荔枝核皂苷对乳腺增生大鼠雌激素受体ERα、ERβ及ERK、VEGF表达的影响

目的:探讨荔枝核皂苷对乳腺增生大鼠雌激素受体ERα、ERβ及ERK通路的影响。方法:取未孕雌性SD大鼠,除留正常对照组8只外,其他动物均进行造模,成模动物随机分为模型组、荔枝核皂苷低剂量组(0.1 g/kg)、荔枝核皂苷高剂量组(0.2 g/kg)和他莫昔芬阳性对照组(4 mg/kg),每组8只。以上各组分别灌胃给药30 d后,采用免疫组化方法检测乳腺组织ERα、ERβ、细胞外信号调节激酶(ERK)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:与模型组比较,荔枝核皂苷高剂量组大鼠乳腺组织ERα、ERK、VEGF的表达显著降低(P<0.05);低剂量组大鼠乳腺组织ERα、ERK的表达显著降低(P<0.05)。结论:荔枝核皂苷可降低乳腺增生大鼠乳腺组织中ERα、ERK、VEGF的表达。

牦牛雌激素受体ERα和ERβ基因分子特征及组织表达研究

为研究牦牛雌激素受体(ERα和ERβ)基因序列特征及其在不同组织中的表达差异.根据NCBI上已公布的普通牛ERα和ERβ基因序列,设计特异性引物,利用RT-PCR技术克隆麦洼牦牛ERα和ERβ基因序列,同时利用荧光定量PCR技术检测ERα和ERβ基因在牦牛不同组织的表达分布.结果表明,分别获得2 100 bp ERα(Gen Ban K登录号:KJ011123)和1 791 bp ERβ(Gen Ban K登录号:KJ011124)基因序列,其中ERα的ORF为1 658 bp,编码596个氨基酸,ERβ的ORF为1 584 bp,编码527个氨基酸.多重序列分析表明,牦牛ERα和ERβ与普通牛、原鸡、人、小鼠、大鼠、扬子鳄、蟾蜍及斑马鱼的氨基酸序列同源性分别为45.3%-99.5%和53.9%-99.1%.荧光定量PCR结果显示,ERα和ERβ基因在牦牛的各种组织中均有表达,且除睾丸外,ERα在输卵管、子宫及乳腺中的表达高于ERβ.此外,就ERα而言,ERα在牦牛乳腺中表达最高,子宫、输卵管及卵巢次之,心、肝、脾、肺、肾及睾丸相对表达较低.而牦牛ERβ基因在卵巢中表达最高,子宫和输卵管次之,心、肝、脾、肺、肾、睾丸及乳腺表达较低.为进一步了解牦牛ERα和ERβ基因的生物学功能及其分子繁殖机制提供了基础.

乳腺癌组织中雌激素受体亚型ERβ的表达及其与临床病理指标的关系

目的研究乳腺癌组织中雌激素受体亚型ERβ的免疫组织化学表达情况及其与临床病理指标的关系。方法应用免疫组织化学方法检测327例乳腺癌组织中ERβ和ERα及VEGF与c-erbB2的表达水平,对其进行比较研究,并结合月经状况、肿瘤大小、TNM分期、组织学类型、淋巴结转移等进行分析。结果ERβ在原发性乳腺癌组织中的阳性表达率为20.49%(67/327),其表达与ERα的表达无相关性(r=-0.051,P=0.137),但与VEGF和c-erbB2的表达呈正相关(r=0.564,P=0.000;r=0.288,P=0.000)。腋窝淋巴结转移数大于3个者其原发肿瘤的ERβ阳性率为31.8%,明显大于无转移者(χ2=4.436,P=0.035)和转移数小于等于3个者(χ2=6.369,P=0.012),后两组比较无统计学差异(χ2=0.744,P=0.388)。结论ERβ与乳腺癌的发展有一定关联,可作为判断乳腺癌生物学行为的重要指标。

ERα和ERβ在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:观察ERα和ERβ蛋白表达与乳腺癌临床病理参数的相关性及临床意义。方法:收集散发性乳腺癌标本214例,乳腺纤维腺瘤组织25例,应用SP免疫组化法检测ERα和ERβ蛋白的表达情况,并分析与乳腺癌患者临床指标及病理参数的相关性。结果:乳腺癌中ERα、ERβ蛋白表达阳性率分别为56.5%(121/214)、62.1%(133/214),乳腺纤维腺瘤中ERα、ERβ蛋白表达阳性率分别76.0%(19/25)、84.0%(21/25),与乳腺纤维腺瘤组织比较,乳腺癌组织ERα蛋白阳性表达率无差异,ERβ蛋白阳性表达率显著低于乳腺纤维腺瘤组织(P=0.031)。在乳腺癌组织中,ERα蛋白表达水平与患者年龄、病理类型、临床分级及淋巴结转移、HER-2、p53蛋白表达均未见相关性,与PR蛋白表达正相关(P<0.000 1)。ERβ蛋白表达与患者年龄和绝经状态相关,在不同的病理类型中,浸润性小叶癌的ERβ蛋白表达阳性率明显高于其它类型肿瘤(P=0.029);ERβ蛋白表达与临床分级、淋巴结转移情况、HER-2、p53蛋白表达比较均未见相关性。生存分析发现,ERα和ERβ蛋白表达对乳腺癌患者总体生存期未见显著影响,ERα和ERβ均阳性表达的乳腺癌患者,OS时间明显延长(P<0.05)。结论:ERα、ERβ蛋白在乳腺癌组织的异常表达与患者年龄、绝经状态、病理类型相关,二者协同表达对于乳腺癌的发生和发展更具指导意义。

中药更年春方通过ERβ及PI3K/Akt信号通路对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元损伤的保护作用

目的观察中药更年春方(Gengnianchun formula,GNC)通过雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及PI3K/Akt信号通路对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)致大鼠胎鼠海马神经元细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ25-35作用人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系,通过CCK-8法检测细胞活力摸索Aβ25-35及GNC含药血清(GNC serum,GS)处理神经细胞的合适浓度及时间。采用Aβ25-35作用大鼠胎鼠海马神经元构建阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的体外模型,分为无血清对照组、模型组、GS组、空白血清对照(normal saline serum,NS)组和PHTPP(选择性ERβ拮抗剂)组。利用正置显微镜观察细胞形态、CCK-8法检测细胞活力及LDH释放法检测细胞损伤。利用Hoest33258/PI双重荧光染色实验、qRT-PCR及Western blot实验检测细胞凋亡相关指标。结果与无血清对照组相比,模型组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触出现明显的收缩崩解和细胞碎片、细胞活力下降、LDH释放升高。与模型组和NS组相比,GS组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触的收缩崩解和细胞碎片减少、细胞活力上升、LDH释放减少、PI阳性神经元细胞数目下降、神经元bax/bcl-2mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase 3、cyt-c蛋白表达水平下降、p-Akt蛋白表达水平上升。与GS组相比,PHTPP组大鼠胎鼠海马神经元bax/bcl-2 mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase3、cyt-c蛋白表达水平上升、p-Akt蛋白表达水平下降。结论GNC对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元的损伤具有保护作用,此作用是通过ERβ及PI3K/Akt信号通路介导的。

雌激素受体亚型ERα、ERβ在乳腺癌中的表达

目的研究雌激素受体亚型ERα、ERβ在不同乳腺组织中的表达及其在浸润性乳腺癌中与肿瘤病理参数和生物学标志物之间的关系。方法选取70例乳腺癌(其中8例原位癌、44例浸润性导管癌、18例浸润性小叶癌)、15例乳腺增生、15例正常乳腺组织石蜡标本,用免疫组织化学法检测ERα、ERβ、C-erbB-2的表达情况。结果 (1)乳腺癌组织中的ERα阳性表达率明显高于正常乳腺及乳腺增生组织;晚期乳腺癌患者ERα阳性表达率明显低于早期患者;C-erbB-2阳性患者的ERα阳性表达率明显减低。(2)乳腺癌组织中的ERβ阳性表达率明显低于正常乳腺及乳腺增生组织;在浸润性乳腺癌中淋巴结转移阳性者、C-erbB-2表达阳性者的ERβ阳性表达率明显高于对照组患者。结论 ERα在乳腺癌的发生发展中可能起到促进作用,ERα的阳性表达与一些预后良好因素相关。ERβ可能对维持乳腺组织的正常生理功能起着重要作用,其与某些预后不良因素可能相关。

ER拮抗剂对人子宫内膜样癌JEC细胞中ERα、ERβ、p57^(kip2)表达的影响

目的探讨雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂对人子宫内膜样癌(endometrioid carcinoma,EC)JEC细胞(中分化)中ER亚型ERα、ERβ及p57^(kip2)表达的影响。方法分别用两种ER拮抗剂[他莫昔芬(Tamoxifen,TAM)(10^(-6)mol/L)、氟维司群(Faslodex,ICI182780)(10^(-6)mol/L)]及雌二醇(β-Estradiol,E_2)(10^(-6)mol/L)干扰JEC细胞,体外培养24、48、72 h后,MTT法观察JEC细胞的生长曲线;光镜与电镜观察JEC细胞的形态变化;Western blot法检测JEC细胞中ERα、ERβ及p57^(kip2)蛋白表达的变化。结果 MTT结果显示,与对照组JEC细胞比较,E_2可明显促进JEC细胞增殖,ICI182780则明显抑制JEC细胞的增殖(P<0.05);与E_2组比较,E_2+ICI182780组JEC细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。形态学改变:与对照组比较,E_2组细胞密度增大较明显,病理性核分裂象易见,ICI182780组细胞密度减小较明显;与E_2组比较,E_2+TAM组与E_2+ICI182780组细胞密度均有所减小,核分裂象不易见。Western blot结果显示:与对照组比较,E_2组ERβ蛋白表达增高,p57^(kip2)蛋白表达降低(P<0.05);ICI182780组与TAM组ERβ蛋白表达均降低,p57^(kip2)蛋白表达均增高,但仅ICI182780组差异有统计学意义(P<0.05)。与E_2组比较,E_2+ICI182780组与E_2+TAM组ERβ蛋白表达均降低,p57^(kip2)蛋白表达均增高,但仅E_2+ICI182780组差异有统计学意义(P<0.05)。实验各组及对照组JEC细胞中均无ERα蛋白表达。结论 JEC细胞不表达ERα蛋白。ICI182780有较强的拮抗雌激素的作用,可能通过下调JEC细胞中ERβ蛋白表达,诱导p57^(kip2)蛋白的表达,发挥其阻滞细胞周期进程的作用,从而抑制肿瘤细胞生长;TAM则对JEC细胞生长有较弱的雌激素样作用。联合检测ERα、ERβ、p57^(kip2)蛋白在EC中的表达,对EC患者内分泌治疗的个体化选择有重要的参考价值。

EGFR与ERβ在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的分析表皮生长因子受体(EGFR)和雌激素受体β(ERβ)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,以进一步探讨EGFR和ERβ与非小细胞肺癌发生、发展的关系以及二者的相关性。方法采用MaxVision免疫组化技术检测59例NSCLC石蜡包埋组织中EGFR和ERβ的表达。结果①EGFR在NSCLC中的阳性表达率为64.4%(38/59),ERβ在NSCLC中的阳性表达率为45.8%(27/59)。在癌旁组织中未见二者表达。②EGFR阳性表达与肿瘤组织的临床分期及有/无淋巴结转移相关,与性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型、分化程度及吸烟状况无关;ERβ阳性表达与NSCLC组织学类型有关,在腺癌组织中的表达明显高于鳞癌,与性别、年龄、肿瘤大小、组织分化程度、临床分期、淋巴结转移及吸烟状况无关。③腺癌中EGFR和ERβ阳性表达与鳞癌相比差异显著。结论本组资料显示,EGFR阳性表达提示预后不良;EGFR和ERβ可能在肺癌,尤其是腺癌的发生发展中发挥协同作用,由此可以通过同时靶向2个信号通路来治疗NSCLC。

雌激素受体亚型ERα和ERβ在子宫内膜癌中表达的研究

目的通过对子宫内膜癌组织中ERα和ERβ表达水平的检测,探讨雌激素受体的表达在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法用ERα及ERβ单克隆抗体免疫组化SP法测定57例子宫内膜癌及32例正常子宫内膜ERα和ERβ的表达,分析比较内膜癌与正常子宫内膜ERα和ERβ表达情况的差异、ERα和ERβ之间的关系以及与临床病理因素的关系。结果正常子宫内膜ERα表达阳性率为68.8%,高于子宫内膜癌(45.6%),P<0.05。ERβ表达的阳性率在正常子宫内膜和子宫内膜癌中分别为56.3%、49.1%,两者差异无显著性。正常子宫内膜ERα表达阳性率增生期(93.3%)高于分泌期(50%),而ERβ表达阳性率分泌期(90%)高于增生期(40%)。子宫内膜癌中,分期越早、分化程度越高,ERα表达阳性率越高,在宫内膜样癌中的表达阳性率高于其他类型,无淋巴结转移者高于有淋巴结转移者。ERβ表达的阳性率在临床分期晚以及分化差者升高。ERα和ERβ在子宫内膜癌中的阳性表达率呈负相关。结论ERα和ERβ在正常月经周期对子宫内膜可能发挥不同的作用,在子宫内膜癌的发生发展中,ERα可能比ERβ起着更重要的作用,两者在其发展过程中的作用可能相反。

乳腺癌EphA2,ERα和ERβ蛋白的表达及意义

目的:研究EphA2,ERα和ERβ等在乳腺癌中的表达及意义。方法:用免疫组织化学SP法检测130例乳腺癌组织中EphA2,ERα和ERβ表达水平及与临床病理因素的关系。结果:EphA2,ERα和ERβ在130例乳腺癌组织中的阳性率分别为72.31%,63.08%和53.08%。EphA2在乳腺癌的阳性表达率与临床分期、淋巴结转移和组织学分级显著相关(P<0.05)。ERα的阳性表达率与各临床病理因素均无显著相关(P>0.05)。ERβ的阳性表达与组织学分级显著相关(P<0.05)。EphA2的阳性表达率在乳腺癌ERα阴性组显著高于ERα阳性组(P<0.05)。EphA2在乳腺癌中表达的阳性率与ERβ在乳腺癌中的阳性率呈显著性相关(P<0.05),即EphA2表达的阳性率随着ERβ阳性率的增高呈升高趋势。结论:乳腺癌的发生发展与EphA2,ERα和ERβ有关。可通过联合检测它们在乳腺癌中的表达来评估乳腺癌的生物学行为、指导临床用药和预测预后。

芳香化酶P450、ERβ在宫颈癌组织的表达及临床意义

目的探讨芳香化酶P450、ERβ在正常宫颈组织、宫颈癌组织及癌周组织的表达差异,进而探讨其临床意义。方法对西安交通大学医学院第二附属医院2004年至2008年手术切除的正常宫颈组织、宫颈癌组织及癌周组织存档蜡块标本各30例,用免疫组化SP法检测其表达。结果芳香化酶P450在正常宫颈组织、癌周组织和宫颈癌组织的表达率分别为0%(0/30)、0%(0/30)和36.7%(11/30),经比较有显著性差异(P<0.05),而正常宫颈组与癌周组织组的表达无显著性差异(P>0.05)。ERβ在正常宫颈组织、癌周组织和宫颈癌组织的表达率分别为73%(22/30)、70%(21/30)和36.7%(11/30),相比较有显著性差异(P<0.05),而正常宫颈组织与癌周组织的表达无显著性差异(P>0.05)。结论芳香化酶P450在宫颈癌组织的阳性表达可能参与宫颈癌的发生;ERβ在宫颈癌组织的阳性表达率低,可作为预测宫颈癌变及宫颈癌预后良好的一项参考指标。

金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα和ERβmRNA水平的调节

目的:研究金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERα,ERβmRNA的调节作用,探讨植物雌激素对子宫内膜癌的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据。方法:体外培养子宫内膜癌细胞系Ishikawa,采用实时荧光定量RT PCR方法,观察不同剂量金雀黄素对两种雌激素亚型表达的影响,阳性对照为雌二醇、孕酮作用组。结果: (1)低剂量金雀黄素能提高子宫内膜癌细胞ERαmRNA表达,但其作用较雌二醇明显弱;低剂量金雀黄素能降低ERβmRNA的表达,而雌二醇对ERβmRNA作用不明显。(2)高剂量金雀黄素的作用与孕酮相似,能下调子宫内膜癌细胞ERαmRNA和ERβmRNA表达,但较孕酮作用弱。结论:金雀黄素对子宫内膜癌细胞ERαmRNA和ERβmRNA的表达作用不同,而且与其剂量有一定关系。推测金雀黄素有雌激素受体调节剂的作用。

雌激素受体α(ERα)与β(ERβ)表达的研究和检测技术新进展及其在疾病预后判断中的应用

雌激素是一种由内分泌系统产生的类固醇性激素．它在生殖系统、骨组织、心血管、免疫系统及中枢神经系统、内分泌系统中都发挥着重要的作用。乳腺癌、骨质疏松、阿尔茨海默病、绝经后妇女动脉粥样硬化及儿童性早熟的发生等都与雌激素有着密切的关系．

ERβ相互作用蛋白PSMC5的分离及其在ERβ信号途径中的作用

雌激素受体β(ERβ)在乳腺癌发生发展中起着重要的作用,寻找与ERβ相互作用的共调节因子对阐明ER信号通路具有重要价值.应用酵母双杂交技术,以ERβ的AF2结构域为诱饵蛋白从人乳腺文库中筛选出了与之相互作用的蛋白26S蛋白酶的亚单位ATPase5(PSMC5).GST沉淀实验表明,PSMC5在体外特异地与ERβ相结合.转录活性实验表明,PSMC5以激素依赖的方式降低ERβ转录活性.上述结果提示,PSMC5可能通过影响ERβ信号途径在乳腺癌发生发展中起着重要的作用.

大黄、虫对药对雌孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型ERα、ERβ的影响

目的:探讨大黄、虫对药对雌、孕激素负荷大鼠子宫肌瘤模型雌激素受体亚型ERα、ERβ的影响及作用机理。方法:70只SD雌性大鼠随机分成正常对照组、模型组、大黄虫小剂量组、大黄虫中剂量组、大黄虫大剂量组、大黄虫丸组、桂枝茯苓胶囊组。采用雌、孕激素负荷法建立大鼠子宫肌瘤模型,用SABC免疫组化法测定大鼠子宫平滑肌细胞ERα、ERβ的表达水平。结果:模型大鼠子宫平滑肌细胞ERα、ERβ的表达显著增高(P<0.01),各治疗组的ERα、ERβ较模型组均下降(P<0.01)。结论:大黄、虫对药可抑制子宫肌瘤平滑肌细胞ERα、ERβ的表达,这可能是该药治疗子宫肌瘤的主要机理之一。

SULT1E1、ERβ在子宫内膜腺癌组织中的表达及其相关性

目的:探讨SULT1E1及ERβ蛋白与子宫内膜腺癌的发生、发展之间的关系。方法:采用Western blot方法检测正常增生期子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织中SULT1E1和ERβ蛋白的表达含量。结果:SULT1E1和ERβ蛋白在正常增生期子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织中的表达含量逐渐降低,三者比较差异有统计学意义(P<0.05)。不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌组织与正常增生期子宫内膜组织比较差异均有统计学意义(P<0.05)。SULT1E1和ERβ蛋白与子宫内膜腺癌组织学分级、肌层浸润深度、手术病理分期及淋巴结转移等无关(P>0.05)。在子宫内膜腺癌组织中,SULT1E1蛋白与ERβ蛋白表达呈明显正相关(r=0.66,P<0.01)。在正常增生期和不典型增生子宫内膜组织中,SULT1E1蛋白与ERβ蛋白表达无明显相关性(r=0.035,P>0.05;r=0.466,P>0.05)。结论:在子宫内膜腺癌的渐近演变过程中,SULT1E1、ERβ表达降低或缺失可能与子宫内膜癌的早期形成有一定的关系,ERβ蛋白含量越多,SULT1E1蛋白对雌激素的调节作用越强,但不能作为子宫内膜腺癌病情严重程度和预后进行评价的指标。

GPER、ERα及ERβ在甲状腺乳头状癌中的表达与临床特征关系

目的探讨新型雌激素受体-G蛋白偶联受体与ERα、ERβ在甲状腺癌组织中的表达特征及其与患者临床资料的相关性。方法选取2014年2月～2017年9月我院普通外科85例甲状腺乳头状腺癌组织标本,平均年龄38.7(23～77)岁,对组织标本进行免疫组化染色,分析甲状腺癌组织中G蛋白偶联受体、ERα及ERβ的表达特征。结果甲状腺乳头状癌组织中GPER、ERα及ERβ阳性表达率分别为63.5%、71.8%、67.1%,呈高表达状态;但这三种雌激素受体表达的阳性率与患者年龄、性别、肿瘤分期、淋巴结转移状态、肿瘤大小等无明显相关;GPER与ERα及ERβ的表达呈正相关。结论三种雌激素受体包括G蛋白偶联受体、ERα及ERβ均与甲状腺癌的发生、发展密切相关,是极具研究价值的潜在治疗靶点。

ERβ──一种新型的雌激素受体

介绍了一种新型的雌激素受体ERβ，对其基因及蛋白结构、分布、作用机制方面的研究进展作了综述，并将其与经典的雌激素受体ERα作了比较。

雌激素受体亚型ERα、ERβ在乳腺癌中的表达及意义

本研究采用免疫组织化学法对100例国人女性不同阶段乳腺组织中雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）进行检测,探讨其与一些肿瘤病理参数和生物学标志物（是否绝经、肿瘤大小、淋巴结转移情况、组织学类型、肿瘤分期、C-erbB-2表达）之间的关系,以期为有关ERα、ERβ与乳腺癌发生发展关系的深入研究以及临床判断乳腺癌预后及指导治疗提供帮助。

ERβ与其变异体对三阴性乳腺癌细胞株生长的影响

目的通过对三阴性乳腺癌细胞转染雌激素受体β(ERβ)及其5-8外显子缺失异构体ERβ△5-8(文中简称ERβ△),试图了解ERβ单独表达对癌细胞生长的影响,及对雌激素、三苯氧胺(tamoxifen)作用的反应性;探讨ERβ是否有可能成为三阴性乳腺癌内分泌治疗的预测因子和新的治疗靶点。方法①构建真核细胞表达克隆pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△。②脂质体法转染人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231,设ERβ组、ERβ△组、空载体组及空白对照四组。③转染后荧光显微镜检,免疫荧光、免疫细胞化学、WesternBlot等方法验证蛋白表达。按实验设计分别加入不同药物浓度的三苯氧胺、雌激素。④流式细胞术观察细胞周期情况。MTT法检测细胞相对活性。结果①以IRES2-EGFP为蓝本改造的pReceiver-M72-ERβ及其剪切体pReceiver-M72-ERβ△成功构建。②转染ERβ后细胞生长速度加快,细胞周期中G1期比例减少,S期比例增加,克隆形成能力增强;转染ERβ△后细胞系相对活性及细胞周期未见明显改变;雌激素及tamoxifen对转染ERβ及其剪切体ERβ△的细胞生长无明显影响。结论 ERβ单独表达促进MDA-MB-231细胞生长,增加细胞相对活性及克隆形成能力;转染ERβ的三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中对雌激素及雌激素抑制剂tamoxifen无明显反应。