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PC-1增强受体酪氨酸激酶家族成员EphA3在前列腺癌细胞中的转录 被引量:1
1
作者 武瑞琴 李其满 +4 位作者 施庆国 张惠 钱晓龙 俞岚 周建光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期633-639,共7页
为了研究前列腺癌相关基因(prostate and colon gene 1,PC-1)对受体酪氨酸激酶家族分子EphA3表达的影响,用RT-PCR、实时PCR和Western印迹检测表达不同水平PC-1的前列腺癌细胞系LNCaP和C4-2中EphA3的表达情况.发现PC-1可诱导EphA3基因表... 为了研究前列腺癌相关基因(prostate and colon gene 1,PC-1)对受体酪氨酸激酶家族分子EphA3表达的影响,用RT-PCR、实时PCR和Western印迹检测表达不同水平PC-1的前列腺癌细胞系LNCaP和C4-2中EphA3的表达情况.发现PC-1可诱导EphA3基因表达上调.采用荧光素酶实验检测PC-1对于EphA3启动子转录活性的影响,结果显示,PC-1对转录起始位点上游916 bp的启动子活性没有影响,而可增强转录起始位点上游2011 bp启动子的活性.对EphA3启动子-916 bp~-2 011 bp区域进行生物信息学分析,结果显示,此区域包含HSF、NF-1、Nkx-2、SP1和GATA-1等多种转录因子结合位点.实验结果表明,PC-1可通过影响EphA3启动子诱导EphA3基因高表达,其调控区域位于转录起始位点上游-2 011 bp至-916 bp之间,提示PC-1可能通过影响一些结合于此区域的转录因子来影响EphA3启动子的转录活性. 展开更多
关键词 前列腺癌 前列腺癌相关基因(PC-1) 受体酪氨酸激酶 epha3
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EphA3在结肠癌组织中的表达及临床意义 被引量:1
2
作者 于泳 窦科峰 +6 位作者 王家林 李霄 王建锋 韩炜 张卓超 阮柏 王德盛 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期835-839,共5页
目的:探讨酪氨酸蛋白激酶受体EphA3在结肠癌组织中的表达与结肠癌微血管生成之间的关系以及临床意义.方法:应用免疫组织化学法检测108例结肠癌组织和15例正常结肠组织中EphA3蛋白的表达情况,同时使用CD31染色检测肿瘤微血管密度(microve... 目的:探讨酪氨酸蛋白激酶受体EphA3在结肠癌组织中的表达与结肠癌微血管生成之间的关系以及临床意义.方法:应用免疫组织化学法检测108例结肠癌组织和15例正常结肠组织中EphA3蛋白的表达情况,同时使用CD31染色检测肿瘤微血管密度(microvessels density,MVD),并分析EphA3与MVD的关系及其与病理分期、预后的关系.结果:EphA3蛋白在癌组织中的表达明显高于正常结肠黏膜组织(P<0.001),而且EphA3阳性表达强度高的肿瘤区域有较高的微血管密度(P<0.001).EphA3蛋白高表达与肿瘤大小[51(71.8%)vs20(28.2%)]、TNM分期[Ⅰ:8(25.0%)vs24(75.0%);Ⅱ:19(67.9%)vs9(32.1%);Ⅲ:32(86.5%)vs5(13.5%);Ⅳ:10(90.9%)vs1(9.1%)]、分化[低分化:18(90.0%)vs2(10.0%);中分化:45(62.5%)vs27(37.5%);高分化:6(37.5%)vs10(62.5%)]、淋巴结转移[64(94.1%)vs4(5.9%)]及远处转移[42(75.0%)vs14(25.0%)]相关,而与患者年龄和性别差异无统计学意义(P>0.05).结论:EphA3蛋白的高表达与结肠癌的发生、浸润以及患者预后密切相关. 展开更多
关键词 结肠癌 epha3 血管生成 微血管密度
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干扰lncRNA SNHG22抑制EPHA3基因对结直肠癌LoVo细胞周期与凋亡的影响 被引量:1
3
作者 姜进平 朱钟钟 +2 位作者 黄耿 程凯 罗海平 《国际医药卫生导报》 2021年第24期3773-3776,共4页
目的观察干扰长链非编码RNA(lncRNA)SNHG22是否通过抑制促红细胞生成素产生肝细胞A型受体3(erythropoietin-producing hepatocellular receptor A3,EPHA3)影响结直肠癌LoVo细胞周期与凋亡。方法利用SNHG22小干扰RNA(si-SNHG22)转染结直... 目的观察干扰长链非编码RNA(lncRNA)SNHG22是否通过抑制促红细胞生成素产生肝细胞A型受体3(erythropoietin-producing hepatocellular receptor A3,EPHA3)影响结直肠癌LoVo细胞周期与凋亡。方法利用SNHG22小干扰RNA(si-SNHG22)转染结直肠癌LoVo细胞,构建干扰SNHG22的细胞(si-SNHG22组),转染小干扰RNA阴性对照(si-NC)至LoVo细胞(si-NC组)。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SNHG22和EPHA3信使RNA(mRNA)的表达水平。流式细胞术评估干扰SNHG22对LoVo细胞周期和凋亡的影响。Western blot检测干扰SNHG22对EPHA3、Cyclin H、Caspase6、CDK3蛋白表达的影响。结果与si-NC组相比,干扰SNHG22显著降低LoVo细胞中EPHA3 mRNA的表达[(0.31±0.06)比(1.31±0.12)](P<0.01),提高G0~G1期的LoVo细胞比例(P<0.01),提高LoVo细胞的凋亡率[(40.61±5.96)%比(10.84±3.22)%](P<0.01)。与si-NC组相比,干扰SNHG22可显著降低LoVo细胞中EPHA3、Cyclin H、CDK3蛋白的表达,显著增加Caspase6蛋白的表达。结论干扰SNHG22可以降低EPHA3基因的表达,阻滞结直肠癌LoVo细胞周期,诱导LoVo细胞凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 SNHG22 epha3 细胞周期 凋亡
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肝癌中EPHA3受体SAM结构域缺失突变体的发现
4
作者 陈霞 厉建中 嵇承栋 《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期1-4,共4页
酪氨酸蛋白激酶受体(RTKs)具有调节细胞生长、分化和迁移的能力,是一类多功能的跨膜糖蛋白。EPH受体家族蛋白高度保守,成员众多,是RTKs中最大的一个分支。大量的研究表明,EPH家族蛋白不仅在胚胎发育过程中具有调节细胞间黏附或排斥、细... 酪氨酸蛋白激酶受体(RTKs)具有调节细胞生长、分化和迁移的能力,是一类多功能的跨膜糖蛋白。EPH受体家族蛋白高度保守,成员众多,是RTKs中最大的一个分支。大量的研究表明,EPH家族蛋白不仅在胚胎发育过程中具有调节细胞间黏附或排斥、细胞迁移、轴突导向以及血管形成等多方面作用,并且在一些恶性肿瘤的血管生成、肿瘤转移与侵袭等肿瘤的发生发展及预后过程中也发挥着重要的调节作用。在研究EPHA3受体对肝癌转移的作用过程中,发现Epha3在肝癌组织中具有一种新的突变体,该突变体在其胞内部分缺失了96 bp并提前终止翻译而缺少SAM结构域,推测其可能在肝癌的发生发展过程中起调控作用。 展开更多
关键词 epha3 突变 肿瘤 酪氨酸激酶受体
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EphA3受体截短突变体variant b在前列腺癌细胞中的分泌表达
5
作者 钱晓龙 庞博 +4 位作者 施庆国 武瑞琴 俞岚 李山虎 周建光 《生物技术通讯》 CAS 2010年第1期27-31,共5页
目的:验证EphA3受体截短突变体variant b是否是一种分泌蛋白,并探索其内源分泌的特点,在细胞水平看其是否有作为前列腺癌血清标志物的潜质。方法:构建EphA3 variant b真核表达载体,应用标签抗体、特异性抗体和Western印迹检测前列腺癌... 目的:验证EphA3受体截短突变体variant b是否是一种分泌蛋白,并探索其内源分泌的特点,在细胞水平看其是否有作为前列腺癌血清标志物的潜质。方法:构建EphA3 variant b真核表达载体,应用标签抗体、特异性抗体和Western印迹检测前列腺癌细胞培养液中EphA3 variant b的表达,用RT-PCR方法分析EphA3 variant b在8种细胞系中的表达谱和对雄激素刺激的应答。结果:验证了EphA3 variant b是一种分泌蛋白,在雄激素受体阳性的前列腺癌细胞系中特异性表达,雄激素以剂量依赖方式诱导EphA3 variant b表达。结论:EphA3 variant b是一种分泌蛋白,其表达与雄激素受体信号通路相关,有作为前列腺癌血清标志物的潜质。 展开更多
关键词 前列腺癌 血清标志物 分泌蛋白 epha3截短突变体variant b
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1504-siRNA对表达EphA3的肿瘤细胞HGC27的抑制作用 被引量:1
6
作者 赵亚丽 武瑞琴 +4 位作者 李海量 王洪涛 罗国兰 王健 周建光 《生物技术通讯》 CAS 2012年第4期503-505,共3页
目的:研究原癌基因EphA3的小干扰RNA(siRNA)1504-siRNA对表达EphA3的胃癌细胞HGC27的增殖抑制作用。方法:将携带1504-siRNA的质粒用Vigorous转染试剂瞬时转染HGC27细胞,48 h后收集蛋白,用Western印迹检测EphA3及AKT信号通路中的蛋白分... 目的:研究原癌基因EphA3的小干扰RNA(siRNA)1504-siRNA对表达EphA3的胃癌细胞HGC27的增殖抑制作用。方法:将携带1504-siRNA的质粒用Vigorous转染试剂瞬时转染HGC27细胞,48 h后收集蛋白,用Western印迹检测EphA3及AKT信号通路中的蛋白分子表达;36 h后收集转染细胞,进行MTT、平板克隆形成和软琼脂克隆形成实验。结果:1504-siRNA能抑制HGC27细胞的EphA3蛋白水平,抑制其增殖、平板克隆形成和软琼脂克隆的形成,抑制pAKT、pmTOR、p-c-Raf、p-4ebp1等信号分子的表达。结论:1504-siRNA可能通过抑制AKT信号通路,而抑制HGC27细胞的增殖、存活能力和恶性程度,它可以作为肿瘤治疗的候选药物。 展开更多
关键词 epha3 肿瘤 增殖 小干扰RNA
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MVD和EphA3在大肠癌及大肠腺瘤中的表达及临床意义 被引量:2
7
作者 张海伟 丰义宽 《青岛医药卫生》 2014年第1期20-23,共4页
目的探讨微血管密度(MVD)和酪氨酸蛋白激酶受体EphA3在大肠癌中表达及其与临床病理特征的关系。方法运用免疫组织化学技术,检测CD31、EphA3蛋白在80例大肠癌、20例大肠腺瘤、10例大肠正常组织中表达情况,并计算MVD值,分析MVD与EphA3蛋... 目的探讨微血管密度(MVD)和酪氨酸蛋白激酶受体EphA3在大肠癌中表达及其与临床病理特征的关系。方法运用免疫组织化学技术,检测CD31、EphA3蛋白在80例大肠癌、20例大肠腺瘤、10例大肠正常组织中表达情况,并计算MVD值,分析MVD与EphA3蛋白的关系及其与临床病理因素之间的关系。结果 (1)大肠癌组织、大肠腺瘤和大肠正常组织中MVD值分别为(89.78±14.31)、(49.35±4.12)、(20.90±2.42),三者比较差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)EphA3在大肠癌组织中的表达明显高于正常大肠组织(P<0.01)。(3)MVD与大肠癌分化程度、淋巴结转移、浸润深度及TNM分期显著相关(P<0.01);EphA3的阳性表达与大肠癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关(P<0.05)。(4)EphA3在大肠癌中表达与MVD呈正相关(r=0.361,P<0.01)。结论 MVD及EphA3与大肠癌的生长、浸润转移有关,对于大肠癌的早期诊断、判断预后等具有重要临床意义。 展开更多
关键词 大肠癌 大肠腺瘤 微血管密度 epha3
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EphA3促进胃癌细胞BGC823的增殖
8
作者 吕晓业 王健 +5 位作者 李昕宇 黄芳 王芃 周建光 李山虎 卫勃 《生物技术通讯》 CAS 2017年第3期286-289,共4页
目的:初步探索EphA3与胃癌细胞BGC823增殖的关系。方法:用T_4DNA连接酶将EphA3的全长cDNA片段连接到酶切后的慢病毒载体pCDH-EF1-MCS-T2A-Puro中制备慢病毒,感染胃癌BGC823细胞建立过表达EphA3细胞系,Western印迹检测目的蛋白的表达,CCK... 目的:初步探索EphA3与胃癌细胞BGC823增殖的关系。方法:用T_4DNA连接酶将EphA3的全长cDNA片段连接到酶切后的慢病毒载体pCDH-EF1-MCS-T2A-Puro中制备慢病毒,感染胃癌BGC823细胞建立过表达EphA3细胞系,Western印迹检测目的蛋白的表达,CCK8细胞生长实验和裸鼠成瘤实验检测EphA3对BGC823细胞增殖的影响。结果:双酶切鉴定与基因测序表明过表达EphA3慢病毒载体构建成功;Western印迹表明建立了过表达EphA3的BGC823细胞系,高表达EphA3对BGC823细胞的增殖和成瘤后生长有明显的促进作用。结论:EphA3促进BGC823胃癌细胞增殖,为胃癌的靶向性治疗及个性化治疗提供了线索。 展开更多
关键词 epha3 胃癌 BGC823细胞
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PC-1、EphA3和SGEF蛋白表达的相互影响
9
作者 王翠敏 施庆国 +1 位作者 郭素枝 周建光 《生物技术通讯》 CAS 2012年第1期23-25,共3页
目的:在293T和LNCaP细胞中验证PC-1、EphA3和SGEF蛋白表达的相互影响。方法 :采用半定量RT-PCR及Western印迹检测EphA3和SGEF在LNCaP细胞中与PC-1的关系,分别在LNCaP和293T细胞中检测EphA3对SGEF表达的影响。结果:在LNCaP细胞中,EphA3和... 目的:在293T和LNCaP细胞中验证PC-1、EphA3和SGEF蛋白表达的相互影响。方法 :采用半定量RT-PCR及Western印迹检测EphA3和SGEF在LNCaP细胞中与PC-1的关系,分别在LNCaP和293T细胞中检测EphA3对SGEF表达的影响。结果:在LNCaP细胞中,EphA3和SGEF在RNA及蛋白水平上均受PC-1高表达诱导,而EphA3的高表达对SGEF的表达无明显影响;但在293T细胞中,SGEF受EphA3表达水平的影响,随EphA3表达量的增加而升高。结论:PC-1、EphA3与SGEF蛋白表达的相互影响与细胞类型相关。 展开更多
关键词 epha3 SGEF PC-1 蛋白表达
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EphA3基因稳定表达细胞模型的建立与分析
10
作者 李其满 武瑞琴 +1 位作者 潘大仁 周建光 《生物技术通讯》 CAS 2009年第5期609-611,共3页
目的:建立稳定表达外源EphA3基因的小鼠成纤维细胞株模型,初步探讨EphA3基因表达对肿瘤发生、发展的影响。方法:通过脂质体介导的方法,将真核表达载体pcDNA3.1(-)/myc-his-EphA3转染NIH3T3细胞,用Western印迹确定外源EphA3基因表达;通过... 目的:建立稳定表达外源EphA3基因的小鼠成纤维细胞株模型,初步探讨EphA3基因表达对肿瘤发生、发展的影响。方法:通过脂质体介导的方法,将真核表达载体pcDNA3.1(-)/myc-his-EphA3转染NIH3T3细胞,用Western印迹确定外源EphA3基因表达;通过MTT实验、软琼脂集落形成实验,观察EphA3基因表达对NIH3T3细胞生物学特性的影响。结果:建立了稳定转染EphA3基因的NIH3T3细胞株;EphA3基因表达的小鼠成纤维NIH3T3细胞生长速度没有明显变化,但在软琼脂上锚着非依赖生长的能力加强。结论:建立了稳定表达外源EphA3基因的NIH3T3细胞株,EphA3基因稳定表达具有诱导正常NIH3T3细胞发生恶性转化的重要生物功能。 展开更多
关键词 epha3基因 基因表达 NIH3T3细胞 细胞模型
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EPHA3基因单核苷酸多态性变异与非综合征型唇腭裂的相关性研究
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作者 于丽丽 马瑞 +6 位作者 马坚 郭飞行 胡晨 董文 阮文彦 迟丹丹 黄永清 《宁夏医学杂志》 CAS 2021年第9期769-772,共4页
目的探讨EPHA3基因多态性与非综合征型唇裂伴或不伴腭裂(NSCL/P)的相关性。方法收集NSCL/P患儿血样504例,留取外周血5 mL;正常新生儿455例,留取脐带血5 mL,提取基因组DNA。选取EPHA3基因上的88个常见SNP,进行基因分型后,用Haploview软... 目的探讨EPHA3基因多态性与非综合征型唇裂伴或不伴腭裂(NSCL/P)的相关性。方法收集NSCL/P患儿血样504例,留取外周血5 mL;正常新生儿455例,留取脐带血5 mL,提取基因组DNA。选取EPHA3基因上的88个常见SNP,进行基因分型后,用Haploview软件进行对照组Hardy-Weinberg平衡检验、相关性检验、连锁和单倍型分析。结果EPHA3基因rs7428598和rs79843236的等位基因频数(P<0.05)和基因型频数(P<0.05)在病例组和对照组之间差异有统计学意义。连锁分析后得到了7个单体型块,单体型块1中的单体型TA(P<0.05),单体型块3中的单体型CTTACATGCTGCGTCGAAGCCTCTATTT(P<0.05);CTGCGCCTTGGTCTAGTGTATCGAGCATACC(P<0.05)和单体型CTGCGTATTAACTGAATGCGTAGGGCGCGCC(P>0.05)。结论EPHA3基因的rs7428598和rs79843236 SNP位点多态性变异与宁夏人群唇裂伴或不伴腭裂发病存在相关性。 展开更多
关键词 epha3 基因 唇裂伴或不伴腭裂 单核苷酸多态性
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EphA3 deficiency in the hypothalamus promotes high-fat diet-induced obesity in mice
12
作者 Jubiao Zhang Yang Chen +5 位作者 Lihong Yan Xin Zhang Xiaoyan Zheng Junxia Qi Fen Yang Juxue Li 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2023年第3期179-193,共15页
Erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma A3(EphA3)is a member of the largest subfamily of tyrosine kinase receptors-Eph receptors.Previous studies have shown that EphA3 is associated with tissue development.R... Erythropoietin-producing hepatocellular carcinoma A3(EphA3)is a member of the largest subfamily of tyrosine kinase receptors-Eph receptors.Previous studies have shown that EphA3 is associated with tissue development.Recently,we have found that the expression of EphA3 is elevated in the hypothalamus of mice with diet-induced obesity(DIO).However,the role of EphA3 in hypothalamic-controlled energy metabolism remains unclear.In the current study,we demonstrated that the deletion of EphA3 in the hypothalamus by CRISPR/Cas9-mediated gene editing promotes obesity in male mice with high-fat diet feeding rather than those with normal chow diet feeding.Moreover,the deletion of hypothalamic EphA3 promotes high-fat DIO by increasing food intake and reducing energy expenditure.Knockdown of EphA3 leads to smaller intracellular vesicles in GT1-7 cells.The current study reveals that hypothalamic EphA3 plays important roles in promoting DIO. 展开更多
关键词 epha3 HYPOTHALAMUS METABOLISM CRISPR-Cas9 OBESITY
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EphA3基因启动子区域定位表达及活性分析
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作者 曾莉 卜碧涛 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期88-92,共5页
目的构建含有不同长度EphA3基因启动子片段的报告基因载体,研究其在293T细胞和MEF细胞中的转录活性。方法以Balb/C小鼠基因组DNA为模板,扩增不同长度的EphA3基因启动子片段,并克隆进入荧光素酶报告基因质粒pGL3-Basic真核表达载体... 目的构建含有不同长度EphA3基因启动子片段的报告基因载体,研究其在293T细胞和MEF细胞中的转录活性。方法以Balb/C小鼠基因组DNA为模板,扩增不同长度的EphA3基因启动子片段,并克隆进入荧光素酶报告基因质粒pGL3-Basic真核表达载体内。酶切鉴定及基因测序无误后,将重组质粒和pRL—CMV内对照质粒共转染293T和MEF细胞,分析不同长度的OhA3基因启动子片段的转录活性。结果酶切和测序鉴定表明表达载体构建成功,EphA3基因的核心启动子区域位于-279bp~+110bp之间,在293T细胞和MEF细胞中其转录活性相似。结论成功构建了荧光素报告基因重组质粒,并确定了BphA3基因的核心启动子区域。 展开更多
关键词 epha3基因 启动子 荧光素酶报告基因载体 转录活性
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干扰EphA3的慢病毒lentivirus-1504的构建及其对肝癌细胞7402抑制作用研究 被引量:1
14
作者 李海量 王洪涛 +5 位作者 赵亚丽 罗国兰 张晓清 薛萌 潘耀振 周建光 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期254-258,共5页
目的构建携带干扰癌基因EphA3的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体,并研究其对肝癌细胞7402的生长和迁徙的影响。方法构建携带EphA3 siRNA的慢病毒载体质粒并将其与外源EphA3表达质粒共转染至人胚肾细胞293T中,Western印迹检测其干扰EphA3蛋... 目的构建携带干扰癌基因EphA3的小干扰RNA(siRNA)慢病毒载体,并研究其对肝癌细胞7402的生长和迁徙的影响。方法构建携带EphA3 siRNA的慢病毒载体质粒并将其与外源EphA3表达质粒共转染至人胚肾细胞293T中,Western印迹检测其干扰EphA3蛋白表达的效果。将pSIH-H1-小发夹RNA(shRNA)-1504及空载体分别与3种包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒lentivirus-1504及对照慢病毒。将所获慢病毒分别感染肝癌细胞7402,并加入嘌呤霉素(puromycin)筛选,1周后将细胞收集。Western印迹检测EphA3蛋白的表达水平,然后分别应用MTT实验、平板克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验以及划痕实验检测敲低EphA3对肝癌细胞增殖能力、存活能力、恶性程度和迁移能力的影响。结果 lentivirus-1504抑制了7402细胞EphA3的表达,敲低EphA3后抑制了7402细胞的增殖能力、存活能力、恶性程度和迁移能力。结论慢病毒lentivirus-1504能够明显抑制肝癌细胞7402的生长能力、存活能力、恶性程度和迁移能力,提示EphA3可能是一个新的肝癌治疗靶点。 展开更多
关键词 epha3 RNA 小分子干扰 慢病毒感染 癌基因 肝细胞 7402
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1504-siRNA对EphA3表达肿瘤细胞HCT116的抑制作用研究 被引量:1
15
作者 赵亚丽 武瑞琴 +4 位作者 李海量 王洪涛 罗国兰 王健 周建光 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期272-275,共4页
目的研究原癌基因EphA3的小干扰RNA(small interfering RNA)1504-siRNA对高表达结肠癌细胞HCT116的增殖抑制作用。方法将1504-siRNA质粒用Vigofect转染试剂瞬时转染HCT116细胞,36~48 h后,收集蛋白,用Western印迹检测EphA3及AKT信号通... 目的研究原癌基因EphA3的小干扰RNA(small interfering RNA)1504-siRNA对高表达结肠癌细胞HCT116的增殖抑制作用。方法将1504-siRNA质粒用Vigofect转染试剂瞬时转染HCT116细胞,36~48 h后,收集蛋白,用Western印迹检测EphA3及AKT信号通路中的蛋白分子表达,收集细胞,进行噻唑蓝(MTT)实验、平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验。结果 1504-siRNA能抑制HCT116细胞的EphA3蛋白水平,抑制其增殖、平板克隆和软琼脂克隆的形成,抑制pmTOR、p-c-Raf、pAKT、p-4ebp1等信号分子的表达。结论 1504-siRNA抑制HCT116细胞的增殖、存活能力和恶性程度,这可能是通过抑制AKT信号通路来实现,它有望作为肿瘤治疗的候选药物。 展开更多
关键词 epha3 结肠肿瘤 增殖 RNA 小分子干扰 HCT116细胞
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滩羊Eph A3基因克隆表达分析及生物信息学初步研究 被引量:4
16
作者 徐芹芹 刘玉芳 +1 位作者 康晓龙 方美英 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期33-38,共6页
本研究以滩羊不同时期(1月龄和48月龄)被毛卷曲性状差异为基础,对在前期构建的消减文库中获得与滩羊被毛卷曲形成相关的重要候选基因EphA3进一步分析。首先通过PCR扩增技术获得EphA3基因的编码区CDS全长,并利用生物信息学方法分析该基... 本研究以滩羊不同时期(1月龄和48月龄)被毛卷曲性状差异为基础,对在前期构建的消减文库中获得与滩羊被毛卷曲形成相关的重要候选基因EphA3进一步分析。首先通过PCR扩增技术获得EphA3基因的编码区CDS全长,并利用生物信息学方法分析该基因所编码的蛋白结构及其在不同物种中的同源性和进化关系。结果表明:滩羊EphA3基因序列在不同物种间高度保守,在皮肤组织中表达量最高;该基因在48月龄滩羊皮肤组织中的表达量显著高于1月龄个体(P<0.05)。EphA3基因可能是影响不同时期滩羊被毛卷曲差异的候选基因之一。 展开更多
关键词 epha3 生物信息学分析 卷曲被毛 滩羊
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贝伐单抗对人眼脉络膜黑色素瘤MUM-2B细胞血管生成拟态的影响
17
作者 周钰娟 丁瑞麟 +3 位作者 彭红菊 李源 倪来超 文庆莲 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第2期197-202,共6页
目的:通过体内外实验探讨贝伐单抗对人眼脉络膜黑色素瘤细胞(MUM-2B)血管生成拟态的影响及可能相关的分子通路。方法:通过不同浓度的贝伐单抗(0,0.1,1,2,3 mg/mL)处理MUM-2B细胞,观察其对MUM-2B细胞成管能力的影响。通过CCK-8法及Transw... 目的:通过体内外实验探讨贝伐单抗对人眼脉络膜黑色素瘤细胞(MUM-2B)血管生成拟态的影响及可能相关的分子通路。方法:通过不同浓度的贝伐单抗(0,0.1,1,2,3 mg/mL)处理MUM-2B细胞,观察其对MUM-2B细胞成管能力的影响。通过CCK-8法及Transwell法检测其对MUM-2B细胞增殖及侵袭的影响。然后,建立裸鼠皮下移植瘤模型,通过不同剂量的贝伐单抗(5 mg/kg,7.5 mg/kg,10 mg/kg)干预,探究贝伐单抗对裸鼠皮下移植瘤VM形成的影响,并通过CD31/PAS免疫组化双重染色法检测VM的表达情况,免疫组化法检测HIF-1a、VE-cadherin、EphA2、PI3K蛋白表达水平变化。结果:体外实验中,不同浓度的贝伐单抗(0,0.1,1,2,3 mg/mL)处理MUM-2B细胞24小时后,对MUM-2B细胞的成管能力、增殖、侵袭能力并没有表现出明显的抑制或促进作用。实验组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在体内实验中,贝伐单抗实验组(5 mg/kg,7.5 mg/kg,10 mg/kg)与对照组相比较能显著的促进MUM-2B细胞形成VM的能力(P<0.05),且形成管道的数量与贝伐单抗的浓度呈正相关(r=0.942,P<0.05)。实验组HIF-1a、VE-cadherin、EphA2和PI3K-Akt蛋白的表达水平均明显高于对照组(P<0.05),且各分子的表达量随着贝伐单抗浓度的升高呈浓度依赖性的升高。结论:体外实验中,贝伐单抗对MUM-2B细胞的成管能力,增殖,侵袭能力并没有表现出明显的抑制或促进作用。体内实验中,贝伐单抗的使用能促进HIF-1a的表达、上调VE-cadherin/EphA2/PI3K-Akt后续的级连信号通路,从而加速VM的生成。 展开更多
关键词 贝伐单抗 人眼脉络膜黑色素瘤 血管生成拟态 增殖 侵袭 HIF-1a/VE-cadherin/EphA2/PI3K-Akt
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