基于EphA1/EphrinA1反馈环的表达探讨BrMC调控子宫腺肌病的机制

目的:探究肝配蛋白A受体1(EphA1)及其配体(EphrinA1)在子宫腺肌病(AM)患者相关组织中的表达情况,并观察8-溴-7-甲氧基白杨素(BrMC)处理对子宫腺肌细胞的影响。方法:采用HE染色对AM患者子宫肌层异位内膜组织、非异位内膜组织及子宫肌瘤患者正常内膜组织的形态学变化进行观察;采用免疫组织化学染色检测3种组织中EphA1与EphrinA1表达情况;分离并培养子宫腺肌细胞,分别使用浓度为2.5、5、10μmol/L BrMC的培养基处理细胞,采用MTT法检测不同处理时间后细胞存活率,处理培养48 h后收集细胞,采用TUNEL染色与Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;采用细胞划痕实验检测细胞迁移;采用RT-qPCR和Western blot检测细胞中EphA1、EphrinA1 mRNA与蛋白的表达水平。结果:AM患者异位和非异位子宫内膜组织中EphA1、EphrinA1表达水平均高于对照组(P<0.05);经鉴定发现成功分离子宫腺肌细胞,波形蛋白与α-平滑肌肌动蛋白均表达;经不同浓度BrMC处理后,与对照组比较,各处理组子宫腺肌细胞存活率下降,凋亡率增加,细胞迁移率降低;细胞内EphA1、EphrinA1的mRNA与蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论:EphA1与EphrinA1在子宫腺肌病内膜组织中表达水平升高,经BrMC处理子宫腺肌细胞后,抑制了细胞生长、迁移并促进细胞凋亡,其机制可能与调控EphA1/EphrinA1反馈环相关。

去甲斑蝥素对肝癌细胞EphA2/EphrinA1和E-cadherin表达的影响

目的 探讨去甲斑蝥素(NCTD)对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭迁移作用及对EphA2/EphrinA1和E-cadherin表达的影响。方法 常规培养SMMC-7721细胞,取对数生长期细胞分为对照组及NCTD高、中、低剂量组,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,qRT-PCR和Western Blot分别检测细胞EphA2/EphrinA1和E-cadherin mRNA及蛋白质的表达情况。结果 NCTD明显抑制细胞侵袭和迁移,差异具有统计学意义(P<0.05);NCTD可以使肝癌细胞中EphA2、EphrinA1 mRNA及蛋白的表达量降低,E-cadherin mRNA和蛋白表达量升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论去甲斑蝥素对人肝癌SMMC7721细胞迁移和侵袭有一定的抑制作用,其机制可能与NCTD下调EphA2/EphrinA1基因及蛋白的表达,引起E-cadherin上调,抑制肿瘤细胞EMT相关。

肾癌中EphA2/EphrinA1和E-cadherin的表达及其意义

目的:探讨EphA2/EphrinA1和E-cadherin在肾癌组织中的表达及与肾癌临床病理特征的关系。方法:利用免疫组织化学法检测68例肾癌组织、24例正常肾组织中EphA2、EphrinA1和E-cadherin的表达;并采用流式细胞术对上述三种蛋白进行定量分析,采用SPSS13.0进行统计学处理。结果:肾癌组织中EphA2、EphrinA1的表达明显高于正常肾组织(P<0.01);E-cadherin的表达明显低于正常肾组织(P<0.01)。在肾癌组织中,肿瘤高分级组EphA2、EphrinA1蛋白的表达水平(IHC、FCM)显著高于低分级组(P<0.01,P<0.05),而E-cadherin蛋白的表达(IHC)显著低于低分级组(P<0.01);肿瘤高分期组EphA2、EphrinA1蛋白的表达水平(IHC、FCM)显著高于低分期组(P<0.01,P<0.05),而E-cadherin蛋白的表达(IHC)显著低于低分期组(P<0.01),淋巴结转移组EphA2、EphrinA1蛋白的表达(IHC、FCM)显著高于无淋巴结转移组(P<0.05),而E-cadherin蛋白的表达(IHC)显著低于无淋巴结转移组(P<0.05)。免疫组织化学显示EphA2与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.483,P<0.01),EphrinA1与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.414,P<0.01),EphA2与EphrinA1蛋白的表达呈显著正相关(r=0.906,P<0.01)。结论:EphA2/EphrinA1与E-cadherin蛋白表达异常可能共同参与了肾癌的发生、发展与转移;联合检测三种蛋白对于评价肾癌的恶性程度、判断其转移潜能具有一定的参考价值。

EphA2/EphrinA1在胃癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的探讨EphA2与其配体EphrinA1在胃癌组织中的表达及与肿瘤血管生成的关系。方法利用免疫组织化学法检测82例胃癌手术切除标本中癌组织、癌旁组织及正常胃黏膜中EphA2、EphrinA1的表达,并采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析EphA2、EphrinA1的表达与MVD之间的相关性及其与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织中EphA2、EphrinA1的表达及MVD显著高于癌旁组织及正常胃黏膜(P<0.01);EphA2、Eph-rinA1表达水平及MVD值与胃癌的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),MVD值还与肿瘤直径有关(P<0.05);Spearman等级相关分析表明,EphA2、EphrinA1表达分别与MVD呈显著正相关(r=0.485,P<0.01;r=0.512,P<0.01)。结论EphA2及其配体EphrinA1在胃癌组织中特异性高表达,可能参与肿瘤血管的生成,在胃癌的发病及恶性进展中发挥重要作用。

人脑星形细胞瘤中EphA2-ephrinA1、CD105的表达及与预后的关系

目的检测酪氨酸激酶受体EphA2及配体ephrinA1在人脑星形细胞瘤中的表达,并探讨其与脑星形细胞瘤预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测55例手术切除人脑星形细胞瘤组织及15例正常脑组织中EphA2、ephrinA1的表达情况,并采用CD105抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。结果 EphA2(51/55)、CD105-MVD(34.26±12.61)在星形细胞瘤中阳性表达明显高于正常脑组织,两者差异有统计学意义(P<0.01);而且随着星形细胞瘤病理级别越高,EphA2及CD105-MVD蛋白染色强度和阳性细胞数均明显升高,ephrinA1则具有相反的趋势,随星形细胞瘤级别越低ephrinA1表达越高。EphA2表达与CD105-MVD呈显著正相关(r=0.713,P<0.05),ephrinA1表达与CD105-MVD呈显著负相关(r=-0.772,P<0.05),EphA2的表达与ephrinA1的表达呈显著负相关(r=-0.912,P<0.05)。EphA2、CD105-MVD和ephrinA1均是重要的星形细胞瘤预后相关风险因子。EphA2、CD105-MVD阳性ephrinA1阴性的星形细胞瘤患者较三者均阳性或三者均阴性或EphA2、CD105-MVD阴性ephrinA1阳性的患者生存期明显缩短。结论 EphA2及CD105-MVD在星形细胞瘤中特异性高表达、ephrinA1特异性低表达与星形细胞瘤不良预后密切相关,EphA2和ephrinA1有望成为脑星形细胞瘤诊断和特异性靶向治疗及预后评估的新靶点。

EphA2及其配体EphrinA1在恶性脑胶质瘤中的表达及与血管生成的关系

目的：检测酪氨酸激酶受体EphA2及其配体EphrinAl在恶性脑胶质瘤中的表达，并探讨其与胶质瘤血管生成的关系。方法：采用免疫组织化学S-P法检测62例胶质瘤组织及8例JY-常脑组织中EphA2、EphrinAl的表达情况，并采用CD105抗体标记微血管内皮细胞，计算微血管密度（micmvesseldensity，MVD）。探讨EphA2、EphrinAl的表达水平与胶质瘤的微血管生成之间可能存在的关系。结果：EphA2、MVD在胶质瘤中阳性表达明显高于正常脑组织，二者差异显著（P〈0．01）。而且随着肿瘤恶性程度增加，EphA2及MVD蛋白染色强度和阳性细胞数均明显升高，高级别脑胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ）中EphA2及MVD强阳性表达明显高于低级别胶质瘤组，差异有显著统计学意义（P〈0．01）。EphrinAl则具有相反的趋势，在大多数恶性脑胶质瘤中呈低水平表达，在低级别胶质瘤和正常组织中呈较高水平表达，且胶质瘤级别越低EphrinAl表达越高。EphA2表达与MVD呈显著正相关（r=0．713，P〈0．01），EphrinAl表达与MVD呈显著负相关（r=-0．772，P〈0．01），EphA2的表达与EphrinAl呈显著负相关（r=-0．912，P〈0．01）。结论：EphA2在恶性脑胶质瘤中特异性高表达、EphrinA1特异性低表达与胶质瘤的侵袭性和恶性程度密切相关．且EphA2过表达和EphrinA1的缺陷表达可能协同促进胶质瘤组织新生血管的生成，在胶质瘤的发病及恶性进展中发挥重要作用。

EphA2/EphrinA1在胃癌中的表达及其意义

目的:探讨EphA2及其配体EphrinA1在胃癌组织中的表达及与胃癌临床病理特征的关系。方法:利用免疫组织化学法检测82例胃癌手术切除标本的癌组织、癌旁组织及正常胃粘膜内EphA2、EphrinA1和E-cadherin的表达;并采用流式细胞术对其中随机选取的45例标本进行上述三种蛋白的定量分析,采用SPSS软件进行统计学处理。结果:胃癌组织中EphA2、EphrinA1的表达明显高于癌旁组织及正常胃粘膜(P<0.01),而癌旁组织与正常胃粘膜之间无显著性差异(P>0.05);E-cadherin在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织和正常胃粘膜(P<0.01),而癌旁组织与正常胃粘膜间无显著性差异(P>0.05)。在胃癌组织中,随分化程度的降低,EphA2、EphrinA1蛋白的表达均显著升高(P<0.05),而E-cadherin蛋白的表达则显著降低(P<0.05);随浸润深度的增加,EphA2、EphrinA1蛋白的表达均显著升高(P<0.05),而E-cadherin蛋白的表达显著降低(P<0.05);淋巴结转移组中EphA2、EphrinA1蛋白的表达显著高于无淋巴结转移组(P<0.05),而E-cadherin蛋白的表达则显著低于无淋巴结转移组(P<0.05);EphA2、EphrinA1和E-cadherin蛋白的表达与肿瘤直径、患者的性别和年龄无关(P>0.05)。EphA2与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.231,P<0.01),EphrinA1与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.403,P<0.01),EphA2与EphrinA1蛋白的表达呈显著正相关(r=0.707,P<0.01)。结论:EphA2/EphrinA1与E-cadherin蛋白表达异常可能共同参与了胃癌的发生、发展与转移;联合检测三种蛋白对于评价胃癌的恶性程度、判断其转移潜能具有一定的参考价值。

促红细胞生成素肝细胞A2受体及其配子ephrinA1与恶性肿瘤关系的研究进展

促红细胞生成素肝细胞(EphA2)及其配体ephrinA1的表达、功能及其在肿瘤细胞中的信号转导与多种恶性肿瘤发生发展密切相关,EphA2和ephrinA1的表达受肿瘤细胞种类和微环境的影响,进而诱导肿瘤细胞及相关细胞信号转导,产生相应的生物学行为。EphA2、ephrinA1系统有望成为恶性肿瘤药物治疗的新靶点。

EphrinA1、ERα和ERβ在乳腺癌中的表达及其意义

目的:研究乳腺癌中EphrinA1、ERα和ERβ蛋白的表达及其意义。方法:用免疫组织化学SP法检测130例乳腺癌组织中EphrinA1、ERα及ERβ蛋白的表达水平,研究其与各临床病理因素的关系。结果:130例乳腺癌组织中EphrinA1、ERα和ERβ的阳性率分别为59.23%、63.08%和53.08%。EphrinA1蛋白在乳腺癌的阳性表达率与临床分期、淋巴结转移和组织学分级显著相关(P<0.05);ERα蛋白阳性表达率与各临床病理因素均无显著相关(P>0.05);ERβ蛋白的阳性表达与组织学分级显著相关(P<0.05)。EphrinA1在乳腺癌中表达与ERα表达无显著相关(P>0.05);EphrinA1蛋白在乳腺癌中表达与ERβ蛋白显著相关(P<0.05)。结论:EphrinA1、ERα和ERβ可能在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用。联合检测可评估乳腺癌的生物学行为,并指导临床用药和预测预后。

EphA2/ephrinA1与人脑胶质瘤发生的关系及靶向治疗潜能探讨

恶性脑胶质瘤发生发展同酪氨酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinases,RTK)受体EphA2及其配体ephrinA1的表达功能与肿瘤细胞中的信号转导密切相关,EphA2和ephrinA1的表达受肿瘤细胞种类和微环境的影响,进而诱导肿瘤细胞及相关细胞信号转导,产生相应的生物学行为。EphA2、ephrinA1系统有望成为恶性脑胶质瘤药物治疗的新靶点。

EphrinA1-Fc对人肾透明细胞癌786-O细胞EphA2和ERK表达影响的研究

目的:探讨EphrinA1-Fc对人肾透明细胞癌786-O细胞系促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化程度的影响。方法:应用可溶性配体EphrinA1-Fc干预人肾透明细胞癌786-O细胞系,采用Wstern blot方法分析不同时间点细胞内EphA2和ERK1/2的磷酸化程度。结果:EphrinA1-Fc干预5、10、30、60 min后,p-EphA2、p-ERK的相对表达量逐渐增加(F=9.392,P=0.025;F=4.428,P=0.041),p-EphA2、p-ERK在EphrinA1-Fc干预前均未见表达。结论:Eph rinA1-Fc抑制肿瘤转移复发的可能机制之一是其促使肾透明细胞癌786-O细胞EphA2磷酸化而导致其降解实现。

大鼠口腔鳞状细胞癌组织中EphA2、EphrinA1和E-cadherin的表达

目的:检测大鼠口腔鳞状细胞癌发生及演变组织中EphA2、EphrinA1和E-cadherin的表达。方法:采用免疫组化SP法检测大鼠腭部的7例正常黏膜、14例上皮单纯性增生黏膜、6例上皮轻度异常增生黏膜、10例上皮中度异常增生黏膜、19例上皮重度异常增生黏膜和14例口腔鳞状细胞癌黏膜组织中EphA2、EphrinA1和E-cadher-in的表达。结果:随正常黏膜到口腔鳞状细胞癌的发生演变,EphA2和EphrinA1的表达呈升高的趋势,E-cadherin的表达呈降低的趋势(F=35.903、101.757和65.409,P<0.001)。口腔鳞状细胞癌组织中EphA2与EphrinA1的表达呈正相关(r=0.708,P=0.015),与E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.531,P=0.004);EphrinA1与E-cad-herin的表达呈负相关(r=-0.596,P<0.001)。结论:EphA2、EphrinA1和E-cadherin可能共同参与了口腔鳞状细胞癌的发生演变。

EphrinA1在输卵管妊娠组织中的表达

目的研究EphrinA1在输卵管妊娠组织中的表达。方法 14例输卵管壶腹部妊娠组织分为种植部位组(n=14)和非种植部位组(n=14),对照组为分泌期输卵管壶腹部组织(n=12),应用免疫组化法和逆转录聚合酶链反应法检测3组组织中EphrinA1蛋白和mRNA的表达。结果 EphrinA1表达于输卵管上皮细胞及种植部位滋养细胞的胞浆,EphrinA1蛋白及mRNA在输卵管妊娠种植部位表达明显低于非种植部位和分泌期输卵管壶腹部对照组(P<0.05)。结论 EphrinA1在输卵管妊娠种植部位的低表达可能与输卵管妊娠发生有关。

EphrinA1在肝细胞癌患者内皮祖细胞中的表达及其临床意义

目的了解肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）患者外周血中手术前后内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）的数量及其内包含的EphrinA1 mRNA的表达变化情况和临床意义。方法应用流式细胞术（FCM）检测手术前组、手术后组和健康对照组外周血中EPCs的含量，同时分离培养三组研究对象外周血中的EPCs，用RT—PCR检测EPCs上EphrinAl的表达情况，进行统计学分析。结果肝癌患者手术前组外周血中EPCs的数量明显高于手术后组和健康对照组（P〈0．05），EphrinA1在肝癌患者手术前组外周血EPCs中存在表达，明显高于手术后组和健康埘照组（P〈0．05），而在手术后组和健康组问差异无统计学意义。结论肝癌患者外周血中的EPCs明显增加，同时其内的EphfinA1表达增高，提示EphrinA1可能在EPCs的增殖动员中起到重要作用．

包裹EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米粒的制备方法及特性研究

目的制备EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米颗粒系统,检测其物理性能。方法制备EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米颗粒系统并检测颗粒大小、形态、包装容量、包装效率、稳定性、包裹方式。结果 EphrinA1-PE38/GMCSF壳聚糖纳米颗粒大小50-100nm,类似球形,分布较为均匀,呈聚集团块状,4℃条件下状态稳定。电泳显示纳米颗粒上清中EphrinA1-PE38/GM-CSF与游离EphrinA1-PE38/GM-CSF在同一分子水平。CLSM图像证实EphrinA1-PE38/GMCSF不仅仅与其表面结合,且包裹于壳聚糖纳米颗粒内。结论 EphrinA1-PE38/GM-CSF可与壳聚糖结合形成纳米颗粒,且包装容量、包装效率、稳定性均较高。

EphrinA1-PE38/GM-CSF壳聚糖纳米粒治疗荷胶质瘤鼠原位激活树突状细胞研究

壳聚糖（chitosan）是从甲壳类生物的贝壳中提取出来的一种可生物降解的多糖，具有良好的生物相容性，对包裹的分子有很好的结合和保护作用，对生物体无毒、相容性好，且很容易制成不同途径给药的基因治疗载体［1］。在表面覆盖吐温‐80的纳米微粒，能很好地透过血‐脑屏障，对颅内肿瘤治疗具有很好前景。值得注意的是，纳米粒能够用配体进行表面修饰，如抗体片段，可进行靶向治疗。EphA2属于受体酪氨酸激酶家族，EphrinA1是其特异性的配体。在成人各种正常上皮细胞中，EphA2几乎不表达，在能够形成血管的胶质瘤中EphA2高表达明显［2］。以树突状细胞为基础的免疫治疗是一种非常有前景的新疗法，具体做法是使DCs负载肿瘤相关抗原，有效激发机体CTLs的抗肿瘤免疫反应，达到靶向性杀伤肿瘤细胞而不伤害正常细胞的目的。本研究内容主要为高性能壳聚糖包裹EphrinA1结合绿脓杆菌毒素PE38杀伤胶质细胞瘤血管生长造成肿瘤缺血、缺氧性坏死，同时联合免疫调节剂GM‐CSF在体内完成DCs抗原负载并产生DCs疫苗。

EphrinA1-caspase-3对乳腺癌细胞的体外靶向性抑制作用

目的:研究重组EphrinA1-caspase-3对体外乳腺癌细胞是否有靶向性抑制作用。方法:将重组EphrinA1-caspase-3感染人乳腺细胞,MTT法检测重组Ad-EphrinA1-caspase-3感染上清对EphA2阳性乳腺癌细胞的体外增殖的影响,采用流式细胞仪检测Ad-EphrinA1-caspase-3感染上清对乳腺癌细胞凋亡的影响,采用抗体中和实验检测感染上清中EphrinA1-caspase-3对靶细胞杀伤效应的特异性。结果:乳腺癌细胞呈贴壁生长,细胞中可见高水平的EphA2受体及EphrinA1表达。Ad-EphrinA1-caspase-3感染上清对乳腺癌细胞增殖表现出强烈的抑制作用,生长抑制率达48.9%。用流式细胞仪检测培养72h后稀释倍比为1∶1、1∶2、1∶4、1∶8、1∶16上清对应的凋亡率分别为36%、24%、18%、8%、7%,显著高于对照组凋亡率4%,且中和抗体能有效的减弱重组EphrinA1-caspase-3对EphA2阳性乳腺癌细胞的杀伤作用。结论:感染EphrinA1-caspase-3的T淋巴细胞能够对体外乳腺癌细胞起到靶向性抑制作用。

绿茶提取物对口腔鳞癌模型大鼠抗肿瘤组织中EphA2、EphrinA1和E-cadherin表达的影响

目的:观察绿茶提取物对口腔鳞癌模型大鼠抗肿瘤组织中Eph A2、Ephrin A1和E-cadherin表达的影响。方法:将45只健康Wistar大鼠分为正常对照组、模型对照组、绿茶提取物组,每组各15只,模型对照组以及绿茶提取物组给予5 g/L 4-NQO涂于口腔腭黏膜以建立口腔鳞癌模型大鼠,正常对照组不涂抹,正常饲养。绿茶提取物组于模型建立后开始给予绿茶提取物50 mg混合10 m L生理盐水,每日分2次灌胃,给药8周。其余2组给予生理盐水灌胃,剂量与使用频率和绿茶提取物组相同至实验结束。比较各组大鼠情况、组织中Eph A2、Ephrin A1和E-cadherin表达情况。结果:实验过程中严格遵守无菌操作,其中正常对照组无大鼠死亡,模型对照组大鼠4只死亡,死亡发生率为26.67%;绿茶提取物组1只死亡,死亡发生率为13.33%。治疗后,与正常对照组相比,模型对照组以及绿茶提取物组Eph A2、Ephrin A1平均光密度水平较高(P<0.05),E-cadherin平均光密度水平较低(P<0.05);与模型对照组相比,绿茶提取物组Eph A2、Ephrin A1平均光密度较低(P<0.05),E-cadherin平均光密度较高(P<0.05)。结论:绿茶提取物能够改善口腔鳞癌模型大鼠症状,阻止癌细胞生长,可能与下调癌症组织Eph A2、Ephrin A1表达水平,上调E-cadherin表达水平有关。

EphB2和EphrinB2及EphrinA1在喉癌组织中的表达及意义

目的探讨EphB2、EphrinB2和EphrinA1与喉癌发生发展的关系及探讨喉癌的发病机制。方法应用流式细胞术检测喉癌组织、癌旁组织及喉部正常黏膜组织的EphB2和EphrinA1、EphrinB2蛋白表达的含量。基因蛋白以荧光指数(FI)>1.0为阳性表达,FI≤1.0为阴性表达。结果EphB2蛋白、EphrinB2蛋白、EphrinA1蛋白在喉癌组织中的阳性表达率分别高于癌旁组织和正常喉黏膜组织(P<0.05或<0.01)。在喉癌组织中,EphB2蛋白、EphrinB2蛋白、EphrinA1蛋白在淋巴结转移组的阳性表达率分别高于无淋巴结转移组(P<0.05);临床Ⅲ、Ⅳ期组的阳性表达率分别高于临床Ⅰ、Ⅱ期组(P<0.05或<0.01)。喉癌组织中EphB2蛋白与EphrinA1蛋白、EphrinB2蛋白有多元线性回归关系,且均为正相关(P<0.01)。结论EphB2蛋白和EphrinA1、EphrinB2蛋白高表达可能与喉癌的发生、发展有关。

EphrinA1基因小干扰RNA的构建及其在Huh-7细胞中的沉默效应

目的:构建针对EphrinA1基因的发夹状RNA(ShRNA)表达载体pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA,观察其对人肝癌细胞Huh-7中EphrinA1基因表达的特异性抑制效应。方法:设计合成针对EphrinA1 mRNA的RNAi核苷酸片段,并定向克隆到pSilencer2.1-U6载体中,构建重组质粒pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA,同时构建不针对任何序列的重组质粒pSilencer2.1-EphrinA1-ScrRNA,通过脂质体介导转染入Huh-7细胞,应用逆转录聚合酶链反应检测小干扰RNA的沉默效应。结果:酶切鉴定证实pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA和pSilencer2.1-EphrinA1-ScrRNA重组质粒构建成功,转染Huh-7细胞后,pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA组EphrinA1 mRNA表达较pSilencer2.1-EphrinA1-ScrRNA组和空白对照组明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA载体的成功构建为下一步研究以EphrinA1基因为靶位点的肝细胞癌基因治疗奠定了重要的实验基础。