Androgen Receptor Promotes Lung Cancer Metastasis by Modifying the miR23a-3p/EPHB2 Pathway

Objective This study aimed to investigate the reasons behind the lower survival rates in male lung cancer patients than in female lung cancer patients.Methods Through various techniques,such as Argonaute immunoprecipitation,luciferase assays,and ChIP,this study confirmed the positive effects of androgen receptor(AR)on lung cancer cell invasion across different in vitro cell lines and in vivo mouse models.Results The findings suggest that AR enhanced the invasion of lung cancer cells by modifying EPHB2 signals at the protein expression level,which in turn required changes in miRNA-23a-3p.Restoring miRNA-23a-3p could counteract the intensified invasion of lung cancer cells mediated by AR.Conclusion This study revealed that AR may facilitate the lung cancer matastasis by modulating miRNA-23a-3p/EPHB2 signaling and that targeting this signaling pathway could provide new approaches to inhibit lung cancer metastasis.

EphB2调控claudin-6对子宫内膜癌侵袭和转移的影响

目的探讨EphB2和claudin-6的靶向关系,观察敲低和过表达EphB2基因通过调控claudin-6对子宫内膜癌细胞生长、迁移及侵袭的影响。方法采用TCGA数据库分析EphB2在子宫内膜癌和癌旁组织中的差异表达及其与临床病理特征的关系;应用GSEA法预测EphB2可能相关的功能通路;应用TCGA数据库分析EphB2互作基因;利用体外培养子宫内膜癌细胞;采用脂质体转染法转染子宫内膜癌细胞敲低和过表达EphB2基因;采用qRT-PCR法和Western blot法检测敲低和过表达EphB2各组细胞EphB2和claudin-6表达水平;提取转染后细胞进行细胞增殖、迁移和侵袭实验;免疫组化检测EphB2和claudin-6蛋白在子宫内膜样癌中的表达。结果TCGA数据库分析543例患者显示EphB2在子宫内膜癌中高表达,claudin-6可能是EphB2最具相关性基因(R=0.6);GSEA数据库分析显示EphB2表达可能与细胞黏附和细胞连接通路相关。qRT-PCR法显示干扰后EphB2 mRNA表达:阴性对照组:1.055±0.284、siRNA-EphB2组:0.499±0.264。划痕实验法检测不同分组中癌细胞的迁移能力,干扰后划痕愈合率显示:阴性对照组:0.629±0.02、空白对照组:0.676±0.006、siRNA-EphB2组:0.352±0.009;过表达后划痕愈合率显示:空白对照组:0.151±0.012、空载体组:0.271±0.015、EphB2过表达组:0.672±0.011;敲低EphB2后claudin-6表达显著下降,细胞增殖活力明显降低,细胞侵袭能力亦受到明显抑制,差异有统计学意义(P均<0.05);过表达EphB2后claudin-6表达明显上升,细胞迁移和侵袭能力亦明显增强,差异有统计学意义(P均<0.05)。实验显示:EphB2和claudin-6在子宫内膜样癌(128例)和癌旁组织(28例)中的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EphB2在子宫内膜癌中高表达,EphB2基因敲低和过表达影响子宫内膜癌细胞的生长及恶性生物学行为,其机制可能与调控claudin-6表达水平有关。

电针对大脑中动脉梗塞大鼠EphrinB2/EphB2信号通路上突触重塑相关因子的影响

目的:观察电针对大脑中动脉梗塞模型(MCAO)大鼠促红细胞生成素产生肝细胞配体-B2(erythropoietin-producing hepatocyte receptor interacting protein-B2,Ephrin B2)/受体-B2(erythropoietin-producing hepatocyte receptor-B2,Eph B2)信号通路上突触重塑相关因子表达的影响,以期揭示针刺治疗脑缺血的可能机制。方法:120只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、穴位组、非穴位组(n=30);各组再分为术后3d,14d及21d三个亚组(n=10)。除假手术组外,其余各组大鼠用Zea-longa线栓法制备MCAO模型;穴位组和非穴组电针治疗,其余两组只绑不针。对大鼠行神经功能评分,采用免疫组化、免疫荧光和蛋白质印迹法行相应指标检测。结果:模型组术后3d梗死灶周Ephrin B2/Eph B2表达明显减少,但随时间呈递增趋势,21d恢复到假手术水平。穴位组较模型组和非穴组增加更明显,术后21d表达高于假手术组(P<0.05)。Ras相关的C3肉毒毒素底物1(ras-related C3 botulinum toxin substrate-1,Rac-1)和微管相关蛋白-2(microtubule-associated protein-2,MAP-2)的表达随时间逐渐递增,且均与神经功能改善相吻合;其中穴位组增加最明显,术后21d超假手术组水平(P<0.05)。结论:Ephrin B2/Eph B2信号通路参与了MCAO大鼠突触重塑,电针肝俞、肾俞穴可能通过激活Ephrin B2/Eph B2信号通路,促进MCAO大鼠神经功能的康复。

梅山猪胚胎附植期EphB2的组织表达及RNA-seq分析

猪产仔数是一个重要的经济和繁殖性状,而胚胎附植是影响猪产仔数的重要因素。为了研究促红细胞生成素产生肝细胞受体B2(Eph B2)对猪胚胎附植过程中子宫内膜迁移和粘附活动的影响,文章以太湖流域梅山猪为研究对象,利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法,检测Eph B2基因在梅山猪胚胎附植前、中、后期子宫内膜附植点/非附植点和卵巢组织的m RNA和蛋白表达谱,并用转录组测序(RNA-seq)方法分析了不同附植时期子宫内膜附植点和卵巢组织的差异表达基因。q RT-PCR和Western blot结果表明,Eph B2在胚胎附植前、中、后期子宫内膜附植点和非附植点的m RNA和蛋白均呈现先升高后降低的表达趋势,且附植中期的表达量显著高于前期和后期(P<0.01);Eph B2在附植前、中、后期卵巢中的m RNA和蛋白表达趋势则相反,为先降低后升高,且不同时期间表达差异显著(P<0.05)。RNA-seq结果表明,Eph B2在子宫内膜附植点的m RNA表达,附植中期极显著高于附植前期(P<0.01);Eph B2在卵巢的m RNA表达,附植中期显著高于附植后期(P<0.05)。综上所述,Eph B2很可能在猪胚胎附植过程中发挥着重要的调控作用,为潜在的猪产仔数性状候选基因。

骨髓间充质干细胞移植对慢性脑缺血大鼠认知功能及海马CA_1区EphB2的影响

目的观察骨髓间充质干细胞移植(mesenchymal stem cells,MSCs)对慢性脑缺血大鼠认知功能及海马CA1区EphB2的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、实验组(2VO模型+MSCs干预),选8、10、12w 3个时间点,采用双侧颈总动脉永久性阻断法(2VO)建立慢性脑缺血模型,通过Morris水迷宫检测各组大鼠的认知功能,同时用免疫组织化学的方法和Western blot检测大鼠海马CA1区EphB2的表达。结果模型组和实验组大鼠与假手术组相比逃避潜伏期明显延长,在同一时间点实验组逃避潜伏期较模型组明显缩短(P<0.05),实验组海马CA1区EphB2的表达较模型组增多(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞移植能明显改善大鼠慢性脑缺血所致的认知功能障碍,其机制可能是通过升高EphB2的表达而改善学习记忆能力。

基于EphB2/Ephrin-B1/JNK通路探讨复方苦参汤调控溃疡性结肠炎的内在机制研究

目的:研究复方苦参汤对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用及其机制。方法:选取健康雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、美沙拉嗪阳性对照组及复方苦参汤低、中、高剂量组,每组10只,除正常对照组外其余各组均采用三硝基苯磺酸+乙醇制备溃疡性结肠炎大鼠模型,于造模成功后给予相应药物进行治疗,观察大鼠的一般情况及疾病活动指数(DAI),检测血清TNF-α、IL-6、IL-4、IL-1β含量,取结肠组织观察其组织病理学变化,检测结肠组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)、一氧化氮合酶(iNOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,RT-PCR检测大鼠结肠组织EphB2、Ephrin-B1、JNK mRNA表达,Western blot检测大鼠结肠组织EphB2、Ephrin-B1、JNK蛋白表达。结果:与模型组比较,美沙拉嗪组及复方苦参汤中、高剂量组大鼠饮食、毛发光泽及活动情况明显改善,DAI评分显著降低(P<0.05);结肠黏膜趋向完整,溃疡缺损程度明显减轻,黏膜下层和肌层轻度水肿,炎细胞浸润明显减少;血清IL-4及结肠组织SOD、GSH-Px水平显著升高,血清TNF-α、IL-6、IL-1β及结肠组织MDA、MPO、iNOS水平显著降低(P<0.05)。结论:复方苦参汤可抑制UC大鼠的炎性因子水平及氧化应激反应,进而对溃疡性结肠炎大鼠起到治疗作用,其机制可能与调控EphB2/Ephrin-B1/JNK通路有关。

BRAF和EphB2在人结直肠锯齿状腺瘤中的表达及意义

目的:探讨鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1(v-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1,BRAF)和生促红素人肝细胞蛋白(erythropoietin-producing hepatoma cell line B2,EphB2)在人结直肠锯齿状腺瘤中的表达及其意义。方法:收集滨州医学院附属医院1996年1月至2008年5月10例正常结直肠肠黏膜、21例增生性息肉、22例锯齿状腺瘤、55例腺瘤性息肉(18例管状腺瘤、16例管状绒毛状腺瘤、21例绒毛状腺瘤)石蜡标本。免疫组织化学法检测BRAF和EphB2蛋白的表达量,同时观察蛋白的表达部位。结果:增生性息肉中BRAF蛋白阳性细胞多位于隐窝中下区域,腺瘤性息肉的阳性细胞多表达位于隐窝上部区域,而锯齿状腺瘤阳性细胞多表达于隐窝全层。锯齿状腺瘤与腺瘤性息肉的BRAF蛋白表达量相近[(0.129±0.030)vs(0.130±0.026),P>0.05],但远高于增生性息肉[(0.129±0.030)vs(0.102±0.014),P<0.01];锯齿状腺瘤、管状腺瘤、管状绒毛状腺瘤、绒毛状腺瘤之间BRAF蛋白表达量差异无统计学意义[(0.129±0.030)vs(0.116±0.019),(0.119±0.037),(0.122±0.008),P>0.05]。增生性息肉中EphB2蛋白阳性细胞多位于隐窝中下区域细胞膜上,腺瘤性息肉EphB2蛋白阳性细胞位于隐窝上部,而锯齿状腺瘤EphB2蛋白阳性细胞表达于隐窝全层。锯齿状腺瘤与腺瘤性息肉的EphB2蛋白表达量相近[(0.138±0.024)vs(0.139±0.025),P>0.05],而远高于增生性息肉[(0.138±0.024)vs(0.169±0.018),P<0.01];锯齿状腺瘤与管状腺瘤、管状绒毛状腺瘤、绒毛状腺瘤间EphB2蛋白表达量无区别[(0.138±0.024)vs(0.143±0.027),(0.139±0.028),(0.133±0.021),P>0.05]。结论:BRAF和EphB2蛋白在增生性息肉、腺瘤性息肉中隐窝部分区域表达,而在锯齿状腺瘤中隐窝全层表达,提示锯齿状腺瘤是一类独立的不同于腺瘤性息肉的结直肠肿瘤。

EphB2在脑膜瘤中表达与血管生成关系的研究

目的 研究酪氨酸激酶EphB2在脑膜瘤中如何表达 ,以及与血管生成的关系 ,并探讨血管生成的可能发生机制。方法 收集 4 4例脑膜瘤病人手术切除的肿瘤标本和作为对照的 14例正常脑膜标本 ,经 4 %的福尔马林固定、石蜡包埋。采用免疫组化的方法分析、评价EphB2在不同类型的脑膜瘤中表达情况及血管生成情况 ,并探讨它们之间的关系。结果 (1)EphB2在 4 4例脑膜瘤标本中的表达情况 :“4”级 7例 ,“3.5”级 5例 ,“3”级 6例 ,“2 .5”级 2例 ,“2”级 8例 ,“1”级 13例 ,“0”级 3例 ,平均“2 .19”级 ;(2 )EphB2在 14例正常脑膜中表达情况 :“1”级 4例 ,“0”级 10例 ;(3) 4 4例脑膜瘤标本中血管生成情况 :“4”级 2例 ,“3.5”级 3例 ,“3”级 10例 ,“2 .5”级 4例 ,“2”级 8例 ,“1”级 10例 ,“0”级 7例 ,平均“1.88”级。结论 (1)EphB2在多数脑膜瘤细胞质中表达 ;(2 )EphB2在脑膜瘤中表达与血管生成呈正相关 ,提示EphB2参与脑膜瘤血管生成。

卵巢浆液性腺癌中EphA2和EphB2的表达及意义

目的观察EphA2、EphB2在卵巢浆液性腺癌(ovarian serous adenocarcinoma,OSA)中的表达,探讨其与肿瘤FIGO分期、病理分级、复发、细胞增殖、患者预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测60例OSA中EphA2、EphB2的表达及细胞Ki-67的增殖指数。结果 (1)EphA2在60例OSA中仅有16例阳性,11例弱阳性,5例强阳性,阳性率为26.7%。(2)EphB2的阳性率为73.3%,其表达与FIGO分期相关,Ⅲ+Ⅳ期组的阳性表达高于Ⅰ+Ⅱ期组(P<0.001);与病理分级相关,高级别组的阳性表达高于低级别组(P=0.017);与复发无关(P=0.109);与患者预后相关,EphB2阳性组的生存率低于阴性组(P=0.046)。(3)Ki-67增殖指数为60%,EphB2的表达与Ki-67增殖指数呈正相关(P=0.046)。结论 EphB2可能促进OSA细胞的生长增殖,其高表达提示患者预后不良。

左、右半结肠癌组织中EphB2的表达及其与预后相关性分析

目的:探讨人结肠癌组织中EphB2蛋白的表达情况,对比分析左、右半结肠癌组织中EphB2蛋白的表达并分析其与预后相关性。方法:选取180例结肠癌标本,应用免疫组化检测结肠癌组织及癌旁组织中EphB2蛋白的表达,并对病理参数及预后情况进行分析。结果:左半结肠癌组织中,EphB2与组织学分级、淋巴结转移及Dukes分期呈负相关;右半结肠癌组织中,EphB2表达与组织学分级、淋巴结转移等均无关。左半结肠癌患者5年生存率明显高于右半结肠癌患者;右半结肠癌患者EphB2表达水平与总体生存之间无关;而左半结肠癌患者低水平EphB2预示着预后不佳。结论:左、右半结肠癌组织中,EphB2表达与组织学分级、淋巴结转移及Dukes分期呈负相关,且左半结肠癌患者低水平EphB2预示着预后不佳。

锯齿状息肉癌变途径中EphB2及EphrinB2的表达及作用

目的:探讨EphB2及其配体EphrinB2在锯齿状息肉癌变过程中的作用.方法:应用免疫组织化学方法检测受体EphB2及其配体EphrinB2在72例结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织,64例锯齿状息肉和33例正常结肠组织中的表达.结果:EphB2受体和EphrinB2配体蛋白阳性表达均主要位于胞膜和胞质中.EphB2阳性表达部位主要位于隐窝基底部和中下2/3区域;绝大多数正常结肠黏膜中EphB2表达阳性,其在CRC组织中表达水平低于在锯齿状息肉及正常结肠组织;EphrinB2阳性表达主要位于隐窝全层,在锯齿状息肉和CRC中的表达呈递增趋势,在正常黏膜组织中的表达阳性率低于在CRC组织和锯齿状息肉中的表达.结论:EphB2在锯齿状息肉癌变过程中其抑制作用,而其配体EphrinB2高水平表达可能促进锯齿状息肉的恶变及肿瘤的发生.

EphB2受体在胃癌中的表达变化及其与转移的关系

目的:观察EphB2在胃癌和转移灶中的表达,并探讨它们在肿瘤发生、发展和转移中的作用以及与胃癌的临床病理参数的关系。方法:采用组织芯片和免疫组化方法检测EphB2在正常粘膜(n=71)、原发癌(n=71)、淋巴结转移癌(n=71)和远处转移癌(n=26)中的表达,比较它们在原发灶和正常组织、转移灶的表达差异。结果:EphB2的表达随肿瘤的发生和进展逐渐下降。EphB2在正常粘膜、原发癌、淋巴结转移和器官远处转移中的表达率分别为:83.1%(59/71)、60.6%(43/71)、43.7%(31/71)和26.9%(7/26)。正常粘膜组织中EphB2的表达率显著高于肿瘤细胞中的表达(P<0.01)。脏器转移中的表达又显著低于原发癌中的表达(P=0.003)。原发灶和转移灶中EphB2表达不一致的病例数与性别(男性)和浸润深度高度相关(P<0.05)。结论:肿瘤转移是一个遗传改变逐步积累的结果,EphB2表达下调在胃癌发展及转移中可能起重要作用。

EphB2蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的:研究EphB2蛋白在不同临床病理分期的结直肠癌组织以及在不同转移能力的结直肠癌细胞株中的表达差异,并初步探讨EphB2对结直肠癌作用的相关机制。方法:运用免疫组织化学法检测43例结直肠癌和10例正常组织中EphB2受体的表达及间质微血管密度(microvascular density,MVD);体外培养SW480、HT29、HCT116和LoVo等4种具有不同转移能力的结直肠癌细胞株,Western印迹法检测EphB2蛋白的表达,RT-PCR法检测EphB2 mRNA水平的表达。结果:EphB2在大多数结直肠癌细胞质中表达,EphB2受体的表达和肿瘤的浸润深度以及远处转移呈负相关,与肿瘤组织的分化程度呈正相关,EphB2蛋白的表达与肿瘤的MVD呈正相关;高转移性结直肠癌细胞株HCT116和LoVo中EphB2蛋白及EphB2 mRNA的表达均较低转移性细胞株SW480和HT29明显降低。结论:EphB2表达对肿瘤的生长可能起抑制作用,EphB2表达的减少能促进肿瘤的形成和演进。影响肿瘤血管形成的功能可能是EphB2抑制肿瘤生长机制中的一种。

EphB2受体及其配体Ephrin-B在结直肠癌中的研究进展

EphB2受体及其配体Ephrin-B系统的功能失调将导致肠上皮具有增殖能力细胞沿着隐窝-鞭毛轴杂乱排列;而且在结直肠癌患者癌组织中,EphB2的表达越低,浸润深度越深,分化越差,远处转移越多,存活率越低;体外实验也证明其高表达在癌细胞菌落形成实验可抑制癌细胞的生长,配体Ephrin-B对EphB2受体的激活可降低肿瘤细胞的侵袭性.在本文中我们将就EphB2/Ephrin-B系统关于肠上皮干细胞迁徙导向的调控,及其在大肠癌的多步癌变过程中的抑制作用的最新研究进展加以综述.

基于TCGA讨论EPHB2表达与子宫内膜癌预后的关系

目的讨论子宫内膜癌中EPHB2基因的表达与一般临床特征及预后的相关性。方法利用TCGA数据库探讨EPHB2在子宫内膜癌中的作用。通过Wilcoxon检验和逻辑回归的方法评估EPHB2基因表达与一些临床性状的关系。Cox回归和Kaplan-Meier法评估EPHB2基因的表达和一些关键的临床病理特征与总体生存率的关系。最后再利用TCGA进行基因集富集分析。结果TCGA证实与正常内膜相比,EPHB2在子宫内膜癌组织中表达增高(P<0.05)。EPHB2高表达与肿瘤分期(Ⅲ/ⅣvsⅠ/Ⅱ,OR=2.58),肿瘤分级(高级别vs低级别,OR=2.41),组织学类型(浆液性腺癌/浆液性与子宫内膜样混合型腺癌vs子宫内膜样腺癌,OR=13.86)及腹水细胞学(阳性vs阴性,OR=4.56)等相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示EPHB2基因高表达较低表达预后差,且单因素及多因素分析进一步证明EPHB2表达增高可作为独立的预后因子预测子宫内膜癌的不良结局(P<0.05)。基因集富集分析结果显示EPHB2表达增高可能促进轴突导向过程,而表达减低可能与α亚麻酸代谢相关。结论EPHB2表达增高可能与子宫内膜癌的发展相关,将来有希望成为预测子宫内膜癌不良结局的分子标志物。

EphB2受体N端结构域蛋白的纯化及其对胃癌细胞蛋白酪氨酸磷酸化的作用

EphB2受体在细胞生长、分化和信号转导过程中具有重要作用,为深入研究其在胃癌的信号转导中的作用及功能,检测了EphB2受体刺激胃癌细胞后的酪氨酸磷酸化的变化。利用Ni-NTA金属螯合亲和层析法将在E.coli中融合表达的重组蛋白EphB2受体的N端球状区进行纯化,并经Western印迹进行确证和ELISA方法检测该蛋白活性,得到纯度95％以上的融合蛋白,并有结合其天然配体的活性,EphB2受体诱导可以使胃癌细胞发生明显的蛋白质酪氨酸磷酸化的改变,即通过反向刺激其ephrinB配体引起了胃癌细胞信号转导通路中一些信号分子酪氨酸磷酸化的改变。

EphB2蛋白在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨EphB2蛋白在胰腺癌中的表达同肿瘤临床病理特征之间的关系。方法:选取中国医科大学盛京医院病理科2003年2月至2006年2月期间外科手术切除胰腺癌标本24例,胆管下段癌行胰十二指肠切除术而切除的正常胰腺组织6例,应用免疫组化方法,检测胰腺癌组织及正常胰腺组织标本中EphB2蛋白的表达情况。结果:EphB2蛋白表达免疫组织化学检测结果显示,阳性染色主要定位于细胞胞浆,呈棕黄色或棕褐色。EphB2蛋白在胰腺癌组织中表达阳性率为66.67%(16/24),评分值为3.08±1.349,明显高于正常组织中的表达16.67%(1/6),评分值为1.17±1.169,差异有统计学意义(P<0.01)。在胰腺癌各病理分级组之间的差别无统计学意义(P>0.05)。淋巴结转移组的EphB2蛋白表达高于淋巴结未转移组,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:EphB2蛋白可能与胰腺癌的发生发展相关。且可能参与了胰腺癌的转移。

EphB2在结肠癌组织中的表达及其与血管生成的关系

背景与目的:研究酪氨酸蛋白激酶受体EphB2在结肠癌组织中的表达,及其与肿瘤血管生成之间的关系,探讨EphB2在结肠癌发生发展中的作用及其相关机制。材料与方法:运用免疫组化法检测43例结肠癌和10例正常结肠组织中EphB2的表达及间质微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:EphB2在大多数结肠癌细胞质中表达,EphB2的表达和结肠癌的浸润深度以及远处转移呈负相关(P<0.01),与结肠癌组织的分化程度呈正相关(P<0.01)。EphB2的表达与结肠癌的MVD呈正相关(r=0.54,P<0.05)。结论:EphB2对于肿瘤的生长可能起抑制作用,EphB2表达的减少可能促进了肿瘤的形成和演进。EphB2抑制肿瘤生长的机制可能与其影响肿瘤血管的生成相关。