乳腺癌中ERα、PR的表达与预后关系及其影响阳性率的相关因素

目的分析乳腺癌中ERα、PR的阳性率与预后的关系,探讨影响ERα、PR阳性率的相关因素。方法采用免疫组化En Vision法检测662例乳腺癌组织中ERα、PR的表达,按不同阳性率分组,Kaplan-Meier法分析预后。选择其中的80例采用两种克隆号ERα(SP1、6F11)染色并由一位高年资医师判读,以分析不同克隆号对阳性率的影响;选择其中的214例ERα(SP1)由三位不同年资医师采用Allred score、H score两种判读系统分别判读,以观察不同判读系统及医师经验对阳性率的影响。一致性采用Kappa检验。结果生存分析显示,ERα、PR低阳性组无病生存率(disease-free survival,DFS)、总生存率(overall survival,OS)均优于阴性组(DFS:P=0.021、0.003)、(OS:P=0.019、0.003),ERα、PR高阳性组DFS、OS均优于低阳性组(DFS:P=0.011、0.002)、(OS:P=0.012、0.005)。浸润性癌非特指型、浸润性小叶癌、导管原位癌ERα阳性率分别为59.5%、78.9%、63.6%,差异有统计学意义(P=0.002),PR阳性率分别为56.3%、68.9%、59.1%,差异无统计学意义(P=0.079)。不同组织学分级的浸润性癌非特指型ERα、PR阳性率差异有统计学意义(P均<0.001)。不同核级导管原位癌ERα、PR阳性率差异有统计学意义(P均<0.05)。克隆号SP1阳性细胞百分率、染色强度均优于6F11;判读系统H score重复性略优于Allred score;高年资医师间阳性细胞百分率、染色强度判读重复性好(κ=0.850,κ=0.824),而高年资和低年资医师之间重复性均较差(0.4<κ<0.75);阳性细胞百分率估计法与计数法重复性较差(κ=0.726)。结论 ERα、PR不同阳性细胞百分率与患者预后密切相关,影响ERα、PR阳性率的因素包括病理类型、组织学分级、核分级、抗体的选择、判读系统及判读医师间的差异等。

槟榔碱对怀孕小鼠子宫ERα和PR的影响

以ICR怀孕小鼠为研究对象,探索了槟榔碱对怀孕小鼠的抗生育作用,重点研究了槟榔碱对小鼠子宫雌激素受体(ERα)和孕激素受体(PR)的影响。用0 mg/kg·day、5 mg/kg·day、10 mg/kg·day和20 mg/kg·day的槟榔碱分别处理怀孕小鼠后发现,槟榔碱处理能导致怀孕小鼠胚胎着床数量和子宫重量减少,并表现出剂量依赖性。当槟榔碱剂量为20 mg/kg·day时,槟榔碱处理组小鼠的胚胎数量减少为对照组的59%,子宫重量减少为对照组的77%。HE染色发现20 mg/kg·day槟榔碱处理能导致怀孕小鼠第5天子宫内腔张开和第6天脱膜失败。荧光定量和免疫组化结果显示,20 mg/kg·day的槟榔碱处理能显著上调ERα和PR在子宫组织中mRNA和蛋白的表达量(P<0.05)。

ERα及PR在乳腺癌患者中的表达及与疾病预后关系探讨

目的探讨ERα及PR在乳腺癌患者中的表达及与疾病预后的关系。方法选取我院100例原发性乳腺癌患者检测ERα及PR水平,然后根据检测结果评价乳腺癌早期诊断以及病情监测、预后评估的价值。结果ERα与PR的表达随着乳腺癌临床分期的逐渐升高,阴性表达也逐渐升高,在临床分期中比较Ⅰ期与Ⅱ期、Ⅱ期与Ⅲ期之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 ERα与PR的表达主要随着临床肿瘤的分期而发生显著变化,反映其对于乳腺癌分化程度可以作为重要的检测指标,为监测临床疗效及判断预后等方面提供有利依据。

妇康乐胶囊对大鼠凝血功能及子宫肌瘤ERα、PR表达的影响

目的:探讨妇康乐胶囊对子宫肌瘤的防治作用及可能作用机制。方法:给大鼠注射苯甲酸雌二醇和黄体酮造模,分别给予米非司酮(MFST)、桂枝茯苓胶囊(GZFL)作对照,给予妇康乐胶囊(FKL)低、中、高剂量作治疗,分别检测相关指标:子宫卵巢系数、凝血功能、子宫ERα和PR表达。结果:FKL胶囊可抑制大鼠子宫平滑肌增生,拮抗雌、孕激素,抗血小板聚集、延长凝血酶原和凝血酶时间,能显著改善凝血。结论:FKL胶囊对子宫肌瘤具有一定的防治作用。

黄芩对ZEA暴露雌性小鼠抗氧化能力、性激素水平和ERαmRNA表达的影响

【目的】试验旨在研究黄芩(SBG)对玉米赤霉烯酮(ZEA)暴露幼龄雌性小鼠抗氧化能力、性激素水平及雌性生殖器官中雌激素受体α(ERα)和孕酮受体(PR)基因表达的影响。【方法】试验选取50只雌性小鼠,预饲1周后随机分为5组,每组10只。对照组(CK)灌胃10 mL/kg玉米油、ZEA组灌胃20 mg/kg ZEA、ZEA+SBG10组灌胃20 mg/kg ZEA+10 g/kg SBG、ZEA+SBG20组灌胃20 mg/kg ZEA+20 g/kg SBG、ZEA+SBG30组灌胃20 mg/kg ZEA+30 g/kg SBG。所有试验小鼠均饲喂基础饲粮,正试期3周。正试期间每日记录小鼠体重;分别在试验的第1、2和3周末晨饲前采集小鼠尾静脉血样,检测血清中抗氧化相关指标和性激素含量;在试验第3周末,采集卵巢和子宫,检测相关类固醇激素受体基因mRNA的表达。【结果】与CK组相比,ZEA暴露2周以上可引起雌性小鼠体重、血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、谷胱甘肽(GSH)和雌二醇(E 2)含量均显著降低(P<0.05);卵巢刺激素(FSH)水平显著增加(P<0.05),而黄体生成素(LH)水平无显著变化(P>0.05)。与ZEA组相比,20和30 g/kg SBG处理3周均显著提升小鼠体重(P<0.05),20 g/kg SBG处理3周显著升高血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、GSH-Px活性及GSH水平(P<0.05),30 g/kg SBG处理2周后这3项指标均显著提高(P<0.05);20和30 g/kg SBG处理2周显著降低血清丙二醛(MDA)含量(P<0.05);30 g/kg SBG处理2周可显著增加血清E 2水平(P<0.05),显著降低FSH含量(P<0.05);20和30 g/kg SBG处理3周后小鼠子宫和卵巢ERα基因表达显著提升(P<0.05),但PR的mRNA表达量在各组之间差异不显著(P>0.05)。【结论】SBG可通过提高ZEA暴露雌性小鼠血清抗氧化能力及性激素水平,增强子宫及卵巢ERα的表达,缓解ZEA造成的氧化损伤和生殖毒性,SBG推荐剂量为20~30 g/kg。

ERβ在乳腺癌组织中的表达及与临床病理因素的关系

目的 探讨ERβ在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系。 方法 采用免疫组化S -P法测定 97例原发性乳腺癌组织中ERα、ERβ和PR的表达 ,并与生化法测得的ER、PR及临床病理指标作对比分析。 结果 ERβ在原发性乳腺癌组织中阳性表达率为 62 .9% ( 61/ 97)。ERβ与ERα的表达无相关性 (P >0 .0 5 )。ERα、生化ER、PR及免疫组化PR均阴性表达的乳腺癌组织内ERβ阳性表达率为 83 .3 % ( 10 / 12 )。ERβ阳性表达与组织学分级呈负相关 (P <0 .0 1)。无腋淋巴结转移者的ERβ阳性表达率为 81.6% ( 3 1/ 3 8) ,有腋淋巴结转移者的ERβ阳性表达率为 5 0 .8% ( 3 0 / 5 9) ,两者具有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ,且ERβ阳性表达与腋淋巴结转移呈负相关。ERβ表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、月经状况和病理类型无明显相关 (P >0 .0 5 )。结论 ERβ与ERα、PR一样也为细胞核受体。原发性乳腺癌组织内亦有ERβ表达。在原发性乳腺癌组织内ERβ阳性表达与组织学分级和腋淋巴结转移呈负相关。ERβ与ERα的表达无相关性 ,不能通过ER、PR及ERα联合测定来取代ERβ的检测。

电针治疗乳腺增生病疗效机制的实验研究

目的：研究电针治疗乳腺增生病疗效的发挥与肋间神经调节途径是否具有一定的关系。方法：选用SD大鼠随机分为A组（空白组）、B组（造模组）、C组（正常治疗组）、D组（肋间神经切断后治疗组）。B、C、D组均制备成乳腺增生模型动物,通过手术将D组大鼠左侧第7肋间神经切断。随后,选用背组穴：天宗、肝俞、肾俞,均双侧;胸组穴：屋翳、合谷（均双侧）、膻中两组穴位交替使用,进行电针治疗,每日1次,5 d 1个疗程,疗程间休息2 d,共治疗20次。治疗结束后,采用乳房外观测定、电镜观察乳腺超微结构、免疫荧光法测定乳腺组织中ERα和PR两种受体含量变化。结果：正常治疗组和肋间神经切断治疗组乳房外观测定、电镜超微结构观察均有改善,乳腺组织中ERα蛋白下调（P〈0.05）、PR蛋白上调（P〈0.05）;且正常电针组要优于肋间神经切断组（P〈0.05）。结论：电针治疗乳腺增生的疗效机制可能与肋间神经通路具有密切关系,且发挥疗效的机制可能是通过调节乳腺组织中ERα和PR蛋白含量实现的。

回乳抑增一号对乳腺增生大鼠激素受体及细胞增殖、凋亡的影响

目的观察回乳抑增一号对乳腺增生大鼠激素受体及细胞增殖、凋亡的影响。探讨其对乳腺增生的作用机制。方法雌性未孕SD大鼠56只随机分成7组,即正常组,模型组,回乳抑增一号低、中、高剂量组,乳癖散结组,他莫昔芬组,采用外源性激素苯甲酸雌二醇和黄体酮复制乳腺增生大鼠模型,造模完成后给予相应药物治疗,荧光定量PCR法检测大鼠乳腺组织ERα、PR mRNA表达,Western blot检测PCNA、VEGF蛋白表达,免疫组化法检测凋亡因子Bcl-2、Bax表达。结果与正常组比较,模型组雌激素受体(ERα)、孕激素受体(PR)、增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)、Bcl-2表达升高(P<0.05),Bax表达降低(P<0.01);与模型组比较,其他治疗组均能下调ERα、PR、PCNA、Bcl-2表达(P<0.01),上调Bax表达(P<0.01)。结论回乳抑增一号能下调ERα、PR、PCNA、VEGF、Bcl-2水平,上调Bax表达,通过抑制雌激素作用和细胞过度增殖、促进细胞凋亡来达到治疗大鼠乳腺增生的作用。

乳腺癌组织中ERα mRNA和PR mRNA检测方法的建立和应用

建立测定雌激素受体α（ERa）tuRNA和孕激素受体（PR）mRNA的实时荧光定量RTPCR，探讨两者在乳腺癌组织及良性乳腺肿瘤组织中的表达水平。分别以pMDl8－ERα和pMDl8－PR质粒为定量模板，用循环阂值（Ct）定量起始模板，在荧光TaqMan方法的基础上建立了测定ERamRNA和PRmRNA的实时荧光定量RT—PCR，并分别测定48例乳腺癌组织及28例良性乳腺肿瘤组织中ERamRNA和PRmRNA的表达水平。ERamRNA和PRmRNA测定的线性范围为103～108copy／μgRNA；ERamRNA和PRmRNA高值和低值的批内和批间变异系数（cⅥ在5．07％～11．28％之间。ERmRNA在乳腺癌组织中的表达量为6．76×10。copy／μgRNA（4．17×10。，9．34×10。），良性乳腺肿瘤组织中的含量为1．54×10μcopy／／μgRNA（1．02×10。，2．06×10。），乳腺癌组织的表达量高于良性组织（P％0．05）；PRmRNA在乳腺癌组织中的表达量为1．02×10。copy／μgRNA（6．81×10。，1．36×10。），良性乳腺肿瘤组织中的含量为4．93×10。copy／／μgRNA（3．21×10。，6．65×10。），两者表达无明显差异（P〉0．05）。ERαmRNA和PRmRNA在乳腺癌和良性乳腺肿瘤组织中的表达存在相关性。我们建立的测定ERamRNA和PRmRNA的实时荧光定量RT—PCR灵敏、稳定、重复性好，可供临床检测和研究。ERamRNA和PRmRNA基因表达水平可作为预测治疗效果及判断预后的重要指标。

乳腺癌雌激素受体表达和临床病理因素的关系

目的:探讨雌激素受体β亚型(Estrogen Receptor,ERβ)在乳腺癌组织中的表达与雌激素受体ɑ亚型(ERɑ)、孕激素受体(PR)表达和临床病理因素的关系。方法:采用免疫组化显色系统二步法(EnVision系统)测定75例原发性乳腺癌组织中ERβ与ERα、PR的表达,并对临床诊断相关指标进行对比分析。结果:ERβ阳性表达率为53.33%(40/75),共同表达46.66%(35/75),ERα和ERβ共同表达,二者无相关性(P>0.05),ERβ表达与组织学分级、腋淋巴结阳性差异有统计学意义(P<0.05);与肿瘤大小、临床分期、和病理类型无相关性(P>0.05)。结论:ERβ表达与乳腺癌高危患者密切相关,与乳腺癌的发生、发展及预后有关,可作为反映乳腺癌生物学行为的指标,不能通过ER、PR及ERα联合测定来代替ERβ的检测。

卵巢上皮肿瘤中ERα PR及E-Cadherin的表达及意义

目的探讨卵巢上皮肿瘤各亚型中雌激素受体α(ERα)及靶蛋白孕激素受体(PR)、E-钙黏着蛋白(E-cad-herin)间表达的相关性及临床意义。方法对解放军总医院2001年1月至2006年1月经病理检查证实的67例卵巢癌标本[5例浆液性交界性腺癌、46例浆液性腺癌(SAC)、6例子宫内膜样腺癌(MAC)、5例透明细胞癌(CCA)及5例其它恶性肿瘤亚型],采用免疫组化SP法检测其ERα、PR、E-cadherin的表达情况,结合临床病理特征分析3种蛋白间表达的关系。结果(1)浆液性交界性卵巢癌、SAC、MAC、CCA中ERα表达阳性率分别为:40.0%、76.08%、66.67%、0;PR表达阳性率分别为:60.00%、82.61%、66.67%、0;E-cadherin表达阳性率分别为:100.00%、95.65%、100.00%、100.00%;SAC与CCA间ERα、PR的表达阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。(2)E-cadherin的表达与SAC临床分期存在相关性(r=0.3610,P<0.05)。(3)SAC中,各临床病理特征(临床分期、病理学分级、年龄、淋巴转移)进行内部比较ERα、PR、E-cadherin的表达阳性率无明显差异。(4)浆液性卵巢癌中ERα、PR、E-cadherin的表达未检测出相关性(P>0.05)。结论ERα可能成为临床区分CCA和SAC的一项重要特征;E-cadherin可能在SAC的癌变过程中起重要作用,对临床诊断及预后评估具有一定的指导意义。

电针肋间神经干预大鼠乳腺增生病的实验研究

目的:探讨电针治疗乳腺增生病疗效的发挥与肋间神经调节途径是否具有一定的相关性。方法:选用雌性SD大鼠50只,随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、电针组(C组)和肋间神经切断后干预组(D组),A、B组各12只,C、D组各13只。B、C、D组均制备乳腺增生模型,造模成功后,手术将D组大鼠左侧第7肋间神经切断。C、D组选背组穴:"天宗""肝俞""肾俞";胸组穴:"屋翳""合谷""膻中",进行电针干预,每次留针20 min,每日1次,两组穴位交替选用,5 d为一疗程,疗程间休息2 d,共干预20次。干预结束后,观察各组大鼠乳头高度和直径、血清雌二醇(E2)、孕激素(P)及乳腺组织中雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PR)的含量变化。结果:(1)大鼠乳头高度和直径:干预后,与B组比较,C组乳头高度和直径明显较小(均P<0.05);与C组左侧乳头比较,D组左侧乳头高度和直径较大(均P<0.05)。(2)血清E_2、P:干预后,与B组比较,C、D组血清E_2、E_2/P含量下调,P含量上调(均P<0.05);与C组比较,D组血清E_2、E_2/P含量上调,P含量下调(均P<0.05)。(3)乳腺组织中ERα、PR:与B组比较,C组ERα含量下调、PR含量上调(均P<0.05);与C组比较,D组ERα含量上调、PR含量下调(均P<0.05)。结论:电针干预乳腺增生的疗效机制可能与肋间神经通路具有密切关系,可能是通过调节血清E_2、P含量及乳腺组织中ERα、PR蛋白含量实现的。

自噬抑制剂3-MA对围着床期小鼠子宫胚胎着床的影响

该文探索了自噬抑制剂3-MA对围着床期小鼠子宫胚胎着床的影响。将成年昆明雌性小鼠随机分为对照组、3-MA低剂量组(15 mmol/L)和3-MA高剂量组(30 mmol/L)。自小鼠孕D1起,腹腔注射自噬抑制剂3-MA,直到处死,以腹腔注射PBS作为对照。收集孕D4、D5、D6子宫内膜组织,Western blot检测自噬抑制剂3-MA注射后自噬相关因子Atg5和LC3蛋白表达,形态学观察对照组和3-MA自噬抑制剂组胚胎着床点数量。Real-time PCR检测Cathepsin B、P62、孕激素受体(PR)和雌激素受体α(ERα)m RNA在孕D5子宫内膜的表达。免疫组化检测PR在孕D5子宫内膜的表达。结果显示,在自噬抑制剂3-MA的作用下,自噬相关因子Atg5、LC3蛋白在孕D4~D6小鼠子宫中的表达量明显降低,Cathepsin B、P62 m RNA在孕D5小鼠子宫中的表达显著降低。注射3-MA自噬抑制剂后,孕D6小鼠着床点(IS)数量比正常组明显减少。在孕D5小鼠子宫内膜着床旁(IIS)和着床点中,自噬抑制剂3-MA干预组PR的蛋白质表达量明显降低,PR和ERαm RNA表达量均显著降低,随着3-MA抑制剂剂量的升高,PR和ERαm RNA表达降低得更显著。结果表明,自噬抑制剂3-MA可能会对小鼠胚胎着床时子宫内膜容受性产生影响,其机制有待进一步研究。