PGRMC1在激素治疗中促进乳腺癌细胞增殖的机制研究

目的探讨孕激素受体膜组分1(progesterone receptor membrane components 1,PGRMC1)在激素治疗中促进乳腺癌细胞增殖的作用机制。方法雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性的乳腺癌MCF7细胞经雌孕激素处理后,用过表达PGRMC1、敲降ER抑制因子PHB1(shPHB1⁃1和shPHB1⁃2)及其相应阴性对照的慢病毒液进行感染。采用免疫共沉淀联合质谱分析及GST pull⁃down实验检测PGRMC1与PHB复合体(PHB1和PHB2)的相互作用,免疫印迹法和RT⁃qPCR检测PHB1、PHB2和PGRMC1的表达情况,CCK⁃8和EDU实验检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期情况,RT⁃qPCR检测ER信号通路下游靶基因THBS1、CXCL12和GREB1的表达情况。结果免疫共沉淀联合质谱分析发现,PHB1和PHB2均存在于PGRMC1的免疫共沉淀组分中;GST pull⁃down鉴定体外条件下PGRMC1与PHB复合体存在直接相互作用。与相应对照组相比,过表达PGRMC1和下调PHB1的乳腺癌细胞增殖速度均明显加快(均P<0.05),S期和G2/M期阳性细胞比例均明显增加(均P<0.05),且能够显著促进ER信号通路下游靶基因THBS1、CXCL12和GREB1的表达(均P<0.01)。PGRMC1过表达后MCF7细胞中PHB1与ER的相互作用减弱。下调PHB1后再过表达PGRMC1的细胞周期中,S期和G2/M期阳性细胞比例与单独下调PHB1相比无明显变化(均P>0.05)。结论PGRMC1可能通过与PHB复合体结合,并解除后者对ER信号通路的抑制作用,从而促进ER信号通路的活化和下游靶基因的表达,加速激素刺激条件下乳腺癌细胞的恶性增殖。