员与归巢,改善母胎界面血管重铸,从而降低胚胎丢失率。

培哚普利对急性心肌梗死患者血管内皮功能及EPCs水平的干预作用

目的探讨培哚普利对急性心肌梗死(AMI)的疗效及对患者血管内皮功能和内皮祖细胞(EPCs)水平的影响。方法选取2016年1月~2018年6月本院收治的94例AMI患者为研究对象,将所有患者按照治疗方案分为观察组(n=47)及对照组(n=47),2组均行急诊经皮冠状动脉介入治疗,对照组术后1d给予常规基础治疗,观察组同时给予培哚普利叔丁胺片治疗,逐渐加量至8mg/d,2组均持续治疗6个月。于治疗前后检测并比较2组患者血压、血钾、心率(HR)及超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、血管紧张素Ⅱ(AngII)、血管内皮生长因子(VEGF)等指标变化;检测并比较2组治疗前后肱动脉内皮依赖性血管舒张功能(FMD)及EPCs数量。结果与治疗前比较,治疗后2组血浆hs-CRP水平及观察组SBP、DBP、AngII水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论培哚普利可显著降低AMI患者血压、炎性因子水平,动员EPCs细胞,进而改善血管内皮功能,且不会影响患者血钾及HR等,具有一定的安全性。

基于对EPCS在线编程的FPGA可重构方法

介绍了一种基于对EPCS配置芯片在线编程方式实现的FPGA可重构方案。这种可重构方案主要是通过开发CPLD器件对EPCS系列的配置芯片进行在线重新烧写用户所需要的配置程序,从而达到重构FPGA系统的目的。文中详细地描述了这种FPGA可重构方案的设计思路以及实现方法。

姜黄素对兔颈动脉斑块稳定性及EPCs活力的影响

目的:观察姜黄素对颈动脉斑块稳定性及内祖皮细胞(EPCs)的影响。方法:将30只新西兰兔随机分为空白对照组、模型组及姜黄素组,各10只,其中空白对照组予普通饲料喂养,模型组予喂养高脂饲料,姜黄素组予喂养高脂饲料+100 mg/d姜黄素。连续喂养12周后HE染色法观察3组西兰兔主动脉内膜斑块厚度、外周血总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)水平以及利用MTT法测定人纤维EPCs细胞迁徙及增殖活性。结果:1)血脂水平:与空白组比较,模型组及姜黄素组TC、TG及LDL-C均升高(P<0.05),HDL-C降低(P<0.05),其中姜黄素干预后上述指标有明显改善(P<0.05)。2)形态学变化:空白对照组颈动脉壁厚薄均匀,结构均匀,模型组及姜黄素均出现动脉管腔狭窄,动脉内膜增厚,其中姜黄素组较模型组改善。3)EPCs增殖情况:与空白组比较,模型组及姜黄素OD值均降低(P<0.05),与模型组比较,姜黄素OD有所上调(P<0.05)。4)EPCs迁徙能力:空白对照组各时间点划痕愈合率均显著高于其余2组(P<0.05),其中姜黄素组各时间点划痕愈合率均高于模型组(P<0.05)。结论:姜黄素由明显抗动脉粥样硬化作用,其作用机制可能与促进EPCs增殖及迁徙有关。

电针介导eNOS动员内源性EPCs促MCAO/R大鼠脑内血管再生

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(e NOS)在电针干预下对局灶脑缺血/再灌注大鼠骨髓及外周血中内皮祖细胞(EPCs)数量变化的影响,及其促大鼠脑内血管再生的机制。方法线栓法制备大鼠局灶脑缺血/再灌注模型,针刺"百会"穴及左侧"四关"穴。100只SD雄性大鼠随机分为正常组(N组)、模型组(I/R组)、模型+电针组(I/RE组)、模型+电针+L-NAME组(I/REL组)。除N组外的各组局灶脑缺血1.5 h后分为再灌注1、2、7 d三个亚组,每个亚组10只大鼠。在各时间点采用流式细胞术检测外周血及骨髓中VEGFR2+EPCs数量,荧光定量PCR技术检测缺血皮质区VEGFR2 mRNA的表达,免疫组织化学法检测缺血皮质区VEGFR2阳性细胞表达及CD34标记的微血管计数。结果与I/R组比较,电针可明显提高骨髓及外周血中EPCs的数量(P<0.01,P<0.05),而I/REL组的VEGFR2+EPCs数量相比于I/RE组则显著降低(P<0.01)。各时间点I/RE组缺血皮质区VEGFR2阳性细胞表达,VEGFR2 mRNA表达及CD34微血管计数明显高于I/R组(P<0.01),而I/REL组与之比较则显著减少(P<0.01)。结论电针可动员局灶脑缺血/再灌注大鼠内源性EPCs促大鼠缺血脑区血管再生,该作用在e NOS被抑制后减弱,推测电针动员EPCs促血管再生的作用与e NOS的激活有关。

消渴通痹颗粒含药血清对高糖环境下EPCs PI3K/Akt/eNOS分子信号通路的影响

目的:观察消渴通痹颗粒含药血清对高糖环境下EPCs PI3K/Akt/e NOS分子信号通路的影响。方法:体外培养并鉴定大鼠骨髓EPCs,制备消渴通痹颗粒含药血清,对EPCs进行不同高糖血清或PI3K抑制剂Wortmannin及e NOS抑制剂L-NAME的干预,检测EPCs的增殖及小管形成能力,Western-blot检测Akt、p-Akt及e NOS、p-e NOS蛋白表达。结果:与对照组比较,消渴通痹颗粒含药血清能促进EPCs的增殖及小管形成,不同浓度的消渴通痹颗粒含药血清预处理后在一定程度上阻止了AKT,p-AKT,e NOS,p-e NOS水平的下降(P<0. 05)。结论:消渴通痹颗粒可能通过上调PI3K/Akt/e NOS分子信号通路相关蛋白的表达水平,促进高糖环境下EPCs增值和小管形成。

自体EPCs移植对急性心肌梗死的干预作用及机制

目的研究自体EPCs移植对急性心肌梗死(AMI)的干预及作用机制。方法选取SPF级40只SD健康大鼠,将40只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和EPCs移植组各10只,模型组、阳性对照组和EPCs移植组建立AMI大鼠模型。建模成功后,阳性对照组使用阿托伐他汀钙进行治疗,EPCs移植组使用50μl EPCs在AMI区进行注射。正常组和模型组不做任何处理,在大鼠给药8 w后对室间隔厚度(IVSD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期容积(LVESV)、短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)、内皮素(ET)-1、一氧化氮(NO)、人三型前胶原肽(PⅢP)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平进行检测。结果EPCs移植组、阳性对照组、模型组IVSD、FS、EF、NO水平显著低于正常组,LVESD、LVESV、LVEDD、ET-1、PⅢP、LDH、ALT、AST、HGF、c-Met水平显著高于正常组(P<0.05);EPCs移植组、阳性对照组IVSD、FS、EF、NO水平显著高于模型组,LVESD、LVESV、LVEDD、ET-1、PⅢP、LDH、ALT、AST、HGF、c-Met水平显著低于模型组(P<0.05);EPCs移植组IVSD、FS、EF、NO水平显著高于阳性对照组,LVESD、LVESV、LVEDD、ET-1、PⅢP、LDH、ALT、AST、HGF、c-Met水平显著低于阳性对照组(P<0.05)。结论自体EPCs移植对大鼠AMI有明显的保护作用,与降低LDH、ALT、AST水平和调节HGF/c-Met信号通路有关。

基于EPCS Flash配置的Altera SOPC启动及更新研究

本文提出了一种利用EPCS Flash完成Altera FPGA的配置,以及启动FPGA中Nios II软核的方法。并且着重讨论了在系统启动后,通过Nios II程序来更新EPCS Flash中启动代码的方法。