参考区间转移和验证的方式

参考区间是解释临床结果的基本工具,通常实验室需要建立本地人群的参考区间,但这要耗费大量资源,并不是每个实验室都有这样的能力。转移和验证已有参考区间是一种经济、可行的实验室应用参考区间的方式。该文基于美国临床和实验室标准研究所(CLSI)EP28-A3c文件讨论转移和验证参考区间的方式,以期帮助广大实验室在更好理解的基础上开展中国人群参考区间的转移和验证研究。

基于CLSI指南EP09-A3比对2套化学发光免疫分析系统血清TT_3测定结果

目的 基于美国临床实验室标准化协会(CLSI)指南EP09-A3探讨2套化学发光免疫分析系统血清总三碘甲状腺原氨酸(TT_3)测定结果的可比性。方法 根据EP09-A3指南要求,使用2个品牌化学发光免疫分析系统(分别命名为系统一和系统二)分别测定111例血清样本TT_3水平。通过广义极端学生化偏差(ESD)法检验离群值,选用EP09-A3指南列举的5种回归模型分析2套系统TT_3检测结果,并计算医学决定水平处的偏移。结果 散点图目测和ESD法检验均未发现离群值。2套系统TT_3检测结果的5种回归分析结果显示,一般线性回归、加权最小二乘法回归、Deming回归、Passing-Bablock回归分析在TT_3医学决定水平处(0.75和1.91 ng·mL~(-1))的偏移均<可接受范围[允许总误差(TEa)±12.5%],偏移的95%可信区间(CI)结果类型解读为可接受的A型和B型,加权Deming回归分析得到的偏移的95%CI部分超出可接受范围,结果类型解读为C型。结论 EP09-A3指南适用于2套系统检测TT_3的方法学比对和偏移评估,且该指南更新的离群值判断方法、回归分类分析法和对应的解读分型方式更为科学、合理。

氮化碳填料的加入对环氧树脂E-44导热性能的影响

以三聚氰胺为原料,通过直接热聚合法制备石墨相氮化碳(g-C_(3)N_(4)),再通过强酸剥离法和高速离心法制备二维g-C_(3)N_(4)纳米片(CNNns),以制备的g-C_(3)N_(4)和CNNns为导热填料,环氧树脂E-44(EP)为基体树脂,分别制备g-C_(3)N_(4)/EP复合材料和CNNns/EP复合材料。采用傅里叶红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)等表征手段对氮化碳导热填料的官能团和表面形貌进行了表征,通过热重分析和热导率测定研究氮化碳填料的加入对环氧树脂E-44热稳定性和导热性能的影响。结果表明:氮化碳填料的加入提高了环氧树脂E-44的热稳定性和导热性能,CNNns/EP复合材料的热稳定性和导热性能明显优于g-C_(3)N_(4)/EP复合材料,填充比为26.8%(质量分数)时其热导率最高达到了0.4420 W/(m.K)。

两种免疫分析方法检测血清总甲状腺素的可比性研究

目的研究美国临床和实验室标准化协会(CLSI)新指南EP09-A3分析血清总甲状腺素(TT4)的检测结果在不同方法间的可比性。方法根据EP09-A3,使用Roche Cobas e602电化学发光免疫分析系统(对比方法)和Sysmex HISCL-5000化学发光免疫分析系统(考核方法)分别测定110份血清样本的TT4水平,通过广义极端学生化偏差(ESD)法检验离群值,选用EP09-A3推荐的回归模型分析结果并计算医学决定水平处的偏移。结果散点图目测和ESD法检验均未发现离群值;两种检测方法通过三种回归方法分析,在TT4医学决定水平处(51、141 ng/mL)偏移均小于可接受范围(TEa)±10%,偏移的95%CI结果类型解读为可接受的A型与B型。结论Cobas e602电化学发光法与HISCL-5000化学发光法两套系统检测TT4的结果具有可比性。

Cdc42EP3对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响

目的:探讨Cdc42EP3在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)转移中的作用及相关作用机制。方法:回顾性收集2010年12月至2011年12月于南京医科大学附属淮安第一医院诊治的97例CRC患者的术后病理蜡块,同时收集相关临床病理资料。采用免疫组织化学法检测Cdc42EP3在癌组织与相应正常组织中的表达,随后通过统计学方法分析差异表达,并评估表达水平与临床病理学参数及生存预后之间的相关性。干扰CRC细胞Cdc42EP3的表达后,应用Transwell技术检测Cdc42EP3对CRC细胞的迁移及侵袭能力的影响,并使用Western blot技术检测EMT相关蛋白的表达。通过基因芯片技术及生物信息学分析预测Cdc42EP3的下游靶点STAT1,并通过回复实验验证。结果:Cdc42EP3在癌组织中的表达水平显著高于相应正常组织(P<0.001),并与肿瘤的淋巴结转移(P=0.011)、TNM分期(P=0.008)及患者生存预后(P<0.001)之间呈显著相关性。干扰Cdc42EP3表达后,CRC细胞的迁移及侵袭能力均明显减弱(P<0.01)。预测出Cdc42EP3的下游靶点STAT1。在CRC细胞中,干扰Cdc42EP3表达可提高内源性STAT1蛋白水平,过表达STAT1具有与Cdc42EP3表达下降类似的肿瘤抑制作用,而STAT1表达下降可削弱Cdc42EP3敲低所致的肿瘤抑制作用(P<0.05)。结论:Cdc42EP3在CRC组织中高表达。Cdc42EP3通过调控STAT1的表达促进CRC细胞的迁移及侵袭。

层状Al_(2)O_(3)/EP复合材料的可控制备及性能研究

采用冰模板法构筑具有层状结构的Al_(2)O_(3)三维网络骨架,并通过真空浸渍工艺制备出Al_(2)O_(3)/环氧树脂(EP)复合材料。研究了楔形硅橡胶角度、浆料固相含量、冷冻温度对层状Al_(2)O_(3)三维网络骨架微观结构的影响,分析了片层间距对Al_(2)O_(3)/EP复合材料导热、介电和绝缘性能的影响。结果表明:楔形硅橡胶角度为10°和15°时Al_(2)O_(3)三维网络骨架的层状有序性最佳,固相含量的增加和冷冻温度的降低均会使片层间距减小;Al_(2)O_(3)/EP复合材料的热导率和介电常数随着片层间距的减小而增大,但体积电阻率呈降低趋势;当片层间距为45μm时,热导率达到0.52 W/(m·K),体积电阻率为10^(12)Ω·cm。

两种血清总胆红素临床检测方法的偏倚分析和一致性评价

目的 依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)发布的EP9-A3文件评价两套血清总胆红素检测系统检测结果的一致性。方法 收集2021年12月北京航天总医院门急诊及住院病人血清40例,以由迈克氧化法试剂及雅培C16000生化分析仪组成的常规检测系统作为参比系统,以西门子Dimension EXL 200及其配套试剂组成的检测系统为待评系统,对检测结果进行分析,选取Passing-Baklok回归模型拟合回归方程,计算其在医学决定水平处的偏移,以国家卫健委临床检验中心室间质评1/2 TEa(7.5%)为可接受标准。结果 使用Passing-Baklok回归对结果进行线性拟合,回归方程为Y=1.001X+1.821,将医学决定水平处的值34.2、171、342分别带入回归方程,计算得到的相对偏移分别为5.3%、1.2%和0.6%,小于国家卫健委临床检验中心室间质评1/2 TEa(7.5%),满足要求。结论 该实验室使用的两种血清总胆红素检测方法结果具有可比性。

腺相关病毒介导的shRNA敲低大鼠双侧臂旁外侧核EP3受体对发热反应的影响

目的研究腺相关病毒(AAV)介导的短发夹RNA(shRNA)敲低臂旁外侧核(LPB)EP3受体表达对LPB微量注射前列腺素E_(2)(PGE_(2))和腹腔注射脂多糖(LPS)引起的发热反应的影响。方法构建干扰EP3受体表达的AAV载体,采用立体定位方法分别向shRNA-control组和shRNA-EP3组大鼠LPB注射AAV2-CMV-EGFP和AAV2-shRNA-Ptger3(EP3)-EGFP病毒。4周后,利用荧光显微镜观察AAV病毒的转染效率;采用实时荧光定量PCR检测LPB EP3受体mRNA表达的变化,以验证敲低效果;采用无线遥测和能量代谢测定的方法检测LPB微量注射生理盐水、PGE_(2)或腹腔注射LPS对shRNA-control组和shRNA-EP3组大鼠的体温(T core)和能量代谢(EE)的影响。结果shRNA-EP3组及shRNA-control组大鼠AAV病毒转染主要集中于LPB脑区;与shRNA-control组相比,AAV病毒注射敲低了shRNA-EP3组大鼠LPB的EP3受体mRNA的表达(P<0.05);shRNA-control组和shRNA-EP3组大鼠的基础体温无明显差异,LPB微量注射生理盐水引起T core和EE均出现短暂轻微的升高,但2组间无明显差异;与shRNA-control组相比,PGE_(2)升高shRNA-EP3组大鼠T core作用明显减弱(P<0.05);shRNA-EP3组大鼠腹腔注射LPS后仍能引起发热反应,但与shRNA-control组相比,发热反应减弱,腹腔注射LPS后5.5 h的体温升高幅度明显降低(P<0.01)。结论敲低LPB的EP3受体表达减弱了LPB微量注射PGE_(2)和腹腔注射LPS引起的发热反应,提示,LPB的EP3受体介导LPB PGE_(2)的致热作用,部分参与了LPS性发热。

基于CLSI EP9-A3的血清葡萄糖方法学比对及偏倚评估

目的对不同血糖全自动生化分析仪测量结果进行方法学比对,以确保检测结果的准确性和可比性。方法使用雅培(A)、西门子(B)2台血糖检测系统同时测量冰冻人血清葡萄糖标准物质和44份单人份血清样本,参考CLSI EP9-A3文件,将两个系统的测量结果进行比对。结果A系统测量冰冻人血清葡萄糖标准物质的偏倚在0.09%~5.22%范围内,B系统偏倚范围为4.98%~6.96%,均在可接受范围内;两者线性相关性较好(R^(2)=0.994);无离群值且百分比差值成正态分布。两系统间的平均百分比差值为0.29%,Bland-Altman图95%以上数据落在均值±2SD范围内。A、B两系统的Passing-bablok回归方程为Y=0.953 X+0.443,其在各医学决定水平处的预期偏倚范围-0.13%~5.27%,小于可接受范围。结论A、B两系统有较好的一致性,检测结果具有可比性,均可为临床提供准确可靠的结果。

EP3D Spoolgen与管道加工设计传统方法的分析对比

管道加工设计质量和效率的高低直接影响着管道施工的质量和效率。本文通过分析对比了管道加工设计的传统方法和EasyPlant3DSpoolgen(简称EP3DSpoolgen)管道预制设计方法,指出了EP3DSpoolgen管道预制设计方法的优点,为今后管道加工设计提供参考。

桂枝汤及其活性成分对EP_3受体激动剂诱导发热的影响

目的 :研究桂枝汤及其有效成分对EP3 受体激动剂诱导大鼠发热的影响。方法 :对比观察侧脑室注射sulprostone(Sul)发热模型组与桂枝汤、肉桂醛、肉桂酸和白芍总苷治疗组大鼠体温变化。结果 :桂枝汤和肉桂醛灌胃均能抑制Sul脑室注射诱导的体温升高 ,白芍总苷腹腔注射可使发热大鼠体温降至正常以下 ,而肉桂酸倾向于增强该发热反应。结论 :抑制EP3 受体后与发热相关的信号转导通路可能是桂枝汤、肉桂醛和白芍总苷的解热作用机理之一 。

金银花对发热新西兰兔解热作用机制的研究

目的探讨金银花解热作用的中枢机制,为其在临床应用提供实验依据。方法用白细胞介素-1β(IL-1β)复制新西兰兔发热模型,在观察金银花解热作用的基础上,应用免疫组化技术检测静脉注射金银花对IL-1β作用下新西兰兔视前区-下丘脑前部(preoptic anterior hypothalamus,POAH)组织中前列腺素受体EP3(E-type prostaglandin receptorEP3)表达的影响。结果金银花静脉注射后对正常新西兰兔结肠温度没有明显影响,与生理盐水组相比,最大体温上升高度(△T)及1 h体温反应指数(TRI1)两组间无统计学意义(P>0.05);IL-1β组在静脉注射IL-1β后,结肠温度逐渐升高,△T及TRI1与生理盐水组比较,有统计学意义(P<0.01);而金银花+IL-1β组结肠温度上升峰值明显低于IL-1β组,两组△T及TRI1有显著性差异(P<0.05)。新西兰兔POAHEP3在生理状态下仅有少量表达;静脉注射IL-1β诱导实验动物发热时,EP3表达明显增强(P<0.01);而金银花能减少IL-1β引起的EP3表达(P<0.05)。结论金银花对IL-1β性发热新西兰兔的解热作用机制可能与其抑制视前区-下丘脑前部EP3的表达有关。

CLSI EP15-A3在临床生化精密度验证中的应用

目的探讨美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP15-A3在临床生化精密度验证中的应用价值。方法按照EP15-A3精密度5×5设计方案,利用IFCC提供的Rela A(水平1)和Rela B(水平2)样本,分别对肌酐(Cr)、尿素(Urea)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、葡萄糖(Glu)6个临床常用生化指标进行批内和实验室内不精密度验证。每个样本每天1批,每批重复5次,共5 d,每个样本获得25个数据。Grubbs'法计算离群值,单因素方差分析(ANOVA)计算用户批内不精密度(SR)和实验室内不精密度(SWL),分别与厂家声明的批内不精密度(σR)和厂家声明的实验室内不精密度(σWL)进行比较和判断,如果SR≤σR、SWL≤σWL,则用户验证了厂家不精密度声明。如果SR>σR或SWL>σWL,则各自继续与其上限验证值(UVL)比较,如果SR≤UVLR、SWL≤UVLWL,同样用户验证了厂家不精密度声明。否则,需查找原因或与厂家联系。结果 6个生化指标的测定结果均通过Grubbs'法离群值检查,各项目无离群值。SR和SWL分别与σR、σWL或UVLR、UVLWL比较,批内不精密度验证实验中,除Cr(水平1)、TC(水平2)、Glu(水平2)的SR>σR、SR≤UVLR外,其他指标各水平SR均≤σR;实验室内不精密度验证实验中,6个指标两个水平SWL均≤σWL。结论实验室现用的6个Roche生化指标批内与实验室内不精密度达到厂家声明要求,符合质量目标要求。

CLSI EP9-A3在血液分析仪比对中的应用

目的探讨美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A3文件在血液分析仪比对中的应用价值。方法根据CLSI EP9-A3文件,用Sysmex XE-5000血液分析仪(XE-5000,参比系统X)和Sysmex XN-1000血液分析仪(XN-1000,待评系统Y)分别测定40份血标本,对WBC、RBC、Hb、PLT结果通过ESD法(extreme studentized deviate)进行离群值检验,选用最佳回归模型拟合回归方程,并计算各参数的95%置信区间(confidence interval,CI)和医学决定水平处的偏移,以≤1/2 TEa(国家临床检验中心室间质评允许总误差)为可接受标准。结果通过ESD法确认离群值,排除离群值并补充相近浓度标本后未发现离群值点。Hb、PLT差值具有恒定CV变化,采用加权最小二乘法(weighted least squares,WLS)回归分析;WBC、RBC差值为混合变化,采用Passing-Bablok回归分析;将医学决定水平分别代入回归方程,其偏移均小于可接受标准。结论 XE-5000和XN-1000血液分析仪检测WBC、RBC、Hb、PLT结果具有可比性。

IL-1β对新西兰兔下丘脑前列腺素受体EP3亚型表达的影响

为了观察IL-1β对新西兰兔下丘脑前列腺素受体EP3亚型表达的影响,本实验用IL-1β复制新西兰兔发热模型,并用免疫组化方法检测兔下丘脑内侧视前区(medial preoptic area,MPO)和正中视前区(median preoptic area,MnPO)前列腺素受体EP3亚型的表达。结果表明:静脉注射IL-1β可引起新西兰兔体温升高,最大体温上升幅度(maximal raise altitude of temperature,△T)及1h体温反应指数(temperatu reresponse index,TRI1)均高于对照组;同时,注射IL-1β后,下MPO和MnPO前列腺素受体EP3亚型的表达明显增强。上述结果提示:MPO和MnPO神经元前列腺素受体EP3亚型表达的增强可能是IL-1β引起发热的中枢机制之一。

前列腺素E_2受体EP_3及其调节剂的研究进展

前列腺素受体类型繁多,可以偶联G蛋白介导多种生理病理过程.其中前列腺素E2受体有4种亚型:EP1、EP2、EP3和EP4.EP3受体由于其亚型多样性及偶联G蛋白的复杂性使其成为众多前列腺素E2受体中较特殊的"成员".EP3的抗凝血功能研究及新型调节剂的研发是目前该领域研究的热点.本文主要阐述EP3的分布、主要功能及其调节剂的研究进展.

新指南CLSI EP9-A3在凝血分析仪比对中的研究与运用

目的运用美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A3指南对该科室2台不同凝血检测仪进行检测结果比对。方法以STAGO-Evlution凝血分析仪为参照系统(X),STAGO-Compact凝血分析仪为实验系统(Y),依据CLSI EP9-A3文件要求,分别测定40例标本的血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)。结果应用ESD法进行离群值检验,选用最佳回归模型拟合回归方程,计算各检测项目95%置信区间(CI)和医学决定水平处的偏倚,≤1/2 TEa为可接受标准。结果 ESD法未发现离群值点。PT、FIB差值具有恒定CV变化,采用加权最小二乘法(WLS)回归分析;APTT差值为混合变化,使用Passing-Bablok回归分析;应用回归方程直接计算医学决定水平处的偏倚及回归各项目可信区间,其偏倚均小于可接受标准。结论 STAGO-Evlution与STAGO-Compact 2台凝血仪检测PT、APTT、FIB结果具有可比性。

基于FPGA的智能火工品等效器设计实现

针对导弹弹上火工品发射前检测问题,设计一种基于FPGA的智能火工品等效器。该系统采用EP3C16F256C8以及其外围电路,在火工品通路测试(低压状态)时等效火工品电爆管阻值;在低压时序测试、高压时序测试时,检测时序指令发出情况。对等效器等效通路进行电阻值测试,同时在实验测试平台对低压电流时序以及高压电压时序进行实验验证,结果表明,本等效器其电阻值、时序宽度满足设计要求并具有高可靠性、良好维修性、实用性强等特点,可以广泛推广和应用。

根据CLSI EP9-A3方案对2种仪器测定血脂水平的可比性分析

目的通过对迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪和贝克曼AU 5400全自动生化分析仪进行比对和偏倚评估,探讨2种检测系统间血脂测定结果的一致性及临床可接受性。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A3文件进行方法学比对和偏倚评估,将BS-2000M全自动生化分析仪作为比较方法,AU5400全自动生化分析仪作为实验方法,测定40份血清标本的血脂水平,包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白(APO)-A1、APO-B、脂蛋白(a)[Lp(a)],对检测结果通过广义极端学生化偏差(ESD)法进行离群值检验,选用最佳回归模型拟合回归方程,并计算各参数在医学决定水平处的可接受性,以国家卫生和计划生育委员会临检中心相关规定作为可接受标准。结果通过ESD法确认离群值,排除离群值并补充相近水平的标本后,未发现离群值点。TC、TG、HDL、LDL用加权最小二乘法(WLS)拟合回归分析,APO-A1、APO-B、Lp(a)采用P-B回归分析,将TC、HDL的医学决定水平代入回归方程,其他的项目选择该地区参考值上限代入方程进行计算,除Lp(a)外,TC、TG、HDL、LDL、APO-A1、APO-B均在可接受范围内。结论 2个检测系统测定TC、TG、HDL、LDL、APO-A1、APO-B可比性良好,偏倚都可接受;但Lp(a)不具有可比性,临床判定为不可接受。

CLSI EP15-A3在临床生化正确度验证中的应用

目的探讨美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP15-A3文件在正确度验证中的应用价值。方法按照EP15-A3文件5×5实验设计方案,用IFCC提供的Rela A(水平1)和Rela B(水平2)样品、美国国家标准与技术研究院(NIST)909C参考物质分别验证肌酐(Cr)、尿素(Urea)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、葡萄糖(Glu)的正确度。每个样品每天1批,每批重复5次,共5 d,每个样品获得25个数据。用Grubbs'法计算离群值,单因素方差分析(ANOVA)计算用户的批内不精密度(S_R)和实验室内不精密度(S_(WL)),基于S_R和S_(WL)计算结果的均值及其标准差,计算靶值(TV)及其标准误差,最后计算出TV的确认区间(VI),观察各指标检测均值是否在VI内,如通过则用户证明了候选方法的偏差可接受;若不通过则计算均值和TV的相对偏差,观察该相对偏差是否小于用户定义的可接受范围(<1/2 TEa),若是则证明候选方法的偏差可接受。否则,需查找原因或与厂家联系。结果6个生化项目的测定结果均通过Grubbs'法离群值检查,各项目无离群值。该次验证实验中,除NIST 909C参考物质样品Urea、TC,Rela样品Cr水平2均值不在VI内,但相对偏差均小于1/2 TEa外,其他均值都在VI内。结论用EP15-A3文件进行验证的6个生化项目的正确度均符合临床要求。