大豆异黄酮对不同时期子代雄性大鼠生殖性状及ER-β受体表达的影响

目的:研究大豆异黄酮孕期和出生后暴露对子代雄性大鼠生殖系统发育相关指标以及ER-β受体表达的影响。方法:SD大鼠随机分为对照组(玉米油)、大豆异黄酮50、200、400 mg/kg体重和已烯雌酚(DES)0.1 mg/kg体重组,母鼠从妊娠0 d开始灌胃各组药品,子鼠21 d断奶后开始灌胃直至处死。子代雄性大鼠每组随机取6只分别在49 d、90 d处死,观察生殖系统发育相关指标并检测睾丸组织ER-β受体表达情况。结果:①对于不同年龄段子代雄鼠,大豆异黄酮各剂量组以及DES组每日平均摄食量均无显著性差异,但49～90日龄子鼠大豆异黄酮200 mg/kg体重、400 mg/kg体重组以及0.1 mg/kg体重DES组的食物利用率显著下降。②大豆异黄酮剂量为50 mg/kg体重以上时,不同年龄段的子鼠体重均显著下降(P<0.05)且90日龄子代雄鼠体重变化大于49日龄子代雄鼠。③随着大豆异黄酮剂量的增加,睾丸重量、睾丸精子头计数和每日精子生成量呈显著下降趋势且90日龄子鼠以上指标的变化比49日龄子代雄鼠变化更加明显。④随着大豆异黄酮剂量的增加,不同年龄段子代雄鼠各剂量组ER-β受体表达与对照组比较均呈上升趋势且90日龄子代雄鼠上升趋势大于49日龄子代雄鼠。结论:大豆异黄酮孕期和出生后暴露可干扰子鼠雄性生殖系统的发育,ER-β受体表达变化可能是其机制之一。

AP-2α对大肠癌细胞侵袭生长及ER-β表达的影响

目的:研究转录因子激活蛋白-2α基因(transcription factor activator protein-2α,AP-2α)对大肠癌SW620细胞侵袭生长的影响,并探讨其对雌激素受体β基因(estrogen receptor-β,ER-β)表达的影响及其可能的分子机制。方法:利用脂质体介导重组质粒pcDNA3.1(+)-AP-2α与空质粒pcDNA3.1(+)转染入SW620大肠癌细胞,采用基质胶黏附实验与Transwell实验检测细胞的体外黏附、侵袭生长与迁移能力,采用实时定量PCR、Western blotting、免疫荧光细胞化学检测细胞中AP-2α和ER-β在基因和蛋白水平的表达,以电泳迁移率分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)方法检测转染AP-2α基因后肿瘤细胞中AP-2α的DNA结合活性及其与ER-β的结合能力。结果:AP-2α转染SW620细胞后抑制了细胞的体外黏附、侵袭与迁移能力(均P<0.05);同时细胞中ER-β基因的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);EMSA结果显示,AP-2α转染的SW620细胞中表达的AP-2α蛋白与ER-β基因启动子区域发生特异性结合。结论:AP-2α转染SW620细胞可显著抑制大肠癌SW620细胞体外黏附、侵袭与迁移能力,其分子机制很可能与AP-2α直接作用于ER-β基因启动子区域从而影响ER-β基因的表达有关。

生后雌性小鼠下丘脑室旁核内ER-β表达的免疫组化研究

研究发现小鼠下丘脑室旁核(PVN)内雌激素β受体(ER-β)的表达与在大鼠等一些实验动物脑PVN的表达有差异,提示其在小鼠PVN内的表达可能有特定的生理意义。为了深入探讨ER-β在小鼠PVN内的功能,本文采用硫酸镍铵增强显色的免疫组化SP法研究了ER-β在生后雌性小鼠PVN内的表达。结果发现ER-β免疫阳性物质主要见于PVN的大细胞部,在小细胞部和背侧帽部免疫阳性细胞数目较少。免疫阳性物质主要位于细胞核内,未发现明显的胞浆或突起阳性,但在发育的某些时期可见免疫阳性细胞核局部呈现阴性反应。最高表达见于生后早期(第1-9天),随后表达降低,生后一个月即达到成年水平。PVN内ER-β的表达模式表现为生后早期表达高、随后降低,提示在该部位ER-β可能主要参与了对生后早期PVN的神经内分泌活动以及神经结构的发育与完善的调控,并可能与生后早期动物的应激、体重增加和脂肪代谢等有关。

子宫内膜异位症中ER-α和ER-β研究进展

雌激素在子宫内膜异位症的发生发展中有重要的作用。过去认为这些雌激素的效果都是通 过单一的雌激素受体ER-α(estrogen receptor-α)起作用的。然而,最近一种新形式的雌激素受体ER-β (estrogen receptor-β)的发现,促进关于雌激素对靶器官作用的再研究。本文综述了国际上关于此研究 的最新报道,提示了在子宫内膜、腹膜和卵巢异位内膜中ER-α和ER-βmRNA的表达有明显差异,对 于深入研究子宫内膜异位症的发生发展,临床生物特性、治疗及预后有重要意义。

ER-β在子宫内膜异位症和腺肌症患者在位内膜中的表达

目的探讨子宫内膜异位症(内异症)和腺肌症患者的在位内膜中雌激素受体β(ER-β)的含量及其在子宫内膜异位症和腺肌症发病中的机制及意义。方法采用免疫组织化学PV两步法,分析12例腺肌症患者在位内膜及5例内异症患者的在位内膜标本中ER-β的含量,并以10例正常子宫内膜做对照。结果3组在位内膜上皮细胞中均有ER-β的表达,而在基质细胞中未检测到其表达。正常子宫内膜上皮细胞中ER-β的表达高于其在内异症在位内膜上皮细胞中的表达,差异有显著性(P<0.05)。结论ER-β在子宫内膜异位症和腺肌症的在位内膜中的表达量不同,对选择药物治疗具有临床意义。

子宫内膜异位症患者在位和异位内膜上皮细胞ER-α、ER-β的检测

目的探讨ER-α和ER-β在内异症患者在位及异位内膜上皮细胞中的表达与子宫内膜异位症发生机制的关系。方法通过体外细胞培养,利用流式细胞仪检测ER-α和ER-β在正常子宫内膜上皮细胞及内异症患者在位及异位内膜上皮细胞中表达。结果在正常子宫内膜上皮细胞及内异症患者在位及异位内膜上皮细胞中均检测到ER-α和ER-β的表达。而且在正常对照组和在位内膜组上皮细胞中ER-β明显高于ER-α。结论在子宫内膜异位症患者在位内膜,异位内膜上皮细胞中ER-α和ER-β表达有明显差异,表明除了已知的ER-α对子宫内膜增殖和分化的作用,ER-β可能对子宫内膜的功能也有重要影响,并提出深入研究二者之间的关系对子宫内膜异位症的发生发展,临床生物特性,治疗及预后有重要价值。

ER-β基因RNA干扰重组表达载体的构建及鉴定

目的:构建针对人雌激素受体-β(estrogen receptor-β,ER-β)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达载体质粒。方法:根据GeneBank数据库提供的ER-β基因核苷酸序列,选择设计能转录小发卡结构RNA的DNA序列,将此双链DNA片段克隆至载体pSilencer3.1-H1-neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌株,提取质粒进行序列测定。结果:经测序证明与设计的相同,获得人ER-β基因的siRNA表达载体质粒。结论:成功构建了针对ER-β基因的RNA干扰重组表达载体,为下一步ER-β基因的RNA干扰奠定了基础。

ER-β在骨转移为首发的非小细胞肺癌中的表达

目的检测分析骨转移为首发的非小细胞肺癌中ER-β的表达,分析其与临床预后相关性。方法应用免疫组织化学方法检测经病理证实骨转移为首发的非小细胞肺癌肿瘤组织标本中ER-β的表达,利用χ2检验检测组间表达差异,生存率单因素采用Kaplan-Meier法及Log-rank方法分析,多因素采用COX回归模型进行分析。结果 46例骨转移为首发的非小细胞肺癌中ER-β总阳性78.3%,χ2检验未见性别、年龄、病理类型、骨转移灶数目、有无骨外其他部位转移、ALK及CEA影响ER-β表达,各组阳性率差异无统计学意义。多因素分析显示ER-β为影响该类患者预后的独立影响因素(P=0.035),单因素分析可见ER-β阳性表达组的生存时间明显长于阴性表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。另外ER-β阳性表达时腺癌、单发骨转移患者能获得较长的生存时间,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨转移为首发的非小细胞肺癌ER-β表达阳性率高,ER-β阳性表达的患者预后明显好于阴性患者,且其可能为影响患者预后的独立影响因素,ER-β的阳性表达可能与腺癌及单发骨转移患者的预后相关。

43例乳腺导管内癌伴微浸润的ER-β和Her-2表达与临床病理特征

目的研究乳腺导管内癌伴微浸润(ductal carcinoma in situ with microinvasion,DCIS-MI)患者的病理与临床特征。方法对本院2002年1月至2007年1月收治的43例Ⅰ、Ⅱ型DCIS-MI患者的临床资料进行回顾性对比研究,利用免疫组织化学方法进行ER-β及Her-2染色。结果①ER-β、Her-2阳性率分别为69.76%、25.57%;②病理分型DCIS-MIⅠ与DCIS-MIⅡ组,ER-β与Her-2表达具有统计学差异;肿瘤大小与ER-β、Her-2表达呈正相关;淋巴结转移数量增多,Her-2表达增高。Her-2过表达与乳腺癌临床TNM分期显著相关(P<0.001)。结论乳腺癌ER-β、Her-2表达与病理类型、肿瘤大小、淋巴结转移数目及临床分期密切相关。ER-β阳性可认为是乳腺癌预后良好的指标,而Her-2的过表达则提示预后不良。

疏肝降肺法对“激怒”伤模型大鼠海马区神经递质及子宫、卵巢ER-β的影响

目的探讨疏肝降肺法对"激怒"伤模型大鼠海马区神经递质活性及子宫-卵巢雌激素受体-β(ER-β)的影响。方法将24只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、"怒"模型组、疏肝降肺汤组,每组8只。采用夹尾间接激怒法建立"怒"大鼠模型。疏肝降肺汤组给予相应中药灌胃[7.56g/(kg·d)],正常组及模型组给予等量生理盐水灌胃,共计4周。观察各组大鼠额叶皮质、海马组织神经递质及子宫-卵巢雌激素受体β(ER-β)含量差异。高效液相-电化学法测定神经递质包括去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、五羟色胺(5-HT)含量及免疫组化法测定子宫、卵巢ER-β表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠海马区NE、DA、5-HT含量均增加[NE:(78.53±8.64)ng/g比(37.38±11.08)ng/g,P<0.01;DA:(41.78±11.26)ng/g比(21.56±10.72)ng/g,P<0.01;5-HT:(26.48±9.67)ng/g比(10.59±5.05)ng/g,P<0.01];与模型组比较,疏肝降肺汤组大鼠海马区NE、DA、5-HT含量均减少[NE:(36.80±10.75)ng/g比(78.53±8.64)ng/g,P<0.01;DA:(23.04±6.17)ng/g比(41.78±11.26)ng/g,P<0.01;5-HT:(12.20±12.07)ng/g比(26.48±9.67)ng/g,P<0.01];疏肝降肺汤组大鼠对ER-β积分光密度增加有一定改善作用,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝降肺法对"激怒"伤模型大鼠神经递质紊乱及卵巢功能损伤有一定的调节改善作用,可能是临床治疗"怒"情志所致疾病的作用机制。

ER-β、MEK-2、p-ERK在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的:探讨雌激素受体ER-β与细胞信号传导通路丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)上游激活酶MEK-2和下游激活酶p-ERK在子宫内膜异位症(EMs)发病机制中的作用。方法:采用免疫组化S-P法检测46例EMs患者在位及异位内膜、40例正常内膜组织中ER-β、MEK-2和p-ERK的蛋白表达。结果:ER-β、MEK-2和p-ERK在异位内膜和在位内膜中表达高于正常内膜,差异有显著性意义(P<0.01),异位内膜表达高于在位内膜,差异具有显著意义(P<0.01);ER-β和MEK-2、p-ERK在正常子宫内膜、在位内膜和异位内膜中表达呈正相关(r=0.628,P<0.01;r=0.559,P<0.01)。MEK-2和p-ERK在正常子宫内膜、在位内膜和异位内膜中表达呈正相关(r=0.699,P<0.01)。结论:ER-β、MEK-2和p-ERK在EMs组织中高表达并呈正相关,MAPK信号通路可能与ER-β相互作用,在EMs的发生发展中起着重要作用。

ER-β基因启动子区甲基化与早发冠心病血瘀证相关性的研究（英文）

目的:探讨雌激素受体(ER)β基因启动子区Cp G岛甲基化状况在早发冠心病(PCHD)血瘀证发生发展中的作用及其临床意义。方法:收集早发冠心病血瘀证标本16例,冠心病非血瘀证(以痰浊证为例)8例,正常健康人8例,采用重亚硫酸盐纯化(BSP)和甲基化特异性PCR(MSP)技术对上述基因Cp G岛甲基化进行检测,比较并分析。结果:3组病例在年龄、性别、血脂、血压等方面不存在显著性差异,具有可比性。血瘀证组的基因甲基化程度为51.7%,大于非血瘀证组34.6%和健康人组12.8%,其差异具有显著性(P<0.05)。结论:ER-β基因甲基化可能与PCHD血瘀证的发生发展具有一定的相关性,检测其基因的甲基化状况可能对PCHD血瘀证的诊断具有一定的临床指导意义。

不同ER-β基因型绝经妇女补充大豆异黄酮和钙后血脂的变化

目的观察血脂正常的不同ER基因型的绝经妇女补充钙和大豆异黄酮片剂(不含蛋白)一年后血脂的变化。方法从武汉郊区绝经妇女中筛选60名血脂正常但骨量减少或骨质疏松的绝经妇女为受试对象,随机分为两组,每组各30人,并确定其ER-β基因型别。一组给予液体钙440mg/d,VD 100IU/d;另一组给予液体钙440mg/d,VD 100IU/d和大豆异黄酮片剂100mg/d(不含蛋白),随访一年。测定每位受试对象各血脂成分,包括甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL)。结果补钙和补钙+大豆异黄酮组的血总胆固醇均显著降低(P<0.05)。在Rr/rr基因型绝经妇女中,补钙组TG平均增加了0.2mmol/L,补钙+大豆异黄酮组平均降低了0.44mmol/L,两者间差异有显著性(P<0.05)。结论足量的钙和适量的大豆异黄酮摄入不仅有益于绝经妇女的骨骼代谢,还有益于血脂代谢,且随ER-β基因酶切型别的不同而异。

不同ER-α基因型绝经妇女补充大豆异黄酮和钙后血脂成分的变化

[目的]观察血脂正常的不同ER-α基因型别绝经妇女补充钙和大豆异黄酮片剂(不含蛋白)一年后机体血脂成分的变化。[方法]从武汉郊区绝经妇女中筛选60例血脂正常但骨量减少或骨质疏松的绝经妇女为受试对象随机分为两组,每组各30人,并确定其ER-α基因PvuⅢ和XbaⅠ酶切型别。一组给予液体钙440mg/d,VD100IU/d;另一组给予液体钙440mg/d,VD100IU/d和大豆异黄酮片剂100mg/d(不含蛋白),跟踪1年。测定每位受试对象各血脂成分,包括甘油三脂(TG)、总胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL)。[结果]补钙和补钙+大豆异黄酮均能显著性降低血总胆固醇(P<0.05)。Px单倍体型的TG在补钙+大豆异黄酮后下降,而补钙组non-Px单倍体的TG升高,两者间差异有显著性(P<0.05);Px单倍体型的HDL在补钙+大豆异黄酮后升高,而补钙组non-Px单倍体的HDL下降,两者间有显著性差异(P<0.05)。[结论]足量的钙和适量的大豆异黄酮摄入不仅有益于绝经妇女的骨骼代谢,还可影响血脂代谢,且因ER-α基因酶切型别而异。

全身振动对去卵巢大鼠三种组织ER-α基因表达的影响

目的:探讨全身振动治疗绝经后肥胖与骨质疏松的作用机理。方法:对体重相近的去卵巢3月龄雌性SD大鼠进行全身垂直振动训练,7周后测定受试大鼠血清雌激素、孕酮、睾酮、骨密度、体重以及肝、脂肪、骨骼肌组织中雌激素受体(ER)-α基因表达水平。结果:去卵巢振动训练组体重增加显著低于去卵巢静止组;去卵巢振动训练组股骨远端和近端的离体骨密度显著高于去卵巢静止组;去卵巢振动训练组大鼠肝脏、脂肪、骨骼肌组织中ER-α基因表达水平较去卵巢静止组显著增加;但去卵巢振动训练组与去卵巢静止组血清雌激素、孕酮、睾酮水平均较假手术组显著降低。结论:促进大鼠ER-α基因的表达是全身振动训练改善因性激素缺乏造成骨密度下降、体重增加等症状的机理之一。

FISH技术检测乳腺癌HER-2基因的应用体会

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测乳腺癌HER-2基因制片的最佳效果。方法本实验室对FISH技术操作进行改进,采用胃蛋白酶滴加消化法替代了国内现行的蛋白酶K浸泡消化法,孵育温度37℃,时间12～15min。切片充分洗涤也是实验成功的关键步骤,洗涤的时间、温度和pH值严格掌握,用配制洗涤液2*SSC/0.3%NP-40pH7.0代替了50%甲酰胺洗涤液,温度74℃,时间2～3min。结果在荧光显微镜油镜放大100倍下观察,HER-2桔红色,CEP-17绿色,采用多个视野任意共选取40个细胞计数桔红色和绿色信号,得出桔红色信号/绿色信号(HER-2/CEP-17),如HER-2/CEP-17<1.8,HER-2无扩增;如HER-2/CEP-17>2.2,HER-2扩增;如介入两者之间,重新选取40个细胞计数,红、绿、蓝信号明显。结论本实验室改进后FISH技术检测乳腺癌HER-2基因实验操作更加稳定,该技术操作简单快速,杂交成功率最高,可提高诊断率。

汽车变速器壳体镁合金Mg-Zn-Er-X的铸态组织与性能研究

在汽车用镁合金Mg-3Zn-0.8Er中分别添加合金元素Sr、Y,并进行了显微组织、物相组成、力学性能和耐腐蚀性能的测试。结果表明:Mg-3Zn-0.8Er-0.2Sr由α-Mg相、Mg Zn2相、(Mg,Zn)4Er相和Mg17Sr2相组成,Mg-3Zn-0.8Er-0.2Y则由α-Mg相、Mg Zn2相、(Mg,Zn)4Er相、Mg3Y2Zn3相和Mg12YZn相组成。与商用AZ31镁合金相比,Mg-3Zn-0.8Er-0.2Y的室温抗拉强度较商业AZ31镁合金增加96 MPa,室温伸长率增加6.3%,盐雾腐蚀100h后的质量损失率下降6.3%。

ER-α30和ER-α36在乳腺癌组织的表达及意义

目的探讨新型雌激素受体亚型ER-α30和ER-α36在乳腺癌中的表达及与他莫昔芬治疗预后的关系。方法收集2015年1月至2015年11月间在河北北方学院附属第一医院接受他莫昔芬内分泌治疗的Luminal A型乳腺癌患者75例,并收集同时期30例ER(-)乳腺癌患者组织。采用免疫组化染色SP法检测ER-α30和ER-α36蛋白表达。分析ER-α30和ER-α36蛋白表达与Luminal A型乳腺癌临床病理特征的关系。随访患者的无病生存时间(DFS)。采用Cox风险比例回归模型分析影响DFS的因素。结果Luminal A型乳腺癌组织中ER-α30蛋白阳性表达率为32.0%(24/75),低于ER(-)乳腺癌组织(P<0.05)。ER-α30蛋白表达与TNM分期、肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移、孕激素受体状态有关(P<0.05)。ER-α36蛋白阳性表达率为52.0%(39/75),与ER(-)乳腺癌组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。ER-α36蛋白表达与TNM分期和肿瘤直径有关(P<0.05)。随访时间为11~54个月,患者48个月无病生存率为64.0%(48/75)。ER-α30阳性患者48个月无病生存率为33.33%(8/24),阴性患者为78.43%(40/51),差异具有统计学意义(P=0.001)。ER-α36阳性患者48个月无病生存率为48.7%(19/39),阴性患者为80.6%(29/36),差异具有统计学意义(P=0.002)。Cox风险比例回归分析显示,ER-α30、ER-α36是影响Luminal A型乳腺癌患者DFS的独立预后因素(P<0.05)。结论Luminal A型乳腺癌ER-α30和ER-α36阳性表达者接受他莫昔芬治疗无病生存期较短,其有望成为预测他莫昔芬治疗反应性的重要指标。

HER-2/neu基因在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨HER-2/neu基因在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化法检测90份非小细胞肺癌组织及20份正常肺组织HER-2/neu基因的表达。结果 HER-2/neu基因在90份非小细胞肺癌组织中过度表达率为32.2%(29/90),20份正常肺组织中无过度表达。非小细胞肺癌的HER-2/neu基因的过度表达与年龄、性别、分化程度均无相关性(P均>0.05),与肿瘤的病理类型、淋巴结转移、临床分期、生存期相关(P均<0.05)。结论检测非小细胞肺癌组织中HER-2/neu基因的表达,有助于判断其预后,也为抗HER-2/neu基因的分子靶向治疗应用于非小细胞肺癌中提供理论依据。