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模拟高住低练对大鼠红细胞相关指标和EPO基因表达的影响 被引量:18
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作者 田中 李卫平 +3 位作者 许豪文 康凯 魏红 张守正 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期395-398,共4页
目的 :研究模拟高住低练对大鼠红细胞相关指标和肾脏EPO基因表达的影响。方法 :4 8只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 :低住低练组 (LoLo) ,模拟高住低练组 (HiLo) ,高住对照组 (Hi) ,对照组 (Con) ,每组 12只。模拟高住低练组和低住低练组... 目的 :研究模拟高住低练对大鼠红细胞相关指标和肾脏EPO基因表达的影响。方法 :4 8只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 :低住低练组 (LoLo) ,模拟高住低练组 (HiLo) ,高住对照组 (Hi) ,对照组 (Con) ,每组 12只。模拟高住低练组和低住低练组进行相同的训练 ,但模拟高住低练组和高住对照组每晚在相当于 2 5 0 0米海拔高度的低压舱内居留 12~ 13小时 ,对照组和低住低练组仅在正常条件下居住 ,4周后测定大鼠红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积和肾脏EPO基因表达。结果 :模拟高住低练组大鼠红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比容明显高于低住低练组、高住组和对照组 (P <0 .0 5 ) ,高住组红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比容与对照组相比无明显差异。模拟高住低练组肾脏EPO基因表达明显高于低住低练组、高住组和对照组 (P <0 .0 5 ) ,高住组、低住低练组与对照组之间无显著差异。结论 :模拟高住低练可提高大鼠血红蛋白浓度 ,促进肾脏EPO基因表达 ,EPO基因表达的增加可能是长期低氧和运动应激累积效应的结果。 展开更多
关键词 模拟高住低练 大鼠 红细胞相关指标 epo基因 基因表达 高原训练
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牦牛EPO基因的PCR-SSCP多态性研究 被引量:9
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作者 陈雪梅 金双 +1 位作者 钟金城 马志杰 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第7期104-107,共4页
以巴州牦牛、大通牦牛和九龙牦牛为对象,对促红细胞生成素(EPO)基因用PCR-SSCP方法进行了多态性检测。结果表明:大通牦牛、巴州牦牛、九龙牦牛具有较丰富的遗传多样性,表现为AA,AB和BB3种基因型,AB为优势基因型,A为优势等位基因;经χ2... 以巴州牦牛、大通牦牛和九龙牦牛为对象,对促红细胞生成素(EPO)基因用PCR-SSCP方法进行了多态性检测。结果表明:大通牦牛、巴州牦牛、九龙牦牛具有较丰富的遗传多样性,表现为AA,AB和BB3种基因型,AB为优势基因型,A为优势等位基因;经χ2适合性检验,3个牦牛品种在该基因位点上均处于Hardy-Weinberg平衡状态。同时发现随着海拔高度的增加,A等位基因频率逐渐升高,BB型的频率则降低,群体杂合度和多态信息含量也逐渐降低,这种变化可能与牦牛对低氧的适应能力有一定的关系。 展开更多
关键词 牦牛 epo基因 PCR-SSCP
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间歇低氧训练对大鼠肾脏EPO基因表达的影响 被引量:3
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作者 黄丽英 许豪文 +1 位作者 林文弢 翁锡全 《沈阳体育学院学报》 2003年第4期10-11,共2页
为探讨间歇低氧训练对大鼠肾脏。EPO mRNA基因表达的影响,为高原训练方案的制定提供理论依据,用RT-PCR技术检测大鼠肾脏。EPOmRNA水平。结果表明急性低氧应激后大鼠肾脏EPO mRNA表达水平均显著性升高(P<0.05),急性低氧运动组升高极显... 为探讨间歇低氧训练对大鼠肾脏。EPO mRNA基因表达的影响,为高原训练方案的制定提供理论依据,用RT-PCR技术检测大鼠肾脏。EPOmRNA水平。结果表明急性低氧应激后大鼠肾脏EPO mRNA表达水平均显著性升高(P<0.05),急性低氧运动组升高极显著(P<0.01);海拔3000 m间歇低氧训练组EPO mRNA表达水平显著性升高(P<0.05)。认为海拔3000 m的间歇低氧训练能稳定EPO mRNA表达的上调。提示3000 m的海拔高度可能是较适宜间歇低氧训练的海拔高度。 展开更多
关键词 间歇低氧训练 肾脏 epo 基因表达 急性低氧运动 海拔高度
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南极冰鱼和伯氏肩孔南极鱼EPO基因预测及生物信息学分析 被引量:2
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作者 张驰 姜华鹏 +1 位作者 王丛丛 许强华 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1193-1201,共9页
运用PCR、TA克隆及二代测序技术获得了独角雪冰鱼(Chionodraco hamatus)、伯氏肩孔南极鱼(Trematomus bernacchii)的EPO区域基因组DNA序列,并结合生物信息学方法进行了基因结构与保守功能域等生物学特性研究。结果表明:克隆获得的独角... 运用PCR、TA克隆及二代测序技术获得了独角雪冰鱼(Chionodraco hamatus)、伯氏肩孔南极鱼(Trematomus bernacchii)的EPO区域基因组DNA序列,并结合生物信息学方法进行了基因结构与保守功能域等生物学特性研究。结果表明:克隆获得的独角雪冰鱼、伯氏肩孔南极鱼EPO基因序列分别为2727 bp和2820 bp,包括5个外显子和4个内含子结构,编码区全长皆为558 bp,推定编码185个氨基酸。理化性质分析得到两者的EPO蛋白皆为相对稳定的酸性可溶性蛋白。其三级结构预测结果都显示出典型的4个反相平行的α螺旋结构特征,保持了其在生物体内发挥的原有作用。多重序列比对显示,独角雪冰鱼EPO与伯氏肩孔南极鱼的氨基酸同源性为95.2%,而与其它物种的同源性在53.9%—85.5%之间。系统发育树显示,独角雪冰鱼、伯氏肩孔南极鱼的EPO基因与鱼类的同源基因聚类,系统进化情况同亲缘关系一致,表明EPO基因在进化过程中具有较强保守性。本研究为揭示EPO基因在南极冰鱼内的遗传特性提供理论依据,并为进一步探讨EPO基因在极端低温高氧环境中的鱼类适应性进化研究奠定了基础。 展开更多
关键词 南极冰鱼 epo基因 基因克隆 适应性进化 生物信息学
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EPO基因治疗安全性的初步评价 被引量:1
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作者 刘永学 魏汉东 +2 位作者 瞿成奎 吴祖泽 贺福初 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第3期190-193,共4页
从逆转录病毒及转基因工程细胞两方面对EPO基因治疗的安全性进行了评价.env基因作为野生型逆转录病毒存在的重要标志,其PCR检测结果表明,转EPO基因工程细胞Myo/EPO及Fib/EPO均未检测到env基因的存在.该两种工程细胞体外连续培养20代,生... 从逆转录病毒及转基因工程细胞两方面对EPO基因治疗的安全性进行了评价.env基因作为野生型逆转录病毒存在的重要标志,其PCR检测结果表明,转EPO基因工程细胞Myo/EPO及Fib/EPO均未检测到env基因的存在.该两种工程细胞体外连续培养20代,生长特性正常,无恶变倾向;裸鼠体内接种实验也未见肿瘤生成.病理检查结果显示,大鼠及裸鼠的细胞接种部位及各主要器官均无病变.初步表明,以逆转录病毒介导的EPO基因治疗是安全可靠的. 展开更多
关键词 epo 基因疗法 安全性
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富氧气体对低压缺氧大耳白兔肾EPO基因表达的影响 被引量:1
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作者 秦志峰 肖华军 +5 位作者 笪冀平 刘晓鹏 齐燕松 闫汝泉 林洪 付丽珊 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2001年第6期394-396,共3页
目的 :观察吸入不同浓度富氧气体对 110 0 0m低压条件下大耳白兔肾EPO基因表达的影响 ,从分子生物学水平为机载分子筛制氧系统的应用提供理论依据。方法 :2 4只大耳白兔随机分为 4组 (n =6 ) :空气对照组 ,6 3%富氧气体组 ,83%富氧气体... 目的 :观察吸入不同浓度富氧气体对 110 0 0m低压条件下大耳白兔肾EPO基因表达的影响 ,从分子生物学水平为机载分子筛制氧系统的应用提供理论依据。方法 :2 4只大耳白兔随机分为 4组 (n =6 ) :空气对照组 ,6 3%富氧气体组 ,83%富氧气体组 ,纯氧组。将各组动物置于低压舱内 ,供给不同浓度的富氧气体 ,低压舱上升到 110 0 0m ,停留 30min ,然后将动物即刻处死 ,提取肾组织总RNA ,用RT -PCR方法检测肾组织EPOmRNA表达情况。结果 :大耳白兔暴露于 110 0 0m后 ,空气对照组EPOmRNA表达的阳性比率为 6 / 6 ,6 3%富氧气体组为 4 / 6 ,83%富氧气体组为 3/ 6 ,纯氧组为 1/ 6。随着吸入气氧浓度的增加 ,EPOmRNA表达的阳性率降低。吸氧浓度与EPO基因表达的阳性率呈明显负相关 (r =- 0 .976 0 4 ,P <0 .0 5 )。结论 :吸入较高浓度富氧气体对 110 0 展开更多
关键词 富氧气体 低压缺氧 epo 基因表达 促红细胞生成素
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改变部分TIR对EPO模拟肽8串联体表达的影响 被引量:2
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作者 韩苇 颜真 +3 位作者 王俊楼 赵永同 石继红 张英起 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第3期224-226,共3页
目的 通过改变部分翻译起始区序列观察对 EPO模拟肽基因 8串联体表达的影响 .方法 设计和人工合成了部分翻译起始区域 (translation initiation region,TIR) DNA序列 ,将该序列插入 p BSEPOM8(含 EPO模拟肽基因 8串联体序列 )的 Eco R... 目的 通过改变部分翻译起始区序列观察对 EPO模拟肽基因 8串联体表达的影响 .方法 设计和人工合成了部分翻译起始区域 (translation initiation region,TIR) DNA序列 ,将该序列插入 p BSEPOM8(含 EPO模拟肽基因 8串联体序列 )的 Eco RI和 X ba I位点 ,经 DNA测序确定正确重组质粒 ,再将 EPO模拟肽基因 8串联体 (含改建的翻译起始区域 )克隆到 p BV2 2 0载体的 Eco RI和 Bam HI位点 ,诱导表达 .结果  DNA测序证明 ,人工合成的 DNA序列已正确插入EPO模拟肽基因 8串联体的翻译起始区域 .该串联体基因插入 p BV2 2 0载体后 ,经 42℃诱导 ,在细菌裂解上清中出现一条相对分子质量为 2 2× 10 3(Mr)的新蛋白带 ,与 EPO模拟肽基因 8串联体的理论计算分子量相符合 .经薄层扫描证明该蛋白带约占细菌蛋白总量的 15 % .结论 通过改变部分翻译起始区域起动了 EPO模拟肽基因 8串联体的翻译 ,使原来不表达的 EPO模拟肽基因 展开更多
关键词 翻译起始区域 SD序列 EOP模拟肽 基因串联体
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含巨细胞病毒早期启动子的EPO逆转录病毒表达载体的构建 被引量:3
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作者 陈广南 梁希若 吴淑华 《广州医学院学报》 1997年第2期1-4,共4页
本文构建了含巨细胞病毒(CMV)早期启动子的红细胞生成素(EPO)逆转录病毒表达我体。困逆转录病毒表达我体pN2A需用外源启动子才能表达国的基因,故把CMV早期启动手及包括除信号肽中第2、3和4位氨基酸外的所有编码区及两个内含子序列... 本文构建了含巨细胞病毒(CMV)早期启动子的红细胞生成素(EPO)逆转录病毒表达我体。困逆转录病毒表达我体pN2A需用外源启动子才能表达国的基因,故把CMV早期启动手及包括除信号肽中第2、3和4位氨基酸外的所有编码区及两个内含子序列的EPO次全基因片段一起克隆到pN2A载体neo基因下游的多聚接头上的单一酶切位点BglⅡ上,构建成重组质粒pN2ACMVEPO。 展开更多
关键词 红细胞生成素(epo) 逆转录病毒载体 基因重组
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靶基因iNOS、EPO表达对卵巢上皮性肿瘤发生发展的影响机制研究
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作者 苏雪锋 陈桂丽 邹云峰 《中国现代医生》 2017年第25期22-25,共4页
目的研究靶基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、促红细胞生成素(EPO)在卵巢上皮性肿瘤中的表达对卵巢上皮性肿瘤发生发展的影响机制。方法随机选取2014年3月~2016年12月我院手术切除并经病理证实的卵巢上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织标本共8... 目的研究靶基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、促红细胞生成素(EPO)在卵巢上皮性肿瘤中的表达对卵巢上皮性肿瘤发生发展的影响机制。方法随机选取2014年3月~2016年12月我院手术切除并经病理证实的卵巢上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织标本共84例。患者均由手术切除取标本切片,经甲醛固定,石蜡包埋,作4μm连续切片,分别进行HE染色及免疫组化染色。综合染色强度和阳性细胞占总细胞数的百分比进行半定量处理,计数肿瘤细胞总数和阳性细胞个数,计算阳性百分率。结果正常卵巢组织上皮细胞中i NOS和EPO几乎没有表达,从良性卵巢肿瘤-卵巢交界性肿瘤-恶性卵巢肿瘤,iNOS表达阳性率分别为17.39%、47.06%、87.50%,EPO表达阳性率分别为73.91%、88.24%、100.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤的组织学分级与EPO及i NOS的表达有关,肿瘤分化程度越低,EPO及iNOS的表达含量越高,且EPO与患者的临床分期有关,差异有统计学意义(P<0.05);而iNOS与患者的临床分期无关(P>0.05)。分析发现,恶性卵巢上皮性肿瘤中EPO蛋白表达和iNOS蛋白表达之间呈正相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 EPO蛋白和iNOS蛋白在卵巢上皮性肿瘤能促进肿瘤细胞的增殖及血管生成,对卵巢上皮肿瘤的发生、发展具有一定的预测作用。 展开更多
关键词 靶基因iNOS epo 卵巢上皮性肿瘤 影响机制
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牦牛EPO、PPARα基因SNP与高原低氧适应的相关性分析 被引量:5
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作者 赵丽玲 向超 +7 位作者 王会 钟金城 柴志欣 王吉坤 王嘉博 武志娟 信金伟 姬秋梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第5期1633-1646,共14页
试验旨在探究促红细胞生成素基因(EPO)、过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)的遗传多样性,并分析其多态性与牦牛高原低氧适应性的相关性。采集不同海拔高度的6个牦牛类群(中甸牦牛、麦洼牦牛、斯布牦牛、类乌齐牦牛、帕里牦牛、申扎... 试验旨在探究促红细胞生成素基因(EPO)、过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)的遗传多样性,并分析其多态性与牦牛高原低氧适应性的相关性。采集不同海拔高度的6个牦牛类群(中甸牦牛、麦洼牦牛、斯布牦牛、类乌齐牦牛、帕里牦牛、申扎牦牛)以及三江黄牛共375头耳样,提取DNA并分别构建DNA池,采用直接测序法结合PCR-RFLP检测分析EPO、PPARα基因的多态性,最后应用SHEsis软件统计分析候选基因SNPs与牦牛高原适应性的相关性。结果表明,EPO基因存在3个SNPs位点:rs527G→A、rs1031A→T、rs1192T→C;PPARα基因存在3个SNPs位点:rs77363C→T、rs77471C→A和rs77534C→T。χ^(2)适合性检验结果显示,EPO基因3个SNPs位点均符合Hardy-Weinberg平衡状态;PPARα基因的rs77363C→T位点上,6个牦牛类群都处于平衡状态(P>0.05),在PPARα基因的rs77471C→A和rs77534C→T位点,麦洼牦牛偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.05)。单倍型分析得出,EPO基因的ATC单倍型在高海拔地区牦牛中的分布频率随海拔升高而升高;PPARα基因的TAC单倍型在6个牦牛类群中分布频率显著高于其他单倍型。研究表明,EPO、PPARα基因可作为牦牛适应高原环境的分子标记,为进一步探讨牦牛高原低氧适应性机制提供一定理论帮助。 展开更多
关键词 牦牛 epo基因 PPARα基因 SNP 高原低氧适应性
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新型融合蛋白hEPO/TNFαM表达质粒的构建
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作者 刘芳 《青海医学院学报》 CAS 2012年第1期7-11,22,共6页
目的构建hEPO/TNFαM融合毒素的表达质粒,为该融合毒素的功能研究及临床应用前景的分析评价奠定基础。方法将人促红细胞生成素(human erythropoiein,hEPO)的基因片段与人工改造的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)基... 目的构建hEPO/TNFαM融合毒素的表达质粒,为该融合毒素的功能研究及临床应用前景的分析评价奠定基础。方法将人促红细胞生成素(human erythropoiein,hEPO)的基因片段与人工改造的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)基因按正确的阅读框架融合,定向克隆于表达载体pET16b。结果经酶切分析及DNA序列分析,所构建的质粒均插入hEPO/TNFαM融合基因。结论利用pET16b表达载体成功构建融合毒素hEPO/TNFαM的表达质粒。 展开更多
关键词 人促红细胞生成素 TNFα突变体 基因重组
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Erythropoietin gene transfer into rat testes by in vivo electropo-ration may reduce the risk of germ cell loss caused by cryptorchidism 被引量:3
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作者 Masaki Dobashi Kazumasa Goda +1 位作者 Hiroki Maruyama Masato Fujisawa 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2005年第4期369-373, ,共5页
Aim: To investigate the effects of rat Erythropoietin (Epo) on spermatogenesis by transferring rat Epo gene into cryptorchid testes by means of in vivo electroporation. Methods: Sprague-Dawley rats with surgically... Aim: To investigate the effects of rat Erythropoietin (Epo) on spermatogenesis by transferring rat Epo gene into cryptorchid testes by means of in vivo electroporation. Methods: Sprague-Dawley rats with surgically-induced unilateral cryptorchidism were divided into three groups: the first group was given intratesticular injections of pCAGGS-Epo (pCAGGS-Epo group), the second group was given intratesticular injections of pCAGGS (pCAGGS group), and the third group were given intratesticular injections of phosphate-buffered saline (PBS group). At the same time, square electric pulses of 30 V were applied six times with a time constant of 100 ms. One or two weeks after injection, each testis was weighed and the ratio of the total number of germ cells to that of Sertoli cells (G/S ratio) was calculated to evaluate the impairment of spermatogenesis. Ten testes taken from each of the three groups were examined at each time point. Results: The testicular weight after the injection of pCAGGS-Epo or pCAGGS control plasmid was (0.85 ± 0.08) g and (0.83 ± 0.03) g, respectively, at week 1 (P = 0.788) and (0.62 ± 0.06) g and (0.52 ± 0.02) g, respectively, at week 2 (P = 0.047). At week 1, spermatids and sperm were more abundant in testes with pCAGGS-Epo than those in the control testes. At week 2, spermatids and sperm were hardly detected in either group. The G/S ratio was 23.27 ± 6.80 vs. 18.63 ± 5.30 at week 1 (P = 0.0078) and 7.16 ± 3.06 vs. 6.05 ± 1.58 at week 2 (P = 0.1471), respectively. Conclusion: The transfer of Epo to rat testes by in vivo electroporation may reduce the risk of the germ cell loss caused by cryptorchidism. 展开更多
关键词 ELECTROPORATION gene transfer techniques ERYTHROPOIETIN spermatogenesis epo
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pGL3-EPO-α-MHC启动子荧光素酶报告基因质粒的构建及缺氧调控功能考察
13
作者 陈勇 石琳 +1 位作者 韩笑 陈妍 《中国当代医药》 2013年第16期8-9,12,共3页
目的考察EPO-α-MHC启动子在缺氧条件下的调控表达作用。方法构建pGL3-EPO-α-MHC启动子编码荧光素酶报告基因的质粒,以含pGL3-EPO-α-MHC和pGL3-CMV启动子的质粒分别转染缺氧和常氧的心肌细胞(H9C2),检测荧光素酶的表达。结果 pGL3-CM... 目的考察EPO-α-MHC启动子在缺氧条件下的调控表达作用。方法构建pGL3-EPO-α-MHC启动子编码荧光素酶报告基因的质粒,以含pGL3-EPO-α-MHC和pGL3-CMV启动子的质粒分别转染缺氧和常氧的心肌细胞(H9C2),检测荧光素酶的表达。结果 pGL3-CMV启动子质粒在缺氧条件下的报告基因表达与常氧条件相比显著下降(P<0.05),而pGL3-EPO-α-MHC启动子在缺氧条件下能够显著上调报告基因的表达4.3倍(P<0.01)。结论 EPO-α-MHC启动子具有缺氧调控功能。 展开更多
关键词 pGL3-epo-α-MHC启动子 荧光素酶报告基因 质粒构建 缺氧调控
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基因兴奋剂的研究进展 被引量:9
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作者 李志朋 徐波 +1 位作者 全明辉 薛帅如 《体育学刊》 CAS CSSCI 北大核心 2006年第6期56-59,共4页
运用文献综述基因兴奋剂的研究进展,探讨基因兴奋剂的分子机制、基因治疗的基本理论,从基因治疗到基因兴奋剂,基因兴奋剂的操作方法,与有氧耐力相关的基因兴奋剂,如促红细胞生成素基因兴奋剂、血管紧张素转换酶基因兴奋剂;与身体力量相... 运用文献综述基因兴奋剂的研究进展,探讨基因兴奋剂的分子机制、基因治疗的基本理论,从基因治疗到基因兴奋剂,基因兴奋剂的操作方法,与有氧耐力相关的基因兴奋剂,如促红细胞生成素基因兴奋剂、血管紧张素转换酶基因兴奋剂;与身体力量相关的基因兴奋剂,如胰岛素样生长因子-1基因兴奋剂、机械生长因子基因兴奋剂;基因兴奋剂的危害、对策,以加深人们对基因兴奋剂的认识,提高人们对基因兴奋剂的警惕。 展开更多
关键词 基因兴奋剂 基因治疗 epo基因 ACE基因
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补肾生血方药对慢性肾功能不全性贫血大鼠红细胞生成素基因表达的影响 被引量:36
15
作者 屈宁 温进坤 李恩 《中国中西医结合杂志》 CSCD 北大核心 1995年第4期222-224,共3页
用腺嘌呤饲喂大鼠,建立慢性肾功能不全性贫血动物模型,观察肾功能损伤与网织红细胞、血红蛋白和红细胞生成素(EPO)合成之间的关系,探讨补肾生血中药改善造血机能的作用机理。结果表明,中药可显著降低肾功能不全大鼠血清肌肝和... 用腺嘌呤饲喂大鼠,建立慢性肾功能不全性贫血动物模型,观察肾功能损伤与网织红细胞、血红蛋白和红细胞生成素(EPO)合成之间的关系,探讨补肾生血中药改善造血机能的作用机理。结果表明,中药可显著降低肾功能不全大鼠血清肌肝和血尿素氮,并通过促进EPO基因表达来改善动物的贫血状况。 展开更多
关键词 肾功能衰竭 红细胞生成素 基因表达 补肾生血方
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云南乌金猪与约大乌猪低氧适应性的研究 被引量:3
16
作者 李美荃 张春勇 +3 位作者 安清聪 潘洪彬 陈克嶙 郭荣富 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期965-973,共9页
旨在探明云南高原乌金猪与约大乌猪低氧适应差异。采集60日龄乌金猪与约大乌猪各30头(公母各半)血样,检测乌金猪和约大乌猪血液血红蛋白含量(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞数目(RBC)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)... 旨在探明云南高原乌金猪与约大乌猪低氧适应差异。采集60日龄乌金猪与约大乌猪各30头(公母各半)血样,检测乌金猪和约大乌猪血液血红蛋白含量(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞数目(RBC)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)和氧饱和度生理表征参数。屠宰60日龄乌金猪与约大乌猪各12头(公母各半),采用Real-time PCR方法检测心、肝、肺、肾、空肠、回肠、十二指肠、皮肤、肌肉、胰腺、睾丸或卵巢12种组织中HIF-1α、VEGF、EPO基因的表达。结果显示,乌金猪HGB和RBC极显著(P<0.01)高于约大乌猪,而HCT和MCH低于约大乌猪,乌金猪氧饱和度高于约大乌猪,但差异不显著(P>0.05)。在乌金猪与约大乌猪的各个组织中均检测到HIF-1α、VEGF、EPO基因mRNA的表达;在低氧适应基因中,HIF-1α基因在肝、肺、胰腺、肾和皮肤组织表达量最高,VEGF基因在肝、肺和胰腺表达量最高,EPO基因在肾和肝表达量最高;HIF-1α、VEGF、EPO基因在两猪种中的表达量趋势一致,约大乌猪组织中的总体表达量高于乌金猪的表达量;母猪低氧适应基因的总体表达量显著高于公猪。乌金猪低氧适应生理表征参数明显高于约大乌猪,在多数组织约大乌猪低氧适应基因的表达高于乌金猪。但对其高原低氧适应性机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 乌金猪 约大乌猪 HIF-1Α VEGF epo 基因表达
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伪狂犬病病毒EP0基因的克隆及原核表达 被引量:5
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作者 周慧英 程艺 +4 位作者 孙磊磊 王雨 吉艺宽 任涛 琚春梅 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第4期4-8,共5页
为研究伪狂犬病病毒EP0蛋白与病毒粒子中其他蛋白的相互作用,应用PCR方法从伪狂犬病病毒基因组中扩增EP0基因的编码区并克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒pMD-EP0;用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pMD-EP0,回收EP0基因,并将其亚克隆至pGEX-4T-1中,... 为研究伪狂犬病病毒EP0蛋白与病毒粒子中其他蛋白的相互作用,应用PCR方法从伪狂犬病病毒基因组中扩增EP0基因的编码区并克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒pMD-EP0;用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pMD-EP0,回收EP0基因,并将其亚克隆至pGEX-4T-1中,构建带有GST标签的重组质粒pGEX-EP0;重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE和Western blot检测其表达情况。结果表明,扩增到EP0基因的编码区序列大小为1 227bp;重组表达菌经诱导后,EP0融合蛋白获得了表达,大小约71.4ku,且能与伪狂犬病病毒EP0单克隆抗体发生特异性反应。该蛋白的成功表达为进一步研究EP0蛋白与宿主细胞及病毒粒子中其他蛋白的相互作用奠定了基础。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 EP0基因 GST标签 融合表达
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伪狂犬病毒EP0基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达研究 被引量:5
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作者 孙磊磊 程艺 +2 位作者 梁梓森 周慧英 琚春梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期57-60,共4页
为了研究EP0蛋白在伪狂犬病毒粒子中的定位及其功能,试验利用PCR从伪狂犬病毒基因组中扩增PRV EP0基因的编码区,克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒pMD-EP0。经测序鉴定正确后,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切pMD-EP0,回收EP0基因与经同样双酶切处... 为了研究EP0蛋白在伪狂犬病毒粒子中的定位及其功能,试验利用PCR从伪狂犬病毒基因组中扩增PRV EP0基因的编码区,克隆至pMD18-T载体,构建重组质粒pMD-EP0。经测序鉴定正确后,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切pMD-EP0,回收EP0基因与经同样双酶切处理的pET-32a(+)进行连接,构建重组质粒pET-EP0。将pET-EP0转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE和Western blotting检测融合蛋白的表达情况及反应原性。结果表明,成功扩增得到EP0基因编码区序列,大小为1227bp;重组表达质粒pET-EP0经诱导后,EP0融合蛋白获得了表达,大小约为75ku,主要以包涵体形式存在,且能与伪狂犬病毒阳性血清反应。 展开更多
关键词 伪狂犬病毒 EP0基因 克隆 表达
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促红细胞生成素与早产儿脑白质损伤的关系研究 被引量:3
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作者 任青 卢宪梅 《中国妇幼健康研究》 2015年第4期893-895,共3页
早产儿脑白质损伤(WMD)是神经系统伤残的主要原因之一。影像学是WMD的确诊依据。目前研究认为,促红细胞生成素(EPO)可促进早产儿脑发育并对脑损伤有保护作用。EPO脑保护的主要机制是抗凋亡、抗氧化、抗炎症、抗惊厥和促进脑血管新生等... 早产儿脑白质损伤(WMD)是神经系统伤残的主要原因之一。影像学是WMD的确诊依据。目前研究认为,促红细胞生成素(EPO)可促进早产儿脑发育并对脑损伤有保护作用。EPO脑保护的主要机制是抗凋亡、抗氧化、抗炎症、抗惊厥和促进脑血管新生等。同时,EPO基因又存在多态性,可能与早产儿WMD的个体易感性差异相关联。 展开更多
关键词 早产儿 脑白质损伤 促红细胞生成素 基因多态性
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促红细胞生成素对糖尿病视网膜病变致病通路的调节分析 被引量:1
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作者 楚青 张敬法 +2 位作者 吴亚兰 徐国彤 李维业 《现代检验医学杂志》 CAS 2010年第3期43-46,共4页
目的采用基因芯片分析技术探讨玻璃体腔内注射促红细胞生成素对糖尿病大鼠视网膜游在的保护作用机制及作用靶点。方法采用SD大鼠45只,并分为3组:正常组(15只)、糖尿病组(15只)及糖尿病玻璃体腔内注射促红细胞生成素组(15只)。... 目的采用基因芯片分析技术探讨玻璃体腔内注射促红细胞生成素对糖尿病大鼠视网膜游在的保护作用机制及作用靶点。方法采用SD大鼠45只,并分为3组:正常组(15只)、糖尿病组(15只)及糖尿病玻璃体腔内注射促红细胞生成素组(15只)。运用腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病模型(60mg/kg BW)。玻璃体腔内注射促红细胞生成素在糖尿病发病后的第0,30d及120d进行,并于注射后4d将大鼠处死,提取视网膜RNA进行基因芯片分析。结果糖尿病组与眼内注射促红细胞生成素组相比在三个时间点有超过1000个基因发生了变化,正常对照组与耱尿病组相比发生变化的基因也超过了1000个。通过进一步分析得出在糖尿病发病的第4,34d及124d,糖尿病组与正常大鼠组相比均下调的通路分别为Pyruvate metabolism丙酮酸盐代谢通路,Galactose metabolism半乳糖代谢通路,Calcium signaling pathway钙离子信号通路,MAPK丝裂原活化蛋白激酶通路。三个时间点同样对照组均下调的通路分别为Starch and sucrose metabolism淀粉蔗糖代谢通路,Neuroactive ligand—receptor interaction刺激神经组织的配体受体相互作用通路,Focal adhesion表面黏附通路。而在给予EPO治疗组中,与同期糖尿病大鼠组相比,原本下调的MAPK丝裂原活化蛋白激酶通路被上调了,而原本上调的Focal adhesion表面黏附通路被下调了。结论糖尿病的发生增加了体内基因信号通路的变化,而给予眼内注射促红细胞生成素后使得原先有变化的信号通路发生了逆转。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 促红细胞生成素 信号通路 基因芯片 芯片分析
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